2,287 matches
-
un exon VDJ, respectiv, un exon VJ. Prin hipermutație somatică pot apare mutații punctiforme la granițele de sudare V-D-J prin mecanismul de reparare ADN predispus la erori. Diversitatea și secvența de nucleotide poate fi generată și prin mecanismul de conversie genică în cadrul căruia sectoare ale secvenței de nucleotide a unui exon (VJ sau VDJ) sunt împrumutate de la segmentele genice ale pseudogenelor ( ΨV) din amonte. În cadrul recombinării de comutare a clasei (macaz), regiunea constantă a Ig este specificată de unități de transcripție
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
V-D-J prin mecanismul de reparare ADN predispus la erori. Diversitatea și secvența de nucleotide poate fi generată și prin mecanismul de conversie genică în cadrul căruia sectoare ale secvenței de nucleotide a unui exon (VJ sau VDJ) sunt împrumutate de la segmentele genice ale pseudogenelor ( ΨV) din amonte. În cadrul recombinării de comutare a clasei (macaz), regiunea constantă a Ig este specificată de unități de transcripție alcătuite din mai mulți exoni. În cazul catenelor grele Ig, mai multe unități de transcripție specifică diferitele clase
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
oportun pentru a contracara tipul de antigen prezent în celulă. Asamblarea genelor pentru catenele imunoglobulinelor (Ig) și a genelor pentru receptorii celulelor T (TCR = RCT) în cursul dezvoltării celulelor limfoide, poartă numele de recombinare, remaniere sau rearanjare. În fiecare locus genic Ig sau TRC, ADN al liniei germinale se află segmente genice disparate, cunoscute sub numele de segmente genice V, J, D și C. Deoarece acești loci au segmente multiple din fiecare tip, sunt posibile numeroasele combinații între ele, ceea ce generează
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
genelor pentru catenele imunoglobulinelor (Ig) și a genelor pentru receptorii celulelor T (TCR = RCT) în cursul dezvoltării celulelor limfoide, poartă numele de recombinare, remaniere sau rearanjare. În fiecare locus genic Ig sau TRC, ADN al liniei germinale se află segmente genice disparate, cunoscute sub numele de segmente genice V, J, D și C. Deoarece acești loci au segmente multiple din fiecare tip, sunt posibile numeroasele combinații între ele, ceea ce generează un set foarte divers de secvențe receptoare de antigenă. Rearanjarea V
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
genelor pentru receptorii celulelor T (TCR = RCT) în cursul dezvoltării celulelor limfoide, poartă numele de recombinare, remaniere sau rearanjare. În fiecare locus genic Ig sau TRC, ADN al liniei germinale se află segmente genice disparate, cunoscute sub numele de segmente genice V, J, D și C. Deoarece acești loci au segmente multiple din fiecare tip, sunt posibile numeroasele combinații între ele, ceea ce generează un set foarte divers de secvențe receptoare de antigenă. Rearanjarea V(D)J reprezintă evenimentul central în dezvoltarea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
multiple din fiecare tip, sunt posibile numeroasele combinații între ele, ceea ce generează un set foarte divers de secvențe receptoare de antigenă. Rearanjarea V(D)J reprezintă evenimentul central în dezvoltarea limfocitelor și se caracterizează printr-o combinare unică de segmente genice pe baza unei recunoașteri de secvențe ADN cu specificitate de situs și reunire imprecisă. Fiecare regiune V, D și J este flancată de o secvență semnal de recombinare care definește situsul de rearanjare. Secvența semnal este reprezentată de un heptamer
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
dintre aceste semnale de joncțiune. Rearanjarea normală produce o fuziune a segmentelor codificatoare (o reuniune de secvențe codificatoare) și o fuziune heptamer la heptamer a semnalelor (adică o reuniune de semnale). La fiecare dintre locii receptori de antigen, toate segmentele genice de un tip (V, D sau J) au aceleași semnal sau de unire (S), astfel că rearanjarea este direcționată pentru a asambla gene funcționale. Depinzând de orientarea semnalelor, reunirea capetelor ADN poate conduce fie la o deleție, fie la o
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
astfel de rearanjare a fost identificată în locii Ig și TCR: de exemplu, la locusul Igκ uman, aproximativ jumătate dintre segmentele V sunt în orientare inversată față de Jκ, asemenea segmente fiind utilizate în edificarea genelor Igκ. În cazul rearanjării segmentelor genice purtătoare de informație ereditară pentru răspunsul imun există o preferință evidentă pentru reunirea segmentelor din aceeași moleculă de ADN. Deși sunt bine cunoscute translocațiile intercromozomale cu valoare oncogenică, care utilizează secvențe semnal, ele sunt rare în cazul recombinării V(D
