1,183 matches
-
moartea embrionului sau a fetusului. Inducerea genelor letale dominante prin expunere la o substanță chimică indică faptul că acea substanță a acționat la nivelul țesutului germinativ al speciei testate. Este cunoscut faptul că genele letale dominante se datorează unei anomalii cromozomiale (numerice și structurale). Moartea embrionului, în cazul în care femelele sunt tratate poate fi cauzată și de efecte toxice. În general, masculii se tratează cu substanța de testare și se împerechează cu femele virgine netratate. Diferitele etape de germinare pot
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
LA MAMIFERE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Acest test de citogeneză in vivo detectează aberațiile cromozomiale structurale ale spermatogoniilor. Testul constă în analiza mitozei spermatogoniei pentru a decela tipul de aberație cromatidiană și cromozomială. Metoda utilizează preparate din mamifere care au tratate cu substanța chimică de testare administrată pe căi specifice și sacrificate la diferite intervale
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Acest test de citogeneză in vivo detectează aberațiile cromozomiale structurale ale spermatogoniilor. Testul constă în analiza mitozei spermatogoniei pentru a decela tipul de aberație cromatidiană și cromozomială. Metoda utilizează preparate din mamifere care au tratate cu substanța chimică de testare administrată pe căi specifice și sacrificate la diferite intervale de timp. Animalele sunt tratate în continuare cu inhibitori ai fusului mitotic cum ar fi colchicina pentru a
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
specifice și sacrificate la diferite intervale de timp. Animalele sunt tratate în continuare cu inhibitori ai fusului mitotic cum ar fi colchicina pentru a opri celulele în stadiul de metafază a mitozei (c-metafază), apoi sunt sacrificate. Se realizează preparate cromozomiale pornind de la celule uscate în aer și apoi colorate, care se examinează microscopic. Analiza spermatocitelor în stadiul diachineză-metafaza I permite obținerea unor informații suplimentare referitoare la translocarea multivalentă a spermatogoniei, în urma tratamentului. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
uscare la aer. Procedura standard poate fi modificată în funcție de specia folosită. Suspensia de celule obținută se tratează cu soluție hipotonică apoi se fixează. Celulele se așează pe lame și se colorează. Lamele numerotate se examinează microscopic. Analiză Pentru stabilirea aberațiilor cromozomiale structurale, trebuie analizate cel puțin o sută de metafaze cu număr complet de centromeri. Pentru a se evidenția un posibil efect citotoxic, se stabilește raportul dintre primele mitoze spermatogonice și a doua metafază meiotică, care poate fi determinat pe un
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
LA ȘOARECI 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Testul apariției translocației ereditare la șoareci decelează modificările cromozomiale structurale și numerice ale celulelor germinale la mamifere, apărute la prima generație (F1). Modificările cromozomiale detectate sunt translocații reciproce, iar dacă în experiment sunt incluse și femele din generația F1, la acestea se detectează pierderea cromozomului X. Purtătorii de translocații
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Testul apariției translocației ereditare la șoareci decelează modificările cromozomiale structurale și numerice ale celulelor germinale la mamifere, apărute la prima generație (F1). Modificările cromozomiale detectate sunt translocații reciproce, iar dacă în experiment sunt incluse și femele din generația F1, la acestea se detectează pierderea cromozomului X. Purtătorii de translocații și femelele XO prezintă o fertilitate scăzută, care este folosită la selecția descendenților F1 pentru
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
prin inhalare) 140 B.9. Toxicitate la doză repetată (28 de zile) (administrare cutanată) 144 B.10. Mutageneza (Test citogenetic in vitro pe celule de mamifere) 148 B.11. Mutageneza (Test citogenetic in vitro al măduvei osoase la mamifere, analiză cromozomială) 151 B.12. Mutageneza (Testul micronucleilor celulari) 154 B.13. Mutageneza (Testul de mutație reversă pe Escherichia coli) 157 B.14. Mutageneza (Testul de mutație reversă pe Salmonella typhimurium) 160 PARTEA C: METODE PENTRU DETERMINAREA ECOTOXICITĂȚII 163 C.1. Toxicitatea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
