1,102 matches
-
imunodeficienței dobândite (SIDA). Aparținând retrovirusurilor, nu poate fi îndepărtat complet din organism pentru că acest tip de virusuri are capacitatea de a-și înscrie codul în codul genetic al celulei gazdă. O infectare cu HIV duce după o perioadă lungă de incubare, de ani, chiar zeci de ani, la declanșarea bolii SIDA. SIDA (sindromul imunodeficienței dobândite) este cauzat de virusul imunodeficienței umane (HIV), un retrovirus din familia lentivirusurilor, familie rămasă necunoscută până în anul 1983. În acel an, cercetătoarea franceză Barré-Sinoussi și colaboratori
HIV () [Corola-website/Science/299911_a_301240]
-
Sheppard în anul 1971, și are la bază folosirea Fmoc (fluorenil metoxi carbonil), iar pentru înepărtarea acesteia se folosește de obicei mediu bazic asigurat de o soluție 20% piperidină/ DMF (dimetil formamidă). Îndepărtarea grupării din lanțul proteic se face prin incubare în acid trifluoracetic (TFA). Protejarea grupării prin intermediul Fmoc este de obicei lentă, deoarece anionul nitro produs la sfîrșitul reacției nu este un produs favorabil desfășurării reacției. Datorită compoziției, fiind formate exclusiv din aminoacizi, se întâlnesc alături de alți compuși importanți de
Proteină () [Corola-website/Science/303840_a_305169]
-
micoplasmă. Pentru mutațiile genice cauzate de substanțele chimice se pot utiliza și alte tipuri de celule, cu condiția ca validitatea utilizării în acest scop să fie pe deplin argumentată cu documentație. Mediu Se utilizează medii de cultură și condiții de incubare corespunzătoare (de exemplu, temperatura, vasele de cultură folosite, concentrațiile de CO2 și umiditatea). Mediul și serul trebuie alese funcție de sistemele selective și tipul celular folosit în experiment. Substanța de testare Înainte de tratarea celulelor, substanța de testare fie poate fi preparată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - linia celulară folosită, numărul de culturi celulare, metodele de menținere a culturilor celulare, - condițiile experimentale: compoziția mediilor, concentrația CO2, concentrația substanței de testare, excipientul folosit, temperatura de incubare, timpul de incubare, durata perioadei de expresie fenotipică (dacă este cazul, raportul poate include numărul de celule cultivate și subculturile și schemele de alimentare), durata tratamentului, densitatea celulară pe parcursul tratamentului, tipul de sistem de activare metabolică la mamifere folosit, martorii
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - linia celulară folosită, numărul de culturi celulare, metodele de menținere a culturilor celulare, - condițiile experimentale: compoziția mediilor, concentrația CO2, concentrația substanței de testare, excipientul folosit, temperatura de incubare, timpul de incubare, durata perioadei de expresie fenotipică (dacă este cazul, raportul poate include numărul de celule cultivate și subculturile și schemele de alimentare), durata tratamentului, densitatea celulară pe parcursul tratamentului, tipul de sistem de activare metabolică la mamifere folosit, martorii pozitivi și negativi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
acest test se pot folosi culturi celulare primare (limfocite umane) sau linii celulare bine caracterizate (de exemplu, celule ovariene de hamster chinezesc). Liniile celulare trebuie verificate pentru a decela contaminarea cu Mycoplasma. * Trebuie folosite medii de cultură și condiții de incubare (de exemplu temperatură, vase de cultură, concentrația CO2 și umiditate) corespunzătoare. * Substanțele testate pot fi preparate în mediul de cultură sau dizolvate sau suspensionate într-un excipient adecvat înainte de începerea tratamentului celulelor. Concentrația finală de excipient în mediul de cultură
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - celulele folosite, metodele de întreținere a culturilor celulare, - condițiile de desfășurare a testului: compoziția mediului, concentrația CO2, concentrația substanței de testare, excipientul folosit, temperatura de incubare, durata tratamentului, inhibitorul fusului de diviziune celulară folosit, concentrația acestuia și timpul de tratament cu acesta, tipul de sistem folosit pentru activarea metabolică la mamifere, martorii pozitivi și negativi, - numărul de culturi la fiecare punct experimental, - detalii despre tehnica folosită
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
ratei de creștere a culturilor. Măsurarea citotoxicității are rolul de a stabili dacă expunerea la substanța chimică testată are relevanță toxicologică, dar nu poate fi folosită pentru a calcula frecvența transformărilor în toate testele, deoarece unele dintre acestea pot necesita incubare prelungită și/sau recultivare. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire Celule În funcție de testul de transformare folosit, sunt disponibile diferite linii celulare sau celule primare. Cercetătorul trebuie să se asigure că celulele folosite în cadrul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
