13,026 matches
-
Constantă de viteză de eliminare (pierdere) (k2) : valoare numerică ce definește viteza de scădere a concentrației substanței de testat la/în pești (sau în țesuturile specifice ale acestora), ca urmare a transferării lor dintr-un mediu care conține substanță de testat, într-un mediu care nu conține această substanță (k2 este exprimată în zile-1). 1.3. Principiul metodei de testare Testul se împarte în două faze: fază de expunere (absorbție) și de post-expunere (eliminare). În cursul fazei de absorbție, grupele separate
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
care nu conține respectivă substanță, pentru faza de eliminare. Această din urmă este întotdeauna necesară, în afară de cazul în care absorbția substanței în timpul fazei de absorbție a fost nesemnificativă (de exemplu, daca BCF este mai mic de 10). Concentrația substanței de testat la/în pești (sau în țesuturile specificate ale acestora) este urmărită de-a lungul celor două faze ale testului. În afară de cele două concentrații de testare, un grup martor de pești este menținut în condiții identice, cu excepția substanței de testat, care
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
de testat la/în pești (sau în țesuturile specificate ale acestora) este urmărită de-a lungul celor două faze ale testului. În afară de cele două concentrații de testare, un grup martor de pești este menținut în condiții identice, cu excepția substanței de testat, care este absența. Acest lucru este necesar pentru stabilirea eventualelor relații între efectele nefaste observate la testul de bioconcentrare și acest grup martor, precum și pentru deducerea concentrației de bază a substanței de testat. Faza de absorbție durează 28 de zile
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
menținut în condiții identice, cu excepția substanței de testat, care este absența. Acest lucru este necesar pentru stabilirea eventualelor relații între efectele nefaste observate la testul de bioconcentrare și acest grup martor, precum și pentru deducerea concentrației de bază a substanței de testat. Faza de absorbție durează 28 de zile, în cazul în care nu se demonstrează mai devreme că a fost atins echilibrul. Se poate estima durată fazei de absorbție și timpul necesar pentru obținerea stării staționare, cu ajutorul ecuațiilor din anexă 3
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
fost atins echilibrul. Se poate estima durată fazei de absorbție și timpul necesar pentru obținerea stării staționare, cu ajutorul ecuațiilor din anexă 3. Perioadă de epurare începe, așadar, cu transferarea peștilor în alt recipient curat, conținând același mediu, cu excepția substanței de testat. Atunci când devine posibil, se calculează factorul de bioconcentrare, de preferință sub formă de raport (BCFSS) de concentrație de pești (Cf) și în apă (CW), în starea de echilibru aparent și în calitate de factor de bioconcentrare cinetica; și BCFk că și raport
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
pierdere) (sau constantele, atunci când este vorba de modele complexe), factorul de bioconcentrare și, daca este posibil, limitele de încredere pentru fiecare dintre acești parametrii, sunt calculate pornind de la modelul care descrie cel mai fidel măsurătorile de concentrație a substanței de testat, în pești și în apă. Factorul BCF se exprimă în funcție de greutatea totală umedă de pește. Cu toate acestea, pentru anumite studii pot fi utilizate țesuturi sau organe specifice (de exemplu, mușchi, ficat), daca peștii sunt suficient de mari sau dacă
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
cu substanțe foarte lipofile (adică având log POW >3), bioconcentrarea trebuie exprimată în funcție de masă corporală totală și de conținutul lipidic. Dacă este posibil, conținutul lipidic se va stabili folosind același material biologic care a servit la determinarea concentrației substanței de testat. 1.4. Informații despre substanță de testat Înainte de a efectua experiență de bioconcentrare, următoarele informații trebuie cunoscute despre substanță de testat : a) solubilitatea în apă; b) coeficientul de partiție octanol-apă POW (de asemenea, KOW, determinat printr-o metodă HPLC în
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
POW >3), bioconcentrarea trebuie exprimată în funcție de masă corporală totală și de conținutul lipidic. Dacă este posibil, conținutul lipidic se va stabili folosind același material biologic care a servit la determinarea concentrației substanței de testat. 1.4. Informații despre substanță de testat Înainte de a efectua experiență de bioconcentrare, următoarele informații trebuie cunoscute despre substanță de testat : a) solubilitatea în apă; b) coeficientul de partiție octanol-apă POW (de asemenea, KOW, determinat printr-o metodă HPLC în A.8); c) hidroliza; d) fototransformarea în
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
