245 matches
-
sisteme procariote și eucariote. La animale, metilarea ADN are loc în special la nivelul dinucleotidelor CpG și există multe argumente că metilarea ADN este implicată în reglarea expresiei genice (Cedar, 1988). Adesea se evidențiază o corelație inversă între nivelul de metilare a citozinei din cadrul unei gene și rata transcrierii sale (Razin, 1988). Genele metilate, neexprimate, pot fi activate prin tratarea celulelor cu inhibitorul metilării 5-azacitidina (5-azaC) (Jones, 1985). Când secvențele genice sunt metilate in vitro și apoi sunt integrate în genomul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
este implicată în reglarea expresiei genice (Cedar, 1988). Adesea se evidențiază o corelație inversă între nivelul de metilare a citozinei din cadrul unei gene și rata transcrierii sale (Razin, 1988). Genele metilate, neexprimate, pot fi activate prin tratarea celulelor cu inhibitorul metilării 5-azacitidina (5-azaC) (Jones, 1985). Când secvențele genice sunt metilate in vitro și apoi sunt integrate în genomul de mamifere, la situsul de integrare cromatina adoptă o conformație inactivă și asemenea secvențe nu sunt exprimate (Keshlet și colab., 1986). Metilarea in
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
inhibitorul metilării 5-azacitidina (5-azaC) (Jones, 1985). Când secvențele genice sunt metilate in vitro și apoi sunt integrate în genomul de mamifere, la situsul de integrare cromatina adoptă o conformație inactivă și asemenea secvențe nu sunt exprimate (Keshlet și colab., 1986). Metilarea in vitro a unor regiuni discrete ale secvenței genice înainte de realizarea transformării celulare a sugerat că metilarea unor situsuri specifice este adesea suficientă spre a bloca expresia genică (Yisraeli și colab., 1988). Genomul multor specii de plante prezintă metilare atât
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
în genomul de mamifere, la situsul de integrare cromatina adoptă o conformație inactivă și asemenea secvențe nu sunt exprimate (Keshlet și colab., 1986). Metilarea in vitro a unor regiuni discrete ale secvenței genice înainte de realizarea transformării celulare a sugerat că metilarea unor situsuri specifice este adesea suficientă spre a bloca expresia genică (Yisraeli și colab., 1988). Genomul multor specii de plante prezintă metilare atât la nivelul dinucleotidului CpG, cât și la nivelul trinucleotidului CpNpG în care N poate fi A, C
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
1986). Metilarea in vitro a unor regiuni discrete ale secvenței genice înainte de realizarea transformării celulare a sugerat că metilarea unor situsuri specifice este adesea suficientă spre a bloca expresia genică (Yisraeli și colab., 1988). Genomul multor specii de plante prezintă metilare atât la nivelul dinucleotidului CpG, cât și la nivelul trinucleotidului CpNpG în care N poate fi A, C sau T și peste 30% dintre resturile C pot fi metilate la anumite specii (Gruenbaum și colab., 1981). Nivelul metilării genelor din
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
plante prezintă metilare atât la nivelul dinucleotidului CpG, cât și la nivelul trinucleotidului CpNpG în care N poate fi A, C sau T și peste 30% dintre resturile C pot fi metilate la anumite specii (Gruenbaum și colab., 1981). Nivelul metilării genelor din T-ADN din celulele cancerului de colet și din elementele transpozabile și genele proteinelor de rezervă se corelează invers cu expresia genică. Genele neexprimate din T-ADN pot fi activate prin tratamentul celulelor transformate cu 5-azacitidină. La porumb
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
genelor din T-ADN din celulele cancerului de colet și din elementele transpozabile și genele proteinelor de rezervă se corelează invers cu expresia genică. Genele neexprimate din T-ADN pot fi activate prin tratamentul celulelor transformate cu 5-azacitidină. La porumb, metilarea ADN reduce afinitatea unei proteine de legare la ADN, față de situsul țintă al acesteia. John și Amasino (1989) au realizat analiza schimbărilor în metilarea ADN legate de schimbările în expresia genică a T-ADN în celulele cancerului de colet. Acest
