2,688 matches
-
virale etc.). Oncoproteinele interferă cu produșii protooncogenelor, perturbându-le activitatea și astfel protooncogenele, deși normale, nu-și mai pot îndeplini rolul reglator al proliferării celulare, deși continuă să codifice sinteza unor proteine specifice normale. Prima oncogenă identificată în carcinomul de vezică urinară de la om, s-a dovedit a fi un omolog celular al oncogenei H-ras, din genomul virusului sarcomului Harvey. Tot astfel, protooncogena activată ca oncogenă în carcinomul pulmonar la om reprezintă omologul oncogenei virale a sarcomului Kirsten, fiind desemnată K-ras
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
repetiția Alu, caracteristică genomului uman. Această repetiție este întâlnită cu o frecvență foarte mare: una la aproximativ fiecare 1000 de baze. Aproape fiecare genă umană poate avea o etichetă Alu. Markerul Alu este lincat cu oncogena activă în neoplazia de vezică urinară, la om. În linia celulară umană tumorală desemnată EJ ca și în neoplazia de vezică urinară se află o oncogenă ce reprezintă omologul celular al oncogenei ras din genomul retrovirusului sarcomului Harvey. Oncogena celulară din linia EJ a fost
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
aproximativ fiecare 1000 de baze. Aproape fiecare genă umană poate avea o etichetă Alu. Markerul Alu este lincat cu oncogena activă în neoplazia de vezică urinară, la om. În linia celulară umană tumorală desemnată EJ ca și în neoplazia de vezică urinară se află o oncogenă ce reprezintă omologul celular al oncogenei ras din genomul retrovirusului sarcomului Harvey. Oncogena celulară din linia EJ a fost desemnată c-ras. Diferența structurală dintre gena celulară ras activă (din celulele tumorale) și gena ras
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
ea însăși suferă modificare structural-funcțională sub acțiunea unor factori mutageni și/sau carcinogeni. Și în acest caz, oncogena celulară este o copie imperfectă a protooncogenei normale. Un exemplu de conversie protooncogenă-oncogenă celulară, consecutivă mutației punctiforme, este oferit de carcinomul de vezică urinară. În celulele epiteliului vezicii urinare a fost identificată protooncogena c-ras. Printr-o Imunogenetică și Oncogenetică 343 transversie G→T, codonul din poziția 12, GGC devine codon GTC. În molecula de ARNm, ca o consecință a acestei mutații, codonul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
sub acțiunea unor factori mutageni și/sau carcinogeni. Și în acest caz, oncogena celulară este o copie imperfectă a protooncogenei normale. Un exemplu de conversie protooncogenă-oncogenă celulară, consecutivă mutației punctiforme, este oferit de carcinomul de vezică urinară. În celulele epiteliului vezicii urinare a fost identificată protooncogena c-ras. Printr-o Imunogenetică și Oncogenetică 343 transversie G→T, codonul din poziția 12, GGC devine codon GTC. În molecula de ARNm, ca o consecință a acestei mutații, codonul CCG, din poziția 12, codificator
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
organizarea genetică virală. Localizarea cromozomală a protooncogenelor s-a realizat cu ajutorul tehnicilor moderne de biologie moleculară: hibridarea moleculară in situ, hibridarea somatică și bandarea cromozomală. Astfel, în genomul uman au fost identificate protooncogene corespondente pentru oncogenele responsabile de carcinomul de vezică urinară, neuroblastom și neoplazie de colon. Ele au o organizare similară (au câte 4 exoni) și codifică pentru o proteină cu o greutate moleculară de 21 000 de Daltoni, desemnată P 21. S-a constatat că P 21 este specifică
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
000 de Daltoni, desemnată P 21. S-a constatat că P 21 este specifică pentru fiecare tip de neoplazie. Analiza proteinelor codificate de oncogene virale din genomul unor retrovirusuri a evidențiat unele similitudini cu proteina P 21. Oncogena carcinomului de vezică urinară prezintă asemănări cu oncogena virală v-ras din genomul virusului Harvey, iar oncogena neoplaziei pulmonare umane este strâns înrudită cu oncogena v-ras din genomul virusului sarcomului Kirsten. Protooncogenele celulare c-ras aparțin unei familii multigenice, întâlnită la diferite
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
încă elucidat, însă, se presupune că el implică activarea căii de transducție a semnalului, atunci când receptorul este activat . Expresia HER-2 poate fi detectată în blaștii pacienților cu neoplasme hematologice, inclusiv leucemia acută limfoblastică. Supraexpresia her-2 apare în cancerele mamare, ale vezicii urinare, cervicale, colorectale, gastrice, pulmonare, ovariene, de prostată, pancreatice, glandei salivare, capului si gâtului, glandei tiroide precum și în osteosarcoame, meduloblastoame și sarcoame sinoviale. Această supraexpresie este asociată cu un prognostic nefavorabil, timp liber de boală scurt, apariția recidivelor și metastazelor
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