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de ADN. Deși sunt bine cunoscute translocațiile intercromozomale cu valoare oncogenică, care utilizează secvențe semnal, ele sunt rare în cazul recombinării V(D)J și atunci când apar, ele conduc la o rearanjare nelegitimă și în consecință neproductivă. Între doi loci genici codificatori ai TCR, aflați în același cromozom, incluzând chiar și centromerul, poate avea loc procesul de recombinare, așa cum are loc frecvent între locii genici umani TCRβ și γ, aflați în cromozomul 7. Cercetările lui Grawunder și colab. (1999) au arătat
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
și atunci când apar, ele conduc la o rearanjare nelegitimă și în consecință neproductivă. Între doi loci genici codificatori ai TCR, aflați în același cromozom, incluzând chiar și centromerul, poate avea loc procesul de recombinare, așa cum are loc frecvent între locii genici umani TCRβ și γ, aflați în cromozomul 7. Cercetările lui Grawunder și colab. (1999) au arătat că diversitatea Ig și TCR este generată în precursorii limfocitelor printr-un proces de rearanjare somatică V(D)J. Mecanismul rearanjării V(D)J
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
dintre ele în rearanjarea V(D)J. Datele actuale arată că XRCC4 manifestă activitate de legare la ADN, ceea ce sugerează participarea ei la recrutarea ADN ligazei IV, în situsurile DSB, în cursul desfășurării rearanjamentului V(D)J. Situsurile de la locii genici pentru RCT se pot reasocia peste distanțe ce variază de la câteva kilobaze, la câteva sute de kilobaze, fără efect evident asupra frecvenței de rearanjare. În unele cazuri, situsurile proximale sunt în mod preferențial utilizate pentru unire. De exemplu, la iepure
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
acest tip de recombinare de alte tipuri de rearanjare cu specificitate de situs, care presupun participarea a două secvențe omoloage. EXCLUDEREA ALELICĂ, funcțională în elaborarea răspunsului imun, respectă totuși regula generală a mecanismelor ereditare bazate pe complementaritate. În procesul transcrierii genice, funcționează ca matriță numai una dintre cele două catene ale duplexului ADN. Eventuala transcriere a ambelor catene ale duplexului ADN pentru una și aceiași genă, într-o celulă, ar sintetiza două tipuri distincte, dar complementare de ARNm, purtătoare de mesaje
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
Secvența consens este semnalul cel mai eficient, dar și multiplele sale variante pot asigura rearanjarea, afirmație bazată pe observația că locii receptorilor de antigen au rareori semnale consens perfecte. Dacă ambele secvențe semnalizatoare au aceeași lungime a spațiatorului, rata rearanjării genice este foarte scăzută și se desfășoară la o frecvență egală cu aceea care are loc atunci când există doar un semnal și un heptamer izolat, ca și cum nonamerul este ignorat. Procesul de rearanjare pentru formarea catenei grele (H) a imunoglobulinei precede pe
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
Astfel, inducția transcrierii din linia germinală a JK-CK sub acțiunea lipopolizaharidului într-o linie celulară pre-B transformată viral a condus la un nivel crescut de reunire VK-JK. Dar relația transcriere-rearanjare nu se evidențiază în toate sistemele analizate, astfel că rearanjarea genică pentru imunoglobuline se corelează cu o structură cromatinică deschisă. Există multiple mecanisme prin care cromatina poate dobândi o astfel de conformație, la nivelul locusului unde trebuie să aibe loc rearanjarea genică pentru imunoglobuline. Metilarea și replicarea pe sisteme extracromozomale experimentale
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
se evidențiază în toate sistemele analizate, astfel că rearanjarea genică pentru imunoglobuline se corelează cu o structură cromatinică deschisă. Există multiple mecanisme prin care cromatina poate dobândi o astfel de conformație, la nivelul locusului unde trebuie să aibe loc rearanjarea genică pentru imunoglobuline. Metilarea și replicarea pe sisteme extracromozomale experimentale au evidențiat efectul sinergic în inducerea stării cromatinizate a ADN, insensibilă la nucleaze. Plasmidele reprezintă cele mai permisive sisteme test. Replicarea ADN la nivelul unui asemenea plasmid s-a dovedit a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
subset dintre componentele necesare prezintă specificitate de celulă limfoidă. Restul factorilor aparțin unui evantai larg de expresie și îndeplinesc și alte funcții celulare generale. Reacția de rearanjare V(D)J este strâns legată de etapele ciclului celular, precum și de locusul genic specific. Aceasta asigură producerea unui repertoriu eficient și specific de receptori de antigene și totodată preîntâmpină potențialele rearanjări genice letale în genom. Cercetările lui J.F. Mc Blane și P. Alday (1999) au demonstrat că nucleosomii inhibă accesul proteinelor RAG la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
și alte funcții celulare generale. Reacția de rearanjare V(D)J este strâns legată de etapele ciclului celular, precum și de locusul genic specific. Aceasta asigură producerea unui repertoriu eficient și specific de receptori de antigene și totodată preîntâmpină potențialele rearanjări genice letale în genom. Cercetările lui J.F. Mc Blane și P. Alday (1999) au demonstrat că nucleosomii inhibă accesul proteinelor RAG la secvențele semnal și blochează inițierea rearanjării V(D)J, astfel că pentru realizarea mecanismului rearanjării V(D)J este
