14,680 matches
-
o cantitate corespunzătoare de sistem de activare metabolică. La sfârșitul tratamentului, celulele sunt centrifugate, spălate și însămânțate pe un mediu de cultură potrivit. După incubație, cutiile sunt inventariate în vederea stabilirii ratei de supraviețuire și a mutațiilor genice produse. Dacă primul experiment este negativ, trebuie realizat un al doilea experiment, folosind celule în fază staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent adecvat. 2. DATE Datele se prezintă într-un tabel, indicându-se numărul coloniilor, numărul mutantelor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
La sfârșitul tratamentului, celulele sunt centrifugate, spălate și însămânțate pe un mediu de cultură potrivit. După incubație, cutiile sunt inventariate în vederea stabilirii ratei de supraviețuire și a mutațiilor genice produse. Dacă primul experiment este negativ, trebuie realizat un al doilea experiment, folosind celule în fază staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent adecvat. 2. DATE Datele se prezintă într-un tabel, indicându-se numărul coloniilor, numărul mutantelor, frecvența coloniilor supraviețuitoare și a mutațiilor. Toate rezultatele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
însămânțate pe un mediu de cultură potrivit. După incubație, cutiile sunt inventariate în vederea stabilirii ratei de supraviețuire și a mutațiilor genice produse. Dacă primul experiment este negativ, trebuie realizat un al doilea experiment, folosind celule în fază staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent adecvat. 2. DATE Datele se prezintă într-un tabel, indicându-se numărul coloniilor, numărul mutantelor, frecvența coloniilor supraviețuitoare și a mutațiilor. Toate rezultatele trebuie confirmate printr-un experiment independent. Toate rezultatele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
incubație, cutiile sunt inventariate în vederea stabilirii ratei de supraviețuire și a mutațiilor genice produse. Dacă primul experiment este negativ, trebuie realizat un al doilea experiment, folosind celule în fază staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent adecvat. 2. DATE Datele se prezintă într-un tabel, indicându-se numărul coloniilor, numărul mutantelor, frecvența coloniilor supraviețuitoare și a mutațiilor. Toate rezultatele trebuie confirmate printr-un experiment independent. Toate rezultatele observate se evaluează cu ajutorul unei metode statistice adecvate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent adecvat. 2. DATE Datele se prezintă într-un tabel, indicându-se numărul coloniilor, numărul mutantelor, frecvența coloniilor supraviețuitoare și a mutațiilor. Toate rezultatele trebuie confirmate printr-un experiment independent. Toate rezultatele observate se evaluează cu ajutorul unei metode statistice adecvate. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: ― sușele folosite, ― condițiile experimentale: celule în faza staționară sau celule în creștere, compoziția
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
să crească, astfel încât să furnizeze un număr corespunzător de colonii. Mod de operare Tratamentul sușelor de Saccharomices cerevisiae se realizează de obicei prin procedeul de testare în lichid, care presupune utilizarea fie de celule staționare, fie de celule în creștere. Experimentele inițiale trebuie realizate pe celule în creștere. 1 - 5 x 107 celule/ml sunt expuse la substanța chimică testată pe o perioadă de 18 ore, la o temperatură de 28 - 37˚C, cu agitare; dacă este cazul, pe parcursul tratamentului, se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
o cantitate corespunzătoare de sistem de activare metabolică. La sfârșitul tratamentului celulele sunt centrifugate, spălate și însămânțate pe un mediu de cultură potrivit. După incubație, cutiile se inventariază în vederea stabilirii ratei de supraviețuire și a mutațiilor genice produse. Dacă primul experiment este negativ, trebuie realizat un al doilea experiment în care se utilizează celule în fază staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent corespunzător. 2. DATE Datele se prezintă sub formă de tabele în care
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
La sfârșitul tratamentului celulele sunt centrifugate, spălate și însămânțate pe un mediu de cultură potrivit. După incubație, cutiile se inventariază în vederea stabilirii ratei de supraviețuire și a mutațiilor genice produse. Dacă primul experiment este negativ, trebuie realizat un al doilea experiment în care se utilizează celule în fază staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent corespunzător. 2. DATE Datele se prezintă sub formă de tabele în care se indică numărul coloniilor, numărul recombinantelor, supraviețuirea și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
mediu de cultură potrivit. După incubație, cutiile se inventariază în vederea stabilirii ratei de supraviețuire și a mutațiilor genice produse. Dacă primul experiment este negativ, trebuie realizat un al doilea experiment în care se utilizează celule în fază staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent corespunzător. 2. DATE Datele se prezintă sub formă de tabele în care se indică numărul coloniilor, numărul recombinantelor, supraviețuirea și frecvența recombinantelor. Toate rezultatele trebuie confirmate printr-un experiment independent. Datele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
