1,663 matches
-
legate de structura împachetată a proteinei, ca urmare a influenței mediului în care se găsește proteina. Sunt prezentate spectrele de absorbție și de emisie fluorescentă pentru triptofan. După cum se observă, Trp-ul prezintă absorbție maximă la 280 nm. Spectrul de emisie fluorescentă arată că intensitatea de emisie este maximă la aproximativ 340 nm. De asemenea, prin suprapunerea celor două spectre, este pusă în evidență deplasarea Stokes. Principalul motiv pentru care se studiază fluorescența intrinsecă a proteinelor este acela de a obține informații
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
de factori externi, precum temperatura, natura și proprietățile solventului, pH-ul soluției, prezența sau absența unor ioni/molecule în soluția de proteină sau acțiunea radiațiilor ionizante. Unul dintre factorii importanți care influențează fluorescența proteinelor este polaritatea solventului. Poziția maximului emisiei fluorescente, așa cum se obține din spectrul de emisie, este sensibilă la polaritatea mediului și la mobilitatea fluoroforului în acest mediu. În general, starea excitată este mult mai polară decât cea fundamentală. În aceste condiții, moleculele excitate tind să interacționeze cu un
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
maximului de emisie poate fi utilizată ca măsură a polarității mediului înconjurător al fluoroforilor. În cazul fluorescenței Trp, intensitatea fluorescenței la λmax crește când polaritatea solventului scade. Mai jos este prezentat modul în care se poate modifica spectrul de emisie fluorescentă a unei proteine, sub influența modificărilor condițiilor de mediu. Atunci când fluorescența naturală a proteinelor nu este suficientă, în anumite experimente se folosesc fluorofori extrinseci, legați prin legături necovalente la proteine, pentru a îmbunătăți proprietățile fluorescente ale sistemului studiat. Fluorescența extrinsecă
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
poate modifica spectrul de emisie fluorescentă a unei proteine, sub influența modificărilor condițiilor de mediu. Atunci când fluorescența naturală a proteinelor nu este suficientă, în anumite experimente se folosesc fluorofori extrinseci, legați prin legături necovalente la proteine, pentru a îmbunătăți proprietățile fluorescente ale sistemului studiat. Fluorescența extrinsecă a proteinelor. Există situații în care fluorescența proteinelor poate fi indusă, pentru a fi studiate anumite caracteristici structurale, fie prin reacții chimice, fie prin formarea de complecși. În aceste cazuri, trebuie să se țină cont
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
va fi cuprinsă între 0 și 20 µM. Pentru studiul interacțiunii HSA ANS, se vor prepara probele. 2. Modul de lucru Se va urmări interacțiunea dintre proteina HSA și ligandul ANS, prin metoda de spectroscopie de fluorescență. Spectrele de emisie fluorescentă vor fi obținute cu spectrofluorimetrul Perkin Elmer LS55. Selectarea condițiilor pentru înregistrarea spectrelor de fluorescență reprezintă o etapă importantă a experimentului. Ca urmare, se va alege un sistem de fante pentru monocromatoarele de excitație și de emisie care să confere
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
condițiilor pentru înregistrarea spectrelor de fluorescență reprezintă o etapă importantă a experimentului. Ca urmare, se va alege un sistem de fante pentru monocromatoarele de excitație și de emisie care să confere atât rezoluție, cât și sensibilitate optime. Spectrele de emisie fluorescentă vor fi înregistrate cu o viteză de scanare de 500 nm/min. Se va alege, pentru excitarea Trplui, lungimea de undă de 295 nm (evitând astfel culegerea datelor de emisie și pentru Tyr), iar intervalul de scanare pentru spectrul de
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
