2,747 matches
-
și elimină suprafețele de separare false datorate concentrației soluțiilor. Lichidul se găsește într-un suport sau mediu poros: - hârtie de filtru specială pentru electroforeză; - acetat de celuloză sub formă de folii pentru separarea de insulină, fibrinogen, proteine, lipoproteine, glicoproteine, hemoglobine ; - geluri de agaroză (proteine), agar (proteine, vitamine, carbohidrați), poliacrilamidă, silice, rășini schimbătoare de ioni, amidon (enzime) etc. Acestea din urmă se caracterizează printr-o mare putere de rezoluție și o mare putere de selecție moleculară. Metoda de analiză pe hârtie care
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
care se poate pune soluția de electrolit; electrozii sunt legați la bornele generatorului; - densitometru prevăzut cu un înregistrator de absorbanță și un integrator. Benzile se îmbibă cu soluția de electrolit prin capilaritate, se introduc în cele două bacuri. Ỉn cazul gelurilor legătura dintre cele două bacuri se face prin benzi de hârtie. Probele de analizat se aplică înainte de începerea procesului, sub formă de linie transversală. Proba se va pune în partea opusă sensului de migrare. Identificarea compușilor separați se poate face
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
focalizare într-o zonă îngustă. 4. Electroforeza bidimensională A doua migrare se face în LSS sau DSS. 5. Electroforeza capilară (EC) Migrarea se face în tub capilar de silice topită, umplut cu o fază conducătoare de electroliți sau cu un gel. Capetele capilarelor se introduc în două bacuri conținând o soluție apoasă de electrolit. Diferențele de potențial de circa 30 kV sunt furnizate de o sursă de alimentare. Electrozii din platină se introduc în cele două bacuri. La un pH=3
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
silice se încarcă negativ determinând acumularea de sarcini pozitive la suprafața electrolitului. Se formează un flux electroosmotic în direcția catodului. Componente: capilar, electrolit tampon, electrozi, sursă de voltaj înalt, detector UV, instrument de măsurare. Mediul de migrare: electroliți tampon sau gel impregnat cu o asemenea soluție. Soluției i se pot adăuga: - solvenți organici: acetonitril; - agenți tensioactivi: LSS, SDS; - ciclodextrine; - agenți complexanți, chelatizanți sau sechestranți; - compuși ionici ce conțin cromofori, fluorofori. Migrarea particulelor: Tehnicile electroforezei capilare 1. Electroforeza capilară zonală Este o
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
sunt formate din lanțuri, cu extremitățile hidrofobe spre interior, iar extremitățile hidrofile încărcate electric orientate spre exterior. Micelele se dezagregă și se refac continuu. Ele înglobează analiți hidrofobi pe care îi antrenează în migrarea lor electroforetică. 3. Electroforeza capilară pe gel (GCE) - Gelul de agaroză 0,5 - 2% Unitate de agaroză - Gelul de poliacrilamidă 3,5 - 20% Atenție la faptul că poliacrilamida este un neurotoxic. Pentru separarea electroforetică a proteinelor se folosește așa numita electroforeză pe gel de poliamidă cu dodecilsulfatul
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
din lanțuri, cu extremitățile hidrofobe spre interior, iar extremitățile hidrofile încărcate electric orientate spre exterior. Micelele se dezagregă și se refac continuu. Ele înglobează analiți hidrofobi pe care îi antrenează în migrarea lor electroforetică. 3. Electroforeza capilară pe gel (GCE) - Gelul de agaroză 0,5 - 2% Unitate de agaroză - Gelul de poliacrilamidă 3,5 - 20% Atenție la faptul că poliacrilamida este un neurotoxic. Pentru separarea electroforetică a proteinelor se folosește așa numita electroforeză pe gel de poliamidă cu dodecilsulfatul de sodiu
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
