11,491 matches
-
mod corespunzător (apendicele 6). 6.3. Analiza produsului reacției PCR 6.3.1. Fragmentele PCR se detectează prin electroforeză în gel de agar. Se pune sub tensiune la 5-8 V/cm o cantitate de cel puțin 12 μl de amestec reactiv de ADN amplificat din fiecare eșantion împreună cu 3 μl de tampon de lest (apendicele 6) pe un mediu agarizat la 2,0 % într-un tampon tri-acetat-EDTA (ETA) (apendicele 6). Se folosește un marcator de ADN corespunzător, precum "100 bp ladder
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
unități (circa 25 mg) la litru Cloramfenicol (Sigma C-3175) 5 mg la litru Penicilină-G (Sigma P-3032) 825 unități (circa 0,5 mg) la litru Clorură de 2,3,5-trifeniltetrazoliu (Sigma) 50 mg la litru Notă: 1. Utilizarea altor reactive decât cele menționate anterior poate afecta creșterea R. solanacearum. 2. Agarul de tip Oxoid nr. 1 poate fi utilizat în loc de Bacto-Agar (Difco). În acest caz, creșterea R. solanacearum va fi mai lentă, dar și creșterea bacteriilor saprofite concurente ar putea
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
fluorescente tipice pe ml de extract concentrat resuspendat (N). N = C x 1 000/y x F unde y = volumul de extract concentrat resuspendat per fereastră și F = factorul de diluție al extractului concentrat resuspendat Apendicele 6 Protocoale PCR și reactivi validați Notă: Testele preliminare trebuie să permită detectarea reproductibilă a 103-104 celule de R. solanacearum pe ml de extract de eșantion. De asemenea, testele preliminare nu trebuie să indice rezultate pozitive false cu o gamă de sușe bacteriene selecționate (a
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
primer de oligonucleotide Primer sens OLI-1 5΄-GGG GGT AGC TTG CTA CCT GCC-3΄ Primer antisens Y-2 5΄-CCC ACT GCT GCC TCC CGT AGG AGT-3΄ Dimensiunea prevăzută a amplimerului matricei ADN de R. solanacearum = 288 bp 1.2. Amestecul reactiv pentru PCR Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 17,65 μl Tampon PCR x 101 (15 mM MgCl2) 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) Amestec dNTP (20 mM) 0,25 μl 0,2 mM
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Primer sens OLI-1 5΄-GGG GGT AGC TTG CTA CCT GCC-3΄ Primer antisens Y-2 5΄-CCC ACT GCT GCC TCC CGT AGG AGT-3΄ Dimensiunea prevăzută a amplimerului matricei ADN de R. solanacearum = 288 bp 1.2. Amestecul reactiv pentru PCR Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 17,65 μl Tampon PCR x 101 (15 mM MgCl2) 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) Amestec dNTP (20 mM) 0,25 μl 0,2 mM Primer OLI-1 (20
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
primer de oligonucleotide Primer sens Ps-1 5΄-agt cga acg gca gcg ggg g-3΄ Primer antisens Ps-2 5΄-ggg gat ttc aca tcg gtc ttg ca-3΄ Dimensiunea prevăzută a amplimerului matricei ADN de R. solanacearum = 553 bp. 2.2. Amestecul reactiv pentru PCR Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 16,025 μl Tampon PCR x 101 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) BSA (fracțiune V) (10 %) 0,25 μl 0,1 % Amestec dNTP (20 mM
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Primer sens Ps-1 5΄-agt cga acg gca gcg ggg g-3΄ Primer antisens Ps-2 5΄-ggg gat ttc aca tcg gtc ttg ca-3΄ Dimensiunea prevăzută a amplimerului matricei ADN de R. solanacearum = 553 bp. 2.2. Amestecul reactiv pentru PCR Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 16,025 μl Tampon PCR x 101 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) BSA (fracțiune V) (10 %) 0,25 μl 0,1 % Amestec dNTP (20 mM) 0,125 μl
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
ACC TGT TAT TGC CTC-3΄ Dimensiunea prevăzută a amplimerului matricei ADN de R. solanacearum = 718 bp (în prezența primerului Rs) Dimensiunea prevăzută a amplimerului controlului intern al PCR de 18S ARNr = 310 bp (în prezența primerului Ns) 3.2. Amestecul reactiv pentru PCR Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 12,625 μl Tampon PCR x 101 (1,5 mM MgCl2) 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) BSA (fracțiune V) (10 %) 0,25 μl 0,1
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
TGC CTC-3΄ Dimensiunea prevăzută a amplimerului matricei ADN de R. solanacearum = 718 bp (în prezența primerului Rs) Dimensiunea prevăzută a amplimerului controlului intern al PCR de 18S ARNr = 310 bp (în prezența primerului Ns) 3.2. Amestecul reactiv pentru PCR Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 12,625 μl Tampon PCR x 101 (1,5 mM MgCl2) 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) BSA (fracțiune V) (10 %) 0,25 μl 0,1 % Amestec dNTP (20