necesitatea eutanasierii);. C. MUTAGENEZA (inclusiv testul de triere prealabilă a compușilor cu potențial cancerigen) Pentru evaluarea preliminară a potențialului mutagen al unei substanțe, este necesar să se obțină informații privind două categorii de mecanisme, și anume, mutația genică și anomaliile cromozomiale. Cele două mecanisme se evaluează prin următoarele teste: (i) Teste privind producerea de mutații genice (punctuale) în celulele procariote ca Salmonella typhimurium; sunt acceptabile și testele care utilizează Escherichia coli. Alegerea între cele două organisme experimentale menționate este determinată de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de mutații genice (punctuale) în celulele procariote ca Salmonella typhimurium; sunt acceptabile și testele care utilizează Escherichia coli. Alegerea între cele două organisme experimentale menționate este determinată de natura substanței chimice care se testează. (ii) Teste privind producerea de anomalii cromozomiale în celulele de mamifere, dezvoltate in vitro; se poate accepta și o procedură in vivo (testul micronucleilor și studiul metafazei celulelor de măduvă osoasă). Cu toate acestea, în absența unor contraindicații, metodele in vitro vor fi puternic preferate. D. EVALUARE
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
punctul A). 1.2. DEFINIȚIE Vezi introducerea generală: partea B (punctul C). 1.3. SUBSTANȚE DE REFERINȚĂ Nici una. 1.4. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Testul citogenetică in vitro este un test de potențial mutagen pe termen scurt destinat evidențierii aberațiilor cromozomiale structurale în culturile de celule ale mamiferelor. Se pot folosi culturi de linii celulare stabilite, precum și culturi de celule primare. După expunerea la substanțele de testare în prezența și în absența unui amestec de activare a enzimelor hepatice (fracțiune postmitocondrială
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
hepatice (fracțiune postmitocondrială suplimentată cu cofactori), culturile celulare se tratează cu un inhibitor al fusului mitotic, precum colchinina în vederea acumulării celulelor în stadiu de tip metafază al mitozei (c-metafază). Celulele se recoltează la momente adecvate și se realizează preparate cromozomiale. Preparatele se colorează și celulele în metafază se analizează pentrua se evidenția anomaliile cromozomiale. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătiri 1.6.1.1. Celule Se folosesc linii celulare stabilite
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
fusului mitotic, precum colchinina în vederea acumulării celulelor în stadiu de tip metafază al mitozei (c-metafază). Celulele se recoltează la momente adecvate și se realizează preparate cromozomiale. Preparatele se colorează și celulele în metafază se analizează pentrua se evidenția anomaliile cromozomiale. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătiri 1.6.1.1. Celule Se folosesc linii celulare stabilite sau culturi de celule primare, de exemplu celule de hamster chinezesc și limfocite umane
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
mai târziu. Acest lucru asigură acoperirea tuturor stadiilor ciclului celular și permite întârzierea ciclului celular. 1.6.3.3. Prepararea cromozomilor Prepararea cromozomilor presupune tratarea celulelor cu soluții hipotone, fixarea, etalarea pe lame și colorarea acestora. Analiza: Pentru depistarea anomaliilor cromozomiale, sunt analizate pe cultură minim 100 de metafaze bine etalate. Înainte de analiză, lamele se codează. Pentru limfocitele umane se analizează doar metafazele care conțin 46 de centromeri. În liniile celulare stabilite se analizează numai metafazele ce conțin ±2 centromeri din
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
statistică, - discutarea rezultatelor, - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B (punctul D). 4. REFERINȚE BIBLIOGRAFICE Vezi introducerea generală: partea B (punctul E). B. 11. MUTAGENEZA (TEST CITOGENETIC "IN VIVO" AL MĂDUVEI OSOASE LA MAMIFERE, ANALIZA CROMOZOMIALĂ) 1. METODĂ 1.1. INTRODUCERE Vezi introducerea generală: partea B (punctul A). 1.2. DEFINIȚIE Vezi introducerea generală: partea B (punctul C). 1.3. SUBSTANȚE DE REFERINȚĂ Nici una. 1.4. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Testul citogenetică in vivo este un
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
punctul A). 1.2. DEFINIȚIE Vezi introducerea generală: partea B (punctul C). 1.3. SUBSTANȚE DE REFERINȚĂ Nici una. 1.4. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Testul citogenetică in vivo este un test de potențial mutagen pe termen scurt destinat evidențierii aberațiilor cromozomiale structurale. Acestea sunt evaluate, în general, pe parcursul primei mitoze consecutive a tratamentului. Cu mutagenele chimice, majoritatea aberațiilor induse sunt de tip cromatidian. În această metodă se folosește măduva osoasă a mamiferelor expuse, prin metode adecvate, la substanțele de testare și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
