1,026 matches
-
15 de soluție de antibiotic, în funcție de diametrul găurii. Pentru fiecare probă, se repetă difuzia de cel puțin 4 ori cu exact aceeași concentrație astfel încât fiecare determinare să cuprindă o evaluare de 32 de zone de inhibiție. 7.3 Incubația Se incubează tăvile peste noapte la 35 - 37ș C. 8. Evaluare Se măsoară diametrul zonelor de inhibiție, de preferință prin proiecție. Se înregistrează măsurătorile pe hârtie semi-logaritmică, introducând într-un grafic logaritmul concentrațiilor față de diametrul zonelor de inhibiție. Se trasează liniile soluției
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
microorganismului. Diametrul acestor zone este direct proporțional cu logaritmul concentrației antibioticului. 3. Microorganisme: Sarcina lutea ATCC nr. 9341 3.1 Menținerea sușei parentale Se inoculează cu Sarcina lutea un tub de geloză luat din mediul de cultură (4.1). Se incubează peste noapte la aproximativ 35ș C. Se păstrează cultura în frigider și se re-inoculează geloza cu ea o dată la 14 zile. 3.2 Prepararea suspensiei bacteriene Se colectează bacteriile dintr-un tub de geloză recent preparat (3.1) folosind 2
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
bacteriene Se colectează bacteriile dintr-un tub de geloză recent preparat (3.1) folosind 2 - 3 ml de salină fiziologică (4.3). Cu această suspensie se însămânțează un balon Roux conținând 250 ml de mediu de cultură (4.1). Se incubează 24 de ore la 35ș C, apoi se colectează bacteria în 25 ml de salină fiziologică (4.3). Se omogenizează și se diluează această suspensie pentru a obține aproximativ 75 % transmisie a luminii la 650 nm. Dacă această suspensie este
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
15 de soluție de antibiotic, în funcție de diametrul găurii. Pentru fiecare probă, se repetă difuzia de cel puțin 4 ori cu exact aceeași concentrație astfel încât fiecare determinare să cuprindă o evaluare de 32 de zone de inhibiție. 7.3 Incubația Se incubează tăvile aproximativ 18 ore la 28 - 30ș C. 8 Evaluare Se măsoară diametrul zonelor de inhibiție, de preferință prin proiecție. Se înregistrează măsurătorile pe hârtie semi-logaritmică, introducând în grafic logaritmul concentrației față de diametrul zonelor de inhibiție. Se trasează liniile soluției
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
Incubația la păsări se realizează prin clocire sau prin incubatoare (clocitori) artificiale. Cel mai adesea, reptilele (broaște țestoase, șerpi) își îngroapă ouăle sub pământ, acestea incubându-se prin căldura primită de la soare. În lumea animală există două specii de animale care incubează ouăle în propriile lor corpuri, ornitorincii și echidnele.
Incubație () [Corola-website/Science/297848_a_299177]
-
Substanțele relativ insolubile în apă se testează până la limita de solubilitate, folosind metode adecvate. Pentru substanțele netoxice cu un grad ridicat de solubilitate în apă, limita superioară a concentrației se determină de la caz la caz. Condiții de incubație Cutiile se incubează timp de 4 - 7 zile, la o temperatură de 28 - 30șC, la întuneric. Frecvențele mutațiilor spontane Se folosesc subculturi celulare cu o frecvență a mutațiilor spontane în limitele normale admise. Numărul replicatelor Pentru analiza prototrofilor produși prin mutageneză și a
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
substanțele de testare fie în faza staționară, fie în faza creșterii, pentru perioade de până la 18 ore. În cazul perioador lungi de tratament, culturile trebuie studiate microscopic în vederea decelării formării sporilor, prezența acestora invalidând testul. Condiții de incubație Cutiile se incubează între 4 și 7 zile la o temperatură de 28 - 30șC, la întuneric. Cutiile utilizate pentru determinarea sectoarelor homozigote roșu și roz produse prin încrucișare mitotică se păstrează în frigider la aproximativ 4˚C, timp de una-două zile înaintea numărării
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
de testare cu și fără un sistem adecvat de activare metabolică. Mod de operare Pregătirea culturilor Liniile celulare bine caracterizate se obțin din culturi de sușe (prin tripsinizare sau descuamare) cultivate cu o densitate corespunzătoare în vase de cultură și incubate la 37 C. Culturile pe termen scurt de hepatocite de șobolan se obțin permițând hepatocitelor proaspăt disociate într-un mediu adecvat să se fixeze pe suprafața de creștere. Culturile de limfocite umane sunt produse prin tehnici adecvate. Tratarea culturilor cu
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
