14,361 matches
-
5) (1) (5), se poate renunța la supunerea eșantioanelor la astfel de tratamente. În schimb, trebuie avut grijă ca rezervoarele să fie cât mai curate posibil, iar conținutul în carbon organic va fi supravegheat pe întreaga durată a fazelor de absorbție și de eliminare. Pentru fiecare eșantionare se prelevează din fiecare incinta de testare un numar convenabil de pești (în mod normal, cel puțin patru). Peștii prelevați vor fi clătiți rapid cu apă, uscați cu ajutorul hârtiei absorbante și sacrificați în mod
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
instantaneu, într-o manieră cât mai umană posibil, după care se cântăresc. Este preferabil să se analizeze peștii și apa, imediat după eșantionare, pentru a se evita orice degradare sau alte pierderi și pentru a calcula cu aproximație regimurile de absorbție și de purificare, în timp ce testul continuă să se desfășoare. De asemenea, analiza imediată evita întârzierea constatării atingerii unui platou. În lipsa unei analize imediate, eșantioanele se vor conserva după o metodă convenabilă. Înainte de începerea studiului, se vor aduna toate datele cu privire la
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
corectate după compararea cu valorile furnizate de martori și cu concentrația naturală a substanței de testat. Pe tot parcursul testării, eșantioanele de pești și de apă sunt astfel manipulate, încât să se minimizeze contaminările și pierderile (rezultate, de exemplu, de absorbția prin materialul de eșantionare). 1.8.4.4. Analiza eșantioanelor de pești Dacă se utilizează materiale marcate radioactiv, se poate analiza marcarea radioactivă totală (respectiv, compușii de origine și metaboliții) sau purifica eșantioanele, astfel încât compusul de origine să poată fi
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
se poate analiza marcarea radioactivă totală (respectiv, compușii de origine și metaboliții) sau purifica eșantioanele, astfel încât compusul de origine să poată fi analizat separat. În plus, principalii metaboliți pot fi caracterizați fie la starea staționara, fie la sfarsitul fazei de absorbție, optându-se pentru varianta cea mai scurtă. Dacă, în funcție de reziduurile marcate radioactiv totale, BCF este ≥ 1 000 %, ar fi indicat (și, pentru anumite categorii de produse chimice, cum ar fi pesticidele, chiar recomandat cu insistență), să se identifice și cuantifice
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
față de cel inițial, cu mai mult de ± 25 %. De asemenea, se va indica procentajul de solide din țesuturi, pentru a permite conversia concentrației lipidice a bazei umede la cea a bazei uscate. 2. DATE 2.1. Prelucrarea rezultatelor Curbă de absorbție a substanței de testat va rezulta din traseul concentrației sale în funcție de timp, la pești (sau în țesuturile specifice), în perioada fazei de absorbție, folosind o scară aritmetică. În cazul în care curbă atinge un platou, adică adopta aproximativ un traseu
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
lipidice a bazei umede la cea a bazei uscate. 2. DATE 2.1. Prelucrarea rezultatelor Curbă de absorbție a substanței de testat va rezulta din traseul concentrației sale în funcție de timp, la pești (sau în țesuturile specifice), în perioada fazei de absorbție, folosind o scară aritmetică. În cazul în care curbă atinge un platou, adică adopta aproximativ un traseu asimptotic la axa timpului, starea staționara BCFSS se va calcula după cum urmează: Cf stare staționara (valori medii) Cw stare staționara (valori medii) Atunci când
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
două constante cinetice de ordinul întâi. Constantă de viteză de eliminare (k2) se determina, în general, plecând de la curbă de eliminare (adică de la un traseu al descreșterii concentrației substanței de testat din pești, în funcție de timp). Apoi, constantă de viteză de absorbție (k1) va fi calculată în funcție de k2 și de o valoare a Cf derivată din curbă de absorbție (vezi și anexă 5). Metodă cea mai bună pentru obținerea BCFk și a constantelor de viteză k1 și k2 este aceea care recurge
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
de la curbă de eliminare (adică de la un traseu al descreșterii concentrației substanței de testat din pești, în funcție de timp). Apoi, constantă de viteză de absorbție (k1) va fi calculată în funcție de k2 și de o valoare a Cf derivată din curbă de absorbție (vezi și anexă 5). Metodă cea mai bună pentru obținerea BCFk și a constantelor de viteză k1 și k2 este aceea care recurge la metode informatice neliniare de estimare a parametrilor (11). Alternativ, se pot utiliza metode grafice pentru calculul
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
