901 matches
-
fie prea mare pentru a mai putea fi amplificat și atunci se produce pierderea lui; deleția unui fragment de ADN purtător de unul sau mai multe situsuri de fixare ale primerilor, poate conduce la absența produsului de amplificare; substituția unei nucleotide, poate influența fixarea unuia sau ambilor primeri la un anumit nivel datorită schimbărilor în omologie, ceea ce poate conduce la prezența sau absența polimorfismelor sau la o schimbare a mărimii fragmentului; inserția sau deleția unui mic fragment de ADN poate duce
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
aplică în cazul substanțelor volatizabile, dar stabile termic, precum și pentru analiza moleculelor polare sau termolabile, în acest din urmă caz nefiind obligatorie derivatizarea prealabilă a analiților. Este important faptul că acest cuplaj se poate adapta și utiliza pentru analiza peptidelor, nucleotidelor, nucleozidelor și a altor molecule biologice și pentru moleculele de substanțe medicamentoase, în special pentru antibiotice. În cazul acestui cuplaj este relativ dificil să se realizeze și să se stăpânească interfața dintre HPLC și MS, mai ales atunci când se utilizează
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
Cele 23 perechi au lungimea brațelor și modelul benzilor diferite (codul bară/ Botez, 2006). Diagnosticul prenatal prin analiza ADN/DNA (metode) Detectarea directă a mutației: Endonucleazele de restricție (enzime bacteriene care secționează ADN-ul la nivelul unor secvențe specifice de nucleotide). Analiza cu probe de oligonucleotide alele specifice (secvențe sintetice comune de nucleotide complementare alelei normale/ mutante). Detectarea indirectă: Distribuția transmiterii polimorfismelor DNA legate de locul mutației. Diagnosticul prenatal al bolilor metabolice Orice mutație unică poate fi diagnosticată in utero. Testarea
Asistenţa la naştere în prezentaţie craniană şi pelvină by Mihai Botez, Vasile Butnar, Adrian Juverdeanu () [Corola-publishinghouse/Science/305_a_1432]
-
Botez, 2006). Diagnosticul prenatal prin analiza ADN/DNA (metode) Detectarea directă a mutației: Endonucleazele de restricție (enzime bacteriene care secționează ADN-ul la nivelul unor secvențe specifice de nucleotide). Analiza cu probe de oligonucleotide alele specifice (secvențe sintetice comune de nucleotide complementare alelei normale/ mutante). Detectarea indirectă: Distribuția transmiterii polimorfismelor DNA legate de locul mutației. Diagnosticul prenatal al bolilor metabolice Orice mutație unică poate fi diagnosticată in utero. Testarea ADN este disponibilă curent pentru 47 de boli monogenice și posibilă pentru
Asistenţa la naştere în prezentaţie craniană şi pelvină by Mihai Botez, Vasile Butnar, Adrian Juverdeanu () [Corola-publishinghouse/Science/305_a_1432]
-
diferă Între ele prin cel puțin un caracter, produsul Încrucișării lor se cheamă hibrid și este heterozigot (ab sau ba). Molecula de ADN trebuie considerată ea Însăși un hibrid, pentru că este compusă din două lanțuri complementare de unități elementare, numite nucleotide, reunite Într-o dublă spirală. Fiecare dintre aceste lanțuri servește drept matrice În momentul replicării care duce la duplicarea cromozomilor În cadrul diviziunii celulare. Crearea de hibrizi moleculari Între lanțuri complementare de acizi nucleici este mecanismul fundamental care asigură funcționarea genelor
Dicționarul alterității și al relațiilor interculturale by Gilles Ferreol () [Corola-publishinghouse/Science/1934_a_3259]
-
amplificat (fig. 17.1). Amplificarea unor secvențe endogene este indusă prin selecția celulelor pentru rezistență la anumiți agenți cu efect mutagen sau carcinogen sau cu efect citostatic. Astfel, methotrexatul (mtx) blochează metabolismul folatului, un precursor în sinteza bazelor azotate din nucleotidele ADN. Liniile celulare de ovar de hamster chinezesc (CHO) supuse unor concentrații progresiv ridicate de mtx, devin rezistente la acest medicament citostatic, prin mutații care modifică activitatea enzimei dihidrofolatreductază (DHFR). Ca alternativă la modificarea activității enzimatice DHFR se înregistrează o