urmați pașii de mai jos: Se vor înregistra spectrele de absorbție pentru proteina HSA (2 µM) și pentru ligandul ANS (2 µM) și se vor determina lungimile de undă la care apar maximele spectrale. Se vor înregistra spectrele de emisie fluorescentă pentru HSA și ANS, aflate în soluții separate. Se va observa că proteina prezintă emisie fluorescentă (datorată cromoforilor intrinseci), în timp ce fluorescența ANS este, practic, insesizabilă. Se vor înregistra spectrele de emisie fluorescentă pentru probele preparate pentru studiul interacțiunii HSA ANS
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
și pentru ligandul ANS (2 µM) și se vor determina lungimile de undă la care apar maximele spectrale. Se vor înregistra spectrele de emisie fluorescentă pentru HSA și ANS, aflate în soluții separate. Se va observa că proteina prezintă emisie fluorescentă (datorată cromoforilor intrinseci), în timp ce fluorescența ANS este, practic, insesizabilă. Se vor înregistra spectrele de emisie fluorescentă pentru probele preparate pentru studiul interacțiunii HSA ANS, la 25 oC, respectiv la 35 oC. Se va determina lungimea de undă la care emisia
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
maximele spectrale. Se vor înregistra spectrele de emisie fluorescentă pentru HSA și ANS, aflate în soluții separate. Se va observa că proteina prezintă emisie fluorescentă (datorată cromoforilor intrinseci), în timp ce fluorescența ANS este, practic, insesizabilă. Se vor înregistra spectrele de emisie fluorescentă pentru probele preparate pentru studiul interacțiunii HSA ANS, la 25 oC, respectiv la 35 oC. Se va determina lungimea de undă la care emisia fluorescentă a ANS-lui este maximă și, pentru măsurătorile la această lungime de undă. Se vor calcula
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
datorată cromoforilor intrinseci), în timp ce fluorescența ANS este, practic, insesizabilă. Se vor înregistra spectrele de emisie fluorescentă pentru probele preparate pentru studiul interacțiunii HSA ANS, la 25 oC, respectiv la 35 oC. Se va determina lungimea de undă la care emisia fluorescentă a ANS-lui este maximă și, pentru măsurătorile la această lungime de undă. Se vor calcula constanta de legare și coeficientul stoechiometric al legării, pe baza ecuației Scatchard, pentru seturile de date obținure la cele două temperaturi și se va discuta
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
A-T, respectiv A-U în cazul ARN-ului). Analiza ADN-ului prin metoda de transfer Southern blot presupune stabilirea prezenței sau absenței unei secvențe de ADN genomic prin hibridizarea cu ajutorul unei secvențe de ADN monocatenar complementar, marcat radioactiv sau fluorescent. Analiza ARN-ului prin metoda Northern blot urmărește să identifice profilurile de expresie ale unei gene, prin hibridizarea ARN mesager cu o secvență monocatenară complementară de ADN. Există o serie de metode directe de detectare a mutațiilor cunoscute din genotipul
[Corola-publishinghouse/Science/2124_a_3449]
-
mari (sute de perechi de baze). 6.2.3. Teste citogenetice moleculare Odată cu progresul tehnologiei genetice, linia de demarcație dintre tipurile de teste genetice este mai puțin clară. Citogenetica moleculară oferă un astfel de exemplu de test-hibrid. Metoda de hibridizare fluorescentă in situ sau FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) este o metodă performantă, dar relativ dificilă și scumpă. Inițial, cromozomii sunt plasați pe lama de microscop, apoi sunt denaturați, pentru a separa lanțurile dublu-helicale. Pentru regiunile de interes, sunt construite „sonde
[Corola-publishinghouse/Science/2124_a_3449]
-
