12,274 matches
-
tampon de blocare. Se aplică 100 μl de diluție conjugată în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.8. Se scoate conjugatul din puțuri. Puțurile se spală ca mai înainte (3.4 și 3.6). 3.9. Se prepară soluția de substrat de fosfatază alcalină (apendicele 5). Se aplică 100 μl în puțuri. Se incubează timp de 30 de minute până la o oră în întuneric la temperatura camerei. 3.10. Se citește absorbanța la 409 nm. Interpretarea testului ELISA
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
a eșantionului este > 2 × DO a controlului negativ. 4. Testul PCR În baza Seal et al., 1993 Notă: În timpul tuturor etapelor de pregătire a eșantioanelor și a altor manipulări care implică PCR trebuie folosite conuri de pipetă cu filtru. Se prepară o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă din rasa 3 / biovar 2 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv. Se testează într-un mod identic cu eșantionul sau eșantioanele. 4.1. Se pipetează 100 μl din extractul concentrat
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
concentrat resuspendat într-o microfiolă conținând 10 μl de 0,5M de NaOH. Se amestecă întorcând în mod repetat microfiola. 4.2. Se încălzește timp de 4 minute la 100 șC. Se pune imediat microfiola la gheață. 4.3. Se prepară cel puțin două soluții decimale, de exemplu 1/10 și 1/100 sau mai multe dacă se consideră util, în apă distilată sterilă sau ultrapură (AUP). 4.4. Se prepară amestecul de reacție PCR (apendicele 6) într-o fiolă sterilă
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
șC. Se pune imediat microfiola la gheață. 4.3. Se prepară cel puțin două soluții decimale, de exemplu 1/10 și 1/100 sau mai multe dacă se consideră util, în apă distilată sterilă sau ultrapură (AUP). 4.4. Se prepară amestecul de reacție PCR (apendicele 6) într-o fiolă sterilă, prin adăugarea următoarelor componente în ordinea următoare: Pentru un volum de reacție de 50 μl: Component Cantitate Concentrație finală Apă distilată sterilă sau AUP 30,8 μl - 33,8 μl
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
dacă se folosesc în aceeași zi, și la -18°C pentru o durată mai mare. 4.6. Analiza produsului PCR Fragmentele PCR se detectează prin electroforeză în gel de agar și colorare cu bromură de etidiu. 4.6.1. Se prepară un mediu agarizat corespunzător aducând încet la fierbere agaroza în tampon de electroforeză tri-acetată (ETA). 4.6.2 Se răcește agaroza topită la 50 - 60 °C, se toarnă în cuva electroforezei și se introduce pieptenul. Soluția se lasă să se
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
fragmentul amplificat este identic cu sușa de control pozitiv de Ralstonia solanacearum. 5. Testul de placare selectivă În baza Elphinstone et al., 1996 5.1 Testul se efectuează printr-o tehnică corespunzătoare de diluare galvano-plastică, cum ar fi: (i) Se prepară cel puțin două diluții zecimale, 1/10 și 1/100 sau mai multe, dacă se consideră util, din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat și fiecare
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
sau testul PCR (prezenta secțiune, 4.). 8. Testul de patogenicitate A se vedea secțiunea II, 4.3. Apendicele 1 Medii nutritive pentru izolarea și cultura Ralstonia solanacearum Agar nutritiv (AN) Agar nutritiv (Difco) 23 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavizare la 121° C timp de 15 minute. Se răcește la 50 °C. Se toarnă pe plăci. Mediu drojdie - peptonă - glucoză - agar
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
minute. Se răcește la 50 °C. Se toarnă pe plăci. Mediu drojdie - peptonă - glucoză - agar (YPGA) Extract de levură (Difco) 5 g Bacto-peptonă (Difco) 5 g D(+) glucoză (monohidrat) 10 g Bacto-geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavizare la 121°C timp de 15 minute. Se răcește la 50°C. Se toarnă pe plăci. Mediu zaharoză - peptonă-agar (SPA) Zaharoză
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de 15 minute. Se răcește la 50°C. Se toarnă pe plăci. Mediu zaharoză - peptonă-agar (SPA) Zaharoză 20 g Peptonă 5 g K2HPO4 0,5 g MgSO4·7H2O 0,25 g Bacto-geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele. Se ajustează la pH 7,2 - 7,4, dacă este necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Se răcește la
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
