2,675 matches
-
37 C timp de 5 minute. Se pipetează apoi în una din eprubete 1 ml substrat (proba activă) iar în cea de-a două eprubetă 2 ml acid tricloracetic 0,3 N și 1 ml preparat enzimatic (proba martor). Ambele eprubete se termostatează timp de o oră la 37 C. După expirarea timpului se oprește reacția enzimatică din proba activă cu 2 ml acid tricloracetic 0,3 N. După omogenizare, se continuă termostatarea celor două probe la 37 C, timp de
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
ml acid tricloracetic 0,3 N. După omogenizare, se continuă termostatarea celor două probe la 37 C, timp de 20 minute. Se agită și se filtrează pe filtru cutat. Din fiecare probă filtrată se ia câte 1 ml în alte eprubete. Se adaugă apoi câte 5 ml soluție de carbonat de sodiu 0,5 M și la interval de 1 minut câte 1 ml reactiv Folin-CiCalteu și se agită. Se determină extincția probei active la 660 nm, în cuve de 1
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
1 și 0,6 se realizează o altă scară etalon cu alte concentrații de tirozină. Se trasează apoi o curbă etalon trecând pe abscisă µg tirozină și pe ordonată extincțiile corespunzătoare. Mod de lucru pentru determinarea activității enzimatice În două eprubete se pipetează câte 5 ml din soluția de substrat de cazeină. Conținutul eprubetelor se aduce la temperatura de 40 C prin menținere pe o baie de apă sau termostat timp de 15 minute. În una din eprubete se adaugă 2
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
de tirozină. Se trasează apoi o curbă etalon trecând pe abscisă µg tirozină și pe ordonată extincțiile corespunzătoare. Mod de lucru pentru determinarea activității enzimatice În două eprubete se pipetează câte 5 ml din soluția de substrat de cazeină. Conținutul eprubetelor se aduce la temperatura de 40 C prin menținere pe o baie de apă sau termostat timp de 15 minute. În una din eprubete se adaugă 2 ml din extractul enzimatic ce trebuie analizat, iar în cea de-a doua
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
enzimatice În două eprubete se pipetează câte 5 ml din soluția de substrat de cazeină. Conținutul eprubetelor se aduce la temperatura de 40 C prin menținere pe o baie de apă sau termostat timp de 15 minute. În una din eprubete se adaugă 2 ml din extractul enzimatic ce trebuie analizat, iar în cea de-a doua 3 ml acid tricloracetic și 2 ml preparat enzimatic (proba martor). După omogenizare, cele două eprubete se termostatează la 40 C timp de 60
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
termostat timp de 15 minute. În una din eprubete se adaugă 2 ml din extractul enzimatic ce trebuie analizat, iar în cea de-a doua 3 ml acid tricloracetic și 2 ml preparat enzimatic (proba martor). După omogenizare, cele două eprubete se termostatează la 40 C timp de 60 minute. După epuizarea timpului în eprubeta în care a acționat enzima se adaugă 3 ml acid tricloracetic (pentru stoparea activității) și se omogenizează. Ambele eprubete se introduc într o baie de apă
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
extractul enzimatic ce trebuie analizat, iar în cea de-a doua 3 ml acid tricloracetic și 2 ml preparat enzimatic (proba martor). După omogenizare, cele două eprubete se termostatează la 40 C timp de 60 minute. După epuizarea timpului în eprubeta în care a acționat enzima se adaugă 3 ml acid tricloracetic (pentru stoparea activității) și se omogenizează. Ambele eprubete se introduc într o baie de apă la fierbere și se țin 30 minute, pentru a permite proteinelor precipitate să coaguleze
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
enzimatic (proba martor). După omogenizare, cele două eprubete se termostatează la 40 C timp de 60 minute. După epuizarea timpului în eprubeta în care a acționat enzima se adaugă 3 ml acid tricloracetic (pentru stoparea activității) și se omogenizează. Ambele eprubete se introduc într o baie de apă la fierbere și se țin 30 minute, pentru a permite proteinelor precipitate să coaguleze complet. Conținutul fiecărei eprubete se filtrează prin hârtie de filtru folosind vase curate și uscate. Dacă filtratele nu sunt
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
acționat enzima se adaugă 3 ml acid tricloracetic (pentru stoparea activității) și se omogenizează. Ambele eprubete se introduc într o baie de apă la fierbere și se țin 30 minute, pentru a permite proteinelor precipitate să coaguleze complet. Conținutul fiecărei eprubete se filtrează prin hârtie de filtru folosind vase curate și uscate. Dacă filtratele nu sunt perfect limpezi se recirculă prin aceeași hârtie de filtru. Se măsoară extincția la 280 nm folosind același aparat ca în cazul scării etalon, cuve de
