160 matches
-
se vor asocia, spre a realiza homoduplexuri (A-A’ și respectiv a-a’) și heteroduplexuri (A-a’ și respectiv a-A’). Mobilitățile fragmentelor reasociate (dublu-catenare) vor fi variabile în funcție de secvența lor. Pe această cale se pot compara pattern-urile mobilităților electroforetice ale alelelor donorului și receptorului, spre a se deduce dacă există potrivire alelică. Aceste pattern-uri electroforetice obținute fie pe calea SSCP, fie pe calea analizei heteroduplexului sunt complexe, dar totodată edificatoare asupra potrivirii alelelor HLA de la donor cu acelea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
și respectiv a-A’). Mobilitățile fragmentelor reasociate (dublu-catenare) vor fi variabile în funcție de secvența lor. Pe această cale se pot compara pattern-urile mobilităților electroforetice ale alelelor donorului și receptorului, spre a se deduce dacă există potrivire alelică. Aceste pattern-uri electroforetice obținute fie pe calea SSCP, fie pe calea analizei heteroduplexului sunt complexe, dar totodată edificatoare asupra potrivirii alelelor HLA de la donor cu acelea de la receptor. Dar, identificarea în sine a alelelor specifice HLA existente la o anumită persoană este mult
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
polimorfismului codonilor (degenerarea sau redundanța codului genetic universal). Dacă încărcătura electrică a aminoacidului care a înlocuit pe cel inițial este diferită de a celui care a fost substituit, rezultă o variantă hemoglobinică ce poate fi recunoscută după modificarea mobilității sale electroforetice, iar mutantele hemoglobinice care nu și-au modificat sarcina electrică și nici mobilitatea electroforetică, pot fi recunoscute numai dacă au indus modificarea funcției hemoglobinei și au determinat o anumită boală - o hemoglobinopatie. Dar, majoritatea mutațiilor hemoglobinice, indiferent dacă au modificat
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
a înlocuit pe cel inițial este diferită de a celui care a fost substituit, rezultă o variantă hemoglobinică ce poate fi recunoscută după modificarea mobilității sale electroforetice, iar mutantele hemoglobinice care nu și-au modificat sarcina electrică și nici mobilitatea electroforetică, pot fi recunoscute numai dacă au indus modificarea funcției hemoglobinei și au determinat o anumită boală - o hemoglobinopatie. Dar, majoritatea mutațiilor hemoglobinice, indiferent dacă au modificat sau nu încărcătura electrică și mobilitatea electroforetică, nu modifică funcția hemoglobinei, fiind compatibile cu
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
au modificat sarcina electrică și nici mobilitatea electroforetică, pot fi recunoscute numai dacă au indus modificarea funcției hemoglobinei și au determinat o anumită boală - o hemoglobinopatie. Dar, majoritatea mutațiilor hemoglobinice, indiferent dacă au modificat sau nu încărcătura electrică și mobilitatea electroforetică, nu modifică funcția hemoglobinei, fiind compatibile cu o sănătate cvasinormală a purtătorilor. Substituțiile de aminoacizi ce au loc spre capetele catenelor hemoglobinice (domeniile 1 și 3) determină mai puține perturbații ale funcției acestora decât cele în care are loc înlocuirea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
hematiilor pacienților cu anemie falciformă ar putea fi intim asociat cu starea și natura hemoglobinei în interiorul eritrocitului. Comparând-o cu hemoglobina persoanelor normale, utilizând electroforeza zonală Tiselius, autorii au stabilit că „rezultatele indicau că există o diferență semnificativă între mobilitățile electroforetice ale hemoglobinei ce provenea din eritrocite ale indivizilor normali și ale hemoglobinei celor cu anemie falciformă” (Pauling și colab., 1949). La heterozigoți, aproximativ 25-40% din hemoglobină este asemănătoare cu cea identificată la persoanele cu anemie falciformă - manifestă, restul de 60-75