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
devenit accesibili proteinelor RAG. Aceasta sugerează că acetilarea histonelor joacă rol în deschiderea structurii cromatinice cu un ordin de organizare superior celui nucleosomal. Realizarea unei structuri cromatinice pe deplin accesibile proteinelor Rag implică intervenția unor factori suplimentari, disponibili la locusul genic al rearanjării numai în anumite stadii de dezvoltare. Studiile de transgeneză și epigenetică arată că legarea factorilor de transcriere cu specificitate de locus și de stadiu, la elementele reglatoare din locii genici ai receptorilor de antigene, este implicată în coordonarea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
implică intervenția unor factori suplimentari, disponibili la locusul genic al rearanjării numai în anumite stadii de dezvoltare. Studiile de transgeneză și epigenetică arată că legarea factorilor de transcriere cu specificitate de locus și de stadiu, la elementele reglatoare din locii genici ai receptorilor de antigene, este implicată în coordonarea deschiderii localizate a cromozomului, ca o precerință în realizarea rearanjării V(D)J. 5.2. ACTIVAREA REARANJAMENTULUI V(D)J DE CĂTRE PRODUȘII GENELOR RAG1 ȘI RAG2 Cercetările efectuate de Oettinger, Schatz, Gorka
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
Gorka și Baltimore (1989, 1990) au permis identificarea genelor RAG1 și RAG2, prin transfecția unei linii celulare fibroblastice de șoarece, care conținea un substrat de rearanjare integrat cu ADN genomic. Autorii au identificat, cu frecvență mică, celule în care substratul genic a suferit procesul rearanjării. Locusul unic, responsabil pentru activarea rearanjării, conține ambele gene RAG1 și RAG2 și, pentru activitatea combinatorie este necesară expresia ambelor gene. La toate speciile studiate - șoarece, om, găină și broasca Xenopus - genele RAG1 și RAG2 formează
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
119 000, iar RAG2, de 59 000 Daltoni. Locusul RAG a fost cartat la șoarece în cromozomul 2, iar la om în 11p13, foarte aproape, dar distinct, de locusul inductor al tumorii Wilms (Oetinger și colab., 1992). Delețiile în locusul genic ce se extinde prin RAG permit identificarea indivizilor hemizigoți pentru RAG, indivizii umani având reactivitate imunitară normală. Sinteza genelor RAG1 și ARNm RAG2 în fibroblastele 3T3 de șoarece, sau în alte linii celulare inactive pentru rearanjările genice, conduce la rearanjarea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
Delețiile în locusul genic ce se extinde prin RAG permit identificarea indivizilor hemizigoți pentru RAG, indivizii umani având reactivitate imunitară normală. Sinteza genelor RAG1 și ARNm RAG2 în fibroblastele 3T3 de șoarece, sau în alte linii celulare inactive pentru rearanjările genice, conduce la rearanjarea V(D)J a substratelor test, la nivele care se apropie de cele care au loc în liniile celulare pre-B. Transfecția selectivă numai a genei RAG1 sau doar a genei RAG2 determină evenimente foarte rare de rearanjare
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
nu au inserțiile de baze tipic randomizate, probabil pentru că fibroblastele nu exprimă enzima TdT. Coexpresia ARNm RAG 1 și RAG2 a fost evidențiată în țesuturile limfoide, dar nu și în alte țesuturi. Faptul se corelează cu prezența activității de rearanjare genică V(D)J. S-a făcut speculația că expresia la nivele înalte și pe termen lung a genelor RAG ar putea induce rearanjări cromozomale cu consecințe nedorite. Analiza secvenței proteinei RAG1 a evidențiat că jumătatea C - terminală a acesteia prezintă
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
la șoarece, ARNm pentru RAG1 fiind distribuit, mai mult sau mai puțin uniform, în toți neuronii, fiind însă mai evident în hipocampus și cerebel. Astfel, se deduce că și în creier ar putea să existe un anumit tip de rearanjare genică programată, asemănătoare aceleia din țesuturile limfoide, fără ca expresia RAG1 să fie esențială. Șoarecii transgenici cu gena RAG1 inactivată printr-un proces de mutație orientată (knock-out), sunt imunodeficienți și lipsiți total de activitate de rearanjare genică V(D)J, dar structurile
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
un anumit tip de rearanjare genică programată, asemănătoare aceleia din țesuturile limfoide, fără ca expresia RAG1 să fie esențială. Șoarecii transgenici cu gena RAG1 inactivată printr-un proces de mutație orientată (knock-out), sunt imunodeficienți și lipsiți total de activitate de rearanjare genică V(D)J, dar structurile și funcțiile creierului sunt normale. Astfel, rolul expresiei RAG 1, în sistemul nervos, rămâne o enigmă. Analog funcției HPR I de la S. cerevisiae, expresia RAG1 în sistemul nervos, în loc de a promova un anumit tip de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]