166 matches
-
partea B (punctul A). 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B (punctul B). 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei Sistemul de reversie cu histidină (his) al Salmonella typhimurium este un test microbian care permite măsurarea reversiei his - his.* indusă de substanțe chimice responsabile pentru substituția de bază sau a mutațiilor care deplasează cadrul de citire la nivelul genomului organismului. Se expun bacteriile la substanța de testare cu sau fără activare metabolică și se varsă la suprafața
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
care deplasează cadrul de citire la nivelul genomului organismului. Se expun bacteriile la substanța de testare cu sau fără activare metabolică și se varsă la suprafața unui mediu minim. După o perioadă de incubație adecvată, se numără coloniile derivate prin reversie și se compară numărul obținut cu cel al revertanților spontani observați într-o cultură martor netratată și/sau în prezența solventului. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei 1.6.1. Pregătire 1.6.1.1. Bacterii
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
în paralel martori netratați și martori în prezența solvenților. Se folosesc și martori pozitivi în cele două scopuri enunțate în continuare: (i) confirmarea sensibilității liniilor bacteriene Compușii menționați în continuare pot fi folosiți pentru testele fără activare metabolică: Cu Specii reversie TA 1535, TA 100 Azid de sodiu TA 1538, TA 98 2-nitrofluoren TA 1537 9-aminoacridină (ii) garantarea activității sistemului metabolizant adecvat. 2-aminoantracenul constituie un martor pozitiv al activității sistemului metabolizant pentru toate speciile. Dacă este posibil, se recomandă folosirea unui
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
amestecă și se varsă la suprafața unei cutii de agar-agar selectiv. Agar-agarul de acoperire se solidifică, iar cutiile se incubează la 37 șC timp de 48 până la 72 de ore. La sfârșitul perioadei de incubație, se numără coloniile derivate prin reversie pe cutie. Pentru metoda de preincubare, se incubează în prealabil un amestec conținând substanța de testare, 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă și o cantitate adecvată de amestec de activare de enzime hepatice sau aceeași cantitate de soluție tampon
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
de acoperire. Restul modului de operare este identic cu cel folosit pentru metoda de incorporare directă pe cutie. Toate cutiile pentru cele două metode se pregătesc cel puțin în trei exemplare. 2. DATE Se indică numărul de colonii derivate prin reversie pentru seriile martor și seriile tratate. Se indică pentru substanța testată și pentru martori evidența pe cutie, numărul mediu de colonii derivate prin reversie pe cutie și diferențele tip. Toate rezultatele se confirmă pe parcursul unei experiențe independente. Datele se evaluează
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
se pregătesc cel puțin în trei exemplare. 2. DATE Se indică numărul de colonii derivate prin reversie pentru seriile martor și seriile tratate. Se indică pentru substanța testată și pentru martori evidența pe cutie, numărul mediu de colonii derivate prin reversie pe cutie și diferențele tip. Toate rezultatele se confirmă pe parcursul unei experiențe independente. Datele se evaluează prin metode statistice adecvate. 3. REZULTATE 3.1. PROTOCOL DE TEST Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - bacteriile, linia folosită; - condițiile
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - bacteriile, linia folosită; - condițiile experimentale: dozele, toxicitatea, compoziția mediului, metodele de tratare (preincubare, incubare), amestecul de activare de enzime hepatice, substanțele de referință, martorii negativi; - numărul pe cutie, numărul mediu de colonii derivate prin reversie pe cutie, diferența tip, relația doză / efect, dacă este posibil; - discutarea rezultatelor; - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B (punctul C). 4. REFERINȚE Vezi introducerea generală: partea B (punctul D). PARTEA C: METODE DE DETERMINARE
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
ar reduce suficient virulența (teste de patogenicitate, analiză genetică, sonde genetice, detectarea bacteriofagelor și a plasmidelor, cartografia enzimelor de restricție, secvențiere, probe proteice) și a cărei siguranțe să fie suficient atestată. Ar trebui să se ia în considerare riscul de reversie a unei eliminări sau a unei mutații de genă printr-un nou transfer de genă. În cazul în care un studiu bibliografic și taxonomic nu furnizează informațiile dorite, ar trebui să se efectueze teste de patogenicitate adecvate asupra microorganismului în
32005D0174-ro () [Corola-website/Law/293615_a_294944]
-
doza terapeutică maximă ) . Cele mai frecvente evenimente adverse observate au fost xerostomia , constipația , cefaleea , dispepsia și uscăciunea mucoasei nazale . Cu toate acestea , supradozajul cu darifenacin poate conduce , potențial , la efecte anticolinergice severe și trebuie tratat corespunzător . Tratamentul trebuie să vizeze reversia simptomelor anticolinergice , sub supraveghere medicală atentă . Utilizarea unor medicamente precum fizostigmina pot susține reversia acestor simptome . 6 5 . 5. 1 Proprietăți farmacodinamice In vitro , darifenacinul este un antagonist selectiv al receptorului muscarinic M3 ( M3 SRA ) . Receptorul M3 este subtipul principal