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
hemoglobina normală se află acidul glutamic, iar în hemoglobina din celulele falciforme se află valina. Faptul că acidul glutamic are două grupări COOH, iar valina, numai una, face ca încărcătura negativă a celor doi aminoacizi să difere, ceea ce explică diferențele electroforetice dintre hemoglobina normală și hemoglobina din anemia falciformă. Spre deosebire de alte substituții de aminoacizi identificate în catenele globinice ale diferitelor variante hemoglobinice, substituția acidului glutamic din poziția 6 a catenei β, cu valina, caracteristică hemoglobinei HbS, influențează solubilitatea și cristalizarea acestei
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
fragment de ADN, lung de 376 perechi de nucleotide, datorită faptului că în urma mutației s-a pierdut situsul de restricție Dde I. Indivizii heterozigoți (purtători) pentru mutația βS, cu formula genotipică βAβS pot fi detectați prin revelarea a trei benzi electroforetice, una corespunzătoare fragmentului lung de 376 p.n, reprezentând alela mutantă dintr-unul din cei doi cromozomi omologi ai perechii 11, și alte două, de 201 p.n. și 175 p.n., corespunzătoare alelei normale βA, din cel de al doilea cromozom
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
formă de disc plat. La persoanele purtătoare ale genei mutante β6 S, 60% din hemoglobină este normală și 40% este de tip mutant, aici fiind vorba de un raport de codominanță între alela normală β6A și alela mutantă β6S. Analiza electroforetică a ADN permite evidențierea mutației punctiforme ce are loc în gena pentru catena β, în cazul anemiei falciforme. Această mutație schimbă o pereche A-T într-una T-A la nivel de secvență genică din ADN, afectând cel de al
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
unor secvențe repetitive de tip palindrom (secvențe cu bisimetrie rotatorie), se poate realiza o cartare de restricție a ADN uman. Fragmentele de ADN uman rezultate în urma acțiunii restrictazelor sunt supuse electroforezei în gel de poliacrilamidă. Fragmentele ADN migrează în câmpul electroforetic în funcție de dimensiunile lor și de sarcina electrică, având în vedere că grupările fosfat conferă moleculei încărcătură negativă. Restrictele de ADN uman, migrate în gel se transferă pe un filtru de nitroceluloză, ce urmeaza a fi hibridizat cu sonde specifice. Pentru
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
în urma acțiunii unor enzime de restricție sau pot fi utilizate metode directe de secvențiere. Evidentierea directă a unei deleții totale sau parțiale a unei gene α-globinice se poate realiza prin aplicarea tehnicii Southern blot, deoarece această mutație determină modificarea profilului electroforetic evidențiat printr-o asemenea tehnică. Bunăoară, cele două gene α-globinice α 1 și α2 sunt localizate într-un același fragment de restricție de 14,5 kb (fig. 16.26). Dacă în urma unei deleții parțiale sunt detașate aproximativ 4,5 kb
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
utilizării tehnicii Southern blot în identificarea indirectă a unei mutații prin aplicarea analizei RFLP, reprezentată de cunoașterea prealabilă a fragmentelor care conțin mutația. Diferența observată nu reprezintă rezultatul unei mutații, ca în cazul demonstrării directe a unei deleții. Dacă modelul electroforetic din tehnica Southern blot al ADN de la persoanele afectate de o hemoglobinopatie nu diferă de acela evidențiat la persoanele neafectate, înseamnă că această metodă de analiză nu este relevantă pentru cazurile investigate și alta este cauza condiției patologice. Utilizarea acestor
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
