6,336 matches
-
10%. ... d) Învelișul inflamator și cheagurile de sânge: probele sunt adăugate la culturi celulare monostratificate, confluente și lăsate timp de o oră la temperatura de 37°C, apoi culturile sunt spălate și acoperite de mediu de cultură ce conține 10% ser de fetus de vițel, îndemn de BVD. Culturile sunt incubate ulterior la temperatura de 37°C, fixate și colorate prin metodele FĂ sau IPX. ... e) Controale: 1. control pozitiv al virusului BVD; 2. control negativ fără adaos de virus. f
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
pozitiv. Testul IPX este colorat după 4 zile de incubare și citit la lumină microscopica. Culoarea maro închis apărută în citoplasma anumitor celule este interpretată ca rezultat pozitiv. 2. Testul de seroneutralizare serologica va fi efectuat conform următorului protocol: a) Ser: toate serurile sunt inactivate la cald, la temperatura de 56°C, timp de 30 de minute înainte de utilizare. ... b) Procedura: testul de neutralizare constantă a diferitelor tipuri de virus pe plăci de microtitru folosește celule bovine corespunzătoare, multiplicate în serii
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
IPX este colorat după 4 zile de incubare și citit la lumină microscopica. Culoarea maro închis apărută în citoplasma anumitor celule este interpretată ca rezultat pozitiv. 2. Testul de seroneutralizare serologica va fi efectuat conform următorului protocol: a) Ser: toate serurile sunt inactivate la cald, la temperatura de 56°C, timp de 30 de minute înainte de utilizare. ... b) Procedura: testul de neutralizare constantă a diferitelor tipuri de virus pe plăci de microtitru folosește celule bovine corespunzătoare, multiplicate în serii (celule bovine
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
MD necitopatic, accidental contaminante. ... d) Virusul de testare, care poate fi orice tulpina corespunzătoare de referință citopatica (de exemplu: tulpina NADL), este folosit la o concentrație de 100 doze infecțioase de cultură celulară medie la 0,025 ml. Diluții de seruri inactivate sunt amestecate cu volume egale de suspensie virală (0,025 ml) și amestecurile de ser-virus sunt incubate timp de o oră la temperatura de 37° înainte de a fi ad��ugate volume similare de suspensie celulară. Celulele sunt folosite la
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
o oră la temperatura de 37° înainte de a fi ad��ugate volume similare de suspensie celulară. Celulele sunt folosite la o concentrație care va forma un monostrat complet după două zile. ... e) Controale: ... 1. controlul infecțiozității virusului; 2. controlul toxicității serului; 3. controlul culturii celulare neinoculate; 4. antiseruri de referință. f) Interpretare: cu virusul tulpinii NADL timpul optim pentru citire este după o incubare de 5 zile la temperatura de 37°C. ... g) Un titru de neutralizare mediu de 1/10
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
negative, culturile sunt plasate în alte culturi și reexaminate timp de 48 de ore. Se va confirma specificitatea tuturor CPE. ... d) Mijloace de transport recomandate: ... 1. tampon fosfat de 0,08 M, pH 7,2, conținând 0,01% albumina de ser bovin, 0,002% roșu de fenol și antibiotice; 2. mediu de cultură tisulara (Eagle's MEM) conținând tampon Hepes de 0,04 M, 0,01% albumina de ser bovin și antibiotice, pH 7,2. e) La mediul de transport trebuie
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de 0,08 M, pH 7,2, conținând 0,01% albumina de ser bovin, 0,002% roșu de fenol și antibiotice; 2. mediu de cultură tisulara (Eagle's MEM) conținând tampon Hepes de 0,04 M, 0,01% albumina de ser bovin și antibiotice, pH 7,2. e) La mediul de transport trebuie adăugate antibioticele (la ml final): ... 1. penicilină 1.000 u.i.; 2. sulfat de neomicina 100 u.i.; 3. sulfat de polimixina B 50 u.i.; 4. micostatin
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
stabil și titrurile variază foarte putin pe o perioadă de câteva luni. ... b) Procedura: testul este realizat pe plăci de microtitru cu fund plat, prevăzute pentru culturi celulare, folosind celule sensibile că IB-RS-2, BHK-21 sau celule de rinichi de vițel. ... Serurile de testat sunt diluate 1/4 într-un mediu de culturi celulare fără ser, la care se adaugă 100 u.i./ml neomicina sau alte antibiotice adecvate. Serurile sunt inactivate la temperatura de 56°C timp de 30 de minute
