5,180 matches
-
gel (volumul spațiului gol sau volumul 1); Vi = volumul intern (volumul 2); Vg = volumul matricei (volumul 3). În cazul proteinelor, volumul de reținere, Vr se poate exprima prin ecuația. Profilul de eluție a trei mărimi moleculare În practică, fiecare fază staționară are rangul său de separare exprimat în doi termeni de masă: masa mare și masa mică, în afara cărora separările sunt imposibile. Particulele curg pe coloană fiind reținute sau separate și apar sub forma unor picuri pe cromatogramă. FAZE STAȚIONARE Ca
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
fază staționară are rangul său de separare exprimat în doi termeni de masă: masa mare și masa mică, în afara cărora separările sunt imposibile. Particulele curg pe coloană fiind reținute sau separate și apar sub forma unor picuri pe cromatogramă. FAZE STAȚIONARE Ca faze staționare se utilizează polimeri organici cu structură reticulată (copolimeri de stiren-divinil benzen) sau compuși minerali (silicați hidroxilați) cu diametru cuprins între 4 și 500 nm. Aceste materiale, adesea denumite geluri, pot fi utilizate sub presiune și temperaturi de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
rangul său de separare exprimat în doi termeni de masă: masa mare și masa mică, în afara cărora separările sunt imposibile. Particulele curg pe coloană fiind reținute sau separate și apar sub forma unor picuri pe cromatogramă. FAZE STAȚIONARE Ca faze staționare se utilizează polimeri organici cu structură reticulată (copolimeri de stiren-divinil benzen) sau compuși minerali (silicați hidroxilați) cu diametru cuprins între 4 și 500 nm. Aceste materiale, adesea denumite geluri, pot fi utilizate sub presiune și temperaturi de ordinul sutelor de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
cuprins între 4 și 500 nm. Aceste materiale, adesea denumite geluri, pot fi utilizate sub presiune și temperaturi de ordinul sutelor de grade, deci în diverse condiții. Coloanele standard au aproximativ 30 cm (diametrul interior, ID = 7,2 mm) Fazele staționare includ. faze lipofilice, când se utilizează faze mobile organice ca tetrahidrofuran sau cloroform. Fazele staționare constituite din alcooli polivinilici sau copolimeri cu poliglicerometacrilat sau vinilpoliacetat sunt utilizate pentru separările de polimeri biologici ce se găsesc într-o fază apoasă (polizaharide
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
presiune și temperaturi de ordinul sutelor de grade, deci în diverse condiții. Coloanele standard au aproximativ 30 cm (diametrul interior, ID = 7,2 mm) Fazele staționare includ. faze lipofilice, când se utilizează faze mobile organice ca tetrahidrofuran sau cloroform. Fazele staționare constituite din alcooli polivinilici sau copolimeri cu poliglicerometacrilat sau vinilpoliacetat sunt utilizate pentru separările de polimeri biologici ce se găsesc într-o fază apoasă (polizaharide, proteine) De asemenea, pentru separări hidrofilice sunt utilizate gelurile poroase constituite din silicați ce conțin
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
solvenții comuni. Coloanele se calibrează utilizând 4-5 etaloane (proteine cu masă moleculară cunoscută) pentru a determina volumul gol (void) și pentru a determina dependența logaritmică. Curba reprezintă logaritmul masei (M) funcție de volumul de eluție și are formă sigmoidală. Alegerea fazei staționare trebuie făcută prin examinarea curbei de calibrare pe diverse coloane. Coloana aleasă trebuie să dea un răspuns linear despre masa moleculară a analitului. Se determină curba de calibrare utilizând macromolecule cu masă cunoscută și reprezentând pe abscisă timpul de reținere
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
1-14). Curba are forma prezentată în figura de mai jos: Picul din extremitatea dreaptă reprezintă stirenul monomeric. Acesta reprezintă molecula cea mai mică și eluează cel mai târziu. Vo este volumul mort, Vz reprezintă volumul de lichid dintre particulele fazei staționare. V0-Vz este volumul porilor fazei staționare. În cromatografia de filtrare prin gel se folosesc ca faze staționare: - silicea; - polimetilacrilat; - polivinil; - polistiren. APARATURA Aparatura și metodologia de analiză pentru CES este similară celei de HPLC. Configurarea unui sistem GPC este redată
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
figura de mai jos: Picul din extremitatea dreaptă reprezintă stirenul monomeric. Acesta reprezintă molecula cea mai mică și eluează cel mai târziu. Vo este volumul mort, Vz reprezintă volumul de lichid dintre particulele fazei staționare. V0-Vz este volumul porilor fazei staționare. În cromatografia de filtrare prin gel se folosesc ca faze staționare: - silicea; - polimetilacrilat; - polivinil; - polistiren. APARATURA Aparatura și metodologia de analiză pentru CES este similară celei de HPLC. Configurarea unui sistem GPC este redată mai jos: Coloanele utilizate sunt adesea
