102,424 matches
-
cu circa 10 mișcări alternative. Se lasă tubul de test în baia de apă la 25ș C timp de exact 10 minute, numărate de la adăugarea soluției de pepsină (timpul și temperatura trebuie să fie respectate în mod strict). Apoi se adaugă 10,0 ml de soluție de acid tricloroacetic (3.4.) încălzită în prealabil la 25ș C, se omogenizează și se filtrează printr-un filtru uscat. 5.3. Dezvoltarea colorației și măsurarea densității optice Se pune cu pipeta 5,0 ml
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
încălzită în prealabil la 25ș C, se omogenizează și se filtrează printr-un filtru uscat. 5.3. Dezvoltarea colorației și măsurarea densității optice Se pune cu pipeta 5,0 ml de filtrat într-un balon Erlenmayer de 50 ml, se adaugă 10,0 ml de soluție de hidroxid de sodiu (3.5.), se agită constant, 3,0 ml de reactiv Folin-Ciocalteu diluat (3.6.). După 5 - 10 minute, se determină densitatea optică a soluției cu spectrofotometrul la 750 nm în celule
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
Pentru fiecare determinare, se efectuează o probă martor după cum urmează: Se pune cu pipeta 5,0 m de soluție de hemoglobină (3.7.) într-un tub de test, se încălzește la 25ș C în baia de apă (4.1.), se adaugă 10,0 ml de soluție de acid tricloroacetic (3.4.) încălzită în prealabil la 25ș C, se omogenizează, apoi se adaugă 1,0 ml din soluția de pepsine obținută la pct. 5.1. Se amestecă cu o baghetă de sticlă
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
3.7.) într-un tub de test, se încălzește la 25ș C în baia de apă (4.1.), se adaugă 10,0 ml de soluție de acid tricloroacetic (3.4.) încălzită în prealabil la 25ș C, se omogenizează, apoi se adaugă 1,0 ml din soluția de pepsine obținută la pct. 5.1. Se amestecă cu o baghetă de sticlă și se lasă tubul de test în baia de apă (4.1.) la 25ș C timp de exact 10 minute. Se
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
4, 0,6, 0,8 și 1,0 μmoli de tirozină în baloane Erlenmayer de 50 ml. Se completează seria cu o soluție de referință fără tirozină. Se completează volumele până la 5,0 ml cu acid clorhidric (3.1.). Se adaugă 10,0 ml de soluție de hidroxid de sodiu (3.5.) și, agitând constant, 3,0 ml din reactivul Folin-Ciocalteu diluat (3.6.). Se măsoară densitatea optică după cum este indicat la pct. 5.3. ultima propoziție. Se trasează curba de
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
μmoli, de tirozină la 25ș C, per mg și per minut, se calculează folosind formula: Unități per mg (U / mg) = Unde: a = cantitatea de tirozină, în μmoli, citită din curba de calibrare; p = greutatea în mg a cantității de pepsină adăugată la pct. 5.2. 7. Observații 7.1. Cantitatea de pepsină care urmează să fie dizolvată trebuie să fie încât la măsurarea finală fotometrică să se obțină o densitate optică de 0,35 ± 0,035. 7.2. Două unități per
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
la o temperatură a camerei de aproximativ 20ș C. 5.2. Determinarea gossypolului liber Se plasează proba test într-un balon cu gât din sticlă șlefuită de 250 ml, fundul balonului fiind acoperit cu sticlă sfărâmată. Folosind o pipetă, se adaugă 50 ml de solvent A (3.2.), se astupă balonul cu un dop de plută și se amestecă pentru o oră în mixer. Se filtrează printr-un filtru uscat și se colectează filtratul într-un balon mic cu gât din
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
cele două baloane gradate de 25 ml (C și D). Se completează conținutul balonului (C) cu amestecul de 2-propanol hexan (3.1). Această soluție va fi folosită ca soluție de referință față de care se măsoară soluția de probă martor. Se adaugă 2 ml de anilină (3.4) la fiecare din baloanele (D) și (B). Se încălzește timp de 30 minute într-o baie de apă care fierbe pentru a dezvolta culoarea. Se răcește la temperatura camerei, se completează volumul cu amestecul
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
