1,018 matches
-
de start a serului la 1/8. 3. Plăcile ELISA sunt spălate de cinci ori cu PBST. 4. Cincizeci de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi transferați din plăcile carrier în plăcile ELISA căptușite cu ser de iepure și incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare, se adăuga în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate la 37°C timp
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
ser de iepure și incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare, se adăuga în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Pl��cile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Pl��cile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de ortofenil-diamina conținând 0,05% H(2)O(2) (30%) m/v. 8. Reacția este stopată după
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
de microtitrare utilizează VERO sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul bolii Aujeszky este utilizat la 100TCID50/0,025 ml; sunt amestecate probe de ser nediluat și inactivat cu volume egale de suspensie virală (0,025 ml). Amestecul virus/ser este incubat timp de două ore la 37°C în plăci de microtitrare înainte că celulele corespunzătoare să fie adăugate. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
tumorala de câine) sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul gastroenteritei transmisibile este utilizat la 100TCID50 per 0,025 ml; probe de ser nediluat inactivat sunt amestecate cu un volum egal (0,025 ml) de suspensie virală. Amestecurile virus/ser sunt incubate în plăci de microtitrare, la 37°C timp de 30 până la 60 minute înainte de a fi adăugate celulele corespunzătoare. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
la concentrație de pretitrare, sonicat rapid pentru a dispersa virus agregat (dacă sonicatorul nu este disponibil se pipetează puternic) și se adaugă 50 μl pe toate godeurile plăcii ELISA. Se lovesc ușor lațurile plăcii pentru a dispersa antigenul. 2. Se incubează la 37°C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală plăcile de trei ori prin umplerea și golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă prin scuturare (lovire puternică a plăcii cu fața în jos pe
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii. 7. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 8. Se dezgheață OPD-ul și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 μl de peroxid de hidrogen 30
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
boala limbii albastre: 1. Se spală de trei ori cu mediu Eagle fără ser 40-60 (plăci) Roux cu celule BHK-21 confluente și se infectează cu serotip 1 de virus al bolii limbii albastre în mediul Eagle fără ser. 2. Se incubează la 37°C și se examinează zilnic pentru observarea efectului citopatic (ECP). 3. Cand ECP este complet, respectiv în proporție de 90 până 100% din substratul celular al fiecărei plăci Roux, se recoltează virusul agitându-se în vederea desprinderii oricăror celule
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se titrează o diluție de 1:20 în PBS de antigen al bolii limbii albastre în raport cu o diluție serica binara (50 μl/godeu) pe placă de microtitrare, utilizând o pipeta multicanal. 2. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 3. Se spală cu PBS de trei ori. 4. Se adaugă 50 μl de anticorpi monoclonali 3-17-A3 (diluție 1/100) în fiecare godeu al plăcii de microtitrare. 5. Se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 3. Se spală cu PBS de trei ori. 4. Se adaugă 50 μl de anticorpi monoclonali 3-17-A3 (diluție 1/100) în fiecare godeu al plăcii de microtitrare. 5. Se incubează o oră la 37°C pe un agitator orbital. 6. Se spală cu PBS de trei ori. 7. Se adaugă 50 μl de globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
un agitator orbital. 6. Se spală cu PBS de trei ori. 7. Se adaugă 50 μl de globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu antigenul și dacă formează o linie completă identică cu cea a serului
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu antigenul și dacă formează o linie completă identică cu cea a serului
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
orice altă tulpina de referință este utilizată la un titru de 100 TCID^50/0,025 ml; probe inactivate de ser nediluat sunt amestecate cu un volum egal de (0,025 ml) de suspensie de virus. Amestecul ser/virus este incubat 24 de ore la 37°C în plăci de microtitrare înainte de a se adaugă celulele MDBK. Celulele sunt utilizate la o concentrație ce formează un monostrat celular complet. Martori: (i) proba de virus infectant, (îi) martori de toxicitate serica, (iii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
pentru fiecare proba. Alte celule susceptibile, de exemplu culturi primare de celule renale bovine sau suine, pot fi utilizate, dar trebuie avut în vedere că pentru anumite tulpini de virus al febrei aftoase acestea sunt mai puțin sensibile. Tuburile sunt incubate la 37°C pe aparate roller (în sistem rotativ) și examinate zilnic timp de 48 de ore pentru prezență efectului citopatic (ECP). În cazul în care sunt negative, se fac pasaje oarbe ale culturii peste culturi noi și se reexaminează
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
godeu 0,05 ml de suspensie celulară conținând 0,5 până la 1,0 x 106 celule la 1 ml mediu de cultură celulară ce conține ser fără anticorpi față de virusul febrei aftoase și apoi placă se închide ermetic. Plăcile sunt incubate la 37°C; monostratul este complet în 24 de ore. Efectul citopatic este, în mod obișnuit, suficient dezvoltat la 48 de ore pentru o citire microscopica în cadrul testului. La acest moment poate fi făcută o citire microscopica finală sau plăcile
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de start a serului la 1/8. 3. Plăcile ELISA sunt spălate de cinci ori cu PBST. 4. Cincizeci de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi transferați din plăcile carrier în plăcile ELISA căptușite cu ser de iepure și incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare, se adăuga în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate la 37°C timp
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
ser de iepure și incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare, se adăuga în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la 37
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de ortofenil-diamina conținând 0,05% H(2)O(2) (30%) m/v. 8. Reacția este stopată după
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de microtitrare utilizează VERO sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul bolii Aujeszky este utilizat la 100TCID50/0,025 ml; sunt amestecate probe de ser nediluat și inactivat cu volume egale de suspensie virală (0,025 ml). Amestecul virus/ser este incubat timp de două ore la 37°C în plăci de microtitrare înainte că celulele corespunzătoare să fie adăugate. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
tumorala de câine) sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul gastroenteritei transmisibile este utilizat la 100TCID50 per 0,025 ml; probe de ser nediluat inactivat sunt amestecate cu un volum egal (0,025 ml) de suspensie virală. Amestecurile virus/ser sunt incubate în plăci de microtitrare, la 37°C timp de 30 până la 60 minute înainte de a fi adăugate celulele corespunzătoare. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
la concentrație de pretitrare, sonicat rapid pentru a dispersa virus agregat (dacă sonicatorul nu este disponibil se pipetează puternic) și se adaugă 50 μl pe toate godeurile plăcii ELISA. Se lovesc ușor lațurile plăcii pentru a dispersa antigenul. 2. Se incubează la 37°C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală plăcile de trei ori prin umplerea și golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă prin scuturare (lovire puternică a plăcii cu fața în jos pe
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii. 7. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 8. Se dezgheață OPD-ul și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 μl de peroxid de hidrogen 30
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]