1,963 matches
-
și o adâncime egală aproximativ cu două treimi din grosimea tulpinii. Se închide incizia aplicând vaselină sterilă cu ajutorul unei seringi. 9.3. Prin aceeași tehnică, se inoculează cinci plantule cu o suspensie apoasă de 105-106 celule pe ml dintr-o sușă virulentă de patruzeci și opt de ore din biovar 2 de R. solanacearum drept control pozitiv și cu tampon de concentrare (apendicele 4) drept control negativ. Se separă plantele de control pozitiv și negativ de celelalte plante pentru a evita
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Testul biologic este pozitiv atunci când plantele test sunt infectate cu R. solanacearum. B. TESTE DE IDENTIFICARE Culturile pure prezumtive de R. solanacearum se identifică prin cel puțin unul dintre următoarele teste bazate pe principii biologice diferite. Se includ, după caz, sușe de referință cunoscute pentru fiecare test efectuat (a se vedea apendicele 3). 1. Teste de identificare enzimatice și de nutriție Se stabilesc următoarele caracteristici fenotipice prezente sau absente sistematic la R. solanacearum în conformitate cu metodele Lelliott și Stead (1987), Klement et
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
al. (1999), Opina et al. (1997), Weller et al. (1999)]. 4.4. O identificare pozitivă a R. solanacearum se obține atunci când fragmentele amplificate PCR au aceeași dimensiune și aceleași polimorfisme ale dimensiunii fragmentelor de restricție ca în cazul celor ale sușei de control pozitiv. 5. Testul FISH 5.1. Se prepară o suspensie de circa 106 celule/ml în apă ultrapură. 5.2. Se aplică procedura FISH (secțiunea VI.A.7) cu cel puțin două oligosonde specifice de R. solanacearum (apendicele
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
trebuie să fie identic cu cel al controlului pozitiv. Prezența acizilor grași caracteristici 14:0 3OH, 16:0 2OH, 16:1 2OH și 18:1 2OH și absența 16:0 3OH indică prezența Ralstonia sp. 7. Metode de caracterizare a sușei Se recomandă o caracterizare a sușei prin una dintre următoarele metode pentru fiecare caz nou de izolare a R. solanacearum. Se includ, după caz, sușe de referință cunoscute pentru fiecare test efectuat (a se vedea apendicele 3). 7.1. Determinarea
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
al controlului pozitiv. Prezența acizilor grași caracteristici 14:0 3OH, 16:0 2OH, 16:1 2OH și 18:1 2OH și absența 16:0 3OH indică prezența Ralstonia sp. 7. Metode de caracterizare a sușei Se recomandă o caracterizare a sușei prin una dintre următoarele metode pentru fiecare caz nou de izolare a R. solanacearum. Se includ, după caz, sușe de referință cunoscute pentru fiecare test efectuat (a se vedea apendicele 3). 7.1. Determinarea biovarului Există diferiți biovari de R.
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
2OH și absența 16:0 3OH indică prezența Ralstonia sp. 7. Metode de caracterizare a sușei Se recomandă o caracterizare a sușei prin una dintre următoarele metode pentru fiecare caz nou de izolare a R. solanacearum. Se includ, după caz, sușe de referință cunoscute pentru fiecare test efectuat (a se vedea apendicele 3). 7.1. Determinarea biovarului Există diferiți biovari de R. solanacearum în funcție de capacitatea lor de a utiliza și/sau oxida trei zaharuri și trei hexoze alcoolice (Hayward, 1964 și
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
în lume) (găsit în Chile și în Columbia) (găsit în zona tropicală) Utilizarea trehalozei - + + Utilizarea mezo-inozitei + - + Utilizarea D-ribozei - - + Activitate pectolitică 1 scăzută scăzută ridicată 1 A se vedea Lelliott & Stead (1987) 7.2. Amprentă genomică Diferențierea moleculară a sușelor din complexul R. solanacearum se poate face prin: 7.2.1. Analiza polimorfismului dimensiunii fragmentelor de restricție RFLP (Cook et al., 1989). 7.2.2. PCR pe secvențe repetitive folosind primeri [REP, BOX și ERIC (Louws et al, 1995; Smith
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
al, 1995)]. 7.2.3. Analiza polimorfismului dimensiunii fragmentelor de restricție amplificate (Van der Wolf et al., 1998). 7.3. Metodele PCR Se pot folosi primeri specifici PCR (Pastrik et al., 2002; a se vedea apendicele 6) pentru a diferenția sușele aparținând diviziunii 1 (biovari 3, 4 și 5) și diviziunii 2 (biovari 1, 2A și 2T) ale R. solanacearum, astfel cum au fost definite inițial de analiza RFLP (Cook et al., 1989) și secvența 16S a ADNr (Taghavi et al
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
efectuat pentru confirmarea finală a diagnosticului de R. solanacearum și pentru evaluarea virulenței culturilor identificate ca fiind R. solanacearum. (1) Se prepară un inoculum de circa 106 celule/ml dintr-o cultură de 24-48 ore de izolat și dintr-o sușă corespunzătoare de control pozitiv de R. solanacearum (de exemplu, NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857; a se vedea apendicele 3). (2) Se inoculează 5-10 plantule de tomată sau vânătă sensibile, la nivelul celei de a treia frunze adevărate (a se
