10,924 matches
-
C timp de 30 de minute. Procedeu: Testul de neutralizare cu virus constant și variind antigenul (aceeași diluție de virus cu diluții diferite de ser) pe plăci de microtitrare folosește celule A72 (linie celulară tumorala de câine) sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul gastroenteritei transmisibile este utilizat la 100TCID50 per 0,025 ml; probe de ser nediluat inactivat sunt amestecate cu un volum egal (0,025 ml) de suspensie virală. Amestecurile virus/ser sunt incubate în plăci de microtitrare, la 37
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
de microtitrare, la 37°C timp de 30 până la 60 minute înainte de a fi adăugate celulele corespunzătoare. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1 ml suspensie celulară. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi) martori de toxicitate a serului, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de seroneutralizare și titrul virusului utilizat în testare sunt înregistrate după trei până la șapte
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1 ml suspensie celulară. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi) martori de toxicitate a serului, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de seroneutralizare și titrul virusului utilizat în testare sunt înregistrate după trei până la șapte zile de incubație la 37°C. Titrurile de ser mai mici de 'bd (ser nediluat) sunt considerate negative
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive. Materiale și reagenți: 1. Plăci corespunzătoare pentru microtitrare ELISA. 2. Antigen: furnizat că și concentrat de extract celular, preparat conform descrierii anterioare și stocat la -20°C sau -70°C. 3. Tampon de blocare: fosfat salin tamponat (PBS) conținând 0,3% ser bovin adult BTV negativ, 0,1% (v/v) Tween-20 (furnizat ca soluție monolaurat sorbitol polioxietilen) în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de virus al bolii limbii albastre în mediul Eagle fără ser. 2. Se incubează la 37°C și se examinează zilnic pentru observarea efectului citopatic (ECP). 3. Cand ECP este complet, respectiv în proporție de 90 până 100% din substratul celular al fiecărei plăci Roux, se recoltează virusul agitându-se în vederea desprinderii oricăror celule rămase atașate de placă de sticlă. 4. Se centrifughează la 2.000 până la 3.000 rpm (pentru a desprinde celulele aglutinate). 5. Se înlătura supernatantul și se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
la 37°C în plăci de microtitrare înainte de a se adaugă celulele MDBK. Celulele sunt utilizate la o concentrație ce formează un monostrat celular complet. Martori: (i) proba de virus infectant, (îi) martori de toxicitate serica, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de neutralizare și titrul virusului utilizat în test sunt înregistrate după trei până la șase zile de incubație la 37°C. Titrurile de ser sunt considerate negative dacă nu există neutralizare la o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
superioare a esofagului și faringelui se fac încercări prin mișcări direcționale lateral și dorsal. Probang-ul este retras, preferabil înainte ca animalul să înghită. Cupă trebuie să fie plină și să conțină un amestec de mucus, salivă, fluid esofagian și resturi celulare. Trebuie să se asigure că fiecare eșantion să conțină material celular vizibil. Trebuie să se evite mișcările brutale ce provoacă sângerări. Probe de la anumite animale pot fi puternic contaminate cu conținut ruminal. Asemenea probe trebuie să fie eliminate și gură
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
Probang-ul este dezinfectat și spălat de trei ori cu apă curată înainte de reutilizarea la un alt animal. Testare pentru depistarea virusul febrei aftoase: Probele sunt inoculate în culturi primare de celule tiroidiene bovine utilizând cel puțin trei tuburi cu culturi celulare pentru fiecare proba. Alte celule susceptibile, de exemplu culturi primare de celule renale bovine sau suine, pot fi utilizate, dar trebuie avut în vedere că pentru anumite tulpini de virus al febrei aftoase acestea sunt mai puțin sensibile. Tuburile sunt