hidrofile încărcate electric orientate spre exterior. Micelele se dezagregă și se refac continuu. Ele înglobează analiți hidrofobi pe care îi antrenează în migrarea lor electroforetică. 3. Electroforeza capilară pe gel (GCE) - Gelul de agaroză 0,5 - 2% Unitate de agaroză - Gelul de poliacrilamidă 3,5 - 20% Atenție la faptul că poliacrilamida este un neurotoxic. Pentru separarea electroforetică a proteinelor se folosește așa numita electroforeză pe gel de poliamidă cu dodecilsulfatul de sodiu, SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis) SDS este
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
3. Electroforeza capilară pe gel (GCE) - Gelul de agaroză 0,5 - 2% Unitate de agaroză - Gelul de poliacrilamidă 3,5 - 20% Atenție la faptul că poliacrilamida este un neurotoxic. Pentru separarea electroforetică a proteinelor se folosește așa numita electroforeză pe gel de poliamidă cu dodecilsulfatul de sodiu, SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis) SDS este un agent tensioactiv anionic care în amestec cu proteinele denaturează structura secundară și terțiară a acestora și încarcă fiecare proteină cu sarcină negativă. SDS liniarizează
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
Unitate de agaroză - Gelul de poliacrilamidă 3,5 - 20% Atenție la faptul că poliacrilamida este un neurotoxic. Pentru separarea electroforetică a proteinelor se folosește așa numita electroforeză pe gel de poliamidă cu dodecilsulfatul de sodiu, SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis) SDS este un agent tensioactiv anionic care în amestec cu proteinele denaturează structura secundară și terțiară a acestora și încarcă fiecare proteină cu sarcină negativă. SDS liniarizează proteinele și contribuie la migrarea lor în funcție de mărimea lor. Se utilizează
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
și terțiară a acestora și încarcă fiecare proteină cu sarcină negativă. SDS liniarizează proteinele și contribuie la migrarea lor în funcție de mărimea lor. Se utilizează 1.4 g SDS la 1 g proteine. Proteinele denaturate se aplică pe stratul de gel de poliamidă și se imersează în soluția tampon. Proteinele scurte migrează mai ușor prin porii gelului. 4. Electroforeza capilară în contracurent Se introduce în soluția tampon folosită, a unor aditivi numiți “selectori chiralici”: ciclodextrine, eteri coroană, proteine, hidrați de carbon
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
la migrarea lor în funcție de mărimea lor. Se utilizează 1.4 g SDS la 1 g proteine. Proteinele denaturate se aplică pe stratul de gel de poliamidă și se imersează în soluția tampon. Proteinele scurte migrează mai ușor prin porii gelului. 4. Electroforeza capilară în contracurent Se introduce în soluția tampon folosită, a unor aditivi numiți “selectori chiralici”: ciclodextrine, eteri coroană, proteine, hidrați de carbon, antibiotice macrociclice (vancomicina, rifampicine), complecși metalici enantioselectivi. APLICAȚIILE ELECTROFOREZEI Determinarea mobilității electroforetice Mobilitatea μ a unei
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
enzimatice cu puterea de detecție luminometrică. A fost aplicată la determinarea glucozei prin intermediul glucozoxidazei, a formolului prin aldehidoxidază, a aminoacizilor prin L-aminoacidoxidaza cu o limită de detecție în jurul a 0,1 ng. Ozonul provoacă chemiluminiscența rodaminei B, adsorbită pe un gel de silicie. Limita de detecție este mai mică de 1 ppm și metoda este selectivă față de SO2, H2S, NO2, NH3, Cl2, H2O2. Determinarea substanțelor organice Reacția luminol-H2O2 este catalizată de metaloproteine ca feritina, citocromii, mioglobina, hemoglobina, catalaza etc. Astfel, se
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
