1,684 matches
-
se deduce dacă există potrivire alelică. Aceste pattern-uri electroforetice obținute fie pe calea SSCP, fie pe calea analizei heteroduplexului sunt complexe, dar totodată edificatoare asupra potrivirii alelelor HLA de la donor cu acelea de la receptor. Dar, identificarea în sine a alelelor specifice HLA existente la o anumită persoană este mult mai dificilă. Specificitatea tipajului HLA bazat pe analiza ADN este în mare măsură influențată de condițiile de reasociere a primerilor sintetici și a probelor utilizate pentru reasociere cu ADN denaturat. În
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
sinteză din cadrul amplificării prin PCR și al secvențierii ADN, precum și la hibridizarea nespecifică a probelor (Gao și colab., 1990; Molkentin și colab., 1991; Allen și colab, 1994). Specificitatea poate fi însă monitorizată prin utilizarea unui ADN de referință care poartă alele HLA bine definite. Un aspect deosebit de important în realizarea tipajului HLA bazat pe analiza ADN este legat de luarea tuturor precauțiilor pentru evitarea contaminării probelor cu ADN anterior amplificat. De asemenea, matrița ADN ce urmează a fi copiată în procesul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
analiza ADN de mai mică rezoluție (generic sau serologic) realizează un rezultat care aparent este similar tipajului serologic, așa cum rezultă din tabelul 12.1. Nivelul intermediar de rezoluție bazat pe analiza ADN îngustează incertitudinea prin indicarea mai exactă a unor alele ce ar putea fi purtate de individul testat (vezi în tabel DRB1*0402 sau DRB1*0414). Nivelul cel mai înalt de rezoluție este cel în care este determinată alela purtată de individ în regiunea CMH, fără echivoc (tabelul 12.1
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
pe analiza ADN îngustează incertitudinea prin indicarea mai exactă a unor alele ce ar putea fi purtate de individul testat (vezi în tabel DRB1*0402 sau DRB1*0414). Nivelul cel mai înalt de rezoluție este cel în care este determinată alela purtată de individ în regiunea CMH, fără echivoc (tabelul 12.1). Similitudinea dintre locii genici HLA și alelele HLA adaugă un plus de complexitate și dificultate în identificarea moleculelor HLA și a genelor codificatoare corespunzătoare. Există numeroase argumente în sprijinul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
individul testat (vezi în tabel DRB1*0402 sau DRB1*0414). Nivelul cel mai înalt de rezoluție este cel în care este determinată alela purtată de individ în regiunea CMH, fără echivoc (tabelul 12.1). Similitudinea dintre locii genici HLA și alelele HLA adaugă un plus de complexitate și dificultate în identificarea moleculelor HLA și a genelor codificatoare corespunzătoare. Există numeroase argumente în sprijinul ipotezei potrivit căreia locii genici HLA au rezultat în urma mecanismului duplicației genice, pornind de la o singură genă primordială
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
a genelor codificatoare corespunzătoare. Există numeroase argumente în sprijinul ipotezei potrivit căreia locii genici HLA au rezultat în urma mecanismului duplicației genice, pornind de la o singură genă primordială copiile rezultate suferind diversificare prin mutație și recombinare genetică între locii genici și alele. Această origine graduală (geneză succesivă) a alelelor HLA impune ca aplicarea metodologiei de tipare bazată pe analiza ADN să se bazeze pe o abordare în mai multe etape în procedura de identificare a alelelor HLA. În cadrul unei asemenea abordări este
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
în sprijinul ipotezei potrivit căreia locii genici HLA au rezultat în urma mecanismului duplicației genice, pornind de la o singură genă primordială copiile rezultate suferind diversificare prin mutație și recombinare genetică între locii genici și alele. Această origine graduală (geneză succesivă) a alelelor HLA impune ca aplicarea metodologiei de tipare bazată pe analiza ADN să se bazeze pe o abordare în mai multe etape în procedura de identificare a alelelor HLA. În cadrul unei asemenea abordări este utilizat un set de primeri PCR pentru
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
recombinare genetică între locii genici și alele. Această origine graduală (geneză succesivă) a alelelor HLA impune ca aplicarea metodologiei de tipare bazată pe analiza ADN să se bazeze pe o abordare în mai multe etape în procedura de identificare a alelelor HLA. În cadrul unei asemenea abordări este utilizat un set de primeri PCR pentru a se realiza amplificarea tuturor alelelor dintr-un anumit locus HLA. Utilizând un ansamblu de probe oligonucleotidice se pot obține rezultate de tipaj de rezoluție redusă sau
