1,103 matches
-
Sare Până la 2% Standardul FIL 12B:1988 Art. 9 și pct. II al Regulamentului (CE) nr. 1255/1999 Brânză produsă din lapte de oaie și/sau capră Lapte de vacă < 1% Anexa XV Regulamentul (CEE) nr. 2921/90 Anexa I ─ Cazeină acidă Apă Până la 12,00% Standardul FIL 78:C1991 Grăsime Până la 1,75% . Standardul FIL 127A:1988 Aciditate liberă Până la 0,30% (lactic) Standardul FIL 91:1979 Regulamentul (CEE) nr. 2921/90 Anexa I ─ Cazeină cheag Apă Până la 12,00
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
nr. 2921/90 Anexa I ─ Cazeină acidă Apă Până la 12,00% Standardul FIL 78:C1991 Grăsime Până la 1,75% . Standardul FIL 127A:1988 Aciditate liberă Până la 0,30% (lactic) Standardul FIL 91:1979 Regulamentul (CEE) nr. 2921/90 Anexa I ─ Cazeină cheag Apă Până la 12,00% Standardul FIL 78C:1991 Grăsimi Până la 1,00% Standardul FIL 127A:1998 Cenușă 7,50% Min. Standardul FIL 90:1979 Regulamentul (CEE) nr. 2921/90 Anexa I - Cazeinați Apă Până la 6,00% Standardul FIL 78C
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
Standardul FIL 78C:1991 Proteine ale laptelui 88,00% Min. Standardul FIL 92:1979 Grăsime și cenușă Până la 6,00% Standardul FIL 127A:1988 Standardul FIL 89:1979 sau Standardul FIL 90: 1979 Regulamentul (CEE) nr. 2921/90 Anexa II - Cazeină acidă Apă Până la 10,00%. Standardul FIL 78C:1991 Grăsime Până la 1,50% Standardul FIL 127A:1988 Aciditate liberă Până la 0,20% (lactic) Standardul FIL 91:1979 TBC (Max.) 30 000 l/g Standardul FIL 100B:1991 Obs. 3 Bacterii
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
000 l/g Standardul FIL 100B:1991 Obs. 3 Bacterii coliforme Absente în 0,1g Anexa XVI Obs. 3 Therm: (Max.) 5 000 l/g Standardul FIL 100B:1991 Obs. 3 și 4 Regulamentul (CEE) nr. 2921/90 Anexa II - Cazeină cheag Apă Până la 8,00% Standardul FIL 78C:1991 Grăsime Până la 1,00% Standardul FIL 127A:1988 Cenușă 7,50% Min. Standardul FIL 90:1979 TBC (Max.) 30 000 l/g Standardul FIL 100B:1991 Obs. 3 Bacterii coliforme Absente
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
conține frecvent o impuritate (stigmastanol) care apare imediat după β-sitosterol. Suprafețele celor două vârfuri trebuie însumate la evaluarea cantității totale de β-sitosterol existente. Stigmastanol Lanosterol Stigmastanol ANEXA XV (Articolul 10) METODĂ DE REFERINȚĂ PENTRU DETECTAREA LAPTELUI DE VACĂ ȘI A CAZEINEI ÎN BRÂNZETURILE PRODUSE DIN LAPTE DE OAIE, LAPTE DE CAPRĂ SAU LAPTE DE BIVOLIȚĂ SAU DIN AMESTECURI DE LAPTE DE OAIE, CAPRĂ ȘI BIVOLIȚĂ 1. Domeniu de aplicare Detectarea laptelui de vacă și a cazeinei în brânzeturile produse din lapte
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
LAPTELUI DE VACĂ ȘI A CAZEINEI ÎN BRÂNZETURILE PRODUSE DIN LAPTE DE OAIE, LAPTE DE CAPRĂ SAU LAPTE DE BIVOLIȚĂ SAU DIN AMESTECURI DE LAPTE DE OAIE, CAPRĂ ȘI BIVOLIȚĂ 1. Domeniu de aplicare Detectarea laptelui de vacă și a cazeinei în brânzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capră, lapte de bivoliță sau din amestecuri de lapte de oaie, capră și bivoliță prin focalizarea izoelectrică a γ-cazeinelor după plasminoliză. 2. Domeniu de aplicare Această metodă poate fi folosită pentru
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
lapte de bivoliță sau din amestecuri de lapte de oaie, capră și bivoliță. Nu poate fi folosită pentru detectarea falsificării laptelui și a brânzei cu concentrate de proteine de zer de bovine tratate termic. 3. Principiul metodei 3.1. Izolarea cazeinei din brânză și din probele de referință 3.2. Dizolvarea cazeinelor izolate și tratarea acestora prin clivare plasminică (EC.3.4.21.7). 3.3. Focalizarea izoelectrică a cazeinelor tratate cu plasmină în prezența ureii și colorarea proteinelor 3.4
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
și bivoliță. Nu poate fi folosită pentru detectarea falsificării laptelui și a brânzei cu concentrate de proteine de zer de bovine tratate termic. 3. Principiul metodei 3.1. Izolarea cazeinei din brânză și din probele de referință 3.2. Dizolvarea cazeinelor izolate și tratarea acestora prin clivare plasminică (EC.3.4.21.7). 3.3. Focalizarea izoelectrică a cazeinelor tratate cu plasmină în prezența ureii și colorarea proteinelor 3.4. Evaluarea benzilor colorate de γ2- și γ3-cazeină (dovezi ale prezenței laptelui
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