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Ns-6-R au fost optimizate pentru extracția miezurilor de taloane de cartof prin metoda de omogenizare și purificare a ADN Pastrik (2000) (a se vedea secțiunea VI.A.6.1.a). Va fi nevoie de o nouă optimizare a concentrațiilor de reactivi în cazul în care se aplică extracția prin agitare sau prin alte metode de izolare a ADN. 3.3. Condițiile reacției PCR Se urmează procedura: 1 ciclu de: (i) 5 minute la 95 °C: denaturarea matricei ADN 35 cicluri de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
-CCC AGT CAC GGC AGA GAC T-3΄ Primer antisens Rs-3-R 5΄-TTC ACG GCA AGA TCG CTC-3΄ Dimensiunea prevăzută a amplimerului matricei ADN de R. solanacearum: cu Rs-1-F/Rs-1-R = 718 bp cu Rs-1-F/Rs-3-R = 716 bp. 4.2. Amestecul reactiv pentru PCR (a) PCR specific biovarului 1/2 Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 12,925 μl Tampon PCR x 101 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) BSA (fracțiune V) (10 %) 0,25 μl
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
antisens Rs-3-R 5΄-TTC ACG GCA AGA TCG CTC-3΄ Dimensiunea prevăzută a amplimerului matricei ADN de R. solanacearum: cu Rs-1-F/Rs-1-R = 718 bp cu Rs-1-F/Rs-3-R = 716 bp. 4.2. Amestecul reactiv pentru PCR (a) PCR specific biovarului 1/2 Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 12,925 μl Tampon PCR x 101 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) BSA (fracțiune V) (10 %) 0,25 μl 0,1 % Amestec dNTP (20 mM) 0,125 μl
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Taq (5 U/μl) 1 0,2 μl 1 U Volumul eșantionului 5,0 μl Volum total 25,0 μl 1 Metodele au fost validate prin polimerază Taq PerkinElmer (AmpliTaq) și Gibco BRL. (b) PCR specific biovarului 3/4/5 Reactiv Cantitate per reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 14,925 μl Tampon PCR x 101 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) BSA (fracțiune V) (10 %) 0,25 μl 0,1 % Amestec dNTP (20 mM) 0,125 μl
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
48,40 g Acid acetic glacial 11,42 ml EDTA (sare disodică) 3,72 g Apă distilată 1,00 l Înainte de utilizare se diluează până la 1 x. De asemenea, este disponibil în comerț (de exemplu, Invitrogen sau echivalent). Apendicele 7 Reactivi validați pentru testul FISH 1. Oligosonde Sondă OLI-1-CY3 specifică R. solanacearum: 5΄-ggc agg tag caa gct acc ccc-3΄ Sondă eubacteriană EUB-338-FITC nespecifică: 5΄-gct gcc tcc cgt agg agt-3΄ 2. Soluția de fixare [ATENȚIE! FIXATIVUL CONȚINE PARAFORMALDEHIDĂ, CARE ESTE
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
CE definește funcțiile și sarcinile laboratorului comunitar de referință pentru influența aviară în vederea coordonării, în colaborare cu Comisia, a metodelor folosite în statele membre pentru diagnosticarea bolii menționate. Funcțiile și sarcinile respective cuprind organizarea de teste comparative periodice și furnizarea reactivilor standard la nivel comunitar. (4) Recent, s-au pus la punct teste de laborator pentru a asigura o diagnosticare rapidă a influenței aviare. (5) Experiența acumulată în ultimii ani în combaterea influenței aviare a permis identificarea procedurilor de prelevare de
32006D0437-ro () [Corola-website/Law/294831_a_296160]
-
în cadrul căreia valoarea tuturor materialelor utilizate nu depășește 50% din prețul franco fabrică al produsului 3820 Preparate antigel și lichide preparate pentru degivrare Fabricare în cadrul căreia valoarea tuturor materialelor utilizate nu depășește 50% din prețul franco fabrică al produsului 3822 Reactivi de diagnostic sau de laborator pe orice fel de suport și reactivi de diagnostic sau de laborator preparați, chiar prezentați pe un suport, alții decât cei de la pozițiile 3002 sau 3006; materiale de referință certificate Fabricare în cadrul căreia valoarea tuturor
22006A0530_01-ro () [Corola-website/Law/294531_a_295860]
-
fabrică al produsului 3820 Preparate antigel și lichide preparate pentru degivrare Fabricare în cadrul căreia valoarea tuturor materialelor utilizate nu depășește 50% din prețul franco fabrică al produsului 3822 Reactivi de diagnostic sau de laborator pe orice fel de suport și reactivi de diagnostic sau de laborator preparați, chiar prezentați pe un suport, alții decât cei de la pozițiile 3002 sau 3006; materiale de referință certificate Fabricare în cadrul căreia valoarea tuturor materialelor utilizate nu depășește 50% din prețul franco fabrică al produsului 3823
22006A0530_01-ro () [Corola-website/Law/294531_a_295860]
-
materialelor utilizate nu trebuie să depășească 50% din prețul franco fabrică al produsului 3820 Preparate antigel și lichide preparate pentru degivrare Fabricare în cadrul căreia valoarea tuturor materialelor utilizate nu trebuie să depășească 50% din prețul franco fabrică al produsului 3822 Reactivi de diagnostic sau de laborator pe orice fel de suport și reactivi de diagnostic sau de laborator preparați, chiar prezentați pe un suport, alții decât cei de la pozițiile 3002 sau 3006; materiale de referință certificate Fabricare în cadrul căreia valoarea tuturor
