686 matches
-
organici eluate ultimele, proporțional cu coeficientul lor de partiție hidrocarbură/apă. Aceasta face posibilă să fie stabilită relația dintre timpul de retenție pe o astfel de coloană (faza inversă) și coeficientul de partiție n-octanol /apă ce trebuie determinat. Coeficientul de partiție este dedus din factorul de capacitate k, dat de: în care tR = timpul de retenție al substanței testate și to = timpul mediu necesar unei molecule de solvent pentru a trece prin coloană (timp mort). Nu sunt necesare metode analitice cantitative
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de solvent pentru a trece prin coloană (timp mort). Nu sunt necesare metode analitice cantitative, ci doar determinarea timpilor de eluție. 1.5. CRITERII DE CALITATE 1.5.1. Repetabilitatea Metoda agitării flaconului Pentru a asigura acuratețea măsurătorii coeficientului de partiție trebuie realizate determinări duble în trei condiții de testare diferite, prin care cantitatea de substanță utilizată, precum și raportul dintre volumelor de solvent poate fi variat. Valorile determinate ale coeficientului de partiție exprimate logaritmic vor fi în intervalul ± 0,3 unități
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
agitării flaconului Pentru a asigura acuratețea măsurătorii coeficientului de partiție trebuie realizate determinări duble în trei condiții de testare diferite, prin care cantitatea de substanță utilizată, precum și raportul dintre volumelor de solvent poate fi variat. Valorile determinate ale coeficientului de partiție exprimate logaritmic vor fi în intervalul ± 0,3 unități logaritmice. Metoda HPLC Pentru a crește coeficientul de încredere al măsurătorilor, trebuie să fie făcute determinări duble. Valorile pentru log P derivate din măsurătorile individuale vor fi în intervalul ± 0,1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
când condițiile impun acest lucru, acest interval poate fi extins pentru log Pow până la 5) când concentrația solutului în oricare fază nu este mai mare de 0,01 mol pe litru. Metoda HPLC Metoda HPLC face posibilă estimarea coeficienților de partiție în intervalul 0 până la 6 pentru log Pow. În mod normal, coeficientul de partiție al unui compus poate fi estimat cu o eroare de ±1 unitate logaritmică față de valoarea determinată prin metoda agitării flaconului. Corelații tipice pot se găsesc în
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
5) când concentrația solutului în oricare fază nu este mai mare de 0,01 mol pe litru. Metoda HPLC Metoda HPLC face posibilă estimarea coeficienților de partiție în intervalul 0 până la 6 pentru log Pow. În mod normal, coeficientul de partiție al unui compus poate fi estimat cu o eroare de ±1 unitate logaritmică față de valoarea determinată prin metoda agitării flaconului. Corelații tipice pot se găsesc în literatura de specialitate (4) (5) (6) (7) (8). O mai mare acuratețe poate fi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
în literatura de specialitate (4) (5) (6) (7) (8). O mai mare acuratețe poate fi obținută în mod normal când graficele de corelare se bazează pe compuși de referință înrudiți structural (9). 1.5.3. Specificitate Metoda agitării flaconului Legea partiției a lui Nernst se aplică numai la temperatură, presiune și pH constante pentru soluții diluate. Ea se aplică strict unei substanțe pure dispersată între doi solvenți puri. Dacă sunt prezenți diferiți soluți în una sau în ambele faze în același
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Ea se aplică strict unei substanțe pure dispersată între doi solvenți puri. Dacă sunt prezenți diferiți soluți în una sau în ambele faze în același timp, aceasta poate afecta rezultatele. Disocierea sau asocierea moleculelor dizolvate duce la deviații de la legea partiției a lui Nernst. Astfel de deviații sunt indicate de funcția care descrie dependența coeficientului de partiție de concentrația soluției. Întrucât presupune echilibre multiple, această metodă nu se folosește în cazul compușilor ionizabili fără a aplica o corecție. Pentru astfel de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
soluți în una sau în ambele faze în același timp, aceasta poate afecta rezultatele. Disocierea sau asocierea moleculelor dizolvate duce la deviații de la legea partiției a lui Nernst. Astfel de deviații sunt indicate de funcția care descrie dependența coeficientului de partiție de concentrația soluției. Întrucât presupune echilibre multiple, această metodă nu se folosește în cazul compușilor ionizabili fără a aplica o corecție. Pentru astfel de compuși se ia în considerare folosirea soluțiilor tampon în locul apei; pH-ul soluției tampon trebuie să
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