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Genele neexprimate din T-ADN pot fi activate prin tratamentul celulelor transformate cu 5-azacitidină. La porumb, metilarea ADN reduce afinitatea unei proteine de legare la ADN, față de situsul țintă al acesteia. John și Amasino (1989) au realizat analiza schimbărilor în metilarea ADN legate de schimbările în expresia genică a T-ADN în celulele cancerului de colet. Acest T-ADN conține bacteriooncogene derivate din oncogene vegetale care codifică sinteza unor enzime implicate în biosinteza factorilor de creștere la plante (Weiler și Schroder
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de nucleotide era hipermetilată, autorii au izolat o linie celulară în cadrul căreia au obținut revertanți în care expresia genică a fost reactivată, fie spontan, fie în urma tratamentului cu 5-azacitidină. Această reactivare genică a fost însoțită de modificarea pattern-ului de metilare a genei ipt. Toți revertanții sunt extensiv demetilați în regiunea înconjurătoare a secvenței acestei gene, ceea ce a făcut ca autorii să tragă concluzia că demetilarea care însoțește reactivarea acestei gene nu prezintă specificitate detectabilă de situs în linia celulară investigată
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
supuse reversiei, autorii au estimat că frecvența de reversie este sub 10-6. Toți cei trei revertanți spontani CX2 1, 2 și 3 (CX2SR1, CX2SR2 și CX2SR3) au fost ulterior studiați (John și Amasino, 1989). S-a studiat pattern-ul de metilare la nivelul locusului ipt și ARNm ipt din liniile care au reinițiat spontan expresia T-ADN (CX1, CX2SR1, CX2SR2 și CX2SR3), din două linii în care reexpresia a apărut în urma tratamentului cu 5-azacitidină desemnate CX2AR1 și CX2AR2 și dintr-o
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
fitohormon și este totdeauna asociată cu fenotipul tumoral. În plus, ambele căi ale reversiei (spontană și indusă de 5-azacitidină) au condiționat realizarea unui nivel similar de expresie a oncogenei ipt. Autorii au realizat și un studiu comparativ al pattern-ului metilării ADN de la nivelul secvenței genei ipt cu acela la nivelul regiunilor flancatoare din linia care a conținut un insert T-ADN silențiat (CX2) cu acela întâlnit în liniile care au exprimat ipt, fie spontan, fie sub acțiunea 5-azacitidinei. În cadrul acestui
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
ipt, fie spontan, fie sub acțiunea 5-azacitidinei. În cadrul acestui studiu, ADN a fost clivat cu endonucleaza de restricție BamHI care taie regiunea ipt în două fragmente (fig. 33.11). Fragmentele obținute au fost ulterior supuse digestiei cu enzimele sensibile la metilare Dde I, Hha I, Hpa II, Msp I sau Pst I. Probele restricționate au fost fracționate dimensional prin electroforeză în gel de agaroză după care au fost transferate pe membrane de nylon (blotting) și hibridizate cu probe radioactive complementare cu
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
prin electroforeză în gel de agaroză după care au fost transferate pe membrane de nylon (blotting) și hibridizate cu probe radioactive complementare cu regiunile 5’ (proba 1) și 3’ (proba 2) ale locusului ipt. Situsurile la care enzimele sensibile la metilare au clivat ADN în cadrul fragmentelor BamHI au fost decelate după pattern-ul restrictelor de greutate moleculară redusă care au hibridizat cu probele utilizate. Clivarea la nivelul unuia dintre aceste situsuri de către enzima sensibilă la metilare demonstrează că situsul respectiv nu
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
