942 matches
-
placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
în serie pe plăci de microtitrare utilizând anse de diluție de 0,05 ml. De asemenea, virusul titrat în prealabil se diluează în mediul de cultură fără ser conținând 100 TCID 50/0,05 ml, apoi se adaugă în fiecare godeu. Urmează incubarea timp de o oră la 37°C pentru a permite să aibă loc neutralizarea, se adăuga în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară conținând 0,5 până la 1,0 x 106 celule la 1 ml mediu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
diluează în mediul de cultură fără ser conținând 100 TCID 50/0,05 ml, apoi se adaugă în fiecare godeu. Urmează incubarea timp de o oră la 37°C pentru a permite să aibă loc neutralizarea, se adăuga în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară conținând 0,5 până la 1,0 x 106 celule la 1 ml mediu de cultură celulară ce conține ser fără anticorpi față de virusul febrei aftoase și apoi placă se închide ermetic. Plăcile sunt incubate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
fiecare test includ antiser omolog cu titrul cunoscut, o cultură de celule martor, un martor de toxicitate a serului, un martor de mediu și o titrare de virus din care este calculată cantitatea actuala de virus utilizată în testare. Interpretare: Godeurile cu efect citopatic prezent sunt considerate că infectate și titrurile de neutralizare sunt exprimate că și corespunzătoare diluției finale de ser prezenta în amestecurile ser/virus la punct final 50% estimat în conformitate cu metoda Spearman-Karber. (Karber, G., 1931, Archiv fuer Experimentelle
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
finale de ser prezenta în amestecurile ser/virus la punct final 50% estimat în conformitate cu metoda Spearman-Karber. (Karber, G., 1931, Archiv fuer Experimentelle Pathologic und Pharmokologic, 162, 480). Testele sunt considerate a fi valide când cantitatea actuala de virus utilizată per godeu în testare este între 101,5 și 102,5 TCID50 și când titrul serului de referință este binar în raport cu titrul așteptat, estimat din manieră titrărilor anterioare. Cand valorile martorilor depășesc aceste limite, testările se repetă. La un titru final de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de iepure, peste noapte, într-o cameră umedă și la temperatura camerei. 2. Cincizeci de microlitri din fiecare ser de testat în diluții serice în baza 2, în duplicat, pornind de la 1/4 sunt preparați în plăci de microtitrare cu godeuri multiple cu fund sub forma literei "U" (plăci carrier). Sunt adăugați cincizeci de microlitri dintr-o doză constantă de antigen în fiecare godeu și amestecul este lăsat peste noapte la 4°C. Adăugarea antigenului reduce diluția de start a serului
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
serice în baza 2, în duplicat, pornind de la 1/4 sunt preparați în plăci de microtitrare cu godeuri multiple cu fund sub forma literei "U" (plăci carrier). Sunt adăugați cincizeci de microlitri dintr-o doză constantă de antigen în fiecare godeu și amestecul este lăsat peste noapte la 4°C. Adăugarea antigenului reduce diluția de start a serului la 1/8. 3. Plăcile ELISA sunt spălate de cinci ori cu PBST. 4. Cincizeci de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi transferați din plăcile carrier în plăcile ELISA căptușite cu ser de iepure și incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare, se adăuga în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
în fiecare godeu 50 μl de imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de ortofenil-diamina conținând 0,05% H(2)O(2) (30%) m/v. 8. Reacția este stopată după 15 minute cu H(2)ȘO(4) soluție 1,25 M. Plăcile sunt citite spectofotometric la 492 nm la un cititor
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
v. 8. Reacția este stopată după 15 minute cu H(2)ȘO(4) soluție 1,25 M. Plăcile sunt citite spectofotometric la 492 nm la un cititor ELISA legat la un microcomputer. Martori: Pentru fiecare antigen se utilizează 40 de godeuri ce nu conțin ser dar conțin antigen diluat în PBST; o diluție binara în serie, dublă de antiser de referință, omolog bovin; o diluție binara în serie, dublă de ser negativ bovin. Interpretare: Titrurile de anticorpi sunt exprimate că diluție
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de antiser de referință, omolog bovin; o diluție binara în serie, dublă de ser negativ bovin. Interpretare: Titrurile de anticorpi sunt exprimate că diluție finală a serului de testat ce dă 50% din valoarea medie a densităților optice înregistrată în godeurile de control al virusului unde serul de testat este absent. Titrurile superioare valorii de 1/40 sunt considerate pozitive. Referințe: Hamblin C., Barnett ITR și Hedger RS (1986) "A new enzime-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibodies against
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
Amestecurile virus/ser sunt incubate în plăci de microtitrare, la 37°C timp de 30 până la 60 minute înainte de a fi adăugate celulele corespunzătoare. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1 ml suspensie celulară. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi) martori de toxicitate a serului, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de seroneutralizare și titrul virusului utilizat în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]