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
eficiente în inducerea stării de transformare malignă a unei celule normale, ca de exemplu, oncogenele ras și myc, sau ras și E1A, din adenovirus. În volumul 409, din anul 2001, al revistei Nature, destinat în exclusivitate prezentării schiței secvenței de nucleotide a genomului uman și a problematicii legate de această mare realizare a biologiei moleculare moderne, Futreal și colaboratorii (2001) au scris un articol intitulat „Cancer and genomics” în care se afirmă că identificarea genelor implicate în oncogeneză reprezintă problema centrală
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
diferite) deopotrivă în țesuturi normale și în țesuturi maligne, ceea ce a fost interpretat ca reprezentând false pozitive. Autorii au apreciat că experimentul lor a subestimat cantitatea limitată și calitatea variabilă a secvenței ADN din celulele tumorale. Anomalii în secvența de nucleotide din ADN apar în toate cazurile de cancer. În decursul vieții individuale, ADN din celulele organismului uman este supus acțiunii mutagenilor și suferă erori de replicare care se constituie în schimbări progresive, subtile, în informația genetică a fiecărei celule. Când
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
boli. Au fost identificate peste 100 oncogene dominante și aproximativ 30 oncogene recesive (gene supresoare de tumori). Înainte de punerea la punct a tehnicilor moderne moleculare de identificare a genelor, bazate eminamente pe tehnologia ADN recombinant, hibridizare in situ, secvențiere de nucleotide și amplificare genică in vitro (PCR) se utilizau strategii de cartare genică după care se realiza screening-ul genelor candidat în regiunea pentru mutații în cancer. O asemenea strategie avea multe limitări, generând confuzii și erori. Multe gene ale cancerului nu
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Houston (SUA), conduși de Moon-Shon Tang, au descoperit că un derivat al benzo-pirenului (BP), component al fumului de țigară, este asociat cu producerea neoplaziilor pulmonare. Derivatul este benzopiren-diolepoxidul (BPDE), inductor al mutațiilor la nivelul a trei situsuri ale secvenței de nucleotide a genei p53, genă cu rol esențial în transformarea malignă, consecutiv alterărilor în anumite regiuni ale sale ce reprezintă veritabile „pete fierbinți” mutaționale. BPDE acționează specific asupra zonelor „fierbinți” ale secvenței de nucleotide a genei p53. Inducerea neoplaziilor experimentale sub
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
nivelul a trei situsuri ale secvenței de nucleotide a genei p53, genă cu rol esențial în transformarea malignă, consecutiv alterărilor în anumite regiuni ale sale ce reprezintă veritabile „pete fierbinți” mutaționale. BPDE acționează specific asupra zonelor „fierbinți” ale secvenței de nucleotide a genei p53. Inducerea neoplaziilor experimentale sub acțiunea carcinogenilor chimici a permis să se tragă concluzia că procesul carcinogenezei are două etape: inițierea și promovarea tumorii. Inducerea tumorilor tegumentare la șobolan, sub acțiunea unui carcinogen chimic, se poate realiza prin
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
nazo-faringian, precum și cu un tip de neoplazie a limfocitelor B (limfomul Burkitt), virusul HERPES 2 - cu carcinom de col uterin etc. Virusul simian SV40 are ca genom o moleculă dublu-catenară circulară de ADN, cu o secvență de 5243 perechi de nucleotide. Virusul a fost identificat la maimuțe, la care provoacă diferite tipuri de neoplazii, dar nu induce transformarea malignă a celulelor umane în cultură, deși genomul ADN SV40 se integrează ca provirus în diferite situsuri, dintre care cert este cel din
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