inventariază în vederea stabilirii ratei de supraviețuire și a mutațiilor genice produse. Dacă primul experiment este negativ, trebuie realizat un al doilea experiment în care se utilizează celule în fază staționară. Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent corespunzător. 2. DATE Datele se prezintă sub formă de tabele în care se indică numărul coloniilor, numărul recombinantelor, supraviețuirea și frecvența recombinantelor. Toate rezultatele trebuie confirmate printr-un experiment independent. Datele se evaluează prin metode statistice corespunzătoare. 3. RAPORT
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Dacă primul experiment este pozitiv, acesta trebuie confirmat printr-un experiment independent corespunzător. 2. DATE Datele se prezintă sub formă de tabele în care se indică numărul coloniilor, numărul recombinantelor, supraviețuirea și frecvența recombinantelor. Toate rezultatele trebuie confirmate printr-un experiment independent. Datele se evaluează prin metode statistice corespunzătoare. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: ― sușele folosite, ― condițiile experimentale: celule în faza staționară sau în faza de creștere, compoziția mediilor de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
deplin argumentată cu documentație. Mediu Se utilizează medii de cultură și condiții de incubare corespunzătoare (de exemplu, temperatura, vasele de cultură folosite, concentrațiile de CO2 și umiditatea). Mediul și serul trebuie alese funcție de sistemele selective și tipul celular folosit în experiment. Substanța de testare Înainte de tratarea celulelor, substanța de testare fie poate fi preparată în mediul de cultură, fie poate fi dizolvată sau suspensionate într-un excipient corespunzător. Concentrația finală a excipientului în sistemul de cultură nu trebuie să afecteze viabilitatea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
exogen adecvat de activare metabolică la mamifere. Dacă se folosesc celule cu activitate metabolică intrinsecă, trebuie să se cunoască intensitatea și natura acestei activități, astfel încât să corespundă clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Folosirea martorilor pozitivi și negativi Fiecare experiment include martori pozitivi, folosind atât un compus cu activitate directă, cât și un compus ce necesită activare metabolică. De asemenea, trebuie folosit și un martor negativ (excipient). Exemple de substanțe ce pot fi folosite ca martor pozitiv: - compuși cu activitate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
care trebuie să fie suficientă pentru a permite expresia fenotipică optimă a mutantelor induse, celulele vor crește în mediu de cultură cu și fără agenți selectivi, pentru determinarea numărului de mutante și a viabilității. Toate rezultatele se verifică într-un experiment independent. 2. DATE Datele se sistematizează în tabele. Se indică numărul de celule pe fiecare cutie pentru substanța de testare și martori, atât în termeni de inducere a mutațiilor, cât și de supraviețuire. Se prezintă de asemenea numărul mediu de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Condiții experimentale Numărul culturilor Pentru fiecare metodă experimentală sunt necesare cel puțin două culturi celulare pentru autoradiografiere și șase culturi (sau mai puține, dacă există argumente științifice) pentru determinările prin LSC a UDS. Folosirea martorilor negativi și pozitivi În fiecare experiment trebuie incluși martori pozitivi și negativi (netratați și/sau excipient) suplimentari, cu și fără activare metabolică. În testele care folosesc hepatocite de șobolan, exemple de martori pozitivi sunt 7,12-dimetilbenzantracenul (7,12-DMBA) sau 2-acetilaminofluorenul (2-AAF). În cazul liniilor celulare bine
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
arii de mărimea nucleului, din citoplasma fiecărei celule numărate. Determinările LSC Pentru determinarea prin LSC a USD, se utilizează un număr adecvat de culturi pentru fiecare concentrație a substanței de testare și pentur martori. Toate rezultatele trebuie confirmate într-un experiment independent. 2. DATE Datele sunt prezentate sub formă de tabele. 2.1. Determinările autoradiografice Cantitatea de 3H-TdR încorporată în citoplasmă și numărul de granulații găsite în nucleii celulari trebuie să fie înregistrate separat. Pentru descrierea distribuției cantității de 3H-TdR încorporată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
celulele folosite, densitatea și numărul de pasaje celulare în momentul tratamentului, numărul de culturi celulare, - metodele folosite pentru menținerea culturilor, inclusiv compoziția mediului, temperatura și concentrația CO2, - substanța de testare, excipientul folosit, concentrațiile și motivația alegerii acestor concentrații folosite în experiment, - informații despre sistemul de activare metabolică, - schema de tratament, - martorii pozitivi și negativi, - tehnica de autoradiografie folosită, - metodele folosite pentru a bloca intrarea celulelor în faza S, - metodele folosite pentru extragerea ADN și determinarea conținutului total în ADN prin tehnica