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de control standardizat disponibil în comerț (a) Izolate de bacterii Următoarele izolate de bacterii se recomandă spre utilizare în calitate de material standard de referință sau control pozitiv (tabelul 1) sau pe parcursul optimizării testelor pentru a evita reacții încrucișate (tabelul 2). Toate sușele sunt disponibile în comerț la următoarele adrese: 1. National Collection of Plant Pathogenic Bacteria (NCPPB), Central Science Laboratory, York, UK. 2. Culture Collection of the Plant Protection Service (PD), Wageningen, Țările de Jos. 3. Collection française de bactéries phytopathogènes (CFBP
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
2, 3 AND 5]*** Cod NCPPB SMT # Alte coduri Țara de origine Biovar Egipt Turcia Anglia Cipru Suedia Belgia Țările de Jos Franța Portugalia Spania Germania Statele Unite Costa Rica Columbia Peru Brazilia Peru Australia Sri Lanka Filipine China (*)A se utiliza ca sușă de referință standard biovarul 2 soiul 3 de R. solanacearum. Notă: Autenticitatea sușelor menționate anterior poate fi garantată numai în cazul în care acestea sunt obținute dintr-o colecție de culturi autentice. Tabelul 2. Gama de referință SMT de bacterii
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Egipt Turcia Anglia Cipru Suedia Belgia Țările de Jos Franța Portugalia Spania Germania Statele Unite Costa Rica Columbia Peru Brazilia Peru Australia Sri Lanka Filipine China (*)A se utiliza ca sușă de referință standard biovarul 2 soiul 3 de R. solanacearum. Notă: Autenticitatea sușelor menționate anterior poate fi garantată numai în cazul în care acestea sunt obținute dintr-o colecție de culturi autentice. Tabelul 2. Gama de referință SMT de bacterii corelate serologic sau genetic în vederea utilizării pentru optimizarea testelor de detectare ***[PLEASE INSERT
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
colecție de culturi autentice. Tabelul 2. Gama de referință SMT de bacterii corelate serologic sau genetic în vederea utilizării pentru optimizarea testelor de detectare ***[PLEASE INSERT TEXT AND NUMBERS FROM ORIGINAL IN ALL COLUMNS]*** Cod NCPPB SMT # Alt cod Identificare (1) Sușă care poate să provoace în testele serologice (IF și/sau ELISA) o reacție încrucișată cu antiserurile policlonale. (2) Sușă din care poate fi amplificat produsul PCR în anumite laboratoare având dimensiuni asemănătoare celor preconizate la utilizarea primerilor specifici OLI-1 și
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
optimizarea testelor de detectare ***[PLEASE INSERT TEXT AND NUMBERS FROM ORIGINAL IN ALL COLUMNS]*** Cod NCPPB SMT # Alt cod Identificare (1) Sușă care poate să provoace în testele serologice (IF și/sau ELISA) o reacție încrucișată cu antiserurile policlonale. (2) Sușă din care poate fi amplificat produsul PCR în anumite laboratoare având dimensiuni asemănătoare celor preconizate la utilizarea primerilor specifici OLI-1 și Y-2 (a se vedea apendicele 6). (3) Susceptibil să provoace o reacție încrucișată în majoritatea testelor, dar cunoscut ca
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
NCPPB: Granule liofilizate de extract din 200 tuberculi de cartof sănătoși în calitate de control negativ pentru ansamblul testelor. Granule liofilizate de extract din 200 tuberculi de cartofi sănătoși conținând 103-104 și 104-106 celule de biovar 2 de R. solanacearum (de exemplu, sușa NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857) în calitate de control pozitiv pentru testele serologice și PCR. Întrucât liofilizarea afectează viabilitatea celulelor, acestea nu pot fi folosite drept control standard pentru testele de izolare sau testele biologice. Suspensii fixate cu formalină de biovar
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
CFBP 3857) în calitate de control pozitiv pentru testele serologice și PCR. Întrucât liofilizarea afectează viabilitatea celulelor, acestea nu pot fi folosite drept control standard pentru testele de izolare sau testele biologice. Suspensii fixate cu formalină de biovar 2 de R. solanacearum (sușa NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857) la 106 celule/ml în calitate de control pozitiv pentru testele serologice. B. Pregătirea controalelor pozitive și negative Se crește timp de 48 ore o sușă virulentă de biovar 2 rasa 3 de R. solanacearum (de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Suspensii fixate cu formalină de biovar 2 de R. solanacearum (sușa NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857) la 106 celule/ml în calitate de control pozitiv pentru testele serologice. B. Pregătirea controalelor pozitive și negative Se crește timp de 48 ore o sușă virulentă de biovar 2 rasa 3 de R. solanacearum (de exemplu, sușa NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857) într-un mediu general SMSA și se face o suspensie într-un tampon fosfat 10 mM pentru a obține o densitate celulară