endonucleaza de restricție Dde I care recunoaște tocmai secvența alterată din mutația HbS. Utilizarea tehnicilor moleculare aplicate în diagnoza prenatală a hemoglobinopatiilor a reprezentat prima aplicare directă a cunoștințelor de Genetică moleculară în medicina umană, în investigațiile clinice. Ameliorarea metodelor electroforetice a permis identificarea a peste 300 de variante hemoglobinice umane în anii ’60 ai secolului XX. În anul 1961, Braunitzer și colaboratorii au stabilit întreaga secvență de aminoacizi a catenelor hemoglobinice, putându-se astfel evidenția multe modificări apărute în secvența
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
fragmentului, va fi generat un fragment mai lung, de 1,35 kb, rezultând trei genotipuri posibile: homozigot normal (βAβA), heterozigot (βAβS) și homozigot mutant (βSβS) așa cum se prezintă în figura 16.28. În figura 16.28 B se prezintă profilul electroforetic rezultat prin aplicarea Southern blotting-ului fragmentelor de restricție rezultate în urma acțiunii enzimei de restricție Dde I, prin care se pot evidenția direct cele trei genotipuri posibile: homozigot normal (βAβ A), heterozigot (βAβS) și homozigot mutant (βSβS), această tehnică permițând stabilirea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
2.725 Analizele cromozomiale computerizate 2.726 Alte examene ale structurilor nucleare și cromozomiale 2.727 Alte investigații genetice 2.7270 A.D.N din celule sau probe de țesut 2.7271 Scindarea A.D.N. cu ajutorul unei enzime litice, inclusiv fragmentarea electroforetică Hibridizarea moleculară A.D.N. cu molecule marcate, 2.7272 eventual și evaluarea calitativă ulterioară prin autoradiografie sau procedee non-radiografice 2.7273 Amplificarea A.D.N. prin reacție în lanț a polimerazei (P.C.R.) 2.7274 Electroforeza acizilor nucleici grei în gel de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/184209_a_185538]
-
2.725 Analizele cromozomiale computerizate 2.726 Alte examene ale structurilor nucleare și cromozomile 2.727 Alte investigații genetice 2.7270 A.D.N din celule sau probe de țesut 2.7271 Scindarea A.D.N. cu ajutorul unei enzime litice, inclusiv fragmentarea electroforetică Hibridizarea moleculară A.D.N. cu molecule marcate, 2.7272 eventual și evaluarea calitativă ulterioara prin autoradiografie sau procedee non-radiografice 2.7273 Amplificarea A.D.N. prin reacție în lanț a polimerazei (P.CR.) 2.7274 Electroforeza acizilor nucleici grei în gel de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/184210_a_185539]
-
2.725 Analizele cromozomiale computerizate 2.726 Alte examene ale structurilor nucleare și cromozomiale 2.727 Alte investigații genetice 2.7270 A.D.N din celule sau probe de țesut 2.7271 Scindarea A.D.N. cu ajutorul unei enzime litice, inclusiv fragmentarea electroforetica Hibridizarea moleculară A.D.N. cu molecule marcate, 2.7272 eventual și evaluarea calitativa ulterioară prin autoradiografie sau procedee non-radiografice 2.7273 Amplificarea A.D.N. prin reacție în lanț a polimerazei (P.CR.) 2.7274 Electroforeza acizilor nucleici grei în gel de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/234267_a_235596]
-
2.725 Analizele cromozomiale computerizate 2.726 Alte examene ale structurilor nucleare și cromozomiale 2.727 Alte investigații genetice 2.7270 A.D.N din celule sau probe de țesut 2.7271 Scindarea A.D.N. cu ajutorul unei enzime litice, inclusiv fragmentarea electroforetica Hibridizarea moleculară A.D.N. cu molecule marcate, 2.7272 eventual și evaluarea calitativa ulterioară prin autoradiografie sau procedee non-radiografice 2.7273 Amplificarea A.D.N. prin reacție în lanț a polimerazei (P.CR.) 2.7274 Electroforeza acizilor nucleici grei în gel de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/234266_a_235595]
-
2.725 Analizele cromozomiale computerizate 2.726 Alte examene ale structurilor nucleare și cromozomiale 2.727 Alte investigații genetice 2.7270 A.D.N din celule sau probe de țesut 2.7271 Scindarea A.D.N. cu ajutorul unei enzime litice, inclusiv fragmentarea electroforetica Hibridizarea moleculară A.D.N. cu molecule marcate, 2.7272 eventual și evaluarea calitativa ulterioară prin autoradiografie sau procedee non-radiografice 2.7273 Amplificarea A.D.N. prin reacție în lanț a polimerazei (P.CR.) 2.7274 Electroforeza acizilor nucleici grei în gel de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/234265_a_235594]