proteine, pe care îl au proteinele mutante P53 dominant inhibitoare produse de mutantele genei p53. Interpretarea calității de genă supresoare de tumori pe care o are gena p53 este susținută de inactivarea sa într-o serie de neoplasme: carcinom al vezicii urinare, de sân, colorectal, esofagian, hepatic, pulmonar, ovarian, tumori cerebrale, sarcoame, limfoame și leucemii. Regiunea cromozomală 17p13 este frecvent deletată în carcinoame de colon și de rect. Deleția 17p conduce la pierderea unei copii a genei p53, iar copia rămasă
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de proteina mutantă P53 și, fiind transmise în generațiile celulare succesive, ele accelerează și accentuează starea de instabilitate genomică caracteristică transformării maligne. Mutațiile punctiforme și delețiile genei p53 au fost identificate în neoplazii umane de colon, esofag, ficat, plămân, sân, vezică urinară etc., iar mutațiile acestei gene în linia germinală stau la baza predispoziției la sindromul Li-Fraumeni. Mutațiile de substituție ale genei p53 determină o creștere remarcabilă a duratei medii funcționale a proteinei P53 mutante, având drept consecință acumularea sa intracelulară
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
normale Rb1 conduce la realizarea condiției homozigote și manifestarea transformării maligne. Din această cauză, genele supresoare de tumori au fost numite și oncogene recesive. Clonarea genei de susceptibilitate la retinoblastom a fost dificilă, deoarece, spre deosebire de oncogena inductoare a neoplaziei de vezică urinară, de exemplu, a cărei prezență a fost ușor detectată prin proprietățile tumorigene pe care le conferă celulelor în care este transferată, gena Rb1 își exprimă efectul numai atunci când este absentă din celulă, printr-o mutație de tip deleție (fig
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
este implicată și în osteosarcoame. Mutațiile Rb1 moștenite sunt rare și retinoblastomul apare cu o frecvență de 1 la 20 000 de copii, dar astfel de mutații sunt implicate și în alte cancere precum cele pulmonare, de sân și de vezică urinară. Aceste condiții maligne sunt de o mie de ori mai frecvente decât retinoblastomul și mutațiile genei Rb1 sunt mai curând somatice decât moștenite pe linia germinală. Asemenea tumori sunt comune la pacienții care supraviețuiesc retinoblastomului moștenit. Produsul genei Rb
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
oncogene celulare ras activate din protooncogene sunt fuzionate cu celule normale, hibrizii celulari nu sunt tumorigeni și continuă să exprime proteina 21 activată la nivel ridicat în locații corespunzătoare din membrana plasmatică. Și linia celulară umană EJ de carcinom de vezică urinară care conține o oncogenă c-Na-ras endogenă activată, fuzionată cu fibroblaste normale diploide dă naștere la hibrizi celulari care păstrează fenotipul transformat în cultură, dar sunt complet netumorigenici, ceea ce amintește de hibrizii HeLa x fibroblaste. Puțini segreganți tumorigenici au putut
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Modificările cromozomale s-au remarcat și în tumorile maligne ale aparatului respirator și ale aparatului digestiv, ale ficatului, pancreasului, aparatului genital masculin (prostată) și feminin, ale glandelor mamare, ovarului, colului uterin, corpului uterin, în tumori ale aparatului urinar, ale rinichilor, vezicii urinare, ale sistemului nervos (glioame cerebrale și meningioame), ale glandelor endocrine, în tumori oculare și ale pielii etc. de la om la care s-au remarcat, pe lângă celule cu complemente cromozomale normale și celule cu diferite anomalii structural- sau numeric cromozomale
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
în numeroase tulpini de virus al sarcomului murin (Ellis și colab., 1981). În anul 1981, două echipe de cercetători, una condusă de R. Weinberg și E. Ruley, cealaltă condusă de Cooper, au realizat transferul ADN extras din carcinom uman de vezică urinară, linia EJ, în celule NIH3T3, constatându-se inducerea transformării maligne a acestora din urmă. Experimentul a oferit primul exemplu de oncogenă umană, biologic activă. ADN extras din celule tumorale și utilizat în transgeneză induce transformarea malignă, pe când ADN extras
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și probabil este necesară pentru acest proces. Toate aceste cercetări și constatări au generat ideea utilizării componentelor telomerazice ca ținte în cadrul unei strategii terapeutice a maladiei canceroase. Cercetările lui Koga și colaboratorii (2001) au dovedit eficiența tratamentului celulelor canceroase de vezică urinară in vivo și in vitro cu un oligoriboucleotid (ARN) antisens 2-5A pentru componenta ARN a telomerazei. În anul 1998, s-a estimat că numărul de noi cazuri de cancer de vezică urinară în SUA depășea 54 000 și dintre
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
2001) au dovedit eficiența tratamentului celulelor canceroase de vezică urinară in vivo și in vitro cu un oligoriboucleotid (ARN) antisens 2-5A pentru componenta ARN a telomerazei. În anul 1998, s-a estimat că numărul de noi cazuri de cancer de vezică urinară în SUA depășea 54 000 și dintre ele aproximativ 12 500 au fost letale. Tumorile superficiale, incluzând carcinoamele in situ pot fi tratate chirurgical prin abordare transuretrală și / sau instilare intravezicală a vaccinului pe bază de bacil Calmette-Guérin (BCG
