2,747 matches
-
mm. Dacă se folosesc geluri de alte dimensiuni sau tipuri, se poate dovedi necesară schimbarea condițiilor de separare. Focalizarea izoelectrica 4.1. Reactivi pentru producerea gelurilor de poliacrilamide cu conținut de uree 4.1.1. Prepararea soluției "de bază" de gel Se dizolvă în apă: 4,85 g acrilamida 0,15 g N, N'-metilen-bis-acrilamida (BIS) 48,05 g uree 15,00 g glicerina (87% m/m) și se completează cu apă până la 100 ml, apoi se păstrează produsul obținut în
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
zile; dacă conductibilitatea acesteia este mai mare de 5 μS, se deionizeaza substanță prin agitare cu 2 g Amberlite MB-3 timp de 30 de minute, apoi se filtrează printr-o membrana de 0,45 μm. 4.1.2. Soluția de gel Se prepară o soluție de gel amestecandu-se aditivii și amfolitii cu soluția "de bază" de gel (vezi pct. 4.1.1): 9,0 ml soluție "de bază" 24 mg beta-alanina 500 μl amfolit pH 3,5-9,5*1) 250
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
mare de 5 μS, se deionizeaza substanță prin agitare cu 2 g Amberlite MB-3 timp de 30 de minute, apoi se filtrează printr-o membrana de 0,45 μm. 4.1.2. Soluția de gel Se prepară o soluție de gel amestecandu-se aditivii și amfolitii cu soluția "de bază" de gel (vezi pct. 4.1.1): 9,0 ml soluție "de bază" 24 mg beta-alanina 500 μl amfolit pH 3,5-9,5*1) 250 μl amfolit pH 5-7*1) 250
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
g Amberlite MB-3 timp de 30 de minute, apoi se filtrează printr-o membrana de 0,45 μm. 4.1.2. Soluția de gel Se prepară o soluție de gel amestecandu-se aditivii și amfolitii cu soluția "de bază" de gel (vezi pct. 4.1.1): 9,0 ml soluție "de bază" 24 mg beta-alanina 500 μl amfolit pH 3,5-9,5*1) 250 μl amfolit pH 5-7*1) 250 μl amfolit pH 6-8*1) ------------ *1) Produsele Ampholine(R) pH 3
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
amfolit pH 6-8*1) ------------ *1) Produsele Ampholine(R) pH 3,5-9,5 (Pharmacia) and Resolyte(R) pH 5-7 și pH 6-8 (BDH, Merck) s-au dovedit deosebit de folositoare pentru obținerea gradului necesar de separare a γ-cazeinelor. Se amestecă soluția de gel și se degazeifica timp de două sau trei minute într-o baie cu ultrasunete sau sub vid. Observație: Soluția de gel se prepară imediat înainte de a se turnă (vezi pct. 6.2). 4.1.3. Catalizatori: 4.1.3.1
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
BDH, Merck) s-au dovedit deosebit de folositoare pentru obținerea gradului necesar de separare a γ-cazeinelor. Se amestecă soluția de gel și se degazeifica timp de două sau trei minute într-o baie cu ultrasunete sau sub vid. Observație: Soluția de gel se prepară imediat înainte de a se turnă (vezi pct. 6.2). 4.1.3. Catalizatori: 4.1.3.1. N, N, N' N' - tetrametiletilendiamina (Temed) 4.1.3.2. 40% m/v persulfat de amoniu (PER) Se dizolvă 800 mg
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
imediat înainte de colorare. Observație: Se recomandă prepararea soluției de colorare în ziua folosirii acesteia. 5. Aparatură 5.1. Plăci de sticlă (265 x 125 x 4 mm); rola de cauciuc (lățime 15 cm), masa reglabila 5.2. Foi susținătoare de gel (265 x 125 mm) 5.3. Foaie de acoperire (280 x 125 mm). Se lipește o bucată de bandă adezivă (280 x 6 x 0,25 mm) pe fiecare latura lungă (vezi figură 1). 5.4. Cuva de electrofocalizare cu
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
mg ditiotreitol. Observație: Pentru a obține o simetrie mai mare a benzilor cazeinice focalizate se recomandă liofilizarea soluției după adăugarea acidului epsilon-aminocaproic și dizolvarea reziduurilor în 0,5 ml soluție tampon pentru dizolvarea proteinelor (pct. 4.6). 6.2. Prepararea gelurilor poliacrilamide care conțin uree Cu ajutorul câtorva picături de apă se întinde foaia susținătoare de gel (pct. 5.2) pe o placă de sticlă (pct. 5.1), indepartandu-se surplusul de apă cu un șervețel. Se întinde în mod similar foaia
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
recomandă liofilizarea soluției după adăugarea acidului epsilon-aminocaproic și dizolvarea reziduurilor în 0,5 ml soluție tampon pentru dizolvarea proteinelor (pct. 4.6). 6.2. Prepararea gelurilor poliacrilamide care conțin uree Cu ajutorul câtorva picături de apă se întinde foaia susținătoare de gel (pct. 5.2) pe o placă de sticlă (pct. 5.1), indepartandu-se surplusul de apă cu un șervețel. Se întinde în mod similar foaia de acoperire (pct. 5.3) cu spatiatoare (0,25 mm) pe o altă placă de