121 °C timp de 15 minute. Se răcește la 50 °C. Se toarnă pe plăci. Mediul de tetrazoliu Kelman Acizi casaminici (Difco) 1 g Bacto-peptonă (Difco) 10 g Dextroză 5 g Bacto-geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Se răcește la 50 °C. Se adaugă o soluție apoasă sterilizată prin filtrare de
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Engelbrecht, 1994 modificat de Elphinstone et al, 1996) dar se elomină geloza și sărurile de tetrazoliu. Mediu de bază Acizi casaminici (Difco) 1 g Bacto-peptonă (Difco) 10 g Glicerol 5 ml Geloză (Difco) 15 g Apă distilată 1 litru Se prepară volume de 1/2 litri de mediu în flacoane de 1 litru. Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se ajustează pH-ul, dacă este necesar, la 6,5 înainte de autoclavizare. Ralstonia solanacearum nu se dezvoltă bine într-un
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
tetrazoliu 50 mg la litru Se dizolvă ingredientele în 70% etanol la concentrațiile date pentru volumul de mediu preparat. Unele ingrediente ca polimixina B și cloramfenicolul necesită o ușoară încălzire și agitare. Mediu nutritiv SMSA (Elphinstone et al., 1996) Se prepară ca și pentru mediul selectiv SMSA, dar se elimină geloza. Se împarte în alicote de 3 ml în tuburi de unică folosință Universal de 30 ml. Bibiografie Buddenhagen, I.W.; Sequeira, L. and Kelman, A. 1962. Description of races in
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
unei poziții, alta decât cea a produsului. Totuși, materialele clasificate în cadrul aceleiași poziții pot fi utilizate cu condiția ca valoarea lor să nu depășească 50% din prețul ex-fabrică al produsului. ex 3404 Tipuri de ceară artificială și tipuri de ceară preparată pe bază de parafină, ceară petrolieră, ceară obținută din materiale bituminoase, gaci de parafină și parafină în solzi. Fabricare în care toate materialele utilizate sunt clasificate în cadrul unei poziții, alta decât cea a produsului. Totuși, materialele clasificate în cadrul aceleiași poziții
jrc2051as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87203_a_87990]
-
de crescătorie, carne de vânat sălbatic și carne de iepure(1) No ................ Nr. ............... Exporting country ............................................ Țară exportatoare ............................................ Ministry ..................................................... Ministerul ................................................... Department ................................................... Departamentul ................................................ Reference(2) ................................................. Referințe(2) ................................................. I. Identification of products: I. Identificarea produselor Products prepared with meat from: (animal species) ........... Produse preparate cu carne de la (specia de animale) ......... Nature of products: .......................................... Natură produselor: ........................................... Number of individual items or packages: Numărul de piese individuale sau al ambalajelor: ............. Storage and transport temperature: Temperatura de depozitare și de transport .................... Net weight: .................................................. Greutatea netă: .............................................. ÎI. Origin
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165865_a_167194]
-
Aparatură 4.2.1. Sticlărie obișnuită de laborator 4.2.2. pH-metru 4.2.3. Electrod de sticlă 4.2.4. Electrod de referință (de calomel). 4.3. Procedeu Se etalonează pH-metrul cu electrozii folosind o soluție tampon standard. Se prepară o soluție sau o dispersie 10%, în apă, a produsului care urmează a fi analizat și se filtrează. Se măsoară pH-ul. Dacă pH-ul este 12 sau mai mare este necesară o determinare cantitativa. 5. DETERMINARE 5.1. Titrare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
în tub și apoi se ia porțiunea de testare. 6.3. Determinare 6.3.1. Se cântărește într-un tub cu dop filetat (5.6) cu precizie 10 mg, 6 până la 7 g [M(5) g] de pastă de dinți preparată în conformitate cu secțiunea 6.2, si se adaugă trei perle mici de sticlă. 6.3.2. Se introduc cu pipeta în tub exact 5 ml soluție standard intern (4.6), 4 ml dimetilformamidă (4.4) și 1 ml metanol (4.5
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