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și numai astfel ele continuă să prolifereze (Kim și colab., 1994; Shay și Wright, 1996; Bacchetti și colab., 1995). Cercetările efectuate de Liu și colaboratorii (1998) au demonstrat existența unei activități telomerazice în peste 90% dintre cazurile de cancer de vezică urinară, nu însă și în țesuturile normale ale acestui organ. De aici s-a tras concluzia că telomeraza ar putea constitui un obiectiv promițător pentru terapia țintită a cancerului de vezică urinară. Koga și colaboratorii (2001), de Kondo și colaboratorii
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
telomerazice în peste 90% dintre cazurile de cancer de vezică urinară, nu însă și în țesuturile normale ale acestui organ. De aici s-a tras concluzia că telomeraza ar putea constitui un obiectiv promițător pentru terapia țintită a cancerului de vezică urinară. Koga și colaboratorii (2001), de Kondo și colaboratorii (1998), precum și de Mukai și colaboratorii (2000) au vizat sinteza unui oligoribonucleotid antisens împotriva componentei ARN a telomerazei umane (hTR) legat la un 2-5A (oligoadenilat fosforilat în 5’ și lincat 2
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
anumite ținte lincate la 2-5A determină degradarea ARN țintă cu mare specificitate și cu eficiență de cel puțin 20 de ori mai mare față de a ARN antisens simplu. Efectul antitumoral al 2-5A-anti-hTR este specific celulelor telomerază pozitive din cancerul de vezică urinară. Koga și colaboratorii (2001) au lucrat cu liniile celulare UM-UC-2, UM-UC-3, UM-UC-6, UMUC-9, UM-UC-14, T24 și RT4 care au activitate telomerazică pusă în evidență cu ajutorul protocolului amplificării repetiției telomerice (TRAP). Această activitate telomerazică a fost evidențiată în toate liniile
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
lipofectamina (fig. 32.6). Activitatea telomerazică internă standard (ITAS) a fost detectată în extractele din toate liniile celulare, ceea ce exclude posibilitatea unor rezultate fals negative, datorate inhibitorilor Taq polimerazei. Când s-a examinat efectul 2-5A-anti hTR asupra celulelor canceroase de vezică urinară s-au folosit celulele fibroblaste WI38 în calitate de martor, cu valoare de celule negative pentru telomerază. Într-un alt experiment, cele șapte linii celulare de cancer de prostată au fost tratate cu un ARN antisens de 19 mer, împotriva componentei
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
numit lipofectamină, constatându-se că tratamentul cu 2-5A anti-hTR (0,5 µM) în prezența a 0,4 µL lipofectamină / 100 µL DMEM a fost cel mai eficient. Acest tratament, efectuat timp de patru zile a redus viabilitatea celulelor canceroase de vezică urinară la 21-55%, în toate liniile celulare (fig. 32.7), dar liniile UM-UC-14 și RT4 au prezentat o oarecare rezistență la acest tratament comparativ cu celelalte cinci linii celulare. Efectul citotoxic al oligonucleotidului spA4-anti-(M6)hTR a fost mai slab
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
88%, în cazul ARN antisens normal, și la 86%, în cazul celui cu erori de împerechere (Koga și colab., 2001). Autorii trag concluzia că aceste rezultate atestă faptul că tratamentul cu 2-5A anti-hTR este eficient în tratarea celulelor canceroase de vezică urinară, dar nu afectează dramatic viabilitatea celulelor normale (fibroblaste) în care nu se evidențiază o activitate telomerazică, în condiții normale, ceea ce constituie un argument privind declararea acțiunii specifice a ARN antisens față de componenta ARN telomerazică și a specificității tratamentului cu
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
normale (fibroblaste) în care nu se evidențiază o activitate telomerazică, în condiții normale, ceea ce constituie un argument privind declararea acțiunii specifice a ARN antisens față de componenta ARN telomerazică și a specificității tratamentului cu 2-5A-anti-hTR asupra celulelor tumorale din cancerul de vezică urinară. Tratamentul timp de patru zile cu spA4-anti hTR aplicat liniilor celulare canceroase a inhibat semnificativ activitatea telomerazică la 75%, în comparație cu tratamentul doar cu lipofectamină sau cu spA4-anti (M6)hTR (fig. 32.7). Kano și colaboratorii (1998) au demonstrat că
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
evaluată cu ajutorul unui Hemocitometru B10-TEK. Activitatea telomerazică a celulelor netratate UM-UC-2 a fost considerată 1,0 și aceasta a fost comparată pentru fiecare probă (din Koga și colab., 2001). Spre a constata dacă 2-5A-anti-hTR a determinat apoptoza celulelor canceroase de vezică urinară, Koga și colaboratorii (2001) au aplicat procedeul utilizării de către enzima terminal deoxiribonucleoridiltransferază (Tdt) a capetelor crestăturii monocatenare și marcajul radioactiv, cunoscut sub acronimul de procedeu TUNEL. Ei au constatat că în celulele tratate doar cu lipofectamină colorarea este foarte
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]