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de tipare bazată pe analiza ADN să se bazeze pe o abordare în mai multe etape în procedura de identificare a alelelor HLA. În cadrul unei asemenea abordări este utilizat un set de primeri PCR pentru a se realiza amplificarea tuturor alelelor dintr-un anumit locus HLA. Utilizând un ansamblu de probe oligonucleotidice se pot obține rezultate de tipaj de rezoluție redusă sau intermediară. Pe baza acestor rezultate vor putea fi selectați primeri care asigură amplificarea doar a unui anumit subset de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
dintr-un anumit locus HLA. Utilizând un ansamblu de probe oligonucleotidice se pot obține rezultate de tipaj de rezoluție redusă sau intermediară. Pe baza acestor rezultate vor putea fi selectați primeri care asigură amplificarea doar a unui anumit subset de alele sau doar a uneia dintre cele două alele existente în locusul genic HLA al unui anumit individ. Un al doilea set de oligonucleotide poate fi utilizat în identificarea alelei prezente în materialul testat. Atât în tipajul serologic cât și în
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de probe oligonucleotidice se pot obține rezultate de tipaj de rezoluție redusă sau intermediară. Pe baza acestor rezultate vor putea fi selectați primeri care asigură amplificarea doar a unui anumit subset de alele sau doar a uneia dintre cele două alele existente în locusul genic HLA al unui anumit individ. Un al doilea set de oligonucleotide poate fi utilizat în identificarea alelei prezente în materialul testat. Atât în tipajul serologic cât și în cel bazat pe analiza ADN pot apare erori
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
selectați primeri care asigură amplificarea doar a unui anumit subset de alele sau doar a uneia dintre cele două alele existente în locusul genic HLA al unui anumit individ. Un al doilea set de oligonucleotide poate fi utilizat în identificarea alelei prezente în materialul testat. Atât în tipajul serologic cât și în cel bazat pe analiza ADN pot apare erori, după cum pot apare discrepanțe în tipajul HLA generate de tehnica utilizată și de metodele aplicate. De aceea, tipajul HLA trebuie să
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
din punct de vedere interpretativ. Sursele acestor discrepanțe sunt multiple și țin atât de nivelul tehnologiilor de laborator, cât și de absența unor reactivi chimici necesari tipajului. De exemplu, până de curând a lipsit reactivul serologic pentru molecula codificată de alela DRB1*0103. Pe de altă parte, unele alele, precum DRB4*0101 nu se exprimă ca proteine de suprafață celulară, iar unele molecule precum DR 11 și DR 13 prezintă omologie de secvență astfel că definirea lor serologică depinde de aloantiserul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
sunt multiple și țin atât de nivelul tehnologiilor de laborator, cât și de absența unor reactivi chimici necesari tipajului. De exemplu, până de curând a lipsit reactivul serologic pentru molecula codificată de alela DRB1*0103. Pe de altă parte, unele alele, precum DRB4*0101 nu se exprimă ca proteine de suprafață celulară, iar unele molecule precum DR 11 și DR 13 prezintă omologie de secvență astfel că definirea lor serologică depinde de aloantiserul utilizat. Moleculele DR 8 poartă determinanți serologici DR
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
inflamator poate permite dezvoltarea unor unelte diagnostice valoroase și noi abordări terapeutice. Totuși este important să ținem cont că polimorfismele implicate în bolile inflamatorii sunt relativ comune în populația generală, așa că este probabil ca fiecare individ să moștenească o anumită alelă de risc: apariția bolii va depinde de interacția dintre diferite alele de risc crescut, expunerea la patogeni, factori de mediu și stilul de viață. Receptorii Toll-like - TLR4 reprezintă prima linie de apărare capabilă să recunoască modele moleculare necunoscute organismelor mamifere
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
terapeutice. Totuși este important să ținem cont că polimorfismele implicate în bolile inflamatorii sunt relativ comune în populația generală, așa că este probabil ca fiecare individ să moștenească o anumită alelă de risc: apariția bolii va depinde de interacția dintre diferite alele de risc crescut, expunerea la patogeni, factori de mediu și stilul de viață. Receptorii Toll-like - TLR4 reprezintă prima linie de apărare capabilă să recunoască modele moleculare necunoscute organismelor mamifere, dar comune printre patogeni. TLR4 transmembranar inițiază răspunsul imun la lipopolizaharide
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
clar de modificare produsă într-o moleculă proteinică de o schimbare alelică într-o singură genă implicată în sinteză”. Această concluzie a fost formulată în anul 1949, independent unul de celălalt de E.A. Beet și J.V. Neel aceștia precizând că alela mutantă apare în condiție homozigotă (βSβS) la persoanele suferinde de anemie falciformă și în condiție heterozigotă (βAβS) la persoane aparent sănătoase dar ale căror eritrocite capătă formă de seceră (caracterul sickling), atunci când sunt expuse la condiții de hipoxie experimentală (în