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
în mod similar foaia de acoperire (pct. 5.3) cu spatiatoare (0,25 mm) pe o altă placă de sticlă. Se așază placă orizontal pe masa reglabila. Se adaugă 10 μl Temed (pct. 4.1.3.1) la soluția de gel degazeificata pregătită (pct. 4.1.2), se amestecă și se adaugă 10 μl soluție PER (pct. 4.1.3.2), se amestecă bine și se toarnă imediat amestecul într-un strat egal pe centrul foii de acoperire. Se pune o
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
2), se amestecă și se adaugă 10 μl soluție PER (pct. 4.1.3.2), se amestecă bine și se toarnă imediat amestecul într-un strat egal pe centrul foii de acoperire. Se pune o margine a plăcii susținătoare de gel (cu fata foii îndreptată în jos) pe placă de acoperire și se coboară încet, astfel încât între foi să se formeze un strat subțire de gel care să se întindă uniform și fără bule (figură 3). Se coboară cu grijă până la
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
strat egal pe centrul foii de acoperire. Se pune o margine a plăcii susținătoare de gel (cu fata foii îndreptată în jos) pe placă de acoperire și se coboară încet, astfel încât între foi să se formeze un strat subțire de gel care să se întindă uniform și fără bule (figură 3). Se coboară cu grijă până la capăt placă susținătoare de gel, folosindu-se o spatula subțire, apoi se așază încă trei plăci de sticlă deasupra, pentru a acționa că greutate. După
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
în jos) pe placă de acoperire și se coboară încet, astfel încât între foi să se formeze un strat subțire de gel care să se întindă uniform și fără bule (figură 3). Se coboară cu grijă până la capăt placă susținătoare de gel, folosindu-se o spatula subțire, apoi se așază încă trei plăci de sticlă deasupra, pentru a acționa că greutate. După încheierea polimerizării (în jur de 60 minute) se transferă gelul polimerizat împreună cu foaia de acoperire pe foaia susținătoare de gel
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
3). Se coboară cu grijă până la capăt placă susținătoare de gel, folosindu-se o spatula subțire, apoi se așază încă trei plăci de sticlă deasupra, pentru a acționa că greutate. După încheierea polimerizării (în jur de 60 minute) se transferă gelul polimerizat împreună cu foaia de acoperire pe foaia susținătoare de gel, inclinandu-se plăcile de sticlă. Se curăță cu grijă spatele foii susținătoare de gel pentru a se elimină reziduurile de gel și de uree. Se sudează marginile "sandvișului" de gel
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
gel, folosindu-se o spatula subțire, apoi se așază încă trei plăci de sticlă deasupra, pentru a acționa că greutate. După încheierea polimerizării (în jur de 60 minute) se transferă gelul polimerizat împreună cu foaia de acoperire pe foaia susținătoare de gel, inclinandu-se plăcile de sticlă. Se curăță cu grijă spatele foii susținătoare de gel pentru a se elimină reziduurile de gel și de uree. Se sudează marginile "sandvișului" de gel astfel încât să se obțină un tub și se păstrează în
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
deasupra, pentru a acționa că greutate. După încheierea polimerizării (în jur de 60 minute) se transferă gelul polimerizat împreună cu foaia de acoperire pe foaia susținătoare de gel, inclinandu-se plăcile de sticlă. Se curăță cu grijă spatele foii susținătoare de gel pentru a se elimină reziduurile de gel și de uree. Se sudează marginile "sandvișului" de gel astfel încât să se obțină un tub și se păstrează în frigider (timp de maximum 6 săptămâni). Observație: Foaia de acoperire și spatiatoarele pot fi
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
încheierea polimerizării (în jur de 60 minute) se transferă gelul polimerizat împreună cu foaia de acoperire pe foaia susținătoare de gel, inclinandu-se plăcile de sticlă. Se curăță cu grijă spatele foii susținătoare de gel pentru a se elimină reziduurile de gel și de uree. Se sudează marginile "sandvișului" de gel astfel încât să se obțină un tub și se păstrează în frigider (timp de maximum 6 săptămâni). Observație: Foaia de acoperire și spatiatoarele pot fi refolosite. Gelul de poliacrilamida poate fi tăiat
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