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Acesta reprezintă molecula cea mai mică și eluează cel mai târziu. Vo este volumul mort, Vz reprezintă volumul de lichid dintre particulele fazei staționare. V0-Vz este volumul porilor fazei staționare. În cromatografia de filtrare prin gel se folosesc ca faze staționare: - silicea; - polimetilacrilat; - polivinil; - polistiren. APARATURA Aparatura și metodologia de analiză pentru CES este similară celei de HPLC. Configurarea unui sistem GPC este redată mai jos: Coloanele utilizate sunt adesea de un volum mai mare în ordinea descrescătoare a rezoluției, uneori
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
GPC separă moeleculele în soluție pe baza “mărimii lor efective. Pentru a pregăti o probă pentru analiză GPC, rășina este solubilizată/dizolvată într-un solvent potrivit. În GPC, rășina dizolvată este injectată continuu în faza mobilă, ce trece prin faza staționară împachetată strâns în coloană. Mărimile porilor fazei staționare sunt controlați și disponibili într-o varietate largă de mărimi. Secțiune prin faza staționară Lărgimea picurilor individuale reflectă distribuția mărimii particulelor pentru o rășină dată și componentele sale. Curba de distribuție este
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
lor efective. Pentru a pregăti o probă pentru analiză GPC, rășina este solubilizată/dizolvată într-un solvent potrivit. În GPC, rășina dizolvată este injectată continuu în faza mobilă, ce trece prin faza staționară împachetată strâns în coloană. Mărimile porilor fazei staționare sunt controlați și disponibili într-o varietate largă de mărimi. Secțiune prin faza staționară Lărgimea picurilor individuale reflectă distribuția mărimii particulelor pentru o rășină dată și componentele sale. Curba de distribuție este numită și curba distribuției greutăților moleculare (MWD). Mecanismul
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
într-un solvent potrivit. În GPC, rășina dizolvată este injectată continuu în faza mobilă, ce trece prin faza staționară împachetată strâns în coloană. Mărimile porilor fazei staționare sunt controlați și disponibili într-o varietate largă de mărimi. Secțiune prin faza staționară Lărgimea picurilor individuale reflectă distribuția mărimii particulelor pentru o rășină dată și componentele sale. Curba de distribuție este numită și curba distribuției greutăților moleculare (MWD). Mecanismul separării după mărimea particulelor Moleculele de diferite dimensiuni eluează din coloană cu rate diferite
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
în porii particulelor, iar moleculele mari trec rapid printre particule și sunt excluse. Acestea eluează primele. Moleculele mici vor trece mai greu, vor fi oprite mereu în porii particulelor și astfel vor elua ultimele. Avantaje: - absența oricăror interacțiuni cu faza staționară; - eluție rapidă; - potențialul de determinare al analitului este mare; - control și măsură în timp real; - se aplică pentru separarea speciilor cu masă moleculară mare; - timp de separare bine definit și mic; - sensibilitate bună; - tehnica permite separarea normală a unei mase
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Atunci când se folosește un gaz ca fază mobilă într-un sistem cromatografic, tehnica este denumită gaz-cromatografie (GC). Această tehnică se efectuează întotdeauna într-o coloană cromatografică deoarece faza mobilă trebuie să curgă în mod continuu. Clasificare cromatografia gaz-lichid (GLC) - faza staționară este un lichid, iar procesul este o formă de repartiție cromatografică cromatografia gaz-solid (GSC) - faza staționară este o suprafață solidă, fenomenul de separare are loc prin adsorbție. Principii generale Separările în gaz-cromatografie au la bază aceleași principii pe care se
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
GC). Această tehnică se efectuează întotdeauna într-o coloană cromatografică deoarece faza mobilă trebuie să curgă în mod continuu. Clasificare cromatografia gaz-lichid (GLC) - faza staționară este un lichid, iar procesul este o formă de repartiție cromatografică cromatografia gaz-solid (GSC) - faza staționară este o suprafață solidă, fenomenul de separare are loc prin adsorbție. Principii generale Separările în gaz-cromatografie au la bază aceleași principii pe care se fundamentează celelalte tipuri de analiză cromatografică. Compușii de analizat migrează prin sistemul cromatografic cu viteze determinate
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de separare are loc prin adsorbție. Principii generale Separările în gaz-cromatografie au la bază aceleași principii pe care se fundamentează celelalte tipuri de analiză cromatografică. Compușii de analizat migrează prin sistemul cromatografic cu viteze determinate de afinitățile lor pentru faza staționară. Puterea de separare depinde de vitezele diferitelor zone de migrare. Se observă o tendință de separare a zonelor centrale și o tendință de amestecare a zonelor periferice. În gaz-cromatografie, faza mobilă (gazul purtător) este un gaz inert (hidrogen, azot, heliu