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
persoanelor normale migrează mai încet decât aceea a persoanelor suferinde de anemie falciformă, desemnată HbS (fig. 16.13). Purtătorii au structura genetică heterozigotă (HbAHbS) și manifestă trăsătura sickling prezentând un amestec de HbA și HbS, ceea ce este o dovadă că alela HbA nu este dominantă asupra alelei HbS, după cum nici HbS nu este recesivă față de HbA, raportul dintre aceste două alele fiind unul de codominanță, din interacțiunea lor rezultând un nou fenotip și anume trăsătura sickling. Linus Pauling a subliniat semnificația
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
aceea a persoanelor suferinde de anemie falciformă, desemnată HbS (fig. 16.13). Purtătorii au structura genetică heterozigotă (HbAHbS) și manifestă trăsătura sickling prezentând un amestec de HbA și HbS, ceea ce este o dovadă că alela HbA nu este dominantă asupra alelei HbS, după cum nici HbS nu este recesivă față de HbA, raportul dintre aceste două alele fiind unul de codominanță, din interacțiunea lor rezultând un nou fenotip și anume trăsătura sickling. Linus Pauling a subliniat semnificația deosebită a acestor cercetări care aduceau
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
structura genetică heterozigotă (HbAHbS) și manifestă trăsătura sickling prezentând un amestec de HbA și HbS, ceea ce este o dovadă că alela HbA nu este dominantă asupra alelei HbS, după cum nici HbS nu este recesivă față de HbA, raportul dintre aceste două alele fiind unul de codominanță, din interacțiunea lor rezultând un nou fenotip și anume trăsătura sickling. Linus Pauling a subliniat semnificația deosebită a acestor cercetări care aduceau una dintre cele mai viguroase dovezi pentru susținerea ipotezei că genele dirijează sinteza de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
1949) au introdus și simbolurile pentru structura genetică, după cum urmează: genotipul normal βAβA, genotipul pentru anemia falciformă βSβS („S” derivat de la Sickle-cell anemia) și genotipul pentru caracterul sickling adică fenotipul celular falciform βAβS, cu genotip heterozigot, respectiv pentru „purtători” ai alelei mutante. În anul 1956, V.M. Ingram lucra în același laborator din Cambridge, în care celebrul Max Perutz își continua cercetările în cristalografie, Francisc Sanger stabilise secvența de aminoacizi a insulinei, iar Crick și Watson elaborase modelul de structură bicatenară a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
care a condus la apariția hemoglobinei anormale HbS se pare că s-a produs într-o regiune a Africii care cuprinde Senegalul, Benin și Bantum și s-a răspândit în toate zonele bântuite de malarie, prin avantajul selectiv pe care alela mutantă l-a conferit purtătorilor ei, față de malarie. În SUA, condiția heterozigotă s-a perpetuat în populația de negrii, aduși ca sclavi din Africa, în urmă cu mai mult de două secole. Modificarea prin substituție sau deleție a secvenței de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
reducere accentuată a tensiunii de oxigen, hematiile heterozigoților iau formă caracteristică de seceră și pe aceasta se bazează screening-ul heterozigoților în populația umană. Modelul ereditar al anemiei falciforme nu este atât de simplu, pe cât pare în aparență. Deoarece cele două alele HbA și HbS sunt în egală măsură funcționale, dar cu eficiență diferită în sinteza tipului corespunzător de catenă β - normală în HbA, mutantă în HbS, se admite caracterul de codominanță al acestui model, în care se exprimă ambele alele, cu
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
două alele HbA și HbS sunt în egală măsură funcționale, dar cu eficiență diferită în sinteza tipului corespunzător de catenă β - normală în HbA, mutantă în HbS, se admite caracterul de codominanță al acestui model, în care se exprimă ambele alele, cu apariția unui fenotip nou (HbA - HbS), diferit de cel al formelor homozigote (HbA HbA și HbS HbS). După alte interpretări, în acest caz funcționează un mecanism în care anemia falciformă se transmite recesiv, dar fenomenul sickling ce apare la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
a dovedit că nu toate mutațiile globinice sunt dăunătoare, multe dintre ele stând la baza remarcabilului polimorfism populațional hemoglobinic. Cele dăunătoare au efecte fenotipice dominante, cu excepția mutației care condiționează sinteza hemoglobinei HbS, în cazul anemiei falciforme, care manifestă codominanță cu alela normală HbA și care conferă chiar avantaj selectiv-adaptativ heterozigoților (purtătorilor) în zonele bântuite de malarie. Această constatare se poate constitui într- o înțelegere a mecanismului mendelian al dominanței și recesivității, precum și al codominanței și semidominanței, codominanța fiind rezultatul interacțiunii, la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]