KorAP: Find »[drukola/base=incubare & drukola/pos=noun]« with Poliqarp

<1 ...38 39 40 ...44 >

1,083 matches

Corola-publishinghouse/Science/422_a_768

de demascare (DAKO Target Retrieval Solution), la 98 0 C, timp de 20 de minute. Prima etapă a tehnicii de incubarea probelor, la 4 0 C, cu un anticorp primar de iepure, anti-neu uman. Etapa a doua a constat în incubarea cu anticorpul secundar, antiiepure, biotinilat, 10 minute, la temperatura camerei. În a treia etapă secțiunile au fost incubate cu complexul enzimatic streptavidină-peroxidază (LSAB - DAKO), 10 minute, la temperatura camerei. Evidențierea activității enzimatice s-a realizat cu DAB/H 2 O

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
hidratare, secțiunile au fost supuse unei etape pregătitoare, de demascare a situsurilor antigenice, prin tratare cu soluție de demascare (Retrieval Antigen Solution - DAKO), la 98 0 C, timp de 20 de minute. Prima etapă a protocolului de lucru a fost incubarea secțiunilor, la 4 0 C, cu nu anticorp monoclonal murin, anti-p53 uman (clona DO-7 - DAKO), anticorp ce are specificitate pentru un epitop comun, ceea ce face posibilă interacțiunea sa cu forma normală cât și cu cele mutante. În a doua etapă

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
0 C, cu nu anticorp monoclonal murin, anti-p53 uman (clona DO-7 - DAKO), anticorp ce are specificitate pentru un epitop comun, ceea ce face posibilă interacțiunea sa cu forma normală cât și cu cele mutante. În a doua etapă s-a realizat incubarea secțiunilor cu anticorpul secundar, biotinilat, la temperatura camerei, 10 minute. A treia etapă a constat în incubarea cu conjugatul enzimatic streptavidină - peroxidază, la temperatura camerei, 10 minute (metoda LSAB - DAKO). Activitatea enzimatică a fost relevată cu DAB/H 2 O

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
un epitop comun, ceea ce face posibilă interacțiunea sa cu forma normală cât și cu cele mutante. În a doua etapă s-a realizat incubarea secțiunilor cu anticorpul secundar, biotinilat, la temperatura camerei, 10 minute. A treia etapă a constat în incubarea cu conjugatul enzimatic streptavidină - peroxidază, la temperatura camerei, 10 minute (metoda LSAB - DAKO). Activitatea enzimatică a fost relevată cu DAB/H 2 O 2 pentru 10-12 minute, urmată de o etapă de contracolorare cu hematoxilină. Secțiunile colorate conform protocolului de

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
Dextran coated chorcoal assay) sau metoda dozei unice saturate Studiile DCC se bazează pe capacitatea cărbunelui activ de absorbție selectivă a hormonului liber, dar nu și a complexului hormon-receptor [270]. Din punct de vedere principial, un studiu DCC constă în incubarea probelor de citosol cu hormoni marcați radioactiv 3H-E, respectiv 3H-P. În paralel, sunt incubate, în același mod, probe de control pentru specificitate, care conțin, în plus, competitori hormonali (dietilstilbestrol, respectiv progesteronă sintetică), în exces. Incubarea este terminată prin adăugarea soluției

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
un studiu DCC constă în incubarea probelor de citosol cu hormoni marcați radioactiv 3H-E, respectiv 3H-P. În paralel, sunt incubate, în același mod, probe de control pentru specificitate, care conțin, în plus, competitori hormonali (dietilstilbestrol, respectiv progesteronă sintetică), în exces. Incubarea este terminată prin adăugarea soluției DCC. Cărbunele pe care este absorbit hormonul este sedimentat prin centrifugare. Radioactivitatea radiometric cu un spectrometru de radiații ( counter). Pentru o precizie cât mai ridicată a determinărilor, pentru fiecare persoană investigată, respectiv pentru fiecare probă