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de separare a zonelor centrale și o tendință de amestecare a zonelor periferice. În gaz-cromatografie, faza mobilă (gazul purtător) este un gaz inert (hidrogen, azot, heliu, argon, aer purificat), astfel încât coeficientul de distribuție este determinat de afinitatea probei pentru faza staționară (în cromatografia de lichide atât faza staționară cât și cea mobilă controlează coeficientul de distribuție). In gaz-cromatografie compușii de analizat migrează prin coloană numai când sunt în stare gazoasă și din acest motiv se ține cont de relația dintre presiunea
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
cea mobilă controlează coeficientul de distribuție). In gaz-cromatografie compușii de analizat migrează prin coloană numai când sunt în stare gazoasă și din acest motiv se ține cont de relația dintre presiunea de vapori a acestora și concentrația lor în faza staționară. Unei soluții ideale i se aplică legea lui Raoult. coeficientul de activitate al acestora, ceea ce arată că este posibil să se separe substanțele care au presiuni de vapori identice, dacă coeficienții lor de activitate sunt diferiți în faza staționară a
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
faza staționară. Unei soluții ideale i se aplică legea lui Raoult. coeficientul de activitate al acestora, ceea ce arată că este posibil să se separe substanțele care au presiuni de vapori identice, dacă coeficienții lor de activitate sunt diferiți în faza staționară a gaz-cromatografiei. Timpul de reținere, tR, este timpul (minute) necesar eluării maximului zonei, măsurat din momentul injectării probei. Viteza de curgere, Fa este debitul fazei mobile în ml/min măsurat la orificiul de golire al coloanei, la temperatura camerei. Viteza
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
în coloană. 2. Coloane Se cunosc două tipuri de coloane: împachetate și capilare (numite și tuburi deschise). coloanele împachetate conțin un suport material solid (diametru particulelor < 100-300 μm), inert, fin divizat (bazat pe pământ de diatomee) acoperit cu o fază staționară lichidă. Aceste coloane sunt de 1,5 -10 m lungime și au un diametru interior de 2-4 mm. Se utilizează pe scară largă, dar sunt încete și ineficiente. coloanele capilare au un diametru interior de aproximativ 10 mm. Au eficiență
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
coloanele capilare au un diametru interior de aproximativ 10 mm. Au eficiență bună, sunt rapide, dar doar pentru probe mici. Sunt de două tipuri: - coloane tuburi deschise cu pereții acoperiți (wall-coated open tubular- WCOT) - au pereții acoperiți cu o fază staționară lichidă de < 1μm; - coloane tuburi deschise cu suport acoperit (support-coated open tubular-SCOT) - pereții interiori ai capilarei sunt acoperiți cu un strat subțire de suport material (pamânt de diatomee) pe care este adsorbită faza staționară. Coloanele SCOT sunt mai puțin eficiente
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
au pereții acoperiți cu o fază staționară lichidă de < 1μm; - coloane tuburi deschise cu suport acoperit (support-coated open tubular-SCOT) - pereții interiori ai capilarei sunt acoperiți cu un strat subțire de suport material (pamânt de diatomee) pe care este adsorbită faza staționară. Coloanele SCOT sunt mai puțin eficiente decât cel WCOT. Ambele tipuri de coloane capilare sunt mai eficiente decât coloanele împachetate. Pentru a rezolva anumite incompatibilități ale fazei staționare ce duce la utilizarea de coloane paralele în loc de o singură coloană, au
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
subțire de suport material (pamânt de diatomee) pe care este adsorbită faza staționară. Coloanele SCOT sunt mai puțin eficiente decât cel WCOT. Ambele tipuri de coloane capilare sunt mai eficiente decât coloanele împachetate. Pentru a rezolva anumite incompatibilități ale fazei staționare ce duce la utilizarea de coloane paralele în loc de o singură coloană, au apărut 2 tipuri de coloane: “microfast” - încălzite intern, combină 2 coloane, un dispozitiv intern de încălzire și un sensor de temperatură într-o singură coloană; “micropacked” - coloană în
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
din interior, astfel furnizându-se un comportament de separare a 2 coloane în una singură. 3. Materiale suport Materialul suport joacă un rol important și particular când faza lichidă este în cantitate mică. Alegerea suportului potrivit ca și a fazei staționare precum și a celorlaltor factori este de o deosebită importanță. In general, un material suport trebuie să îndeplinească câteva condiții dintre care menționăm: să aibă o suprafață activă mare; să fie inert din punct de vedere chimic și lipsit de efecte
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
trebuie să îndeplinească câteva condiții dintre care menționăm: să aibă o suprafață activă mare; să fie inert din punct de vedere chimic și lipsit de efecte adsorbtive; să fie robust din punct de vedere fizic; când este învelit cu faza staționară trebuie să umple ușor și uniform coloana. Se folosesc drept suporturi: - diferite tipuri de pământ de diatomee special purificate, a căror mărimi ale ochiurilor rețelei sunt de 60 - 80, 80 - 100 și 100-120 mesh; - Chromosorb P, W, G; - perle de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]