opinia unui biostatistician. 2.2. Interpretarea rezultatelor Rezultatele se vor interpreta cu precauție, atunci când concentrațiile măsurate de soluție de testare se află la valori apropiate de limita de detecție a metodei de analiză. Claritatea cu care sunt definite curbele de absorbție și de eliminare, dovedește bună calitate a datelor de bioconcentrare. Variația constantelor de absorbție/eliminare între cele două concentrații de testare trebuie să fie mai mică de 20 %. Diferențele considerabile observate la ratele de absorbție/eliminare, între cele două teste
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
concentrațiile măsurate de soluție de testare se află la valori apropiate de limita de detecție a metodei de analiză. Claritatea cu care sunt definite curbele de absorbție și de eliminare, dovedește bună calitate a datelor de bioconcentrare. Variația constantelor de absorbție/eliminare între cele două concentrații de testare trebuie să fie mai mică de 20 %. Diferențele considerabile observate la ratele de absorbție/eliminare, între cele două teste de concentrație vor fi înregistrate și explicate, daca este posibil. În general, limită de
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
care sunt definite curbele de absorbție și de eliminare, dovedește bună calitate a datelor de bioconcentrare. Variația constantelor de absorbție/eliminare între cele două concentrații de testare trebuie să fie mai mică de 20 %. Diferențele considerabile observate la ratele de absorbție/eliminare, între cele două teste de concentrație vor fi înregistrate și explicate, daca este posibil. În general, limită de încredere pentru BCF se apropie de ± 20 %, în studiile bine concepute. 3. RAPORT Procesul-verbal de testare va cuprinde următoarele informații: 3
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
și caracteristicile iluminării utilizate și fotoperioada sau fotoperioadele, - conceptul testului (de exemplu, numărul și dimensiunea incintelor de testare, regimul de înlocuire al volumelor de apă, numărul de subeșantioane și de pești per subeșantion, număr de concentrații testate, durata fazelor de absorbție și de epurare, frecvență eșantionării pentru pești și pentru apa), - metodă de preparare a soluțiilor mama și frecvența de reînnoire (se vor indică, daca este cazul, agentul de dizolvare, concentrația să și contribuția sa la conținutul în carbon organic al
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
3.4. Rezultate - rezultatele studiilor preliminare efectuate, - mortalitatea peștilor martor și a peștilor din fiecare incinta de testare, precum și orice comportament anormal observat, - conținutul lipidic al peștilor (dacă a fost determinat cu ocazia experimentului), - curbele (din toate măsurătorile efectuate) exprimând absorbția și eliminarea produselor chimice experimentale la pești, timpul de acces la starea staționara, - Cf și CW (cu deviația standard și, eventual, intervalul) la momentul fiecărui eșantionări [Cf se exprimă în µg/g de produs viu (ppm), din întreg peștele sau
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
Valorile CW pentru seria martor (de asemenea, se indică concentrația de bază), - factorul de bioconcentrare în starea staționara (BCFSS) și/sau factorul de concentrare cinetica (BCFk) și, daca este cazul, limitele de încredere la 95 % ale constantelor de viteză de absorbție și de eliminare (pierdere), toate exprimate în raport cu întregul corp și cu conținutul total de lipide, dacă acesta este măsurat, ale peștelui (ori ale anumitor țesuturi), limitele de încredere și deviația standard (dacă este disponibilă), metode de calcul/analiza ale rezultatelor
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
în laboratoare, în condițiile în care maladiile și paraziții, se află sub control; așadar, animalele utilizate vor fi în stare bună de sănătate, cu ascendentă genetică cunoscută. Pot fi găsiți aproape în întreaga lume. ANEXĂ 3 Estimarea duratei fazelor de absorbție și de eliminare 1. Prognoză pentru durată fazei de absorbție Înainte de executarea testării, se poate estima k2 și deci un procentaj de timp necesar pentru a ajunge la starea staționara pornind de la relațiile empirice între k2 și coeficientul de partiție
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
află sub control; așadar, animalele utilizate vor fi în stare bună de sănătate, cu ascendentă genetică cunoscută. Pot fi găsiți aproape în întreaga lume. ANEXĂ 3 Estimarea duratei fazelor de absorbție și de eliminare 1. Prognoză pentru durată fazei de absorbție Înainte de executarea testării, se poate estima k2 și deci un procentaj de timp necesar pentru a ajunge la starea staționara pornind de la relațiile empirice între k2 și coeficientul de partiție n-octanol / apă (POW) sau între k2 și solubilitatea în apă
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