la care enzimele sensibile la metilare au clivat ADN în cadrul fragmentelor BamHI au fost decelate după pattern-ul restrictelor de greutate moleculară redusă care au hibridizat cu probele utilizate. Clivarea la nivelul unuia dintre aceste situsuri de către enzima sensibilă la metilare demonstrează că situsul respectiv nu conține un rest de citozină metilată, la o poziție inhibitorie pentru enzimă. Rezistența la clivare la un anumit situs este un indiciu că acolo ADN este modificat și clivarea este blocată, după toate probabilitățile, datorită
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
demonstrează că situsul respectiv nu conține un rest de citozină metilată, la o poziție inhibitorie pentru enzimă. Rezistența la clivare la un anumit situs este un indiciu că acolo ADN este modificat și clivarea este blocată, după toate probabilitățile, datorită metilării. Enzimele de restricție isoschizomere Msp I și Hpa II recunosc un singur situs comun în regiunea secvenței genice ipt. În ADN din linia CX2, fragmentul de restricție BamHI de 980 perechi de nucleotide a rămas intact după clivare cu cele
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
primul situs Msp I din aval de regiunea codificatoare a rămas demetilat în toate liniile exprimate, cu excepția liniei CX2AR2 în care aceste situsuri din aval au fost parțial metilate. S-a evidențiat existența unui contrast evident între pattern-ul de metilare a ADN la nivelul locusului ipt din linia CX2 și acela identificat în liniile care au exprimat această genă. În linia CX2, secvența ipt a fost metilată la nivelul oricărui situs analizat. Totuși, în revertanții spontani sau induși cu 5-azacitidină
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
că azbestul activează sau inactivează o mare varietate de gene, incluzând receptorul factorului de creștere epidermal, receptorul pentru insulină și gene reglatoare ale ciclului celular (INK4a/ARF, p16, NF2). Secvența SV40Tag este prezentă frecvent în cazul mezoteliomului pleural malign difuz. Metilarea aberantă RASSF1A, mai frecventă în mezoteliomul epitelial, este corelată cu un prognostic prost [41]. Studii de fluxcitometrie ADN Până la 65% dintre mezotelioame sunt diploide și au rate de proliferare mică [39]. DIAGNOSTIC CLINIC Simptomatologia mezoteliomului pleural malign difuz se datorează
Tratat de chirurgie vol. IV. Chirurgie toracică. by CLAUDIU NISTOR, ADRIAN CIUCHE, TEODOR HORVAT () [Corola-publishinghouse/Science/92103_a_92598]
-
-NH2, -SH, -COOH, mediat de enzimele de fază I: citocromul P450 și epoxid hidroxilazele microzomale;procesul de detoxifiere, mediat de enzimele de fază II: chinin oxidoreductaza 1 (NQ01), Nacetiltransferaza (NAT) și în principal, glutationS-transferazele, care realizează reacții de glucuronidare, sulfatare, metilare sau anilare, prin care se transformă xenobioticele în metaboliți hidrosolubili, care sunt excretați pe cale hepatică sau renală. Variabilitatea expresiei diferitelor enzime de fază I sau II este dependentă de polimorfismele genetice ale genelor care codifică enzimele, cele mai multe fiind rezultatul substituției
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Adrian Covași () [Corola-publishinghouse/Science/92154_a_92649]
-
unei enzime termolabile și cu activitate redusă, iar polimorfismul 1298 A>C determină o substituție a acidului glutamic cu alanina. Polimorfismele în regiunile codante ale MTHFR determină scăderea activității enzimei și se asociază cu creșterea nivelului seric al homocisteinei și metilarea anormală a AND[36]. Genotipul 677 TT conservă doar 30% din activitatea tipului sălbatic (genotipul CC), în timp ce genotipul 677 CT păstrează 65% din activitatea enzimatică [37]. În populația asiatică din Tailanda genotipurile MTHFR 677 TT și 1298 TT analizate izolat
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Adrian Covași () [Corola-publishinghouse/Science/92154_a_92649]
-