Ro_297 () [Corola-website/Science/291056_a_292385]
-
dispepsia și uscăciunea mucoasei nazale . Cu toate acestea , supradozajul cu darifenacin poate conduce , potențial , la efecte anticolinergice severe și trebuie tratat corespunzător . Tratamentul trebuie să vizeze reversia simptomelor anticolinergice , sub supraveghere medicală atentă . Utilizarea unor medicamente precum fizostigmina pot susține reversia acestor simptome . 6 5 . 5. 1 Proprietăți farmacodinamice In vitro , darifenacinul este un antagonist selectiv al receptorului muscarinic M3 ( M3 SRA ) . Receptorul M3 este subtipul principal care controlează contracția musculaturii vezicii urinare . Nu se cunoaște dacă această selectivitate pentru receptorul
Ro_297 () [Corola-website/Science/291056_a_292385]
-
doza terapeutică maximă ) . Cele mai frecvente evenimente adverse observate au fost xerostomia , constipația , cefaleea , dispepsia și uscăciunea mucoasei nazale . Cu toate acestea , supradozajul cu darifenacin poate conduce , potențial , la efecte anticolinergice severe și trebuie tratat corespunzător . Tratamentul trebuie să vizeze reversia simptomelor anticolinergice , sub supraveghere medicală atentă . Utilizarea unor medicamente precum fizostigmina pot susține reversia acestor simptome . 16 5 . 5. 1 Proprietăți farmacodinamice In vitro , darifenacinul este un antagonist selectiv al receptorului muscarinic M3 ( M3 SRA ) . Receptorul M3 este subtipul principal
Ro_297 () [Corola-website/Science/291056_a_292385]
-
dispepsia și uscăciunea mucoasei nazale . Cu toate acestea , supradozajul cu darifenacin poate conduce , potențial , la efecte anticolinergice severe și trebuie tratat corespunzător . Tratamentul trebuie să vizeze reversia simptomelor anticolinergice , sub supraveghere medicală atentă . Utilizarea unor medicamente precum fizostigmina pot susține reversia acestor simptome . 16 5 . 5. 1 Proprietăți farmacodinamice In vitro , darifenacinul este un antagonist selectiv al receptorului muscarinic M3 ( M3 SRA ) . Receptorul M3 este subtipul principal care controlează contracția musculaturii vezicii urinare . Nu se cunoaște dacă această selectivitate pentru receptorul
Ro_297 () [Corola-website/Science/291056_a_292385]
-
anexă: "ANEXĂ Exemple de elemente care pot fi inegale, în ceea ce privește regimurile prestații definite, finanțate prin capitalizare, prevăzute în art. 6 lit. (h): - conversia într-o sumă capitală a unei părți din pensia periodică, - transferul drepturilor de pensie, - o pensie de reversie plătibilă unei persoane aflate în întreținere în schimbul cedării unei părți din pensia anuală, - o pensie redusă atunci când lucrătorul optează să se pensioneze anticipat." Articolul 2 1. Orice măsură de aplicare a prezentei directive, cu privire la lucrătorii remunerați, trebuie să cuprindă toate
jrc3049as1996 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88205_a_88992]
-
specii și mediul receptor, inclusiv potențialii receptori. - Instabilitate fenotipică și genetică Se ia în considerare măsura în care instabilitatea genetică poate să ducă la instabilitate fenotipică și să cauzeze un pericol. Instabilitatea modificării genetice poate sp determine în anumite cazuri reversia fenotipului sălbatic. Se au în vedere și alte cazuri, cum ar fi: - dacă o linie de plante transgenice conține mai mult de o transgenă, procesul ulterior de segregare duce la divizarea transgenelor din descendență, rezultând plante cu mai puține transgene
jrc5537as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90707_a_91494]
-
sușă care necesită un aminoacid (histidină sau respectiv triptofan) pentru a produce o sușă independentă de aportul exterior de aminoacid. Mutageni care provoacă substituția perechilor de bază sunt agenți care provoacă substituirea unei baze din ADN. Într-un test de reversie, acest tip de modificare poate să se producă la locul mutației inițiale sau într-un al doilea loc în genomul bacterian. Mutageni de decalare a cadrului de citire sunt agenți care produc adăugarea sau deleția uneia sau a mai multor
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
1535; TA 1537 sau TA97a sau TA97; TA98 și TA100) pentru care comparațiile între laboratoare au indicat că sunt fiabile și dau răspunsuri reproductibile. Cele patru sușe de S. typhimurium menționate posedă perechi de bază GC în primul situs de reversie și se cunoaște că acestea nu pot să detecteze anumiți agenți mutageni oxidanți, agenți de reticulare și unele hidrazine. Detectarea acestor substanțe este posibilă cu ajutorul sușelor de E. coli WP2 sau de S. typhimurium TA102 (19) care posedă o pereche
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
să detecteze anumiți agenți mutageni oxidanți, agenți de reticulare și unele hidrazine. Detectarea acestor substanțe este posibilă cu ajutorul sușelor de E. coli WP2 sau de S. typhimurium TA102 (19) care posedă o pereche de bază AT în situsul primar de reversie. Combinația de sușe recomandată este, prin urmare, următoarea: − S. typhimurium TA1535 și − S. typhimurium TA1537 sau TA97 sau TA97a și − S. typhimurium TA98 și − S. typhimurium TA100 și − E. coli WP2 uvrA sau E. coli WP2 uvrA (pKM101) sau S.