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
trebuie să se cunoască intensitatea și natura acestei activități, astfel încât să fie corespunzătoare clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Numărul de culturi Pentru fiecare punct experimental se folosesec cel puțin două culturi. Folosirea martorilor pozitivi și negativi În toate experimentele se folosesc martori pozitivi, folosind atât un compus cu activare directă, cât și un compus ce necesită activare metabolică; de asemenea, se folosește și un martor pentru excipient. Exemple de substanțe ce pot fi folosite ca martori pozitivi: - compuși cu
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
numai celulele care conțin 46 de centromeri. Pe liniile celulare bine caracterizate se analizează numai metafazele care conțin 2 centromeri din numărul modal. Trebuie precizat dacă marcarea joncțiunii centromerice este sau nu inventariată ca SCE. Rezultatele trebuie confirmate într-un experiment independent. 2. DATE Datele se sistematizează în tabele. Pentru fiecare cultură tratată sau martor se menționează separat numărul de SCE pentru fiecare metafază și numărul de SCE pe cromozom pentru fiecare metafază. Datele se evaluează prin metode statistice adecvate. 3
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
vapori. Administrarea substanței de testare prin hrană se poate face în soluții zaharoase. Dacă este necesar, substanța poate fi dizolvată într-o soluție de NaCl 0,7% și injectată în torace sau abdomen. Folosirea martorilor pozitivi și negativi În fiecare experiment trebuie folosiți martori negativi (pentru excipient) și pozitivi. Totuși, dacă sunt disponibile date istorice pertinente despre martori, nu este necesară folosirea simultană a acestora. Concentrațiile de expunere Se folosesc trei niveluri de expunere. Pentru o evaluare preliminară se poate folosi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
numărul de masculi nefertili și numărul de cromozomi letali la fiecare concentrație de expunere și pentru fiecare perioadă de împerechere, pentru fiecare mascul tratat. Trebuie raportat numărul de clustere de diferite dimensiuni per mascul. Aceste rezultate trebuie confirmate într-un experiment separat. Pentru evaluarea SLRL se vor folosi metode statistice adecvate. Trebuie luată în considerare aglomerarea de gene letale recesive provenite de la un singur mascul, care trebuie evaluată cu metode statistice corespunzătoare. 3. RAPORTAREA 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
și în absența unui sistem adecvat de activare metabolică. Dacă tipul celular folosit are activitate metabolică intrinsecă, natura acestei activități trebuie să fie cunoscută și adecvată clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Folosirea martorilor pozitivi și negativi În fiecare experiment trebuie folosiți martori pozitivi, atât un compus cu activitate directă cât și un compus ce necesită activare metabolică. De asemenea, trebuie folosit și un martor negativ (pentru excipient). Printre exemplele de substanțe ce pot fi folosite ca martor pozitiv se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
unui sistem adecvat de activare metabolică. La sfârșitul perioadei de expunere, celulele trebuie spălate, îndepărtând substanța de testare, și cultivate în condiții adecvate pentru apariția modificărilor fenotipice urmărite și pentru stabilirea incidenței de transformare. Toate rezultatele trebuie confirmate în cadrul unui experiment independent. 2. DATE Datele se sistematizează în tabele și pot avea diferite forme în funcție de metoda folosită, ca, de exemplu, numărarea plăcilor, plăci pozitive sau număr de celule transformate. După caz, supraviețuirea se exprimă ca procent din nivelul de supraviețuire la
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
mărimea semnificației. De exemplu, în cadrul unui test tipic, numărul masculilor din fiecare lot testat trebuie să fie suficient pentru a asigura între 30 - 50 de femele gestante în fiecare perioadă de împerechere. Martori negativi și pozitivi În general, în fiecare experiment se utilizează substanțe martor pozitive și negative. Când experimente efectuate recent în același laborator oferă rezultate acceptabile cu privire la martorii pozitivi, aceste rezultate pot fi folosite ca martori pozitivi în experimentul curent. Substanțele martor pozitiv trebuie folosite la o doză scăzută
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
masculilor din fiecare lot testat trebuie să fie suficient pentru a asigura între 30 - 50 de femele gestante în fiecare perioadă de împerechere. Martori negativi și pozitivi În general, în fiecare experiment se utilizează substanțe martor pozitive și negative. Când experimente efectuate recent în același laborator oferă rezultate acceptabile cu privire la martorii pozitivi, aceste rezultate pot fi folosite ca martori pozitivi în experimentul curent. Substanțele martor pozitiv trebuie folosite la o doză scăzută, adecvată (ex: MMS, intraperitoneal într-o doză de 10
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]