reglare a activității sale, sub influența promotorilor sau a amplificatorilor (enhancers) virali. Promotorii și amplificatorii virali sunt uneori atât de puternici, încât pot induce stimularea funcțională a unei protooncogene normale, situată la distanță mare, de ordinul miilor de perechi de nucleotide, condiționând astfel transformarea malignă a celulei. Infecția cronică cu virusul hepatitei B, în al cărui genom nu se află oncogene, induce o dereglare a activității genelor celulare, prin interferența reglatorilor diviziunii celulare cu proteine specific virale, perturbarea acțiunii reglatoare a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
fenotipică, astfel încât ele transformă celula normală într-una malignă. Retrovirusurile transductoare poartă în genomul lor oncogene virale (v-onc), foarte asemănătoare, până la identitate, cu genele corespunzătoare celulare (c-onc). Asemănarea celor două categorii de gene a fost evidențiată prin analiza secvenței de nucleotide și prin tehnicile de hibridare moleculară in situ. Studiile de hibridare moleculară in situ au furnizat argumente potrivit cărora gena v-src a virusului sarcomului Rous (VSR) este de origine celulară: gena v-src a fost preluată din ADN celular și încorporată
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
noi locații cromozomale, în ambianța altor gene celulare. Protooncogena încorporată de un retrovirus este supusă modificărilor calitative (de secvență), precum și unor modificări cantitative. Modificările calitative ale protooncogenei sunt determinate de mutații, reprezentate de substituții, deleții, inserții (adiții) sau inversii de nucleotide care schimbă cadrul de citire (frameshift mutations). Schimbarea cadrului de citire modifică secvența de aminoacizi a produsului protooncogenei, devenită oncogenă virală și, în consecință, are loc modificarea funcției produsului genic, conducând celula normală pe calea transformării maligne. Modificările cantitative sunt
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
platinic cu activitatea citostatică cea mai eficientă. Hidroliza cDDP conduce la apariția unui produs monoacvatat sau unui diacvatat, care sunt specii moleculare instabile, dar care pot forma resturi de liganzi monodentat sau bidentat, ce se pot lega la guanina din nucleotidele ADN formând complexși sau aducți în ADN care afectează desfășurarea normală a sintezei replicative a acestei macromolecule. Se realizează complecși macromoleculari ADN-cDDP, aducții fiind formați la una sau la ambele catene ale duplexului ADN, modificându-se conformația dublului helix de la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
cu proteina G. Un semnal din receptor declanșează legarea lui GTP la proteina RAS, iar GTP-RAS transmite semnalul în celulă. Proteinele RAS au activitate GTP-azică și astfel GTP-RAS este rapid convertit în GDP-RAS, inactiv. Mutațiile de substituție în secvența de nucleotide a acestei gene, colineare cu substituții în secvența de aminoacizi a proteinei RAS, au fost identificate într-o varietate mare de neoplazii de colon, plămân, sân și vezică urinară. Mutațiile determină scăderea activității GTP-azice a proteinei RAS și, ca urmare
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
produșii lor, în stabilirea planurilor de simetrie a corpului, la toate organismele. Protooncogenele jun și fos codifică pentru proteine nucleare desemnate JUN și FOS. Din asocierea FOS-JUN rezultă factorul de transcriere AP 1, care se leagă la anumite secvențe de nucleotide, cu rol reglator al transcrierii genice specifice. Transcrierea protooncogenelor jun și fos, ca și a altor gene, are loc la începutul ciclului celular (G1-S), sub influența unor mediatori extracelulari, de tipul factorilor de creștere și neurotransmițătorilor. Alte protooncogene codifică sinteza
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