gelul polimerizat împreună cu foaia de acoperire pe foaia susținătoare de gel, inclinandu-se plăcile de sticlă. Se curăță cu grijă spatele foii susținătoare de gel pentru a se elimină reziduurile de gel și de uree. Se sudează marginile "sandvișului" de gel astfel încât să se obțină un tub și se păstrează în frigider (timp de maximum 6 săptămâni). Observație: Foaia de acoperire și spatiatoarele pot fi refolosite. Gelul de poliacrilamida poate fi tăiat la dimensiuni mai mici, acțiune care este recomandată în
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
a se elimină reziduurile de gel și de uree. Se sudează marginile "sandvișului" de gel astfel încât să se obțină un tub și se păstrează în frigider (timp de maximum 6 săptămâni). Observație: Foaia de acoperire și spatiatoarele pot fi refolosite. Gelul de poliacrilamida poate fi tăiat la dimensiuni mai mici, acțiune care este recomandată în cazul în care există puține probe sau dacă se folosește un aparat automat de electroforeza (două geluri format 4,5 x 5 cm). 6.3. Focalizarea
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
Observație: Foaia de acoperire și spatiatoarele pot fi refolosite. Gelul de poliacrilamida poate fi tăiat la dimensiuni mai mici, acțiune care este recomandată în cazul în care există puține probe sau dacă se folosește un aparat automat de electroforeza (două geluri format 4,5 x 5 cm). 6.3. Focalizarea izoelectrica Se reglează termostatul de răcire la 12°C. Se șterge cu kerosen spatele foii susținătoare de gel, apoi se picura câteva picături de kerosen (pct. 4.2) pe centrul blocului
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
există puține probe sau dacă se folosește un aparat automat de electroforeza (două geluri format 4,5 x 5 cm). 6.3. Focalizarea izoelectrica Se reglează termostatul de răcire la 12°C. Se șterge cu kerosen spatele foii susținătoare de gel, apoi se picura câteva picături de kerosen (pct. 4.2) pe centrul blocului de răcire. Se rulează apoi pe el "sandvișul" de gel, cu partea susținătoare de gel îndreptată în jos, avându-se grijă să se evite formarea bulelor. Se
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
izoelectrica Se reglează termostatul de răcire la 12°C. Se șterge cu kerosen spatele foii susținătoare de gel, apoi se picura câteva picături de kerosen (pct. 4.2) pe centrul blocului de răcire. Se rulează apoi pe el "sandvișul" de gel, cu partea susținătoare de gel îndreptată în jos, avându-se grijă să se evite formarea bulelor. Se șterge excesul de kerosen și se îndepărtează foaia de acoperire. Se îmbiba benzile de electrozi în soluțiile electrolitice (pct. 4.3, 4.4
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
răcire la 12°C. Se șterge cu kerosen spatele foii susținătoare de gel, apoi se picura câteva picături de kerosen (pct. 4.2) pe centrul blocului de răcire. Se rulează apoi pe el "sandvișul" de gel, cu partea susținătoare de gel îndreptată în jos, avându-se grijă să se evite formarea bulelor. Se șterge excesul de kerosen și se îndepărtează foaia de acoperire. Se îmbiba benzile de electrozi în soluțiile electrolitice (pct. 4.3, 4.4), se taie după lungimea gelului
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
gel îndreptată în jos, avându-se grijă să se evite formarea bulelor. Se șterge excesul de kerosen și se îndepărtează foaia de acoperire. Se îmbiba benzile de electrozi în soluțiile electrolitice (pct. 4.3, 4.4), se taie după lungimea gelului și se plasează în poziția prevăzută (distanță dintre electrozi de 9,5 cm). Condiții pentru focalizarea izoelectrica: 6.3.1. Dimensiunile gelului 265 x 125 x 0,25 mm
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]
-
acoperire. Se îmbiba benzile de electrozi în soluțiile electrolitice (pct. 4.3, 4.4), se taie după lungimea gelului și se plasează în poziția prevăzută (distanță dintre electrozi de 9,5 cm). Condiții pentru focalizarea izoelectrica: 6.3.1. Dimensiunile gelului 265 x 125 x 0,25 mm
ORDIN nr. 1 din 16 ianuarie 2003 privind aprobarea Metodei de analiza de referinţa pentru detectarea laptelui de vacă şi a cazeinatilor din lapte de vacă în branzeturile produse din lapte de oaie, lapte de capra sau lapte de bivolita ori din amestecuri de lapte de oaie, capra şi bivolita. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/148897_a_150226]