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
testul este realizat pe plăci de microtitru cu fund plat, prevăzute pentru culturi celulare, folosind celule sensibile că IB-RS-2, BHK-21 sau celule de rinichi de vițel. ... Serurile de testat sunt diluate 1/4 într-un mediu de culturi celulare fără ser, la care se adaugă 100 u.i./ml neomicina sau alte antibiotice adecvate. Serurile sunt inactivate la temperatura de 56°C timp de 30 de minute și se folosesc volume de 0,05 ml pentru prepararea unor serii duble pe
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
folosind celule sensibile că IB-RS-2, BHK-21 sau celule de rinichi de vițel. ... Serurile de testat sunt diluate 1/4 într-un mediu de culturi celulare fără ser, la care se adaugă 100 u.i./ml neomicina sau alte antibiotice adecvate. Serurile sunt inactivate la temperatura de 56°C timp de 30 de minute și se folosesc volume de 0,05 ml pentru prepararea unor serii duble pe plăci de microtitru utilizând 0,05 ml verigi diluante. Se adaugă apoi în fiecare
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
30 de minute și se folosesc volume de 0,05 ml pentru prepararea unor serii duble pe plăci de microtitru utilizând 0,05 ml verigi diluante. Se adaugă apoi în fiecare godeu virus pretitrat, diluat în mediu de cultură fără ser, conținând 100 TCID50/0,05 ml. După incubare la temperatura de 37°C timp de o oră pentru a permite reacția de neutralizare se adaugă în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară ce conține 0,5-1,0 x
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
37°C timp de o oră pentru a permite reacția de neutralizare se adaugă în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară ce conține 0,5-1,0 x 106 celule la ml într-un mediu de cultură celulară conținând ser fără anticorpi la FMD, după care plăcile sunt sigilate. Plăcile sunt incubate la temperatura de 37°C. Monoculturile devin normal confluente în 24 de ore. CPE este în mod normal suficient de dezvoltat la 48 de ore pentru a permite
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
microscopica finală sau plăcile pot fi fixate și colorate în vederea unei citiri macroscopice, utilizându-se, de exemplu, 10% formol și 0,05% albastru de metilen. c) Controale: controalele fiecărui test cuprind antiserul corespunzător al titrului cunoscut, controlul celulelor, controlul toxicității serului, controlul mediului și titrul virusului de la care se calculează cantitatea reală a virusului conținuta în test. ... d) Interpretare: godeurile care prezintă CPE sunt considerate infectate și titrurile de neutralizare sunt exprimate ca reprezentând reciprocă diluției finale de ser prezent în
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
controlul toxicității serului, controlul mediului și titrul virusului de la care se calculează cantitatea reală a virusului conținuta în test. ... d) Interpretare: godeurile care prezintă CPE sunt considerate infectate și titrurile de neutralizare sunt exprimate ca reprezentând reciprocă diluției finale de ser prezent în amestecurile de ser-virus la punctul final de 50% estimat după metodă Spearman-Karber. e) Testele sunt considerate valide dacă cantitatea reală de virus folosită la godeu este cuprinsă între 101,5 și 102,5 TCID50 și dacă titrul serului
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
ser prezent în amestecurile de ser-virus la punctul final de 50% estimat după metodă Spearman-Karber. e) Testele sunt considerate valide dacă cantitatea reală de virus folosită la godeu este cuprinsă între 101,5 și 102,5 TCID50 și dacă titrul serului de referință se gaseste într-o zonă dublă a titrului anticipat, estimat după modul de realizare a titrărilor precedente. Cand martorii se găsesc în afara acestor limite se repetă probele. Un titru final de 1/11 sau inferior este considerat negativ
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
aftoase (FMDV) folosite la o concentrație optimă predeterminata într-un tampon de carbonat/bicarbonat cu pH 9,6. Se prepară antigeni din tulpinile de virus selectate, cultivate pe celule monocelulare BHK-21. Se utilizează supernatanți nepurificați, pretitrati conform protocolului, dar fără ser pentru a da o diluție, care după adăugarea unui volum egal de PBST (lichid fiziologic tamponat cu fosfat, conținând 0,05% Tween-20 și indicator roșu fenol) ar da o intensitate optică între 1,2 și 1,5. Virusurile pot fi