la substanțele de testare și sacrificate la intervale succesive. Înainte de a fi sacrificate, animalele sunt tratate cu ajutorul unor substanțe precum: colchinina, care împiedică formarea fusului în vederea acumulării celulelor în stadiul de tip metafază al mitozei (c-metafază). Se realizează preparate cromozomiale pornindu-se de la celulele uscate la aer, apoi colorate; se analizează apoi metafazele la microscop pentru a evidenția aberațiile cromozomiale. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătirea testului Se dizolvă substanțele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
colchinina, care împiedică formarea fusului în vederea acumulării celulelor în stadiul de tip metafază al mitozei (c-metafază). Se realizează preparate cromozomiale pornindu-se de la celulele uscate la aer, apoi colorate; se analizează apoi metafazele la microscop pentru a evidenția aberațiile cromozomiale. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătirea testului Se dizolvă substanțele de testare într-o soluție fiziologică. Dacă sunt substanțe insolubile, acestea se dizolvă sau se pun în suspensie în excipienți
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
se face în general pe cale orală sau prin injecție intraperitoneală. Sunt adecvate și alte căi de administrare. 1.6.2.4. Folosirea martorilor negativi și pozitivi Ca martor pozitiv se folosește un compus despre care se știe că produce aberații cromozomiale in vivo. De asemenea, trebuie inclus și un lot martor negativ (tratat cu solvent). 1.6.2.5. Doze Pentru dosarul de bază, se folosește o doză din substanța de testare, respectiv doza maximă tolerată sau cea care determină apariția
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
întind pe lame. După uscarea la aer, lamele se colorează. Analiză Lamele se codează înainte de a fi folosite la microscop. Se analizează cel puțin 50 de metafaze bine etalate, incluzând numărul complet de centromeri pe animal pentru a evidenția aberații cromozomiale structurale. Se pot stabili și indexuri mitotice pentru fiecare animal. 2. DATE Datele se prezintă sub formă de tabele. Aberațiile de tip cromatidian și izocromatidian (lacune, fisuri, rearanjări) și numărul de metafaze anormale (lacune incluse și excluse), precum și indexurile mitotice
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
generală: partea B (punctul A). 1.2. DEFINIȚIE Vezi introducerea generală: partea B (punctul C). 1.3. SUBSTANȚE DE REFERINȚĂ Nici una. 1.4. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Testul micronucleului este un test in vivo pe termen scurt destinat evidențierii leziunilor cromozomiale sau a celor ale aparatului mitotic induse prin substanțe chimice. Acest test se bazează pe o creștere a numărului de micronuclee în eritrocitele policromatice ale animalelor tratate față de animalele martor. Micronucleele sunt formate din fragmente de cromozomi sau din cromozomi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
s-au produs în cele doua linii evolutive. Maimuțele antropoide actuale (familia "Pongidae") au 48 de comozomi, în timp ce specia umană are doar 46 cromozomi, cromozomul 2 uman rezultând din fuziunea a doi cromozomi acum aproximativ 10-15 milioane de ani. Remanierile cromozomiale asociate mutațiilor punctiforme au determinat evoluția acestei linii evolutive care a dus la apariția speciei umane. Cromozomii sunt structuri ce apar în cursul diviziunilor celulare rezultând din condensarea cromatinei interfazice. Cromozomul metafazic este format din două structuri paralele numite "cromatide
Genom () [Corola-website/Science/304239_a_305568]
-
(trisomie 21) reprezintă o afecțiune cromozomială (o afecțiune din naștere, care este prezentă la copil încă din momentul conceperii) cauzată de prezența unui cromozom 21 suplimentar. Cromozomii sunt structuri microscopice prezente in fiecare celulă din fiecare țesut al organismului. Ei poartă planul tuturor caracteristicilor pe care
Sindromul Down () [Corola-website/Science/308997_a_310326]
-
trisomia cromozomului 21 și mai exact de trisomia regiunii 21q22 (numită și DSCR-Down Syndrome Critical Region= Regiune Critica a Sindomului Down=RCSD). Analiza citogenetică poate evidenția mai multe variante: trisomia 21 liberă și omogenă, trisomia 21 liberă și in mozaic cromozomial; trisomia 21 prin transolocație Robertsoniană neechilibrată; trisomia 21 parțială. Trisomia 21 liberă și omogenă apare în 92-95% din cazurile de sindrom Down și constă în prezența unui cromozom 21 suplimentar la nivelul tuturor liniilor celulare. Se produce prin nedisjuncție meiotică
Sindromul Down () [Corola-website/Science/308997_a_310326]
-
92-95% din cazurile de sindrom Down și constă în prezența unui cromozom 21 suplimentar la nivelul tuturor liniilor celulare. Se produce prin nedisjuncție meiotică, cel mai frecvent maternă și în special în meioza I. Trisomia 21 liberă și în mozaic cromozomial apare în 2-3% din cazuri și se caracterizează prin prezența a doua linii celulare distincte genetic, una cu 46 de cromozomi și o alta cu 47 de cromozomi, ce conține și un cromozom suplimentar 21. Acest tip de trisomie liberă
Sindromul Down () [Corola-website/Science/308997_a_310326]