Din această valoare se calculează conținutul de gossypol liber după cum este indicat la pct. 6. 5.3. Determinarea gossypolului total Se așează o probă test conținând 1 - 5 mg de gossypol într-un balon gradat de 50 ml și se adaugă 10 ml de solvent B (3.3). În același timp, se prepară un test neutru, plasându-se 10 ml de solvent B (3.3) în alt balon gradat de 50 ml. Se încălzesc cele două baloane 30 de minute într-
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
filtrat de test neutru în fiecare din alte două baloane de 25 ml. Se completează conținutul unui balon din fiecare serie până la 25 ml cu amestecul de 2-propanol hexan (3.1). Aceste soluții sunt folosite ca soluții de referință. Se adaugă 2 ml de anilină (3.4) la fiecare dintre celelalte două baloane. Se încălzesc 30 minute într-o baie de apă care fierbe pentru a dezvolta culoarea. Se răcesc la temperatura camerei, se completează până la volumul de 25 ml cu
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
solvent A (proba martor). Se completează volumul baloanelor din prima serie (inclusiv balonul din proba martor) până la 25 ml cu un amestec de 2-propanol hexan (3.1), se omogenizează și se lasă să stea o oră (seriile de referință). Se adaugă 2 ml de anilină (3.4) la fiecare din baloanele din seria a doua (incluzând balonul pentru proba martor). Se încălzesc 30 de minute într-o baie de apă care fierbe pentru a dezvolta culoarea. Se răcește la temperatura camerei
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
0 ml din aceste soluții în fiecare din cele două serii de câte șase baloane gradate de 25 ml. Se completează conținutul în prima serie până la 25 ml cu un amestec de 2-propanol hexan (3.1) (serii de referință). Se adaugă 2 ml de anilină (3.4) la fiecare din baloanele din seria a doua. Se încălzește 30 de minute într-o baie de apă ce fierbe. Se răcește la temperatura camerei, se completează cu volum cu un amestec de 2-propanol
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
lucru standard S3 cu o concentrație corespunzând la 0,2 μg per ml de Clorotetraciclină-HCl. Diluția este realizată folosind soluția tampon de fosfat, pH 5,5, diluată la 1/10 (4.3), la care 0,01 % amido black a fost adăugat 1. Apoi se prepară prin diluării succesive (1 + 1), folosind soluția tampon (4.3), următoarele concentrații: S4 0,1 μg/ml S2 0,05 μg/ml S1 0,025 μg/ml 5.2 Oxitetraciclină Procedând cum este indicat la pct.
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
μg pe ml de tetraciclină- HCl și următoarele concentrații: S4 0,5 μg/ml S2 0,25 μg/ml S1 0,125 μg/ml 6. Extracte 6.1 Conținut de 50 ppm sau mai puțin Pentru a testa proba se adaugă formamidă (4.8) în cantitățile indicate în tabelul de mai jos. Se agită 30 minute pe o platformă de agitare. Apoi se diluează imediat cu soluția tampon de fosfat (4.3) conform indicațiilor date în tabelul de mai jos pentru
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
balon gradat cu soluție tampon, 6.2 Conținut mai mare decât 50 ppm 6.2.1 Clorotetracilcină Pentru o probă de test de 2 - 10 g, în funcție de conținutul presupus de antibiotic al probei sau de garanția ei de manufacturare, se adaugă de 20 ori volumul său de amestec (4.9). Se agită 30 minute pe o platformă de agitare. pH-ul trebuie să rămână sub 3 în timpul extracției; dacă este necesar, se reajustează la pH 3 (folosind 10 % acid acetic pentru
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de metanol și acid clorhidric pentru determinarea OTC și TC. Extractele sunt apoi diluate și efectele antibioticelor sunt determinate prin măsurarea transmisiei luminii a unui mediu de cultură care a fost însămânțat cu Staphylococus aureus și la care s-a adăugat antibioticul. Transmisia luminii depinde de concentrația de antibiotic. 3. Microorganisme: Staphylococus aureus K 1411 3.1 Menținerea sușei parentale Se inoculează cu S. aureus într-un tub de geloză luat din mediul de cultură (4.1), la care s-a
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
antibioticul. Transmisia luminii depinde de concentrația de antibiotic. 3. Microorganisme: Staphylococus aureus K 1411 3.1 Menținerea sușei parentale Se inoculează cu S. aureus într-un tub de geloză luat din mediul de cultură (4.1), la care s-a adăugat 1,5 - 3 % de geloză (în funcție de calitate). Se incubează peste noapte la 37ș C. Se păstrează cultura într-un frigider și se re-inoculează geloza la fiecare 4 săptămâni. În același timp se prepară sub-culturi pentru uzul de laborator. 3.2