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
pe care o au provitaminele D de a da în prezența anumitor reactici diferite culori. XI.1.2.1. Reacția Liebermann-Burchard Reactivi Soluție cloroformică de provitamină D 0,5 %; Acetaldehidă; Acid sulfuric concentrat. Mod de lucru Se iau într-o eprubetă 1-2 ml soluție cloroformică de provitamină D și se adaugă pe rând 1 ml aldehidă acetică și 3-4 picături acid sulfuric conc. Se obține la început o culoare roșie care virează ușor spre violet, iar în final în verde. XI
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
început o culoare roșie care virează ușor spre violet, iar în final în verde. XI.1.2.2. Reacția Rosenheim Reactivi Soluție cloroformică de provitamina D 0,5 %; Soluție de acid tricloracetic 10 %. Mod de lucru Se iau într-o eprubetă 1-2 ml soluție cloroformică de provitamină D și se adaugă 1 ml soluție de acid tricloracetic. Apare o colorație roșie care virează încet în albastru deschis. XI.1.3. Identificarea vitaminelore D Ca și pentru provitaminele D se cunosc numeroase
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
metodei Vitaminele D, în prezența anilinei și acidului clorhidric, dau o culoare roșie. Reactivi soluție uleioasă de vitamina D farmaceutică (600000 U.I.) sau untură de pește; soluție acid clorhidric concentrat-alanină (1:1); Mod de lucru Se ia într-o eprubetă 1 ml din soluția vitaminică și se tratează cu câteva picături din soluția de acid clorhidric alanină. Apare o colorație roșie, atât cu soluția de vitamină pură cât și cu untura de pește. XI.1.4. Identificarea vitaminei A Principiul
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
și nu dau indicații corecte asupra activității biologice. Reactivi soluție uleioasă de vitamina A (30000 U.I. / 1 ml); soluție cloroformică de acid tricloracetic: acid tricloracetic 30,09 g și cloroform 100 ml. Mod de lucru Se iau într-o eprubetă 4-5 picături de soluție de vitamină A și se adaugă 1 ml din soluția cloroformică acidă. La început apare o colorare galbenă care ulterior trece în albastru. XI.1.5. Identificarea vitaminelor E Principiul metodei Reacțiile chimice pentru recunoașterea vitaminelor
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
bazează pe proprietatea tCoferolilor de a se oxida în prezența acidului azotic cu formarea unei culori roșii. Reactivi soluție uleioasă de vitamină E (vitamină farmaceutică 0,3 mg / 1 ml); acid azotic concentrat. Mod de lucru Se iau într-o eprubetă 10 picături de soluție uleioasă de vitamină E și se titrează cu acid azotic. Se încălzește și apoi se dezvoltă imediat o culoare roșie datorită apariției unui compus cu structură chinonică. Metoda este rapidă dar are dezavantajul că este pozitivă
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
leucoderivat nefluorescent. Reacția este reversibilă, produsul redus se poate reoxida prin simpla agitare la aer. Reactivi soluție de vitamina B2 (produs farmaceutic / 2 mg fiolă); pulbere de fier; soluție diluată de acid clorhidric; Mod de lucru Se ia într-o eprubetă 1 ml din soluția de riboflavină și se observă fluorescența galben-verzuie. Se adaugă o mică cantitate de pulbere de fier și 1-2 ml soluție de acid clorhidric. Fluorescența dispare datorită reducerii substanței. Se astupă eprubeta cu degetul și se agită
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
lucru Se ia într-o eprubetă 1 ml din soluția de riboflavină și se observă fluorescența galben-verzuie. Se adaugă o mică cantitate de pulbere de fier și 1-2 ml soluție de acid clorhidric. Fluorescența dispare datorită reducerii substanței. Se astupă eprubeta cu degetul și se agită. Soluția își recapată fluorescența inițială datorită oxidării substanței sub acțiunea oxigenului atmosferic. XI.2. METODE DE DOZARE A VITAMINELOR XI.2.1. Dozarea provitaminei A Principiul metodei Carotenul se extrage din materialul cercetat cu acetonă
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
la 100 ml, din care benzenul se îndepărtează până la sec pe baie de apă în vacuum realizat cu trompă de vid în apă. După acesta reziduul se preia cu 10 ml soluție de reactiv și benzen, din nou se astupă eprubeta și se lasă la lC întunecos. Intensitatea colorației se măsoară după 15 minute la spectrafotometru cu filtru verde (absorbția maxima λ=490 nm). Pentru analiza de material vegetal uscat, o probă de 0,1-0,5 g se introduce în coloana