produce o umflare a granulelor, cu absorbția unei cantități mari de apă. Continuînd încălzirea, granulele de amidon se umflă la maximum și cînd se atinge temperatura critică de gelatinizare se dezintegrează, eliberînd amiloză și amilopectină și formează soluții vîscoase sau geluri. Umflarea granulelor de amidon este însoțită de creșterea viscozității fluidului. Gelificarea amidonului nu are loc la o temperatură fixă ci într-un interval mai mult sau mai puțin larg de temperatură. Prin răcirea dispersiei de amidon gelificat aceasta se transformă
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
de amidon este însoțită de creșterea viscozității fluidului. Gelificarea amidonului nu are loc la o temperatură fixă ci într-un interval mai mult sau mai puțin larg de temperatură. Prin răcirea dispersiei de amidon gelificat aceasta se transformă într- un gel rigid, omogen, translucid, denumit coca. Formarea acesteia este rezultatul pierderii mobilității moleculelor dizolvate, datorită apariției unor rețele tridimensionale formate din lanțurile de amiloză unite între ele prin legături de hidrogen, prin intermediul apei. Amilopectina, fiind puternic ramificată, împiedică asocierea fizică dintre
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
rezultatul pierderii mobilității moleculelor dizolvate, datorită apariției unor rețele tridimensionale formate din lanțurile de amiloză unite între ele prin legături de hidrogen, prin intermediul apei. Amilopectina, fiind puternic ramificată, împiedică asocierea fizică dintre moleculele de amidon și prin urmare împiedică formarea gelului. Fenomenul este comparabil cu cristalizarea, avînd loc, ca și aceasta, la temperatură fixă. Agregatul de macromolecule rigide, imobile, ce ia astfel naștere este neregulat și înglobează mari cantități de apă. Gelurile de amidon pot fi rapid distruse prin amestecare, fiind
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
dintre moleculele de amidon și prin urmare împiedică formarea gelului. Fenomenul este comparabil cu cristalizarea, avînd loc, ca și aceasta, la temperatură fixă. Agregatul de macromolecule rigide, imobile, ce ia astfel naștere este neregulat și înglobează mari cantități de apă. Gelurile de amidon pot fi rapid distruse prin amestecare, fiind geluri tixotropice. Dacă după amestecare fluidul se lasă în repaus, gelul se formează din nou. Atît la geluri cît și la dispersiile de amidon încălzite deasupra temperaturii de gelatinizare și rămase
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
Fenomenul este comparabil cu cristalizarea, avînd loc, ca și aceasta, la temperatură fixă. Agregatul de macromolecule rigide, imobile, ce ia astfel naștere este neregulat și înglobează mari cantități de apă. Gelurile de amidon pot fi rapid distruse prin amestecare, fiind geluri tixotropice. Dacă după amestecare fluidul se lasă în repaus, gelul se formează din nou. Atît la geluri cît și la dispersiile de amidon încălzite deasupra temperaturii de gelatinizare și rămase fluide la răcire poate avea loc fenomenul de retrogradare care
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
la temperatură fixă. Agregatul de macromolecule rigide, imobile, ce ia astfel naștere este neregulat și înglobează mari cantități de apă. Gelurile de amidon pot fi rapid distruse prin amestecare, fiind geluri tixotropice. Dacă după amestecare fluidul se lasă în repaus, gelul se formează din nou. Atît la geluri cît și la dispersiile de amidon încălzite deasupra temperaturii de gelatinizare și rămase fluide la răcire poate avea loc fenomenul de retrogradare care constă în formarea de cristale prin agregarea amilozei. Amidonul nu
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
imobile, ce ia astfel naștere este neregulat și înglobează mari cantități de apă. Gelurile de amidon pot fi rapid distruse prin amestecare, fiind geluri tixotropice. Dacă după amestecare fluidul se lasă în repaus, gelul se formează din nou. Atît la geluri cît și la dispersiile de amidon încălzite deasupra temperaturii de gelatinizare și rămase fluide la răcire poate avea loc fenomenul de retrogradare care constă în formarea de cristale prin agregarea amilozei. Amidonul nu este o substanță unitară, ci un amestec