3 și Nr. 4 ori echivalenții lor 2.2. Micropipete, 1 μl 2.3. Baloane cotate, 100 ml 2.4. Filtre cutate 2.5. Aparatură pentru cromatografie descendentă pe hârtie 3. PREPARARE PROBE 3.1. Produși solubili în apă Se prepară două soluții din fiecare proba prin dizolvarea a 1 g și respectiv 5 g de produs în 100 ml apă. Se folosește 1 μl din fiecare dintre aceste soluții pentru realizarea cromatografiei pe hârtie, descrisă la punctul 5. 3.2
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
aduce la semn cu apă, în fiecare din cele două cazuri, si se amestecă. Se filtrează dispersiile peste filtrul cutat (3.4) și se folosește 1 μl din fiecare filtrat pentru realizarea cromatografiei pe hârtie, descrisă la punctul 5. Se prepară încă o dată două dispersii din fiecare proba prin diluția a 1 g și respectiv 5 g în 50 ml apă, acidulata cu acid clorhidric diluat (2.7), se aduce la semn cu apă și se amestecă. Se filtrează dispersiile peste
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
2.2) și B (2.3) în scopul realizării cromatografiei descendente pe hârtie. Se saturează tancurile cromatografice pentru cel putin 24 ore cu vapori de solvent. 4.2. Se pun câte 1 μl din proba și din soluția de referință preparată conform punctelor 4 și 2.1 pe câte un punct de pornire de pe banda de hartie cromatografica (Whatman Nr. 3 ori echivalent) de lungime 40 cm și lățime 20 cm (3.1) sau alt format adecvat și se evaporă soluția
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
în 800 ml apă la cald. Se răcește și se adaugă 100 ml acid clorhidric concentrat agitandu-se în acest timp. Se adaugă apă până la 1000 ml. 4.5. Acid clorhidric 5 N 4.6. Reactiv N-1-naftil: Această soluție trebuie preparată în ziua în care se folosește. Se dizolvă 0,1 g diclorhidrat de N-1-naftiletilendiamina în apă și se diluează cu apă până la 100 ml. 5. APARATURĂ 5.1. Balanța analitică 5.2. Baloane cotate de 150, 250, 500 și 1000
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
5). Se amestecă și se lasă să stea 5 minute. Se adaugă 2,0 ml reactiv N-1-naftil (4.6), se amestecă și se lasă să stea 3 minute. Se diluează cu apă până la semn și se amestecă. 6.7. Se prepară un test orb prin repetarea operațiilor 6.5 și 6.6 fără adăugarea reactivului N-1-naftil. 6.8. Se măsoară (5.7) densitatea optică la 538 nm a soluției obținute la 6.6 folosind soluția oarbă (6.7) că referință. 6
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
5.2.9. Formaldehida de 37 la 40% m/v 5.2.10. Hidroxid de sodiu, 1 M 5.2.11. Acid clorhidric, 1 M 5.2.12. Acid clorhidric, 0,002 M 5.2.13. Soluție de amidon proaspăt preparată în conformitate cu European Pharmacopoeia (vezi 4.2.8) 5.2.14. Soluție de iod standard, 0,05 M 5.2.15. Soluție de tiosulfat de sodiu standard, 0,1 M 5.2.16. Fază mobilă: Soluție apoasa de fosfat disodic (5
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
13. Centrifuga. 5.3.14. Baie ultrasonica 5.3.15. Agitator vibrator (vortex sau echivalent). 5.4. Procedeu 5.4.1. Curbă de etalonare Aceasta este obținută prin construirea curbei înălțimilor picurilor că funcție a concentrației standard formaldehida: diluata. Se prepară soluțiile standard prin diluarea soluției de referință de formaldehida (5.2.19) cu fază mobilă (5.2.16) - 1,00 ml de soluție (5.2.19) diluata la 20,00 ml (cca. 185 μg/100 ml). - 2,00 ml de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
Se transferă, cu pipeta (5.7), 0,6 ml TECS (4.6) și 0,12 ml soluție standard intern (4.8) într-un balon cotat de 10 ml. Se diluează cu xilen (4.5) până la semn și se amestecă. Se prepară proaspăt zilnic. 4.10. Acid percloric, 70% (m/v) 4.11. Acid percloric, 20% (m/v) în apă (4.2) 5. APARATURĂ 5.1. Echipament standard de laborator 5.2. Cromatograf de gaze cu un detector cu ionizare în flacăra
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
3) montate în serie prin intermediul unor țevi de PVC. NB: Aparatul de antrenare trebuie să fie treacă de următorul test de etanșeitate: simulând condițiile de testare, se înlocuiește produsul care urmează să fie determinat în 10 ml soluție de sulfura (preparată la 4.4) conținând "X mg" de sulfura (determinată iodometric). Fie "Y" numărul de miligrame de sulfura găsit la sfârșitul acestei operații. Diferența dintre cantitatea "X" și cantitatea "Y" nu trebuie să depășească 3%. 6.1.4. Se trece curent
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]