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de 48 de ore. Specificitatea fiecărui efect citopatic trebuie să fie confirmată. Mediul de transport recomandat: 1. 0,08M tampon fosfat pH 7,2 conținând 0,01% albumina serica bovina, 0,002% roșu fenol și antibiotice. 2. Mediu pentru culturi celulare (exemplul MEM Eagle) cu pH 7,2, conținând 0,04 M tampon Hepes, 0,01% albumina serica bovina și antibiotice. 3. Antibiotice (per mililitru final) trebuie să fie adăugate la mediul de transport, de exemplu penicilină 1.000 UI, neomicina
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
transport, de exemplu penicilină 1.000 UI, neomicina sulfat 100 UI, polimixin B sulfat 50 UI, micostatin 100 UI. B. Testul de virus-neutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Reactivi: preparat stoc de antigen al virusului febrei aftoase în culturi celulare sau pe limbi de vită și stocat la -70°C sau mai puțin sau la -20°C după adăugarea a 50% glicerol. Acesta este antigenul stoc. Virusul febrei aftoase este stabil în aceste condiții și titrul variază puțin pe o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
luni de zile. Procedeu: Testul este efectuat în plăci de microtitrare cu fund plat destinate pentru culturi tisulare, utilizând celule susceptibile de tipul IB-RS-2, BHK-21 sau celule renale de vițel. Serurile pentru test sunt diluate 'bc în mediul pentru culturi celulare fără ser cu adăugarea a 100 UI/ ml neomicina sau alt antibiotic corespunzător. Serurile sunt inactivate la 56°C timp de 30 de minute și sunt utilizate cantități de 0,05 ml pentru a prepara diluții binare (duble) în serie
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
ser conținând 100 TCID 50/0,05 ml, apoi se adaugă în fiecare godeu. Urmează incubarea timp de o oră la 37°C pentru a permite să aibă loc neutralizarea, se adăuga în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară conținând 0,5 până la 1,0 x 106 celule la 1 ml mediu de cultură celulară ce conține ser fără anticorpi față de virusul febrei aftoase și apoi placă se închide ermetic. Plăcile sunt incubate la 37°C; monostratul este complet
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
timp de o oră la 37°C pentru a permite să aibă loc neutralizarea, se adăuga în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară conținând 0,5 până la 1,0 x 106 celule la 1 ml mediu de cultură celulară ce conține ser fără anticorpi față de virusul febrei aftoase și apoi placă se închide ermetic. Plăcile sunt incubate la 37°C; monostratul este complet în 24 de ore. Efectul citopatic este, în mod obișnuit, suficient dezvoltat la 48 de ore
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
următorul protocol: Ser: Toate serurile, înainte de utilizare, sunt inactivate prin căldură la 56°C timp de 30 de minute. Procedeu: Testul de neutralizare cu cantitate constantă de virus și variind serul pe plăci de microtitrare utilizează VERO sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul bolii Aujeszky este utilizat la 100TCID50/0,025 ml; sunt amestecate probe de ser nediluat și inactivat cu volume egale de suspensie virală (0,025 ml). Amestecul virus/ser este incubat timp de două ore la 37°C
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de microtitrare înainte că celulele corespunzătoare să fie adăugate. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi) martori de toxicitate a serului, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de neutralizare și titrul virusului utilizat în testare sunt înregistrate după trei până la șapte zile de incubație la 37°C. Titrurile de ser mai mici de 1/2 (ser nediluat) sunt considerate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
utilizare, sunt inactivate prin căldură la 56°C timp de 30 de minute. Procedeu: Testul de neutralizare cu virus constant și variind antigenul (aceeași diluție de virus cu diluții diferite de ser) pe plăci de microtitrare folosește celule A72 (linie celulară tumorala de câine) sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul gastroenteritei transmisibile este utilizat la 100TCID50 per 0,025 ml; probe de ser nediluat inactivat sunt amestecate cu un volum egal (0,025 ml) de suspensie virală. Amestecurile virus/ser sunt
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
C timp de 30 de minute. Procedeu: Testul de neutralizare cu virus constant și variind antigenul (aceeași diluție de virus cu diluții diferite de ser) pe plăci de microtitrare folosește celule A72 (linie celulară tumorala de câine) sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul gastroenteritei transmisibile este utilizat la 100TCID50 per 0,025 ml; probe de ser nediluat inactivat sunt amestecate cu un volum egal (0,025 ml) de suspensie virală. Amestecurile virus/ser sunt incubate în plăci de microtitrare, la 37