microARN-373, datorită unei hipermetilări a insulei CpG, la nivelul regiunii promotoare a genei miR-373 se asociază cu o diferențiere celulară slabă, stadii avansate de boală și supravețuire redusă. În același timp există o suprareglare a MBP2, care favorizează procesul de metilare a insublei CpG [68]. Numeroase molecule miARN sunt identificate la nivelul tisular al CC, intervenind în ciclul celular,proliferare și migrare: miR-421, miR-21, miRNA26a, miR-494), în apoptoză (miR-25, miR-21),chimiorezistență ( miR-21, miR-200b) [69]. TELOMERAZA Telomeraza conține trei elemente structurale:componentul
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Adrian Covași () [Corola-publishinghouse/Science/92154_a_92649]
-
printr-o succesiune de fosforilări rezultă un fenotip proliferativ într-o varietate de sisteme celulare [19]. Activarea aberantă a căii RAS în CHC poate să apară prin intervenția unor variate mecanisme: supraexpresia H-RAS, anomalii ale numărului de copii ale ADN, metilarea aberantă a regiunii promotoare a unor gene cu rol important etc. Mutațiile punctiforme ale genei RAS apar atât în tumorile ce survin în mod natural, cât și în cele induse experimental, ducând la substituții ale aminoacizilor din codonul 12 (N-
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Luminița Leluțiu, Alexandru Irimie () [Corola-publishinghouse/Science/92126_a_92621]
-
și de inhibare a dezvoltării tumorale care ar putea fi utilizat în viitor ca posibilă țintă în terapia cancerului uman [38]. GENELE SUPRESOARE TUMORALE Inactivarea genelor supresoare tumorale poate fi realizată prin mutații, pierderea heterozigozității (LOH), pierderi bialelice sau prin metilarea regiunii promotoare (mecanism epigenetic). Gena TP53 Gena TP53 este localizată pe brațul scurt al cromozomului 17 (17p13.1) și conține o regiune centrală ,,core” sau domeniul de legare la ADN cu rol în activarea transcripției, fiind o zonă țintă pentru
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Luminița Leluțiu, Alexandru Irimie () [Corola-publishinghouse/Science/92126_a_92621]
-
eveniment tardiv în hepatocarcinogeneză. Inițial s-a considerat că în CHC inactivarea CDKN2A este produsă prin deleții homozigote și mutații, însă studiile realizate au arătat că inactivarea genei, care apare în stadiile timpurii ale hepatocarcinogenezei, se realizează în special prin metilarea excesivă a insulelor 5’CpG din regiunea promotoare (exonul 1) și nu este un eveniment specific CHC indus de VHC, aceeași frecvență a hipermetilării regiunii promotoare a genei fiind întâlnită și în cazurile de CHC nonVHC [58]. Inactivarea epigenetică a
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Luminița Leluțiu, Alexandru Irimie () [Corola-publishinghouse/Science/92126_a_92621]
-
tumorală în liniile celulare de CHC, între cele două evenimente genetice fiind descrisă o relație de reciprocitate [59]. În cazul CHC induse prin expunerea la AFB1, concentrația de AFB1 a fost găsită corelată cu rata mutațiilor TP53 și cu statusul metilării genei CDKN2A/p16 [60]. Proteina p21 CIP1/WAF1 un inhibitor Cdk (Cdk2, Cdk4), este codificată de o genă supresoare WAF1/CIP1 tumorală localizată pe cromozomul 6p21.2. P21 blochează activitatea complexului Cdk2:Ciclina E și determină arestul mediat prin p53
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Luminița Leluțiu, Alexandru Irimie () [Corola-publishinghouse/Science/92126_a_92621]
-
caracterul invaziv și metastazant al celulelor tumorale, fiind un eveniment care apare în stadiile incipiente ale hepatocarcinogenezei [62]. Expresia scăzută a p27 a fost descrisă și la pacienții cu ciroză, iar pierderea expresiei p27 este rezultatul unui nivel crescut de metilare la nivelul regiunii promotoare a genei. Inactivarea funcțională prin hipermetilarea genei p27 a fost găsită asociată cu metilarea genei p16 [63]. CDH1 Gena CDH1 localizată pe cromozomul 16q22.1 codifică proteina numită E-caderină, o glicoproteină de adeziune celulară calciu dependentă
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Luminița Leluțiu, Alexandru Irimie () [Corola-publishinghouse/Science/92126_a_92621]