corespunzătoare. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - tipul de celule folosite, numărul de culturi celulare, metoda de menținere a culturilor, - condițiile experimentale: concentrația substanței de testare, excipientul folosit, timpul de incubare, durata și frecvența tratamentului, densitatea celulară pe parcursul tratamentului, tipul de sistem exogen folosit pentru activarea metabolismului, martorii pozitivi și negativi, caracteristicile fenotipului monitorizat, tipul de sistem selectiv folosit (dacă este cazul), argumentarea alegerii dozelor, - metoda folosită pentru exprimarea numărului de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
faza morții. Precultura: Precultura are ca scop obținerea unei cantități de alge adecvată pentru inocularea culturilor de testare. Precultura se incubează în condițiile de testare și se folosește în faza de creștere exponențială, în mod normal după o perioadă de incubare de aproximativ trei zile. Când culturile de alge conțin celule deformate sau anormale, acestea trebuie înlăturate. TOXICITATEA PENTRU RÂME TEST PE SOL ARTIFICIAL 1. METODĂ 1.1. Introducere În acest test de laborator substanța de testare se adaugă la un
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
50% sau prezintă câteva alte semne de citotoxicitate. Dacă nu este toxică, substanța se testează până la limita superioară a solubilității sau până la o concentrație maximă de 5 mg/ml. Condiții de cultură: Se folosesc medii de cultură și condiții de incubare (de exemplu, temperatura, vasele de cultură utilizate, concentrațiile de CO2 și umiditatea) adecvate. 1.6.3. Mod de operare 1.6.3.1. Prepararea culturilor Linii celulare stabilite: celulele se obțin pornind de la culturile mamă (de exemplu prin tripsinizare sau
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
ci dimpotrivă, este chiar preferabilă modificarea anumitor condiții experimentale, în vederea obținerii mai multor rezultate utile. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul testului cuprinde, dacă este posibil, următoarele date: - celulele folosite, - condițiile experimentale: compoziția mediului, concentrația CO2, temperatura de incubare, timpul de incubare, nivelul dozelor, timpul de tratare, durata tratamentului cu inhibitor de fus mitotic și concentrația acestuia, tipul de amestec hepatic enzimatic activator folosit, martorii pozitivi și negativi, - numărul de culturi celulare, - numărul de metafaze analizate (datele se raportează
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
chiar preferabilă modificarea anumitor condiții experimentale, în vederea obținerii mai multor rezultate utile. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul testului cuprinde, dacă este posibil, următoarele date: - celulele folosite, - condițiile experimentale: compoziția mediului, concentrația CO2, temperatura de incubare, timpul de incubare, nivelul dozelor, timpul de tratare, durata tratamentului cu inhibitor de fus mitotic și concentrația acestuia, tipul de amestec hepatic enzimatic activator folosit, martorii pozitivi și negativi, - numărul de culturi celulare, - numărul de metafaze analizate (datele se raportează separat pentru fiecare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
cultură să atingă faza morții. Precultura: Precultura are ca scop obținerea unei cantități de alge adecvată pentru inocularea culturilor de testare. Precultura se incubează în condițiile testării și se folosește în timpul creșterii exponențiale, în mod normal după o perioadă de incubare de aproximativ trei zile. Când culturile de alge conțin celule deformate sau anormale, ele sunt înlăturate. Apendicele 2 ISO 8692 - Calitatea Apei - testul de inhibare a creșterii algelor în apa proaspătă cu Selenastrum capricornutum și Scenedesmus subspicatus consemnează următoarele rezultate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Gradul de biodegradare se calculează exprimând concentrația COD îndepărtată (corectată în funcție de cea din blancul cu inocul) ca procent din concentrația prezentă inițial. Gradul de biodegradare primară poate fi de asemenea calculat din analiza chimică suplimentară făcută la începutul și sfârșitul incubării. II.2. DESCRIEREA METODEI II.2.1. Aparatură (a) Vase conice, de exemplu, 250 ml -2 litri în funcție de volumul necesar pentru analiza COD; (b) Agitatoare pentru vase conice, fie cu control automat al temperaturii, fie fără acest control, dar folosite
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
zile. Gradul de biodegradare este calculat exprimând concentrația COD eliminată (corectată în funcție de cea din blancul cu inocul) ca procent din concentrația inițială. Gradul de biodegradare primară poate fi de asemenea calculat din analiza chimică suplimentară făcută la începutul și sfârșitul incubării. III.2. DESCRIEREA METODEI III.2.1. Aparatură: (a) Vase conice, de exemplu, de la 250 ml la 2 litri, în funcție de volumul necesar pentru analiza COD; (b) Agitatoare pentru vase conice, fie cu control automat al temperaturii, fie fără acest control
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