-
2.725 Analizele cromozomiale computerizate 2.726 Alte examene ale structurilor nucleare și cromozomiale 2.727 Alte investigații genetice 2.7270 A.D.N din celule sau probe de țesut 2.7271 Scindarea A.D.N. cu ajutorul unei enzime litice, inclusiv fragmentarea electroforetica Hibridizarea moleculară A.D.N. cu molecule marcate, 2.7272 eventual și evaluarea calitativa ulterioară prin autoradiografie sau procedee non-radiografice 2.7273 Amplificarea A.D.N. prin reacție în lanț a polimerazei (P.CR.) 2.7274 Electroforeza acizilor nucleici grei în gel de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/234264_a_235593]
-
2.725 Analizele cromozomiale computerizate 2.726 Alte examene ale structurilor nucleare și cromozomiale 2.727 Alte investigații genetice 2.7270 A.D.N din celule sau probe de țesut 2.7271 Scindarea A.D.N. cu ajutorul unei enzime litice, inclusiv fragmentarea electroforetica Hibridizarea moleculară A.D.N. cu molecule marcate, 2.7272 eventual și evaluarea calitativa ulterioară prin autoradiografie sau procedee non-radiografice 2.7273 Amplificarea A.D.N. prin reacție în lanț a polimerazei (P.CR.) 2.7274 Electroforeza acizilor nucleici grei în gel de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/234269_a_235598]
-
2.725 Analizele cromozomiale computerizate 2.726 Alte examene ale structurilor nucleare și cromozomiale 2.727 Alte investigații genetice 2.7270 A.D.N din celule sau probe de țesut 2.7271 Scindarea A.D.N. cu ajutorul unei enzime litice, inclusiv fragmentarea electroforetica Hibridizarea moleculară A.D.N. cu molecule marcate, 2.7272 eventual și evaluarea calitativa ulterioară prin autoradiografie sau procedee non-radiografice 2.7273 Amplificarea A.D.N. prin reacție în lanț a polimerazei (P.CR.) 2.7274 Electroforeza acizilor nucleici grei în gel de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/234268_a_235597]
-
soluție acidă, aminoacizii sub formă de cationi vor migra spre catod (migrare catodică). Sub formă de amfiioni, aminoacizii nu vor migra într un câmp electric, fiind atrași în mod egal spre cei doi poli. Aceste proprietăți stau la baza separării electroforetice a aminoacizilor,deci și a proteinelor, pe baza vitezelor diferite de migrare a acestora în câmpul electric. 4.1.4. Proprietăți chimice ale aminoacizilor Aminoacizii (aa) prezintă reacții chimice pentru grupările funcționale COOH și NH2, cât și reacții specifice pentru
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
netă a moleculei este 0. 4.3.6.2.Comportarea proteinelor într-un câmp electric Fiind încărcate pozitiv sau negativ, proteinele au proprietatea de a migra într-un câmp electric. Această proprietatea se numește electroforeză și stă la baza metodei electroforetice de separare a proteinelor dintr-un amestec pe baza vitezelor diferite de migrare a acestora în câmpul electric. Migrarea proteinelor spre cei 2 poli ai câmpului electric este în funcție de pH-ul soluției tampon care influențează mult gradul de ionizare. Într-
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
catalizează aceeași reacție enzimatică dar care diferă într-o anumită măsură, prin structura componenței proteice. Izoenzimele se deosebesc prin structura primară a catenelor polipeptidice, deci prin secvențializarea aminoacizilor și printr-o serie de proprietăți fizico-chimice: pH optim, mobilitatea în câmpul electroforetic, stabilitatea la căldură. Izoenzimele prezintă afinități diferite pentru același substrat și se comportă diferit față de efectorii alosterici. La enzimele cu structură cuaternară pot apărea izoenzime prin hibridizarea formelor intermediare. Izoenzimele prezintă importanța în reglarea unor metabolisme, în morfogeneză și în
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]