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
500 μg per ml de CTC-HCl, OTC-HCl sau TC-HCl. Această soluție se păstrează o săptămână în frigider. 6. Extracția 6.1 Clorotetraciclină Se plasează 1 - 2 g de probă test într-o balon gradat de 200 sau 250 ml. Se adaugă aproximativ 100 ml din amestecul (4.4) și se agită 30 minute pe platforma de agitare. Se completează volumul cu soluție tampon de fosfat, pH 4,5 (4.2). Se omogenizează și se lasă să stea. 6.2 Oxitetraciclină și
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
cu soluție tampon de fosfat, pH 4,5 (4.2). Se omogenizează și se lasă să stea. 6.2 Oxitetraciclină și tetraciclină Se plasează 1 - 2 g de probă test într-o balon gradat de 200 sau 250 ml. Se adaugă aproximativ 100 ml din amestec (4.5) și se agită 30 minute pe o platformă de agitare. Se completează volumul cu soluție tampon de fosfat, pH 4,5 (4.2). Se omogenizează și se lasă să stea. 7. Metoda de
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
proporțional cu logaritmul concentrației antibioticului. 3. Microorganisme: B. cereus K 230 TR1 ( rezistent la tetraciclină) 3.1 Menținerea sușei parentale Se inoculează cu B. cereus un tub de geloză luat dintr-un mediu de cultură (4.1) la care se adaugă 100 μg pe 5 ml de Oxitetraciclină. Se incubează peste noapte la aproximativ 30ș C. Se păstrează cultura în frigider și se re-inoculează mediul de geloză cu el la fiecare 4 săptămâni. 3.2 Prepararea suspensiei de spori Se colectează
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
soluțiile (4.6), următoarele concentrații: S4 0,05 μg/ml S2 0,025 μg/ml S1 0,0125 μg/ml 6. Extracție Se ia o probă de testat de 2 - 10 g, în funcție de conținutul de oleandomicină presupus al probei, se adaugă 100 ml din soluție (4.7) și se agită 30 de minute pe o platformă de agitare. Se centrifughează, se ia o parte alicotă din extract și se diluează cu soluția (4.6) pentru a obține o concentrație presupusă de
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
concentrații: S4 1 µg / ml S2 0,5 µg / ml S1 0,25 µg / ml 6. Extracție Pentru concentrate, se ia o probă de test de 10 g; pentru preamestecuri și furaje, o probă de test de 29 g. Se adaugă 60 ml de soluție tampon de fosfat, pH 8 (4.2), încălzită anterior la 80ș C și omogenizată pentru 2 minute (mixer casnic, Ultra-turrax etc.). Se lasă să stea 10 minute, se adaugă 40 ml de metanol (4.5) și
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
probă de test de 29 g. Se adaugă 60 ml de soluție tampon de fosfat, pH 8 (4.2), încălzită anterior la 80ș C și omogenizată pentru 2 minute (mixer casnic, Ultra-turrax etc.). Se lasă să stea 10 minute, se adaugă 40 ml de metanol (4.5) și se omogenizează 5 minute. Se centrifughează extractul și se diluează o parte alicotă cu amestecul (4.7) pentru a obține o concentrație presupusă de tirolină de 2 µg per ml (= U3). Apoi se
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
S4 0,5 μg / ml S2 0,25 μg / ml S1 0,125 μg / ml 6 Extracție 6.1 Produse cu un conținut de viriginamicină mai mic de 50 ppm Se ia o probă test de 10 - 20 g, se adaugă 100 ml din soluția (4.6), și se agită 30 minute pe o platformă de agitare. Se centrifughează sau se filtrează, se iau 20 ml din soluția clară și se evaporă până este uscată într-un evaporator rotativ. Se dizolvă
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
se prepară concentrațiile U4, U2 și U1 prin diluări succesive (1 + 1) folosind amestecul (4.5). 6.2 Produse cu un conținut de viriginiamicină mai mare de 50 ppm Se ia o probă de test de 1 - 10 g, se adaugă 100 ml din soluția (4.6) și se agită 30 minute pe o platformă de agitare. Se centrifughează sau se filtrează apoi se diluează cu amestecul (4.5) pentru a obține o concentrație presupusă de virginiamicină de 1 µg per
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]