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
mai rapidă, ea tinde să capete o utilizare tot mai frecventă, mai ales în studii curente. Analiza SCATCHARD (metoda dozelor multiple de legare a ligandului) Metoda („analiza”) Scatchard de determinare a concentrației și ale caracteristicilor situsurilor de legare constă în incubarea probelor de citosol cu diferite concentrații de estradiol ce variază între două limite: a x 10-10 și respectiv, b x 10-8 M. Durata incubării și modul de prelucrare al probelor sunt identice cu cele utilizate pentru DCC; pentru fiecare concentrație

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
ligandului) Metoda („analiza”) Scatchard de determinare a concentrației și ale caracteristicilor situsurilor de legare constă în incubarea probelor de citosol cu diferite concentrații de estradiol ce variază între două limite: a x 10-10 și respectiv, b x 10-8 M. Durata incubării și modul de prelucrare al probelor sunt identice cu cele utilizate pentru DCC; pentru fiecare concentrație de E2 marcat se realizează triplicate, atât în cazul legării totale, B T , cât și în cazul legării nespecifice BN. Legarea specifică, B S

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
cele două loturi de paciente studiate. Analiza expresiei ER și PR s-a efectuat prin metoda imunohistochimică. Studiul a fost realizat pe secțiuni obținute din formațiunea tumorală inclusă la parafină. Din punct de vedere tehnic, se descriu trei timpi principali: incubarea cu anticorpi primari, incubarea cu anticorp secundar, tratarea secțiunilor cu kit-ul de vizualizare. Secțiunile au fost deparafinate, rehidratate și tratate termic (98 0 C) în soluție Retrieval (DAKO Retrieval Target Solution), timp de 20 de minute, pentru demascarea situsurilor

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
paciente studiate. Analiza expresiei ER și PR s-a efectuat prin metoda imunohistochimică. Studiul a fost realizat pe secțiuni obținute din formațiunea tumorală inclusă la parafină. Din punct de vedere tehnic, se descriu trei timpi principali: incubarea cu anticorpi primari, incubarea cu anticorp secundar, tratarea secțiunilor cu kit-ul de vizualizare. Secțiunile au fost deparafinate, rehidratate și tratate termic (98 0 C) în soluție Retrieval (DAKO Retrieval Target Solution), timp de 20 de minute, pentru demascarea situsurilor antigenice. Incubarea secțiunilor cu

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
anticorpi primari, incubarea cu anticorp secundar, tratarea secțiunilor cu kit-ul de vizualizare. Secțiunile au fost deparafinate, rehidratate și tratate termic (98 0 C) în soluție Retrieval (DAKO Retrieval Target Solution), timp de 20 de minute, pentru demascarea situsurilor antigenice. Incubarea secțiunilor cu anticorpii primari s-a efectuat la 4 0 C. Au fost folosiți 2 anticorpi monoclonali: un anticorp monoclonal murin, cu specificitate pentru receptorul estrogenic uman (clona 1 D5 - DAKO) și un anticorp monoclonal murin cu specificitate pentru receptorul

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
C. Au fost folosiți 2 anticorpi monoclonali: un anticorp monoclonal murin, cu specificitate pentru receptorul estrogenic uman (clona 1 D5 - DAKO) și un anticorp monoclonal murin cu specificitate pentru receptorul progesteronic uman (clona PgR 636 - DAKO). A doua etapă de incubare, cu anticorp secundar, s a efectuat la temperatura camerei, timp de 10 minute, utilizând un anticorp secundar biotinilat, cu specificitate pentru anticorpii murini primari. Etapa a treia a constat în tratarea secțiunilor cu streptavidină-peroxidază (kit-ul de vizualizare LSAB - DAKO

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
alte paciente, preoperator s-au aplicat chimiosau radioterapia. Analiza expresiei pS2 s-a efectuat prin metoda imuno-histochimică. Studiul a fost realizat pe secțiuni obținute din formațiunea tumorală inclusă la parafină. Din punct de vedere tehnic, se descriu trei timpi principali: incubarea cu anticorpi primari, incubarea cu anticorp secundar, tratarea secțiunilor cu kit ul de vizualizare. Secțiunile au fost deparafinate, rehidratate și tratate termic (98 0 C) în soluție Retrieval (DAKO Retrieval Target Solution), timp de 20 de minute, pentru demascarea situsurilor