n = 36) Aceste relații se aplică numai produselor chimice ale căror valori log Pow se situează între 2 și 6,5 (4). Timpul necesar pentru atingerea unui anumit procentaj din starea staționara va rezulta din ecuația cinetica generală, indicându-se absorbția și eliminarea (cinetica de ordinul I), prin aplicarea estimării k2: unde, daca Cw este constant : (ecuația 3) Atunci cand ne apropiem de starea staționara (ț → ∞ ), ecuația 3 se reduce (5) (6) la: sau Raportul k1/k2 · CW se apropie astfel, de
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
sau (ecuația 4) Timpul necesar pentru atingerea unui anumit procentaj din starea staționara, poate fi prevăzut grație ecuației 4, atunci când k2 a fost în prealabil estimat cu ajutorul ecuațiilor 1 sau 2. Cu titlu informativ, durata optimă statistică a fazei de absorbție, care permite obținerea de rezultate statistice acceptabile (BCFk), este perioada necesară pentru că curbă logaritmului concentrației de substanță de testatădin pești, trasata în funcție de timp în scară lineara, să ajungă la punctul median, adică la 1,6/k2 sau la 80 % din
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
staționara, fără a depăși 3,0/k2 sau 95 % din starea staționara (7). Timpul până la atingerea a 80 % din starea staționara, este (ecuația 4): unde (ecuația 5) Similar, pentru 95 % din starea staționara : (ecuația 6) De exemplu, durata fazei de absorbție (abs.) a unei substanțe de testat, având un log Pow = 4, va fi (folosind ecuațiile 1, 5 și 6): adică 2,45 zile (59 ore) sau adică 4,60 zile (110 ore) În același mod, pentru o substanță de testat
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
va fi (folosind ecuațiile 1, 5 și 6): adică 2,45 zile (59 ore) sau adică 4,60 zile (110 ore) În același mod, pentru o substanță de testat cu s = 10-5 mol/l [ log (s) = - 5,0 ], durata de absorbție va fi (folosind ecuațiile 1, 2, 5 și 6 ): adică 6,5 zile (156 ore) sau adică 12,2 zile (293 ore) De asemenea, se poate utiliza expresia alternativă: pentru calculul timpului de atingere a stării staționare (4). 2. Estimarea
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
atingere a stării staționare (4). 2. Estimarea duratei fazei de eliminare Se poate estima, de asemenea, timpul necesar pentru că substanță de testat ajunsă în corpul peștilor să se reducă la un anumit procentaj din concentrația inițială, grație ecuației generale, ilustrând absorbția și eliminarea (cinetica de ordinul I) (1) (8). Pentru faza de eliminare, CW este considerată nulă. Ecuația poate fi redusă la: sau unde Cf,0 este concentrația la începutul perioadei de eliminare. Se va obține apoi o eliminare de 50
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
0 este concentrația la începutul perioadei de eliminare. Se va obține apoi o eliminare de 50 %, la momentul (t50) : sau În același mod, 95 % din faza de eliminare va fi atinsă la : Dacă ne plasăm la 80 % din faza de absorbție pentru prima perioadă (1,6 / k2) și la 95 % din pierderi pentru faza de eliminare (3,0/k2), atunci fază de eliminare este aproximativ dublul duratei fazei de absorbție. Cu toate acestea, este important de menționat că aceste estimări se
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
fi atinsă la : Dacă ne plasăm la 80 % din faza de absorbție pentru prima perioadă (1,6 / k2) și la 95 % din pierderi pentru faza de eliminare (3,0/k2), atunci fază de eliminare este aproximativ dublul duratei fazei de absorbție. Cu toate acestea, este important de menționat că aceste estimări se bazează pe ipoteza că schemele de absorbție și eliminare urmează o cinetica de ordinul întâi. Dacă nu este cazul, se vor folosi modele mai complexe [de exemplu, referință (1
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
și la 95 % din pierderi pentru faza de eliminare (3,0/k2), atunci fază de eliminare este aproximativ dublul duratei fazei de absorbție. Cu toate acestea, este important de menționat că aceste estimări se bazează pe ipoteza că schemele de absorbție și eliminare urmează o cinetica de ordinul întâi. Dacă nu este cazul, se vor folosi modele mai complexe [de exemplu, referință (1)]. Bibliografie (pentru anexă 3) (1) Spacie A. and Hamelink J.L. (1982) Alternative models for describing the bioconcentration of
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]
-
4 Exemple teoretice de grafice de eșantionare pentru testele de bioconcentrare ale substanțelor cu log Pow = 4 Prelevări de pești Calendar de eșantionare Număr eșantioane de apă Număr de pești pe eșantion Frecvență minimă cerută (zile) Eșantionare suplimentară Faza de absorbție -1 0 2 (*) 2 se adaugă 45-80 de pești I 0,3 0,4 2 (2) 4 (4) ÎI 0,6 0,9 2 (2) 4 (4) III 1,2 1,7 2 (2) 4 (4) IV 2,4 3
jrc3693as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88853_a_89640]