zer de bovine tratate termic. 3. Principiul metodei 3.1. Izolarea cazeinei din brânză și din probele de referință 3.2. Dizolvarea cazeinelor izolate și tratarea acestora prin clivare plasminică (EC.3.4.21.7). 3.3. Focalizarea izoelectrică a cazeinelor tratate cu plasmină în prezența ureii și colorarea proteinelor 3.4. Evaluarea benzilor colorate de γ2- și γ3-cazeină (dovezi ale prezenței laptelui de vacă) prin compararea benzilor obținute din probă cu benzile obținute pe același gel din probele de referință
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
75 g glicerol (87 % m/m) 24,03 g uree 250 mg ditiotreitol, și se completează cu apă până la 50 ml. Observație: Se păstrează substanța în refrigerator; termen de valabilitate: maximum o săptămână. 4.7. Reactivi pentru clivarea plasminică a cazeinelor 4.7.1. Soluție tampon de carbonat de amoniu Se titrează până la pH 8 o soluție de hidrogen carbonat de amoniu 0,2 mol/l (1,58 g/100 ml apă) conținând acid etilendiaminotetraacetic 0,05 mol/l (EDTA, 1
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
pulbere fină omogenă. Pentru prepararea probei standard 0%, se urmează aceeași procedură folosind lapte degresat de bivoliță veritabil. Probele trebuie păstrate la -20 ° C. Observație: Înaintea preparării probelor standard se recomandă verificarea purității laptelui de bivoliță prin focalizarea izoelectrică a cazeinelor tratate cu plasmină. Reactivi pentru colorarea proteinelor 4.9. Fixativ Se dizolvă în apă 150 g acid tricloroacetic și se completează cu apă până la 1000 ml. 4.10. Soluție pentru decolorare Se diluează în apă distilată până la 2000 ml 500
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
sau liofilizator 5.18. Baie de apă cu agitator, controlată termostatic și ajustabilă la 35 și 40 ± 1 °C 5.19. Echipament de densitometrie cu citire la λ = 634 nm 6. Procedură 6.1. Prepararea probei 6.1.1. Izolarea cazeinelor Se cântărește într-un tub de centrifugă de 100 ml echivalentul a 5 g materie uscată de brânză sau probă de referință, se adaugă 60 ml apă distilată și se omogenizează cu un omogenizator cu tijă (8 000-10 000 rpm
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
de 4,5 cu soluție de acid acetic diluat (4.5.1), se adaugă 20 ml diclorometan (4.5.2), se omogenizează din nou și se pune în centrifugă (5 minute, 3000 g). Se îndepărtează cu o spatulă stratul de cazeină care se află între faza apoasă și cea organică (vezi Figura 2) și se elimină ambele faze. Se reomogenizează cazeina în 40 ml apă distilată (vezi mai sus) și în 20 ml diclorometan (4.5.2), apoi se pune în
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
se omogenizează din nou și se pune în centrifugă (5 minute, 3000 g). Se îndepărtează cu o spatulă stratul de cazeină care se află între faza apoasă și cea organică (vezi Figura 2) și se elimină ambele faze. Se reomogenizează cazeina în 40 ml apă distilată (vezi mai sus) și în 20 ml diclorometan (4.5.2), apoi se pune în centrifugă. Se repetă procedura până când ambele faze extrase sunt incolore (de două sau trei ori). Se omogenizează reziduul de proteină
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
medie. Se spală de fiecare dată reziduul de pe filtru cu câte două porții separate de 25 ml acetonă și se lasă să se usuce în aer sau sub jet de azot, apoi se transformă în pulbere într-un mojar. Observație: Cazeina izolată uscată trebuie păstrată la -20 °C. 6.1.2. Clivarea plasminică al ß-cazeinelor pentru intensificarea γ-cazeinelor Se prepară o suspensie de 25 mg cazeine izolate (6.1.1) în 0,5 ml soluție tampon de carbonat de amoniu (4
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
aer sau sub jet de azot, apoi se transformă în pulbere într-un mojar. Observație: Cazeina izolată uscată trebuie păstrată la -20 °C. 6.1.2. Clivarea plasminică al ß-cazeinelor pentru intensificarea γ-cazeinelor Se prepară o suspensie de 25 mg cazeine izolate (6.1.1) în 0,5 ml soluție tampon de carbonat de amoniu (4.7.1) și se omogenizează timp de 20 minute folosind, de exemplu, tratamentul ultrasonic. Se încălzește la 40 °C ș se adaugă 10 μl plasmină
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
1: Fixarea, spălarea, colorarea și decolorarea se efectuează la 20 °C. A nu se folosi temperaturi ridicate. Observația 2: Dacă se preferă colorarea mai sensibilă cu argint (de exemplu Silver Staining Kit, Protein, Pharmacia Biotech, cod nr. 17-1150-01), probele de cazeină tratate cu plasmină trebuie diluate la 5 mg/ml. 7. Evaluare Evaluarea este efectuată prin compararea benzilor de proteine ale probei necunoscute cu probele de referință efectuate pe același gel. Detectarea laptelui de vacă în brânzeturile din lapte de oaie