în locul apei; pH-ul soluției tampon trebuie să difere cu cel puțin 1 unitate de pKa-ul substanței ținând seama și de semnificația acestui pH pentru mediul înconjurător. 1.6. DESCRIEREA METODEI 1.6.1. Estimarea preliminară a coeficientului de partiție Coeficientul de partiție este estimat de preferință prin calcul (a se vedea anexa 1), sau acolo unde este posibil, din raportul solubilităților substanței testate în solvenți puri (10). 1.6.2. Metoda agitării flaconului 1.6.2.1. Pregătire n-Octanol
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
-ul soluției tampon trebuie să difere cu cel puțin 1 unitate de pKa-ul substanței ținând seama și de semnificația acestui pH pentru mediul înconjurător. 1.6. DESCRIEREA METODEI 1.6.1. Estimarea preliminară a coeficientului de partiție Coeficientul de partiție este estimat de preferință prin calcul (a se vedea anexa 1), sau acolo unde este posibil, din raportul solubilităților substanței testate în solvenți puri (10). 1.6.2. Metoda agitării flaconului 1.6.2.1. Pregătire n-Octanol: Determinarea coeficientului de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
este estimat de preferință prin calcul (a se vedea anexa 1), sau acolo unde este posibil, din raportul solubilităților substanței testate în solvenți puri (10). 1.6.2. Metoda agitării flaconului 1.6.2.1. Pregătire n-Octanol: Determinarea coeficientului de partiție va fi efectuată cu reactivi de puritate analitică (p.a.). Apă: se folosește apă distilată sau dublu distilată în aparate din sticlă sau cuarț. Dacă este cazul, pentru compușii ionizabili vor fi folosite în locul apei soluții tampon. Notă: Nu se folosește
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
sau cuarț. Dacă este cazul, pentru compușii ionizabili vor fi folosite în locul apei soluții tampon. Notă: Nu se folosește apa luată direct dintr-un aparat cu schimbători de ioni. 1.6.2.1.1. Presaturarea solvenților Înaintea determinării coeficientului de partiție, fazele sistemului de solvent sunt saturate reciproc prin agitare la temperatura de testare. În acest scop, de obicei se agită două sticle mari cu n-octanol de puritate analitică sau apă, fiecare cu o cantitate suficientă din celălalt solvent, timp de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
sistemului bifazic trebuie să umple aproape total vasul de test. Aceasta va ajuta la prevenirea pierderilor de material datorită volatilizării. Raportul volumelor și cantitățile de substanță ce vor fi folosite sunt fixate prin următoarele condiții: - evaluarea preliminară a coeficientului de partiție (a se vedea mai sus), - cantitatea minimă din substanța de testare necesară la determinările analitice și - limita concentrației maxime în fiecare fază este de 0,01 mol pe litru. Sunt efectuate 3 măsurători. În prima este folosit raportul de volume
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
exemplu 1:1, 1:2, 2:1). 1.6.2.1.3. Substanța de testare O soluție etalon este preparată în n-octanol presaturat cu apă. Concentrația acestei soluții va fi determinată cu precizie înaintea folosirii ei pentru stabili coeficientului de partiție. Această soluție va fi depozitată în condiții care să-i asigure stabilitatea. 1.6.2.2. Condiții experimentale Temperatura de testare se menține constantă (±1oC) și se află în intervalul 20 - 25oC. 1.6.2.3. Procedeul de măsurare 1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
care să-i asigure stabilitatea. 1.6.2.2. Condiții experimentale Temperatura de testare se menține constantă (±1oC) și se află în intervalul 20 - 25oC. 1.6.2.3. Procedeul de măsurare 1.6.2.3.1. Stabilirea echilibrului de partiție Pentru fiecare dintre condițiile de testare se pregătesc două vase de test conținând cantitățile necesare, precis măsurate din cei doi solvenți, împreună cu cantitatea necesară din soluția etalon. Fazele cu n-octanol vor fi măsurate volumetric. Vasele de test sunt amplasate într-
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
se rotească acest tub repede într-o direcție aflată la 180o față de axa sa transversală, astfel încât aerul captat să se ridice prin cele două faze. Experiența a arătat că 50 de astfel de rotații sunt de regulă suficiente pentru stabilirea partiției de echilibru. Pentru siguranță se recomandă 100 de rotații în 5 minute. 1.6.2.3.2. Separarea fazelor Dacă este necesar, se efectuează centrifugarea amestecului pentru a separa fazele. Acest lucru se desfășoară într-o centrifugă de laborator menținută
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