este posibil, conținutul lipidic se va stabili folosind același material biologic care a servit la determinarea concentrației substanței de testat. 1.4. Informații despre substanță de testat Înainte de a efectua experiență de bioconcentrare, următoarele informații trebuie cunoscute despre substanță de testat : a) solubilitatea în apă; b) coeficientul de partiție octanol-apă POW (de asemenea, KOW, determinat printr-o metodă HPLC în A.8); c) hidroliza; d) fototransformarea în apă, la radiația solară sau solară artificială simulata și în condițiile de radiații ale
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
asemenea, trebuie cunoscută toxicitatea relativă pentru specia de pești utilizată pentru test, de preferință LC50 asimptotica (adică, independentă de timp). Este indispensabil să se utilizeze o metodă analitică potrivită, cu exactitatea, precizia și sensibilitatea cunoscute pentru a cuantifica substanță de testat în soluția de testare și în materialul biologic, precum și informații precise legate de prepararea și păstrarea eșantioanelor. De asemenea, trebuie să fie cunoscută limită de detecție analitică a substanței de testat, atât în apă cât și în țesuturile peștilor. Dacă
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
precizia și sensibilitatea cunoscute pentru a cuantifica substanță de testat în soluția de testare și în materialul biologic, precum și informații precise legate de prepararea și păstrarea eșantioanelor. De asemenea, trebuie să fie cunoscută limită de detecție analitică a substanței de testat, atât în apă cât și în țesuturile peștilor. Dacă se utilizează o substanță de testat marcată cu 14C, trebuie cunoscut procentajul de radioactivitate asociat impurităților. 1.5. Condițiile de validitate ale testării Pentru că un test să fie valabil, trebuie îndeplinite
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
în materialul biologic, precum și informații precise legate de prepararea și păstrarea eșantioanelor. De asemenea, trebuie să fie cunoscută limită de detecție analitică a substanței de testat, atât în apă cât și în țesuturile peștilor. Dacă se utilizează o substanță de testat marcată cu 14C, trebuie cunoscut procentajul de radioactivitate asociat impurităților. 1.5. Condițiile de validitate ale testării Pentru că un test să fie valabil, trebuie îndeplinite următoarele condiții: - variația de temperatură să fie mai mică de ± 2 °C - concentrația oxigenului dizolvat
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
Condițiile de validitate ale testării Pentru că un test să fie valabil, trebuie îndeplinite următoarele condiții: - variația de temperatură să fie mai mică de ± 2 °C - concentrația oxigenului dizolvat să nu coboare sub 60 % din nivelul de saturație - concentrația substanței de testat în vase să fie menținută la ± 20 % din media valorilor măsurate în timpul fazei de absorbție - mortalitatea și alte efecte sau maladii indezirabile, înregistrate la peștii martor sau la cei supuși testului, să fie mai mici de 10 %, la sfârșitul testului
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
însă pentru un test dat, pH-ul trebuie să rămână în interiorul unei plaje de ± 0,5 unități de pH. Pentru a avea siguranță că apa de diluție nu influențează în mod nejustificat rezultatele studiului (de exemplu, prin complexarea substanței de testat) sau că nu afectează negativ performanțele stocului de pești, se vor preleva cu regularitate eșantioane pentru analiză. De exemplu, este oportun să se efectueze această o dată la trei luni, interval în care o apă de diluție își păstrează calitățile, relativ
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
pot rări, iar intervalele dintre ele pot fi mărite (de exemplu, la șase luni). Conținutul în particule naturale, precum și în carbon organic total (TOC) din apa de diluție vor fi cât mai mici posibil, pentru a evita absorbția substanței de testat în materiile organice, ceea ce i-ar putea reduce biodisponibilitatea (4). Valoarea maximă admisă este de 5 mg/l pentru particulele de materie (materia uscată nu trece printr-un filtru de 0,45 µm) și de 2 mg/l, pentru carbonul
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
apei în carbon organic total trebuie să fie cât mai mici posibil. Pe parcursul testului, concentrația în carbon organic din recipient nu trebuie să depășească cu mai mult de 10 mg/l (± 20 %), concentrația de carbon organic provenit din substanță de testat și, eventual, pe cea a agentului de dizolvare. 1.7.3. Soluții de testat Se prepară o soluție stoc de substanță de testat, la concentrația dorită. De preferință, soluția stoc va fi preparată prin simpla amestecare ori agitare a substanței
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