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
au aplicat chimiosau radioterapia. Analiza expresiei pS2 s-a efectuat prin metoda imuno-histochimică. Studiul a fost realizat pe secțiuni obținute din formațiunea tumorală inclusă la parafină. Din punct de vedere tehnic, se descriu trei timpi principali: incubarea cu anticorpi primari, incubarea cu anticorp secundar, tratarea secțiunilor cu kit ul de vizualizare. Secțiunile au fost deparafinate, rehidratate și tratate termic (98 0 C) în soluție Retrieval (DAKO Retrieval Target Solution), timp de 20 de minute, pentru demascarea situsurilor antigenice. Incubarea secțiunilor cu

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
anticorpi primari, incubarea cu anticorp secundar, tratarea secțiunilor cu kit ul de vizualizare. Secțiunile au fost deparafinate, rehidratate și tratate termic (98 0 C) în soluție Retrieval (DAKO Retrieval Target Solution), timp de 20 de minute, pentru demascarea situsurilor antigenice. Incubarea secțiunilor cu anticorpul primari s-a efectuat la 4 0 C. A doua etapă de incubare, cu anticorp secundar, s-a efectuat la temperatura camerei, timp de 10 minute, utilizând un anticorp secundar biotinilat, cu specificitate pentru anticorpul primar. Etapa

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
deparafinate, rehidratate și tratate termic (98 0 C) în soluție Retrieval (DAKO Retrieval Target Solution), timp de 20 de minute, pentru demascarea situsurilor antigenice. Incubarea secțiunilor cu anticorpul primari s-a efectuat la 4 0 C. A doua etapă de incubare, cu anticorp secundar, s-a efectuat la temperatura camerei, timp de 10 minute, utilizând un anticorp secundar biotinilat, cu specificitate pentru anticorpul primar. Etapa a treia a constat în tratarea secțiunilor cu streptavidină-peroxidază (kit-ul de vizualizare LSAB - DAKO). Activitatea

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
determinat concentrațiile proteice prin metoda spectrofotometrică a diferenței de absorbanța între 280 și 310 nm, descrisă în paragraful 6. 5. Pentru fiecare probă de citosol s-au realizat duplicate, concentrația fiind calculată ca medie a celor două determinări. A urmat incubarea citosolului cu hormon marcat pentru determinarea legării "totale" BT , cu hormon marcat și competitor neradioactiv (DES = dietilstilbestrol; ORG = progesteron sintetică: 16-etil-hidroxi-19-nor-(6,8 3H)pregn-4-en-2,3-dionă); HCO = hidrocortizon), pentru calculul legării „nespecifice" B N volumele luate în lucru pentru fiecare

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
parte sunt prezentate în tabelele 4. Volumul final a fost de 200 l, iar concentrația de proteină a fost de 3 mg/ml. . Pentru reducerea erorilor, pentru fiecare caz în parte s-au realizat triplicate, rezultatele finale fiind media determinărilor. Incubarea s-a făcut peste noapte, în frigider, la o temperatură de aproximativ 4C. În paralel, în prima zi, s-au determinat "fondurile", respectiv radioactivitatea fiolelor în care se fac determinările de proteină; "fondul" a fost ulterior scăzut din valorile radioactivităților

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
temperatură de aproximativ 4C. În paralel, în prima zi, s-au determinat "fondurile", respectiv radioactivitatea fiolelor în care se fac determinările de proteină; "fondul" a fost ulterior scăzut din valorile radioactivităților "totalelor" sau "nespecificelor". A doua zi s-a continuat incubarea, timp de 2 ore, la temperatura camerei (25C). S-au adăugat apoi 250 mg de cărbune activ cu excepția "totalelor". Probele au fost omogenizate puternic, la un agitator de tip "vortex", după care s-a sedimentat cărbunele prin centrifugarea timp de