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
în S. typhimurium prin sensibilizare la cristal violet și mutația uvrA în E. coli sau mutația uvrB în S.typhimurium prin sensibilizare la lumina ultravioletă) (2) (3). De asemenea, sușele ar trebui să producă un număr de colonii spontane de reversie pe fiecare placă, între limitele de frecvență estimate pe baza datelor de laborator anterioare și, de preferință, între limitele semnalate în literatura de specialitate. 1.5.1.2. Mediul Se utilizează o geloză minimală corespunzătoare (de ex. una care conține
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
urmează se utilizeze sunt citotoxicitatea și solubilitatea în amestecul final de tratare. Ar putea fi util un test preliminar pentru determinarea toxicității și caracteristicilor de solubilitate. Detectarea citotoxicității poate fi posibilă printr-o reducere a numărului de colonii care provoacă reversia, o clarificare și diminuare a fondului de bacterii sau a gradului de supraviețuire a culturilor tratate. Prezența sistemelor de activare metabolică poate să influențeze citotoxicitatea unei substanțe. Insolubilitatea ar trebui să fie evaluată prin formarea în amestecul final, în condiții
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
ex. în vase închise ermetic (12) (14) (15) (16). 1.5.4. Incubarea Toată plăcile dintr-un test dat ar trebui să fie incubate la 37oC timp de 48-72 de ore. După incubare, se procedează la numărătoarea coloniilor care provoacă reversia de pe fiecare placă. 2. DATELE 2.1. PRELUCRAREA REZULTATELOR Datele ar trebui să se prezinte sub forma numărului de colonii care provoacă reversia de pe fiecare placă. De asemenea, ar trebui să se prezinte numărul de colonii care provoacă reversie, atât
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
incubate la 37oC timp de 48-72 de ore. După incubare, se procedează la numărătoarea coloniilor care provoacă reversia de pe fiecare placă. 2. DATELE 2.1. PRELUCRAREA REZULTATELOR Datele ar trebui să se prezinte sub forma numărului de colonii care provoacă reversia de pe fiecare placă. De asemenea, ar trebui să se prezinte numărul de colonii care provoacă reversie, atât pe plăcile cu martor negativ (martor solvent și martor netratat, dacă s-a utilizat), cât și pentru plăcile cu martor pozitiv. Ar trebui
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
provoacă reversia de pe fiecare placă. 2. DATELE 2.1. PRELUCRAREA REZULTATELOR Datele ar trebui să se prezinte sub forma numărului de colonii care provoacă reversia de pe fiecare placă. De asemenea, ar trebui să se prezinte numărul de colonii care provoacă reversie, atât pe plăcile cu martor negativ (martor solvent și martor netratat, dacă s-a utilizat), cât și pentru plăcile cu martor pozitiv. Ar trebui să se prezinte numărătoarea pentru fiecare placă, numărul mediu de colonii care provoacă reversia pentru fiecare
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
care provoacă reversie, atât pe plăcile cu martor negativ (martor solvent și martor netratat, dacă s-a utilizat), cât și pentru plăcile cu martor pozitiv. Ar trebui să se prezinte numărătoarea pentru fiecare placă, numărul mediu de colonii care provoacă reversia pentru fiecare placă și deviația standard pentru substanța de testat și pentru martorii pozitivi și negativi (netratați și/sau solvent). Nu este necesară verificarea unui răspuns clar pozitiv. Rezultatele nesigure ar trebui să fie clarificate prin teste suplimentare, realizate de
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
activare metabolică. 2.2. EVALUAREA ȘI INTERPRETAREA REZULTATELOR Există câteva criterii pentru determinarea unui rezultat pozitiv, precum creșterea în funcție de concentrație peste intervalul testat și/sau o creștere reproductibilă a uneia sau mai multor concentrații ale numărului de colonii care provoacă reversia per placă, la cel puțin o sușă cu sau fără sistem de activare metabolică (23). În primul rând ar trebui să se aibă în vedere relevanța biologică a rezultatelor. Pentru evaluarea rezultatelor testelor se poate recurge și la ajutorul unor
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
dozei și numărului de plăci per concentrație, - mediile utilizate, - tipul și compoziția sistemului de activare metabolică, inclusiv criteriile de acceptabilitate, - procedurile de tratament. Rezultatele: - semnele de toxicitate, - semnele de precipitare, - numărătoarea pentru fiecare placă, - numărul mediu de colonii care provoacă reversia pentru fiecare placă și deviația standard - relația doză-răspuns, dacă este posibil, - analizele statistice, dacă există, - datele privind martorii negativi (solvent/vehicul) și pozitivi studiați în paralel, cu domenii, valori medii și deviații standard, - datele privind martorii negativi (solvent/vehicul) și
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]