Hybridization) este o metodă performantă, dar relativ dificilă și scumpă. Inițial, cromozomii sunt plasați pe lama de microscop, apoi sunt denaturați, pentru a separa lanțurile dublu-helicale. Pentru regiunile de interes, sunt construite „sonde” de ADN monocatenar, complementar, marcate cu substanțe fluorescente (fluorocrom), specifice pentru un cromozom, o regiune a cromozomului sau pentru gene cu localizare cunoscută dintr-o anumită zonă. Acest ADN complementar va hibridiza cu regiunile de interes, zonele hibridizate putând fi detectate cu ajutorul unui microscop cu fluorescență. Cu ajutorul acestei
[Corola-publishinghouse/Science/2124_a_3449]
-
Această metodă presupune izolarea proteinelor, separarea lor prin electroforeză, transferarea lor pe un filtru și incubarea cu un antiser (anticorp) specific pentru proteina respectivă (antigen). Complexul antigen - anticorp este identificat cu un așa-numit anti-anticorp care e marcat radioactiv sau fluorescent. Stabilirea secvenței de aminoacizi a proteinei poate fi utilizată atât pentru analiza și sinteza proteinei, cât și pentru izolarea genei corespunzătoare și se realizează după clivarea chimică sau enzimatică a proteinei în polipeptide formate din 15-30 aminoacizi, urmată de secvențierea
[Corola-publishinghouse/Science/2124_a_3449]
-
interfața de comandă E) și sistemul motor (motorul M, driverul de motor și interfața de comanda a motorului). Interfețele de comandă și procedura software de inspecție sunt rezidente pe computerul de proces. Sursa de lumină este desemnată de un tub fluorescent care furnizează o iluminare de 5000 lucși și care lucrează la o frecvență de 40-50KHz, pentru a împiedica apariția flicker-ului. Tubul este montat la o distanță de 10 cm de material. Utilizarea encoderului incremental permite sincronizarea dintre imaginea citită de
Sisteme video by Codrin Donciu () [Corola-publishinghouse/Science/84096_a_85421]
-
fizice și biologice: centrifugare în gradient de densitate, microfiltrare, tehnici imunomagnetice, utilizând anticorpi monoclonali, chip-uri microfluide, acestea fiind urmate de tehnici de identificare a originii și caracterizări moleculare:analiza acizilor nucleici (ADN sau mARN);analize citometrice;tehnici de citometrie fluorescenta și sisteme automate de analiză a imaginii;analize funcționale [129, 133]. Având în vedere că numai 35% dintre celulele CHC exprimă markeri epiteliali (EPCAM: molecule de adeziune epiteliala) cea mai răspândită tehnică, cea imunomagnetică (Cell Search) nu este adecvată pentru
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Mircea Grigorescu, Mircea Dan Grigorescu () [Corola-publishinghouse/Science/92130_a_92625]
-
biologii de la universitate și de la Muzeul Național. Până acum ar fi trebuit să termine cu fotografiatul și măsurătorile. Sunt niște tineri foarte conștiincioși, doi studenți și trei studente. Par obosiți, dar entuziaști. Au însemnat câțiva porci pe spinare cu coloranți fluorescenți. După asta au stat nopți întregi pe platforme suspendate în copaci, ca să filmeze mișcările porcilor. Unul din studenți e ecolog. La cafea povestește că e o ocazie unică de a studia niște animale tipic domestice în libertate, "procesul de dedo-mesticire
by P. C. Jersild [Corola-publishinghouse/Memoirs/1092_a_2600]
-
puțin negativ. Turistul cu casă proprie e numit gotlandez de vară.) Îmi vine greu să scriu pe hârtie creponată, mai bune sunt foile vechi folosite la toaletă. O mai fi 26 noiembrie? Aproape imposibil să-mi scot din păr colorantul fluorescent, are o aderență extraordinară. Dacă mă vede cineva zice că sunt omulețul de fosfor. Credeam că cei de la Muzeul Național și-au luat catrafusele. Că doar n-or fi vrut să dea oamenii peste fâșiile adezive îmbibate cu colorant? La fel de
by P. C. Jersild [Corola-publishinghouse/Memoirs/1092_a_2600]
-
Aș adăuga: se decontează de către stat. (Ar fi să promit prea mult, pun o monedă de cinci coroane în debara.) Mă simt întărit. Poate ar trebui să aștept să se mai întunece, altfel risc să intru în alte benzi adezive fluorescente. Îmi asum riscul. Pun pistolul-mitralieră în ultima revistă, "Knickerbocker-ul" e la locul lui. (De data asta l-am așezat reglementar, cu partea adezivă în interior.) E un adevărat miracol că s-a stricat numai gheata. S-a sfâșiat carâmbul și