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de microtitrare, la 37°C timp de 30 până la 60 minute înainte de a fi adăugate celulele corespunzătoare. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1 ml suspensie celulară. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi) martori de toxicitate a serului, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de seroneutralizare și titrul virusului utilizat în testare sunt înregistrate după trei până la șapte
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1 ml suspensie celulară. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi) martori de toxicitate a serului, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de seroneutralizare și titrul virusului utilizat în testare sunt înregistrate după trei până la șapte zile de incubație la 37°C. Titrurile de ser mai mici de 'bd (ser nediluat) sunt considerate negative
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive. Materiale și reagenți: 1. Plăci corespunzătoare pentru microtitrare ELISA. 2. Antigen: furnizat că și concentrat de extract celular, preparat conform descrierii anterioare și stocat la -20°C sau -70°C. 3. Tampon de blocare: fosfat salin tamponat (PBS) conținând 0,3% ser bovin adult BTV negativ, 0,1% (v/v) Tween-20 (furnizat ca soluție monolaurat sorbitol polioxietilen) în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de virus al bolii limbii albastre în mediul Eagle fără ser. 2. Se incubează la 37°C și se examinează zilnic pentru observarea efectului citopatic (ECP). 3. Cand ECP este complet, respectiv în proporție de 90 până 100% din substratul celular al fiecărei plăci Roux, se recoltează virusul agitându-se în vederea desprinderii oricăror celule rămase atașate de placă de sticlă. 4. Se centrifughează la 2.000 până la 3.000 rpm (pentru a desprinde celulele aglutinate). 5. Se înlătura supernatantul și se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
la 37°C în plăci de microtitrare înainte de a se adaugă celulele MDBK. Celulele sunt utilizate la o concentrație ce formează un monostrat celular complet. Martori: (i) proba de virus infectant, (îi) martori de toxicitate serica, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de neutralizare și titrul virusului utilizat în test sunt înregistrate după trei până la șase zile de incubație la 37°C. Titrurile de ser sunt considerate negative dacă nu există neutralizare la o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
superioare a esofagului și faringelui se fac încercări prin mișcări direcționale lateral și dorsal. Probang-ul este retras, preferabil înainte ca animalul să înghită. Cupă trebuie să fie plină și să conțină un amestec de mucus, salivă, fluid esofagian și resturi celulare. Trebuie să se asigure că fiecare eșantion să conțină material celular vizibil. Trebuie să se evite mișcările brutale ce provoacă sângerări. Probe de la anumite animale pot fi puternic contaminate cu conținut ruminal. Asemenea probe trebuie să fie eliminate și gură
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
Probang-ul este dezinfectat și spălat de trei ori cu apă curată înainte de reutilizarea la un alt animal. Testare pentru depistarea virusul febrei aftoase: Probele sunt inoculate în culturi primare de celule tiroidiene bovine utilizând cel puțin trei tuburi cu culturi celulare pentru fiecare proba. Alte celule susceptibile, de exemplu culturi primare de celule renale bovine sau suine, pot fi utilizate, dar trebuie avut în vedere că pentru anumite tulpini de virus al febrei aftoase acestea sunt mai puțin sensibile. Tuburile sunt
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de 48 de ore. Specificitatea fiecărui efect citopatic trebuie să fie confirmată. Mediul de transport recomandat: 1. 0,08M tampon fosfat pH 7,2 conținând 0,01% albumina serica bovina, 0,002% roșu fenol și antibiotice. 2. Mediu pentru culturi celulare (exemplul MEM Eagle) cu pH 7,2, conținând 0,04 M tampon Hepes, 0,01% albumina serica bovina și antibiotice. 3. Antibiotice (per mililitru final) trebuie să fie adăugate la mediul de transport, de exemplu penicilină 1.000 UI, neomicina
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]