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
compară cu raportul dintre suprafața vârfurilor γ3- și γ2-cazeinelor pentru proba de referință 1% (oaie, capră) sau pentru standardul provizoriu de laborator (bivoliță), analizate pe același gel. Observație: Metoda funcționează corespunzător dacă se obține un semnal pozitiv clar pentru ambele cazeine bovine γ3- și γ2- din proba de referință 1%, dar nu și din proba de referință 0%. Dacă nu, procedura trebuie îmbunătățită respectându-se cu exactitate detaliile metodei. O probă este considerată pozitivă dacă ambele cazeine bovine γ3- și γ2-
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
pozitiv clar pentru ambele cazeine bovine γ3- și γ2- din proba de referință 1%, dar nu și din proba de referință 0%. Dacă nu, procedura trebuie îmbunătățită respectându-se cu exactitate detaliile metodei. O probă este considerată pozitivă dacă ambele cazeine bovine γ3- și γ2- sau raportul suprafeței vârfurilor corespunzător sunt mai mari sau egale cu nivelul din proba de referință 1%. 8. Referințe 1. Addeo F., Moio L., Chianese L., Stingo C., Resmini P., Berner I., Krause I., Di Luccia
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
Polyacrylamidgelen. Z. Lebensm. Unters. Forsch. 174, 195-199 (1982). 5. Radola B.J.: Ultrathin-layer isoelectric focusing in 50-100 μm polyacrylamide gels on silanised glass plates or polyester films. Electrophoresis 1, 43-56 (1980). Figura 1: Schița foii de acoperire Figura 2: Strat de cazeină plutind după centrifugare între faza apoasă și faza organică Figura 3: Tehnică de pliere pentru obținerea straturilor foarte fine de geluri poliacrilamide a = bandă adezivă pentru spațiere (0,25 mm); b = foaie de acoperire (5.3); c, e = plăci de
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
bandă adezivă pentru spațiere (0,25 mm); b = foaie de acoperire (5.3); c, e = plăci de sticlă (5.1); d = soluție de gel (4.1.2); f = foaie susținătoare de gel(5.2) Figura 4 a: Focalizare izoelectrică a cazeinelor tratate cu plasmină din brânză din lapte de oaie și de capră care conține diferite cantități de lapte de vacă % CM = procentaj lapte de vacă, C = vacă, E = oaie, G = capră Este ilustrată jumătatea de sus a gelului IEF. Figura
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
din lapte de oaie și de capră care conține diferite cantități de lapte de vacă % CM = procentaj lapte de vacă, C = vacă, E = oaie, G = capră Este ilustrată jumătatea de sus a gelului IEF. Figura 4 b: Focalizare izoelectrică a cazeinelor tratate cu plasmină din brânză din amestec de lapte de oaie, capră și bivoliță care conține diferite cantități de lapte de vacă % CM = procentaj lapte de vacă, 1+ = probă conținând 1 % lapte de vacă și dopat cu cazeină pură de
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
izoelectrică a cazeinelor tratate cu plasmină din brânză din amestec de lapte de oaie, capră și bivoliță care conține diferite cantități de lapte de vacă % CM = procentaj lapte de vacă, 1+ = probă conținând 1 % lapte de vacă și dopat cu cazeină pură de lapte de vacă la mijlocul traiectului gelului. C = vacă, E = oaie, G = capră, B = bivoliță Este ilustrată distanța separatoare totală a gelului IEF. Figura 5: Suprapunerea densitogramelor probelor standard (STD) și a probelor de brânză preparate din amestec de
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
3 și 7 % lapte de vacă. C = vacă, E = oaie, G = capră Jumătatea superioară a gelului IEF a fost scanată la λ = 634 nm. ANEXA XVI (Articolul 11) METODĂ DE REFERINȚĂ PENTRU DETECTAREA BACTERIILOR COLIFORME DIN UNT, LAPTE PRAF DEGRESAT, CAZEINĂ ȘI CAZEINAȚI La analiza untului pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme se inoculează probe de 1 g de unt în mediul de cultură. Pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme în lapte praf degresat sau cazeină/cazeinați, se inoculează probe de 0,1
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
BACTERIILOR COLIFORME DIN UNT, LAPTE PRAF DEGRESAT, CAZEINĂ ȘI CAZEINAȚI La analiza untului pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme se inoculează probe de 1 g de unt în mediul de cultură. Pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme în lapte praf degresat sau cazeină/cazeinați, se inoculează probe de 0,1 g în mediul de cultură. Se folosește standardul FIL 73A: 1985, metoda B cu următoarele modificări: 1) Pregătirea probelor se face conform standardului FIL 122B:1992. Pentru cazeină acidă se poate folosi ca
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]