by P. C. Jersild [Corola-publishinghouse/Memoirs/1092_a_2600]
-
am putut detecta, păsări cântătoare în copaci. Pe lacul de lângă casa de oaspeți unde am fost cazată, era o singură rățușcă. Fiindcă străzile nu erau luminate, coloana de mașini a fost direcționată spre drumul corect de o pereche de bețe fluorescente mânuite de un polițist al cărui corp era invizibil în noapte. Este un loc sinistru și mohorât unde mulțimile de oameni aplaudă ca niște roboți, și chiar copiii de cinci ani se alătură, într-o armonie perfectă, acestui ritual. Din
by MADELEINE ALBRIGHT [Corola-publishinghouse/Administrative/999_a_2507]
-
strîngînd paharele În mîini și vîrÎndu-și iute restul În buzunare. L-am auzit pe Whitey spunîndu-i barmanului „Ține-mi ăsta, OK?”, apoi i-a dat cuțitul lui mare, cu arc, peste bar. Băieții ședeau tăcuți și Întunecați sub lumina fluorescentă. Tuturor le era frică de Whitey - tuturor, În afară de Roy. Roy Își sorbea berea cu un aer tenebros. Ochii-i lucea, cu fosforescența lor ciudată. Corpul lui lung, asimetric, era proptit de bar. Nu se uita la Whitey, ci spre peretele
[Corola-publishinghouse/Memoirs/2031_a_3356]
-
fierbinte sau rece. Plasma fierbinte se obține prin încălzirea gazului la temperaturi foarte mari, cuprinse între valorile 15 000o 70 000oK. Plasma rece se obține prin: iluminare cu radiații ultraviolete; iluminare cu radiații X; descărcare electrică în gaze (în tuburi fluorescente). 1.1.1. Starea gazoasă Experiența ne arată că la presiuni mici, toate gazele se comportă asemănător. Volumul unei probe de gaz poate fi determinat doar prin trei parametri: presiune, temperatură și număr de molecule. Menținând constanți unii dintre parametri
CHIMIE FIZICĂ ȘI COLOIDALĂ by Alina Trofin () [Corola-publishinghouse/Science/703_a_1091]
-
sau rece. Plasma fierbinte se obține prin încălzirea gazului la temperaturi foarte mari, cuprinse între 15 000 70 000 grade Kelvin. Plasma rece se obține prin: iluminare cu radiații ultraviolete; iradiere cu radiații X; descărcare electrică în gaze (în tuburi fluorescente). Materia, substanța se poate descompune în părțile sale componente prin efectul Compton, cu ajutorul fotonilor care au o energie foarte mare, așa cum sunt fotonii ultravioleți, nucleari γ sau X (Röentgen), care interacționează atât cu învelișul electronic cât și cu nucleul atomic
CHIMIE FIZICĂ ȘI COLOIDALĂ by Alina Trofin () [Corola-publishinghouse/Science/703_a_1091]
-
o serie de câmpuri electrice și magnetice, numite „lentile electronice”. Imaginea obiectului poate fi fotografiată la ieșirea din sistemul optic, fluxul de electroni căzând pe o placă fotografică. Imaginea se poate vedea cu ochiul liber dacă electronii lovesc un ecran fluorescent. 2.5.3. Proprietăți electrice Starea de dispersie înaintată a sistemelor coloidale conferă acestora și proprietăți electrice speciale. Cele mai cunoscute fenomene electrice coloidale sunt electroforeza și electroosmoza. Unul dintre factorii cei mai importanți de care depind fenomenele electrice coloidale
CHIMIE FIZICĂ ȘI COLOIDALĂ by Alina Trofin () [Corola-publishinghouse/Science/703_a_1091]
-
interior să fie saturată în vaporii solventului. 3. Revelarea cromatogramei Cromatograma uscată nu poate fi studiată direct deoarece substanțele implicate sunt incolore. Pentru a localiza compușii se apelează la revelarea cu reactivi convenabili, care dau cu componenții derivați colorați sau fluorescenți în lumină ultravioletă. Identificarea ionilor Cu2+, Fe3+ și Co3+ Mod de lucru Se prepară soluții apoase de azotați ai metalelor de mai sus (concentrație 0,5 m). Eluarea se face cu un amestec de apă:acid clorhidric:acetonă în raport
CHIMIE FIZICĂ ȘI COLOIDALĂ by Alina Trofin () [Corola-publishinghouse/Science/703_a_1091]