proliferării celulei gazdă este motivul pentru care ea a fost denumită PROTOONCOGENĂ. Oncogena virală omoloagă este o variantă, respectiv o derivată a protooncogenei, devenită parte integrantă a genomului retroviral și care induce transformarea malignă a celulei gazdă. Analiza secvenței de nucleotide a v-src și a c-src a confirmat filiația v-src/c-src. Pe baza acestor date, a fost elaborat conceptul sau paradigma PROTOONCOGENEI care a reprezentat una dintre cele mai mari realizări conceptuale ale biologiei moleculare de la sfârșitul secolului al XX-lea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și amplificatorilor (enhancer) virali care, prin natura lor, sunt foarte puternici. Influența se exercită în condițiile inserției provirale în imediata vecinătate a protooncogenei. În asemenea condiții, rata transcrierii protooncogenei este foarte mare și, deși ea rămâne nemodificată ca secvență de nucleotide, iar produsul său proteinic nemodificat ca structură, prin intensificarea transcrierii și traducerii, protooncogena funcționează ca oncogenă celulară, condiționând conversia celulei pe calea transformării maligne. Conversia protooncogenei în oncogenă celulară se poate realiza și pe calea mutației punctiforme (deleții, adiții, inserții
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
s-a interpretat în termenii realizării unei recombinări între protooncogena c-src normală și oncogena v-src defectivă, cu geneza unei oncogene v-src normale, eficiente în inducerea stării de transformare malignă. Realizarea recombinării intragenice implică existența unei reale omologii de secvență a nucleotidelor între protooncogenă și oncogena virală. Deși la om se cunosc peste 100 tipuri diferite de neoplazii ce afectează diferite organe și țesuturi, până în prezent au fost identificate doar 60 de protooncogene ce pot fi convertite în oncogene active, pe diferitele
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
17 (her-2) care codifică o proteină transmembranară de 185kDa numită p185HER-2 (proteina HER-2 sau receptorul HER-2) cu activitate tirozin kinazică înrudită cu EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor). Bazându-se atât pe localizarea cromozomală (cromozomul 17) cît și pe secvența de nucleotide, Kraus (1987) a considerat că gena neu de la șobolan corespunde genei her-2 din genomul uman. Gena her-2 conține 27 exoni - lungimea totală a exonilor fiind de 4477 pb, și codifică proteina precursoare HER-2 de 1255 aa (Casalini și Iorio, 2004
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
p53 sunt implicați șase din cei 393 de codoni ai acestei gene și anume codonii 175, 245, 248, 249, 273 și 282. Peste jumătate din totalul mutațiilor sunt localizate în codonul 273. Este evident că distribuția mutațiilor în secvența de nucleotide a acestei gene nu este întâmplătoare, ceea ce explică implicarea ei într-un număr mare de neoplazii umane. Mutațiile genei p53 apar deopotrivă la nivelul exonilor și al intronilor. Se consideră că nici un domeniu al proteinei P53 nu este răspunzător în
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
dar cu capacitatea potențială de a evolua spre carcinoame invazive. Gena pentru această condiție, desemnată apc, a fost identificată și cartată 5q21. Gena apc (acronim derivat de la Adenoma Polyposis Coli) este localizată în 5q21.22. Ea are 8538 perechi de nucleotide și conține 15 exoni care codifică o proteină de 2843 de aminoacizi (fig. 20.6). Exonul 15 este foarte mare, având 6579 perechi de nucleotide. Peste 95% dintre mutații determină sinteza unei proteine APC trunchiate prin geneza codonilor stop (40
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
derivat de la Adenoma Polyposis Coli) este localizată în 5q21.22. Ea are 8538 perechi de nucleotide și conține 15 exoni care codifică o proteină de 2843 de aminoacizi (fig. 20.6). Exonul 15 este foarte mare, având 6579 perechi de nucleotide. Peste 95% dintre mutații determină sinteza unei proteine APC trunchiate prin geneza codonilor stop (40% dintre aceste mutații), deleții (41%), inserții (12%) și mutații de splicing (7%). Gena apc suferă mutații și în forma sporadică de cancer colorectal. Mutante de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]