a concentrației se stabilește de la caz la caz. Mod de operare Pregătirea culturilor Liniile celulare bine caracterizate se obțin din culturile de rezervă (de exemplu, prin tripsinizare sau prin descuamare), cultivate în vase de cultură cu o densitate corespunzătoare și incubate la 37 C. Pentru culturile unistratificate, numărul de celule pe cultură trebuie ajustat astfel încât în momentul prelevării culturile să nu fie confluente în proporție mai mare de 50%. Ca alternativă, se pot folosi suspensiile de culturi celulare. Culturile de limfocite
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
ajustat astfel încât în momentul prelevării culturile să nu fie confluente în proporție mai mare de 50%. Ca alternativă, se pot folosi suspensiile de culturi celulare. Culturile de limfocite umane se pot obține din sânge heparinizat, prin tehnici adecvate și sunt incubate la 37 C. Tratament Celulele aflate în stadiul de creștere exponențială se tratează cu substanța de testare pe o perioadă de timp corespunzătoare, în majoritatea cazurilor fiind suficiente una sau două ore. Durata tratamentului poate fi extinsă în anumite cazuri
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
se scurg pe tuburile înclinate acoperite cu agar-agar. Culturile se transferă într-un mediu proaspăt cel puțin o dată la 2 luni. Culturile de rezervă se cresc în recipiente conice care conțin mediul corespunzător (volum cca. 100 ml). Când algele sunt incubate la 20șC cu iluminare continuă, este necesar un transfer săptămânal. În timpul transferului o cantitate din cultura "veche" se transferă cu pipete sterile într-un recipient cu mediu proaspăt, astfel încât în cazul speciilor cu creștere rapidă concentrația inițială să fie de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
cultura trebuie transferată într-un mediu nou. Acest lucru trebuie să se facă înainte ca algele din cultură să atingă faza morții. Precultura: Precultura are ca scop obținerea unei cantități de alge adecvată pentru inocularea culturilor de testare. Precultura se incubează în condițiile de testare și se folosește în faza de creștere exponențială, în mod normal după o perioadă de incubare de aproximativ trei zile. Când culturile de alge conțin celule deformate sau anormale, acestea trebuie înlăturate. TOXICITATEA PENTRU RÂME TEST
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
3. Mod de operare 1.6.3.1. Prepararea culturilor Linii celulare stabilite: celulele se obțin pornind de la culturile mamă (de exemplu prin tripsinizare sau detașare selectivă prin agitare viguroasă), însămânțate în recipiente de cultură cu densitate adecvată și se incubează la 37oC. Limfocite umane: se adaugă sânge heparinizat la mediul de cultură, conținând fitohemaglutinină, ser fetal bovin și antibiotice se adaugă sânge integral heparinizat, incubat la 37°C. 1.6.3.2. Tratarea culturilor cu compusul de testare (i) Tratamentul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
detașare selectivă prin agitare viguroasă), însămânțate în recipiente de cultură cu densitate adecvată și se incubează la 37oC. Limfocite umane: se adaugă sânge heparinizat la mediul de cultură, conținând fitohemaglutinină, ser fetal bovin și antibiotice se adaugă sânge integral heparinizat, incubat la 37°C. 1.6.3.2. Tratarea culturilor cu compusul de testare (i) Tratamentul fără amestec hepatic enzimatic activator Toate tratamentele trebuie să acopere timpul unui ciclu celular complet și schemele de fixare trebuie să asigure analiza primelor mitoze
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
suferă reversii spontane, o limpezire a fundalului sau prin gradul de supraviețuire a culturilor tratate. Substanțele netoxice se testează la concentrația de 5 mg /cutie pentru a putea considera testul negativ. 1.6.2.5. Condiții de incubație Cutiile se incubează la 37șC timp de 48 - 72 de ore. 1.6.3. Mod de operare În metoda de încorporare directă pe cutie fără activare enzimatică, se adaugă substanța de testare și 0,1 ml de cultură bacteriană proaspătă la 2 ml
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
enzime hepatice conținând o cantitate adecvată de fracțiune postmitocondrială, după adăugarea substanței de testare și a bacteriilor. Conținutul fiecărui tub se amestecă și se varsă la suprafața unei cutii de agar-agar selectiv. Agar-agarul de acoperire se solidifică, iar cutiile se incubează la 37șC timp de 48 până la 72 de ore. La sfârșitul perioadei de incubație, se numără coloniile derivate prin reversie pe cutie. Pentru metoda de preincubare, se incubează în prealabil un amestec conținând substanța de testare, 0,1 ml de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
cutii de agar-agar selectiv. Agar-agarul de acoperire se solidifică, iar cutiile se incubează la 37șC timp de 48 până la 72 de ore. La sfârșitul perioadei de incubație, se numără coloniile derivate prin reversie pe cutie. Pentru metoda de preincubare, se incubează în prealabil un amestec conținând substanța de testare, 0,1 ml de cultură bacteriană proaspătă și o cantitate adecvată de amestec de activare de enzime hepatice sau aceeași cantitate de soluție tampon, înainte de adăugarea a 2,0 ml de agar-agar