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
4156 = PD 2762 = CFBP 3857) la 106 celule/ml în calitate de control pozitiv pentru testele serologice. B. Pregătirea controalelor pozitive și negative Se crește timp de 48 ore o sușă virulentă de biovar 2 rasa 3 de R. solanacearum (de exemplu, sușa NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857) într-un mediu general SMSA și se face o suspensie într-un tampon fosfat 10 mM pentru a obține o densitate celulară de circa 2 x 108 ufc/ml. În general, aceasta se obține
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Protocoale PCR și reactivi validați Notă: Testele preliminare trebuie să permită detectarea reproductibilă a 103-104 celule de R. solanacearum pe ml de extract de eșantion. De asemenea, testele preliminare nu trebuie să indice rezultate pozitive false cu o gamă de sușe bacteriene selecționate (a se vedea apendicele 3). 1. Protocolul PCR Seal et al. (1993) 1.1. Secvența de primer de oligonucleotide Primer sens OLI-1 5΄-GGG GGT AGC TTG CTA CCT GCC-3΄ Primer antisens Y-2 5΄-CCC ACT GCT GCC
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
specii, provenind din toate părțile de pe teritoriul Elveției pentru care autoritățile țării în cauză au aplicat restricții echivalente cu cele stabilite prin deciziile 2006/115/CE12 și 2006/135/CE13 ale Comisiei. (8) Amenințarea pe care o reprezintă, pentru Comunitate, sușa asiatică a virusului influenței aviare nu a scăzut. Sunt descoperite, în continuare, cazuri de boală la păsările sălbatice din Comunitate și la păsările sălbatice și păsările de curte din diferite țări terțe, inclusiv din țări membre ale Oficiului Internațional de
32006D0405-ro () [Corola-website/Law/294818_a_296147]
-
Decizia 2005/436/CE, Comisia Comunităților Europene și Organizația Națiunilor Unite pentru Alimentație și Agricultură au încheiat, la 1 septembrie 2005, un acord de aplicare privind utilizarea și funcționarea fondului menționat.. (3) Ținând seama de apariția unor noi topotipuri și sușe ale virusului și de deteriorarea măsurilor de combatere pe plan regional, cărora li se adaugă apariția simultană a gripei aviare, Comunitatea, în strânsă cooperare cu Comisia Europeană pentru combaterea febrei aftoase (EUFMD) și cu ajutorul fondului, trebuie să se pregătească să
32006D0447-ro () [Corola-website/Law/294836_a_296165]
-
32006D0473 DECIZIA COMISIEI din 5 iulie 2006 de recunoaștere a anumitor țări terțe și a anumitor regiuni din țări terțe ca fiind îndemne de Xanthomonas campestris (toate sușele patogene citricului), Cercospora angolensis Carv. & Mendes sau Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele patogene citricului) [notificata cu numarul C(2006) 3024] (2006/473/CE) COMISIA COMUNITĂȚILOR EUROPENE, având în vedere Tratatul de instituire a Comunității Europene, având în vedere Directivă
32006D0473-ro () [Corola-website/Law/294852_a_296181]
-
32006D0473 DECIZIA COMISIEI din 5 iulie 2006 de recunoaștere a anumitor țări terțe și a anumitor regiuni din țări terțe ca fiind îndemne de Xanthomonas campestris (toate sușele patogene citricului), Cercospora angolensis Carv. & Mendes sau Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele patogene citricului) [notificata cu numarul C(2006) 3024] (2006/473/CE) COMISIA COMUNITĂȚILOR EUROPENE, având în vedere Tratatul de instituire a Comunității Europene, având în vedere Directivă 2000/29/ CE a Consiliului din 8 mai 2000 privind măsurile de protecție
32006D0473-ro () [Corola-website/Law/294852_a_296181]
-
circulația lor în Comunitate în temeiul Directivei 2000/29/CE, Decizia 98/83/ CE a Comisiei din 8 ianuarie 1998 de recunoaștere a anumitor țări terțe și a anumitor regiuni din țări terțe ca fiind îndemne de Xanthomonas campestris (toate sușele patogene citricului), Cercospora angolensis Carv. et Mendes și Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele patogene citricului)2 a recunoscut unele țări terțe și unele regiuni din țări terțe ca fiind îndemne de acești dăunători. (2) De la data adoptării sale, Decizia 98
32006D0473-ro () [Corola-website/Law/294852_a_296181]
-
CE a Comisiei din 8 ianuarie 1998 de recunoaștere a anumitor țări terțe și a anumitor regiuni din țări terțe ca fiind îndemne de Xanthomonas campestris (toate sușele patogene citricului), Cercospora angolensis Carv. et Mendes și Guignardia citricarpa Kiely (toate sușele patogene citricului)2 a recunoscut unele țări terțe și unele regiuni din țări terțe ca fiind îndemne de acești dăunători. (2) De la data adoptării sale, Decizia 98/83/ CE a fost modificată de mai multe ori. Din motive de concizie
32006D0473-ro () [Corola-website/Law/294852_a_296181]