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
care conține tiamina se supune oxidării. Pentru aceasta, într-o altă pâlnie de separare se introduc 2 ml NaOH 30 %, apoi pe pereții pâlniei soluția de K3Fe(CN)6, 2 %. Cantitatea de oxidant se stabilește empiric. Pentru aceasta în 6 eprubete cu dop rodat se interoduc câte 2 ml NaOH 30 % și 5 ml extract, adăugând în ele câte 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 ml de oxidant. Eprubetele se închid și după o agitare intensă timp
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
oxidant se stabilește empiric. Pentru aceasta în 6 eprubete cu dop rodat se interoduc câte 2 ml NaOH 30 % și 5 ml extract, adăugând în ele câte 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 ml de oxidant. Eprubetele se închid și după o agitare intensă timp de 2 minute se observă apariția unei colorații galbene. Pentru oxidarea soluției de analizat se utilizează volumul de oxidant stabilit anterior la adăugarea căruia a apărut o colorație galbenă ce nu a
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
obține prin diluarea de 100 ori a soluției mamă. Mod de lucru Două porțiuni a câte 8 ml extract filtrat (se utilizează extract preparat pentru determinarea tiaminei după incubarea cu preparat de fosfatază, vezi dozarea vitaminei B1). Se introduc în eprubete gradate de 10 ml. În una din ele, pentru control, se adaugă 0,5 ml soluție standard de riboflavină, adică 0,2 µg. Se adaugă în picături în ambele eprubete o cantitate egală de soluție 4 % de KMnO4 până la apariția
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
preparat de fosfatază, vezi dozarea vitaminei B1). Se introduc în eprubete gradate de 10 ml. În una din ele, pentru control, se adaugă 0,5 ml soluție standard de riboflavină, adică 0,2 µg. Se adaugă în picături în ambele eprubete o cantitate egală de soluție 4 % de KMnO4 până la apariția unei colorații slab roz ( de obicei 1 ml). După 10 minute pentru îndepărtarea excesului de permanganat, soluțiilor li se adaugă în picături H2O2 soluție 3 % (aproximativ 2-5 picături) până la decolorare
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
H2O2 soluție 3 % (aproximativ 2-5 picături) până la decolorare. La soluțiile decolorate se adaugă 0,2 ml soluție SnCl2 și 0,1 ml soluție de hidrosulfat de sodiu și amestecul se agită intens timp de 20 minute. Volumul de lichid din eprubete se aduce cu apă la 10 ml și apoi se măsoară fluorescența. Drept soluție de comparație se utilizează soluția standard de riboflavină. După fluorometru în eprubetele cu soluția de analizat și cu soluția standard se adaugă câte 0,1 g
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
sodiu și amestecul se agită intens timp de 20 minute. Volumul de lichid din eprubete se aduce cu apă la 10 ml și apoi se măsoară fluorescența. Drept soluție de comparație se utilizează soluția standard de riboflavină. După fluorometru în eprubetele cu soluția de analizat și cu soluția standard se adaugă câte 0,1 g NaHCO3 și 0,1 g Na2S2O4 x 2 H2O (hidrosulfat de sodiu) pentru înlăturarea fluorescenței riboflavinei și din nou se măsoară fluorescența amestecului. Mod de calcul
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
fenolftaleinei prin adăugare de K3PO4 cristalizat până la apariția unei colorații slab - roz; apoi se aduce la pH=6 cu HCl 1N și se centrifughează până la limpezirea deplină a lichidului supernatant. Se iau 5 ml de extract, se introduc într-o eprubetă gradată de 10 ml, se încălzesc până la 70 C. Apoi se adaugă 1 ml soluție proaspătă de rodan-bromură și 2 ml alcoolică de anilină, se amestecă; Se aduce lichidul la semn cu soluție alcoolică de anilină, se lasă 1-11/2
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
soluție eterică 0,1% (se dizolvă 0,1 g floroglucină în 100 ml eter etilic și se păstrează în sticlă brună cu dop rodat, la întuneric max. 7-8 zile); acid clorhidric concentrat (d=1,19). Mod de lucru într-o eprubetă curată se introduc 2-3 ml untură topită (45500C). Se adaugă același volum de acid clorhidric concentrat și se omogenizează bine. În continuare se adaugă același volum de soluție floroglucinică omogenizându-se din nou. Interpretarea reacției când untura este proaspătă, conținutul
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]