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
al revertanților spontani observați într-o cultură martor netratată și/sau în prezența solventului. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătiri 1.6.1.1. Bacterii Culturile proaspete de bacterii se incubează la 37șC până la faza exponențială tardivă sau faza staționară precoce a creșterii. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie 108 - 109 celule pe mililitru. 1.6.1.2. Activare metabolică Bacteriile se tratează cu substanța de testare atât în prezența cât
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
suferă reversii spontane, o limpezire a fundalului sau prin gradul de supraviețuire a culturilor tratate. Substanțele netoxice se testează la concentrația de 5 mg /cutie pentru a putea considera testul negativ. 1.6.2.5. Condiții de incubație Plăcile se incubează la 37șC între 48 și 72 de ore. 1.6.3. Mod de operare În metoda de încorporare directă pe cutie fără activare enzimatică, se adaugă substanța de testare și 0,1 ml de cultură bacteriană proaspătă la 2 ml
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
enzime hepatice conținând o cantitate adecvată de fracțiune postmitocondrială, după adăugarea substanței de testare și a bacteriilor. Conținutul fiecărui tub se amestecă și se varsă la suprafața unei cutii de agar-agar selectiv. Agar-agarul de acoperire se solidifică, iar cutiile se incubează la 37șC timp de 48 până la 72 de ore. La sfârșitul perioadei de incubație, se numără coloniile derivate prin reversie pe cutie. Pentru metoda de preincubare, se incubează în prealabil un amestec conținând substanța de testare, 0,1 ml de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
cutii de agar-agar selectiv. Agar-agarul de acoperire se solidifică, iar cutiile se incubează la 37șC timp de 48 până la 72 de ore. La sfârșitul perioadei de incubație, se numără coloniile derivate prin reversie pe cutie. Pentru metoda de preincubare, se incubează în prealabil un amestec conținând substanța de testare, 0,1 ml de cultură bacteriană proaspătă și o cantitate adecvată de amestec de activare de enzime hepatice sau aceeași cantitate de soluție tampon, înainte de adăugarea a 2,0 ml de agar-agar
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
mg/l, pentru a demonstra că CE50 este mai mare decât această concentrație. Culturile cu creștere exponențială de alge verzi selecționate sunt expuse acțiunii diverselor concentrații de substanță de testare, pe câteva generații, în condiții definite. Soluțiile de testare se incubează timp de 72 de ore, pe durata cărora densitatea celulară din fiecare soluție se măsoară cel puțin din 24 în 24 de ore. Inhibarea creșterii se determină prin comparație cu o cultură martor. 1.5. CRITERII DE CALITATE Criteriile de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
regularitate, se scurg pe tuburile înclinate acoperite cu agar-agar. Culturile se transferă într-un mediu proaspăt cel puțin o dată la 2 luni. Culturile mamă se cresc în vase conice care conțin mediul corespunzător (volum cca. 100 ml). Când algele sunt incubate la 20șC cu iluminare continuă, este necesar un transfer săptămânal. În timpul transferului o cantitate din cultura "veche" se transferă cu pipete sterile într-un vas cu mediu proaspăt, astfel încât în cazul speciilor cu creștere rapidă concentrația inițială să fie de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
cultura trebuie transferată într-un mediu nou. Acest lucru trebuie să se facă înainte ca algele din cultură să atingă faza morții. Precultura: Precultura are ca scop obținerea unei cantități de alge adecvată pentru inocularea culturilor de testare. Precultura se incubează în condițiile testării și se folosește în timpul creșterii exponențiale, în mod normal după o perioadă de incubare de aproximativ trei zile. Când culturile de alge conțin celule deformate sau anormale, ele sunt înlăturate. Apendicele 2 ISO 8692 - Calitatea Apei - testul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
La testele de respirometrie, compușii care conțin azot pot afecta consumul de oxigen din cauza nitrificării (vezi anexele II și V). 1.4. PRINCIPIUL METODELOR DE TESTARE O soluție sau suspensie a substanței de testare în mediu mineral este inoculată și incubată în condiții aerobe la întuneric sau lumină difuză. Cantitatea de COD datorată inoculului în soluție trebuie să fie menținută la valori cât mai mici posibile în comparație cu cantitatea de COD datorată substanței de testare. Activitatea endogenă a inoculului este cuantificată făcând
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]