referință și pentru martorii de toxicitate pot fi folosite formate similare. 6. ANALIZA CARBONULUI (opțional) - Analizor de carbon: Timpul (ziua) Proba martor mg/l Substanța de testare mg/l 0 Cb(o) Co 28 (*) Cb(t) Ct (*) sau la sfârșitul incubării % COD eliminat = 7. DEGRADAREA ABIOTICĂ (opțional) PARTEA V. TESTUL DE RESPIROMETRIE MANOMETRICĂ (Metoda C.4-D) V.1. PRINCIPIUL METODEI Un volum măsurat de mediu mineral inoculat, cu o concentrație cunoscută din substanța de testare (100 mg/litru de substanță testată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
necesară altă supraveghere în afara citirilor și verificărilor zilnice pentru a urmări menținerea unei temperaturi corecte și unei agitări adecvate. Se calculează consumul de oxigen din citirile efectuate la intervale regulate și frecvente, folosind metodele date de fabricantul echipamentului. La sfârșitul incubării, în mod normal după 28 zile, se măsoară pH-ul soluțiilor din vase, în special în cazul în care consumurile de oxigen sunt scăzute sau mai mici decât CTONH 4 (pentru compușii care conțin azot). Dacă este necesar, se prelevează
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
oxigen (3,43 x N x V)(mg) - - (ii+iv)Echivalentul oxigenului total - - 7. ANALIZELE CARBONULUI (opțional) Analizorul de carbon: Timpul (zile) Proba martor mg/litru Substanța de testare mg/litru 0 (Cblo) (Co) 28 * (Cblt) (Ct) * sau la sfârșitul incubării % COD eliminat = 8. SUBSTANȚA SPECIFICĂ (opțional) Sb = concentrația în controlul fizico-chimic (steril) după 28 zile Sa = concentrația în vasul inoculat după 28 zile. % biodegradare = 9.DEGRADARE ABIOTICĂ (opțional) a = consumul de oxigen din vasul steril după 28 zile, (mg) consumul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
experimentală este însoțită de o serie paralelă completă, pentru determinarea blancului inoculat. Se prelevează probe din vasele duplicate, din toate seriile, pentru analiza oxigenului dizolvat la intervale egale de timp (cel puțin săptămânal), de-a lungul celor 28 zile de incubare. Probele prelevate săptămânal permit evaluarea procentului de eliminare în fereastra de 14 zile, în timp ce prelevarea de probe la 3 - 4 zile permite identificarea ferestrei de 10 zile, care necesită dublarea numărului celor mai multe vase. Pentru substanțele de testare care conțin azot
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
1 C1 substanță) 2 C2 Media mb = Substanța de testare 1 a1 2 a2 Media mt = Notă: Un format similar poate fi folosit pentru substanța de referință și martorul de toxicitate. 6. CORECȚIA PENTRU NITRIFICARE (vezi anexa V) Timpul de incubare (zile) 0 n1 n2 n3 (i) Concentrația de nitrat (mg N/litru) (ii) Modificarea concentrației de nitrat (mg N/litru) (iii) Echivalentul de oxigen (mg /litru) (iv) Concentrația de nitrit (mg N/litru) (v) Modificarea concentrației de nitrat (mg N
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
este absorbit în calce sodică. Biodegradabilitatea este exprimată ca procent de oxigen absorbit (corectat cu absorbția în blanc) față de absorbția teoretică (CTO). Procentul biodegradabilității primare se calculează de asemenea din analiza chimică specifică suplimentară realizată la începutul și la sfârșitul incubării și, opțional, prin analiza COD. VII.2. DESCRIEREA METODEI VII.2.1. Aparatură (a) Aparat automat de măsurare electrolitică a CBO sau respirometru normal echipat cu 6 vase de 300 ml fiecare și cu capsule ce conțin absorbant de CO2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
oxigenului consumat și se notează orice schimbare a culorii conținutului vaselor. Se citește direct consumul de oxigen la șase vase, printr-o metodă adecvată, de exemplu, prin intermediul unui înregistrator cu diagramă cu șase puncte, care furnizează curba CBO. La sfârșitul incubării, în mod normal după 28 zile, se măsoară pH-ul conținutului vaselor și se determină concentrația substanței de testare rămasă și a oricărui intermediar și, în cazul substanțelor solubile în apă, concentrația de COD (anexa II.4). Este necesară o
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
pot apărea erori grave. Dacă nitrificarea are loc, dar nu este completă, consumul de oxigen observat al amestecului de reacție poate fi corectat prin cantitatea de oxigen folosită la oxidarea amoniului la nitrit sau la nitrat, dacă modificările concentrației în timpul incubării nitritului și nitratului sunt determinate luând în considerare următoarele ecuații: 2NH4Cl + 3O2 = 2HNO2 + 2HCl + 2H2O (1) 2HNO2 + O2 = 2HNO3 (2) Reacția globală este: 2NH4Cl + 4O2 = 2HNO3 + 2HCl + 2H2O (3) Din ecuația (1), consumul de oxigen pentru ca 28 g azot conținut
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
acestea: Notă: Timpul necesar pentru finalizarea acțiunii enzimei poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus este dată numai orientativ și se recomandă determinarea ei pentru fiecare lot. Când se determină acidul L-lactic singur, timpul de incubare poate fi redus la 10 minute. 2.5. Exprimarea rezultatelor Concentrația acidului lactic se redă în grame la litru, cu o cifră zecimală. 2.5.1. Metoda de calcul Formula generală pentru calcularea concentrației în g/l este: unde: V
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]