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
utilizat probe provenind din tumori mamare umane și din uter de șobolan-femelă (Rattus norveticus) imature. Un experiment care durează două zile cuprinde mai multe etape: 1. Extracția citosolului; 2. Determinarea concentrației proteice a citosolului; 3. Formarea complexelor proteice - [3H]estrogen (incubare peste noapte la 4 C, urmată de stopare cu cărbune DCC); 4. Pregătirea gelului de poliacrilamidă; 5. Separarea electroforetică (condiții: 20mA/100V); probe evidențiate cu albastru de bromfenol 0,02% (2 mg/ml apă bidistilată); 6. Porționarea gelului și măsurarea

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
eprubetele; se adaugă câte 200 l de „standard”, „control” și „probe” (diluate) în eprubetele corespunzătoare; se omogenizează ușor conținutul eprubetelor, cu ajutorul unui agitator de tip „Vortex”; se incubează conținutul eprubetelor timp de o oră, sub agitare, la temperatura camerei. după incubare se spală conținutul eprubetelor, de trei ori, cu apă distilată; de fiecare dată se îndepărtează apa de spălare. Îndepărtarea apei trebuie să fie cât mai accentuată, pentru a nu influența citirile. se determină radioactivitatea (exprimată în „cpm” = counts per minute

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483

abundența proteinei P53 și activitatea tumorigenă a virusului SV40. Celulele neinfectate sau celulele infectate cu mutante neoncogene ale virusului nu acumulează cantități mari ale proteinei P53. În celulele transformate cu o mutantă de SV40 care codifică o antigenă T termosensibilă, incubarea celulelor la temperatură nepermisivă determină reversia celulelor tumorigene la forma normală, concomitent cu pierderea proteinei P53. Astfel, s-a dedus că gena p53 codifică o proteină a cărei funcție de supresie tumorală este anulată de proteinele timpurii ale acestor oncodnavirusuri, fiind

Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean (2009) [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
neoplazici, aceasta realizându-se până acum, în special la cei aflați în stadii avansate sau la cei rezistenți la terapia tradițională. Cercetările lui S.A. Rosenberg (1985-1996) au fost deschizătoare de drum în terapia genică. Testele clinice timpurii au demonstrat că incubarea ex vivo a limfocitelor pacientului neoplazic cu IL-2, activează o populație de limfocite care poate distruge celulele tumorale rezistente la celulele natural killer (NK), dar nu și celulele normale (Mule și colab., 1984). Asemenea celule au fost denumite celule LAK

Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean (2009) [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
anti(M6)hTR. Pentru aceasta au fost inoculate 5 × 103 celule din fiecare linie într-un vas, la 37°C, peste noapte adăugându-se apoi 2-5A-anti-hTR (50µM) cu lipofectamină (0,4 µl) în 10 µl apă distilată sterilă. După o incubare de două min., s-a adăugat 90 µl de mediu proaspăt. Concentrația finală de 2-5A antisens ARN telomerazic a fost de 0,5 µM. Tratamentul cu 2-5A ARN antisens telomerazic a fost aplicat la fiecare 24 h timp de patru

Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean (2009) [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
Corola-publishinghouse/Science/91566_a_92850

în altul. Substratul uzat va fi transportat la o distanță destul de mare de spațiul de cultură (cel puțin câțiva kilometric), iar platform să fie acoperită. - împiedicarea pătrunderii dăunătorilor în spațiile de cultură are o importanță deosebită pe durata însămânțării și incubării miceliului în substratul nutritive. Etanșeizarea perfectă a spațiilor (uși, ferestre), este absolute necesară. - incubarea rapidă a miceliiiliii Asigurarea condițiilor optime de microclimate la incubare duce la colonizarea rapidă a substratului nutrivit de către micelul ciupercilor Pleurotus, reducând astfel timpul de expunere

PRINCIPALII DĂUNĂTORI AI LEGUMELOR DIN CÂMP ȘI SPAŢII PROTEJATE by TEODOR GEORGESCU (2009) [Corola-publishinghouse/Science/91566_a_92850]