22006D0612-ro () [Corola-website/Law/294658_a_295987]
-
produsului 3820 Preparate antigel și lichide preparate pentru degivrare Fabricare în cadrul căreia valoarea tuturor materialelor utilizate nu trebuie să depășească 50% din prețul franco fabrică al produsului 3822 Reactivi de diagnostic sau de laborator pe orice fel de suport și reactivi de diagnostic sau de laborator preparați, chiar prezentați pe un suport, alții decât cei de la pozițiile 3002 sau 3006; materiale de referință certificate Fabricare în cadrul căreia valoarea tuturor materialelor utilizate nu trebuie să depășească 50% din prețul franco fabrică al
22006D0612-ro () [Corola-website/Law/294658_a_295987]
-
un factor esențial, măresc cantitățile de carbonat de bariu necesare procesului de producție atunci când produsul este importat din RPC, spre deosebire de cantitățile pe care le utilizează atunci când produsul este fabricat în Comunitate, arată că îl consideră pe acesta din urmă mai reactiv. Mai mult, dintr-o analiză mai aprofundată a produselor vândute pe piața comunitară reiese că, pe lângă categoriile cele mai reactive, care, astfel cum se arată la considerentul 80 din regulamentul provizoriu, reprezintă mai puțin de 5 % din vânzările sale în
32005R1175-ro () [Corola-website/Law/294264_a_295593]
-
cantitățile pe care le utilizează atunci când produsul este fabricat în Comunitate, arată că îl consideră pe acesta din urmă mai reactiv. Mai mult, dintr-o analiză mai aprofundată a produselor vândute pe piața comunitară reiese că, pe lângă categoriile cele mai reactive, care, astfel cum se arată la considerentul 80 din regulamentul provizoriu, reprezintă mai puțin de 5 % din vânzările sale în Comunitate, industria comunitară vinde, de asemenea, alte categorii cu o reactivitate foarte ridicată, reprezentând aproximativ 20 % din totalul vânzărilor sale
32005R1175-ro () [Corola-website/Law/294264_a_295593]
-
provizoriu, reprezintă mai puțin de 5 % din vânzările sale în Comunitate, industria comunitară vinde, de asemenea, alte categorii cu o reactivitate foarte ridicată, reprezentând aproximativ 20 % din totalul vânzărilor sale pe piață. Restul vânzărilor industriei comunitare privește categorii mai puțin reactive. Prin urmare, s-a concluzionat că, în aceste circumstanțe și contrar conținutului considerentului 80 din regulamentul provizoriu, se justifică o ajustare în funcție de diferențele de reactivitate. (25) În scopul analizării subcotării prețurilor, prețul de vânzare practicat de industria comunitară pentru categoriile
32005R1175-ro () [Corola-website/Law/294264_a_295593]
-
urmare, s-a concluzionat că, în aceste circumstanțe și contrar conținutului considerentului 80 din regulamentul provizoriu, se justifică o ajustare în funcție de diferențele de reactivitate. (25) În scopul analizării subcotării prețurilor, prețul de vânzare practicat de industria comunitară pentru categoriile foarte reactive a fost redus cu 14 %. Această ajustare s-a bazat pe diferența de preț dintre categoriile cu reactivitate ridicată sau scăzută vândute de industria comunitară. Din comparație a reieșit faptul că, pe parcursul perioadei de anchetă, produsul în cauză originar din
32005R1175-ro () [Corola-website/Law/294264_a_295593]
-
cu dispozițiile privind piesele de schimb care trebuie să asigure compatibilitatea cu sistemele OBD. (5) Măsurile necesare punerii în aplicare a alineatelor (1), (2) și (3) se adoptă până la 28 decembrie 2005. Articolul 5 Sistemele de control al emisiilor utilizând reactivi consumabili La definirea măsurilor necesare punerii în aplicare a articolului 4, în conformitate cu dispozițiile articolului 7 alineatul (1), Comisia include, după caz, măsuri tehnice necesare minimizării riscului de utilizare, la sistemele de control, a unor reactivi consumabili menținuți în mod inadecvat
32005L0055-ro () [Corola-website/Law/293981_a_295310]
-
de control al emisiilor utilizând reactivi consumabili La definirea măsurilor necesare punerii în aplicare a articolului 4, în conformitate cu dispozițiile articolului 7 alineatul (1), Comisia include, după caz, măsuri tehnice necesare minimizării riscului de utilizare, la sistemele de control, a unor reactivi consumabili menținuți în mod inadecvat în utilizare. Suplimentar și după caz, se includ măsuri destinate să asigure minimizarea emisiilor de amoniac ca urmare a utilizării agenților reactivi. Articolul 6 Stimulente fiscale (1) Statele membre pot prevedea stimulente fiscale numai în privința
32005L0055-ro () [Corola-website/Law/293981_a_295310]