concentrația în carbon organic din recipient nu trebuie să depășească cu mai mult de 10 mg/l (± 20 %), concentrația de carbon organic provenit din substanță de testat și, eventual, pe cea a agentului de dizolvare. 1.7.3. Soluții de testat Se prepară o soluție stoc de substanță de testat, la concentrația dorită. De preferință, soluția stoc va fi preparată prin simpla amestecare ori agitare a substanței de testat în apa de diluție. Nu se recomandă utilizarea solvenților sau a dispersanților
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
depășească cu mai mult de 10 mg/l (± 20 %), concentrația de carbon organic provenit din substanță de testat și, eventual, pe cea a agentului de dizolvare. 1.7.3. Soluții de testat Se prepară o soluție stoc de substanță de testat, la concentrația dorită. De preferință, soluția stoc va fi preparată prin simpla amestecare ori agitare a substanței de testat în apa de diluție. Nu se recomandă utilizarea solvenților sau a dispersanților (agenți de dizolvare); se poate totuși recurge la aceștia
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
eventual, pe cea a agentului de dizolvare. 1.7.3. Soluții de testat Se prepară o soluție stoc de substanță de testat, la concentrația dorită. De preferință, soluția stoc va fi preparată prin simpla amestecare ori agitare a substanței de testat în apa de diluție. Nu se recomandă utilizarea solvenților sau a dispersanților (agenți de dizolvare); se poate totuși recurge la aceștia, în anumite situații, pentru producerea soluției stoc, la concentrația necesară. Solvenții susceptibili de a fi utilizați sunt: etanol, metanol
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
două săptămâni înaintea testului și nici în cursul acestuia. 1.8. Efectuarea testului 1.8.1. Testul preliminar Se poate dovedi util un test preliminar pentru optimizarea condițiilor de execuție ale testului real, în ceea ce privește, de exemplu, selecția concentrațiilor substanței de testat, duratele fazelor de absorbție și de eliminare. 1.8.2. Condiții de expunere 1.8.2.1. Durată fazei de absorbție Se poate estima durată fazei de absorbție,cu ajutorul unui test preliminar (de exemplu, plecând de la un studiu anterior sau
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
modelul peștilor în compartiment unic, după o cinetica de ordinul întâi se utilizează faze de epurare mai lungi, pentru determinarea constantelor de viteză de eliminare. Această perioadă de timp poate fi totuși controlată prin intermediul perioadei în care concentrația substanței de testat din pești se situează deasupra limitei de detecție analitice. 1.8.2.3. Numărul de pești pentru test Alegerea numărului de pești pentru concentrațiile de testare se face astfel încât să fie disponibili cel puțin patru pești pentru fiecare eșantion, la
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
0,1 - 1,0 g de pește (produs viu) la litru de apă și pe zi, este cel recomandat pentru toate cazurile. Se pot realiza încărcări mai rapide, dacă se demonstrează că se poate ajusta concentrația necesară de substanță de testat, în limitele de ± 20 % și că, de asemenea, concentrația de oxigen dizolvat, nu coboară sub 60 % din nivelul de saturație. La alegerea regimului de încărcare, se va ține cont de habitatul normal al speciei. De exemplu, peștii bentonici pot necesită
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
6. Iluminare și temperatura În general, fotoperioada este de 12 -16 ore, la temperatura (± 2 °C) corespunzătoare speciei utilizate (vezi anexă 2). Tipul și caracteristicile iluminării vor fi clar definite. Se va ține seama de eventualele fototransformări ale substanței de testat, în condițiile de radiație ale studiului. Iluminarea nu trebuie să expună peștii la fotoproduse nenaturale. În anumite cazuri, poate fi esențială utilizarea de filtre, pentru blocarea radiației UV mai mică de 290 nm. 1.8.2.7. Concentrațiile testului Peștii
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
În anumite cazuri, poate fi esențială utilizarea de filtre, pentru blocarea radiației UV mai mică de 290 nm. 1.8.2.7. Concentrațiile testului Peștii sunt expuși la o reînnoire continuă de cel puțin două concentrații apoase ale substanței de testat. În mod normal, concentrația mare (sau cea mai mare) a substanței de testat, stabilită la aproximativ 1 % din LC50 acută asimptotica și de cel puțin 10 ori mai mare decât limită să de detecție în apă, prin metoda de analiză
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
va depăși solubilitatea substanței de testare. Atunci când se utilizează un agent de dizolvare, concentrația acestuia nu trebuie să depășească 0,1 ml/l și trebuie să fie aceeași, în toate recipientele pentru test. Contribuția să, adăugată celei a substanței de testat, la conținutul global de carbon organic din apa pentru test trebuie să fie cunoscute. Cu toate acestea, se va face tot posibilul să nu se recurgă la astfel de materiale. 1.8.2.8. Martori Apă de diluție martor sau
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]