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
volum egal de PBST (lichid fiziologic tamponat cu fosfat, conținând 0,05% Tween-20 și indicator roșu fenol) ar da o intensitate optică între 1,2 și 1,5. Virusurile pot fi folosite inactivate. PBST este folosit că diluant. Se prepară serurile de cobai prin inocularea cobailor cu antigen 146S din fiecare serotip. Se prepară o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Se folosește imunoglobulina de iepure anticobai conjugata cu
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
1,2 și 1,5. Virusurile pot fi folosite inactivate. PBST este folosit că diluant. Se prepară serurile de cobai prin inocularea cobailor cu antigen 146S din fiecare serotip. Se prepară o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Se folosește imunoglobulina de iepure anticobai conjugata cu peroxidaza din hrean la o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
pot fi folosite inactivate. PBST este folosit că diluant. Se prepară serurile de cobai prin inocularea cobailor cu antigen 146S din fiecare serotip. Se prepară o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Se folosește imunoglobulina de iepure anticobai conjugata cu peroxidaza din hrean la o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Serurile de testat sunt diluate în
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Se folosește imunoglobulina de iepure anticobai conjugata cu peroxidaza din hrean la o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Serurile de testat sunt diluate în PBST. ... b) Procedura: ... 1. Plăcile ELISA sunt acoperite cu 59 u.i. seruri antivirale de iepure și lăsate peste noapte într-o incinta umedă, la
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Se folosește imunoglobulina de iepure anticobai conjugata cu peroxidaza din hrean la o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Serurile de testat sunt diluate în PBST. ... b) Procedura: ... 1. Plăcile ELISA sunt acoperite cu 59 u.i. seruri antivirale de iepure și lăsate peste noapte într-o incinta umedă, la temperatura ambianța. 2. Se prepară 50
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Se folosește imunoglobulina de iepure anticobai conjugata cu peroxidaza din hrean la o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Serurile de testat sunt diluate în PBST. ... b) Procedura: ... 1. Plăcile ELISA sunt acoperite cu 59 u.i. seruri antivirale de iepure și lăsate peste noapte într-o incinta umedă, la temperatura ambianța. 2. Se prepară 50 æl de duplicat, serii
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
din hrean la o concentrație optimă predeterminata în PBST, ce conține 10% ser normal de bovina și 5% ser normal de iepure. Serurile de testat sunt diluate în PBST. ... b) Procedura: ... 1. Plăcile ELISA sunt acoperite cu 59 u.i. seruri antivirale de iepure și lăsate peste noapte într-o incinta umedă, la temperatura ambianța. 2. Se prepară 50 æl de duplicat, serii duble din fiecare ser de testat începând cu 1/4 în plăci cu multe godeuri și cu fundul
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
diluate în PBST. ... b) Procedura: ... 1. Plăcile ELISA sunt acoperite cu 59 u.i. seruri antivirale de iepure și lăsate peste noapte într-o incinta umedă, la temperatura ambianța. 2. Se prepară 50 æl de duplicat, serii duble din fiecare ser de testat începând cu 1/4 în plăci cu multe godeuri și cu fundul în formă de U (plăci purtătoare). Se adaugă în fiecare godeu 50 æl dintr-o doză constantă de antigen și se lasă amestecurile peste noapte la
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
temperatura de 4°C. Adăugarea antigenului reduce diluția serica inițială la 1/8. 3. Se spală plăcile ELISA cu PBST de 5 ori. 4. Se transferă apoi 50 æl din amestecurile ser-antigen din plăcile purtătoare în plăcile ELISA acoperite cu ser de iepure și se incubează la temperatura de 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare se adaugă în fiecare godeu 50 u.i. de antiser de cobai la antigenul folosit la lit. d). Se
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]