o centrifugă de laborator menținută la temperatura camerei, sau, dacă este folosită o centrifugă netermostatată, tuburile centrifugei se păstrează pentru echilibrare la temperatura de test cel puțin o oră înainte de analiză. 1.6.2.4. Analiza Pentru determinarea coeficientului de partiție este necesară determinarea concentrațiilor de substanță analizată în ambele faze. Aceasta poate fi făcută prin prelevarea unei probe alicote din fiecare din cele două faze din fiecare tub pentru fiecare condiție de testare și analizarea lor prin metoda aleasă. Cantitatea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Substanțele cu solubilitate foarte scăzută în n-octanol tind să dea în mod valori neobișnuit de mici pentru log Pow prin metoda HPLC; picurile unor astfel de compuși însoțesc uneori frontul de solvent. Aceasta se datorează probabil faptului că procesul de partiție este prea lent pentru a atinge echilibrul în timpul necesar în mod normal pentru o separare. Scăderea debitului și/sau micșorarea raportului metanol/apă poate fi o măsură eficientă pentru a ajunge la o valoare fiabilă. Compușii de testare și compușii
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
testare Proba este injectată într-o cantitate cât mai mică posibil de fază mobilă. Se determină timpul de retenție (în duplicat), permițând calcularea factorului de capacitate k. Din graficul de corelare al compușilor de referință poate fi interpolat coeficientul de partiție al substanței testate. Pentru coeficienții de partiție foarte mici și pentru cei foarte mari, este necesară extrapolarea. În aceste cazuri particulare trebuie să se acorde atenție limitelor de încredere ale liniei de regresie. 2. DATE Metoda agitării flaconului Fiabilitatea valorilor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
cât mai mică posibil de fază mobilă. Se determină timpul de retenție (în duplicat), permițând calcularea factorului de capacitate k. Din graficul de corelare al compușilor de referință poate fi interpolat coeficientul de partiție al substanței testate. Pentru coeficienții de partiție foarte mici și pentru cei foarte mari, este necesară extrapolarea. În aceste cazuri particulare trebuie să se acorde atenție limitelor de încredere ale liniei de regresie. 2. DATE Metoda agitării flaconului Fiabilitatea valorilor determinate pentru P poate fi testată prin
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
înseamnă că se prezintă un total de 12 concentrații), - masa substanței de testare, volumul fiecărei faze folosite în fiecare vas de test și cantitatea totală calculată de substanță, prezentă în fiecare fază după atingerea echilibrului, - valorile calculate ale coeficientului de partiție (P) și media lor se consemnează pentru fiecare set de condiții experimentale, ca și media pentru toate determinările. Dacă există vreun indiciu privind coeficientul de partiție ca funcție de concentrație, aceasta este notată în protocol, - se consemnează deviația standard a valorilor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de substanță, prezentă în fiecare fază după atingerea echilibrului, - valorile calculate ale coeficientului de partiție (P) și media lor se consemnează pentru fiecare set de condiții experimentale, ca și media pentru toate determinările. Dacă există vreun indiciu privind coeficientul de partiție ca funcție de concentrație, aceasta este notată în protocol, - se consemnează deviația standard a valorilor individuale ale lui P de la media lor, - media P a tuturor determinărilor se exprimă și ca logaritm (în baza 10), - valoarea calculată teoretic pentru Pow când
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
n-octanol/apă pentru metoda agitării flaconului), - ca verificare internă de laborator a posibilelor erori experimentale, - pentru a furniza un Pow estimat în cazul când metodele experimentale nu pot fi aplicate din motive tehnice. METODA ESTIMATIVĂ Estimarea preliminară a coeficientului de partiție Valoarea coeficientului de partiție poate fi estimată prin folosirea solubilităților substanței de testare în solvenți puri. Astfel, METODE DE CALCUL Principiul metodelor de calcul Toate metodele de calcul se bazează pe fragmentarea formală a moleculei în structuri adecvate pentru care
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
agitării flaconului), - ca verificare internă de laborator a posibilelor erori experimentale, - pentru a furniza un Pow estimat în cazul când metodele experimentale nu pot fi aplicate din motive tehnice. METODA ESTIMATIVĂ Estimarea preliminară a coeficientului de partiție Valoarea coeficientului de partiție poate fi estimată prin folosirea solubilităților substanței de testare în solvenți puri. Astfel, METODE DE CALCUL Principiul metodelor de calcul Toate metodele de calcul se bazează pe fragmentarea formală a moleculei în structuri adecvate pentru care se cunosc incrementuri fiabile
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
a gradului de ionizare. Metode de calcul Metoda π a lui Hansch Constanta substituentului hidrofob original, π, introdusă de Fujita et al. (f) se definește ca: π x = log POW (PhX) - log POW (PhH) unde Pow (PhX) este coeficientul de partiție al unui derivat aromatic și Pow (PhH) este coeficientul de partiție al compusului inițial. (de exemplu π Cl = log POW (C6 H5 Cl) - log POW (C6 H6) = 2,84 - 2,13 = 0,71) În concordanță cu definiția, metoda - π este
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]