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
4-α-glicozidice din interiorul macromoleculelor de amiloză și amilopectină, în prima etapă a hidrolizei are loc o fragmentare rapidă la dextrine. In etapele următoare, dextrinele sunt hidrolizate complet numai la concentrații ridicate de α-amilază. In aceste condiții, sub acțiunea α-amilazei, viscozitatea gelului de amidon scade brusc, se produce lichefierea amidonului . In privința stabilității termice, în momentul de față se produc α-amilaze cu un grad superior de stabilitate termică, obținute din bacterii facultativ termofile, cum ar fi: B. coagulans, B. stearothermophilus, B. licheniformis
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
carboxil acționează ca bază, ușurînd atacul apei la C1, punerea în libertate a maltozei și regenerarea enzimei. Gruparea X are rolul de a orienta substratul în zona activă. Activitatea enzimatică este condiționată de existența grupelor -SH. Sub acțiunea β-amilazei, viscozitatea gelului de amidon scade lent, iar în mediul de reacție apare, încă de la început, mult zahăr reducător. Legăturile α-1,6-glucozidice din amilopectină sunt hidrolizate sub acțiunea α-1,6- glucozidazei (glucoamilaza sau amiloglucozidaza) sau a pullulanazei (enzima R). Amiloglucozidaza are un domeniu
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
microorganismele de infecție și celulele slabe de drojdie. Cercetările efectuate în industria alcoolului au condus la utilizarea drojdiilor imobilizate, realizându-se o creștere cu 20÷25% a producției de alcool. Imobilizarea celulelor de drojdie se face prin înglobarea lor în geluri de natură diferită, care reprezintă materiale inerte în raport cu produsele din mediu: alginat de aluminiu sau calciu, polimeri sintetici, parasilicați etc. Performanțele cele mai bune se obțin cînd se lucrează cu culturi pure de drojdii, obținute plecînd de la o singură celulă
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
două trepte. Materia primă este spălată și mărunțită, iar apoi este uscată și tratată cu soluție de acid sulfuric 25÷90%. Se produce “decristalizarea” biomasei lignocelulozice (separarea celulozei și hemicelulozei de lignină) cu formarea unei mase eterogene cu aspect de gel care include material solid. Acest gel este diluat cu acid și este încălzit la 80÷100°C, cînd are loc hidroliza parțială a celulozei și hemicelulozei conținute în materia brută. Se filtrează, precipitatul fiind trimis la a doua etapă de
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
și mărunțită, iar apoi este uscată și tratată cu soluție de acid sulfuric 25÷90%. Se produce “decristalizarea” biomasei lignocelulozice (separarea celulozei și hemicelulozei de lignină) cu formarea unei mase eterogene cu aspect de gel care include material solid. Acest gel este diluat cu acid și este încălzit la 80÷100°C, cînd are loc hidroliza parțială a celulozei și hemicelulozei conținute în materia brută. Se filtrează, precipitatul fiind trimis la a doua etapă de hidroliză, desfășurată în condiții asemănătoare cu
Ob?inere. Carburant. B?uturi alcoolice by Eugen Horoba () [Corola-publishinghouse/Science/83660_a_84985]
-
prin calcule de mecanică moleculară (MM+) cu ajutorul unui program Hyperchem, Versiunea 4.0 [51]. Viscozitatea inerenta a polimerilor a fost in domeniul 0,47-0,66 dl/g (Tabelul 2.1). Masele moleculare ale polimerilor s-au determinat prin cromatografie pe gel permeabil (GPC). Masele moleculare medii gravimetrice (Mw) au fost în domeniul 85500-107000 g/mol, masele moleculare medii numerice (Mn) au variat în intervalul 44300-69600 g/mol iar indicele de polidispersitate (Mw/Mn) în limitele 1,70-1,93 (Tabelul 2.1
POLIETERI HETEROCICLICI TERMOSTABILI by Corneliu HAMCIUC, Elena HAMCIUC () [Corola-publishinghouse/Science/91504_a_92977]