4,306 matches
-
Clorura de sodiu 3.11. Ninhidrina 3.12. Eter de petrol cu interval de fierbere 40-60°C 3.13. Norleucina sau alt compus corespunzător pentru a fi utilizat că standard intern. 3.14. Azot gazos ( 3.15. 1-Octanol 3.16. Aminoacizi 3.16.1. Substanțe standard enumerate la punctul 1. Compuși puri ce nu conțin apă de cristalizare. Se usucă sub vid sub flux de P(2)O(5) sau H(2)ȘO(4) timp de o săptămână înainte de utilizare. 3
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
20. Se aduce la 1 litru cu apă. 3.25. Tampoane de eluție preparate în conformitate cu condițiile prevăzute pentru analizorul utilizat (4.9). 3.26. Reactiv ninhidrina preparat în conformitate cu condițiile prevăzute pentru analizorul utilizat (4.9). 3.27. Soluții etalon de aminoacizi. Aceste soluții trebuie să fie păstrate la o temperatură mai mică de 5°C. 3.27.1. Soluție standard stoc de aminoacizi (3.16.1) c = 2,5 æmol/ml din fiecare în acid clorhidric. Poate fi obținută comercial. 3
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
3.26. Reactiv ninhidrina preparat în conformitate cu condițiile prevăzute pentru analizorul utilizat (4.9). 3.27. Soluții etalon de aminoacizi. Aceste soluții trebuie să fie păstrate la o temperatură mai mică de 5°C. 3.27.1. Soluție standard stoc de aminoacizi (3.16.1) c = 2,5 æmol/ml din fiecare în acid clorhidric. Poate fi obținută comercial. 3.27.2. Soluție standard stoc de acid cisteic și metionin sulfona c = 1,25 æmol/ml. Se dizolvă 0,2115 g acid
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
în tampon citrat (3.24), într-un balon cotat și se aduce la 250 ml cu tampon citrat. Se păstrează la o temperatură mai mică de 5°C timp de maxim 6 luni. 3.27.4. Soluție de etalonare a aminoacizilor standard pentru utilizare cu hidrolizate, c = 5 nmol/50 æl de acid cisteic și metionin sulfona și c = 10 nmol/50 æl a altor aminoacizi. Se dizolvă 2,2 g clorura de sodiu (3.10) într-un pahar gradat de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
de 5°C timp de maxim 6 luni. 3.27.4. Soluție de etalonare a aminoacizilor standard pentru utilizare cu hidrolizate, c = 5 nmol/50 æl de acid cisteic și metionin sulfona și c = 10 nmol/50 æl a altor aminoacizi. Se dizolvă 2,2 g clorura de sodiu (3.10) într-un pahar gradat de 100 ml cu 30 ml tampon citrat (3.24). Se adaugă 4,00 ml soluție standard stoc de aminoacizi (3.27.1), 4,00 ml
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
10 nmol/50 æl a altor aminoacizi. Se dizolvă 2,2 g clorura de sodiu (3.10) într-un pahar gradat de 100 ml cu 30 ml tampon citrat (3.24). Se adaugă 4,00 ml soluție standard stoc de aminoacizi (3.27.1), 4,00 ml soluție standard stoc de acid cisteic și metionina sulfona (3.27.2.) și 0,50 ml soluție standard stoc de standard intern, (3.27.3) dacă este utilizat. Se aduce pH-ul la 2
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
la semn cu tampon citrat (3.24) și se amestecă. Se păstrează la o temperatură mai scăzută de 5°C, timp de maxim 3 luni. Vezi de asemenea observațiile de la punctul 9.1. 3.27.5. Soluție de etalonare a aminoacizilor standard pentru utilizarea cu hidrolizate preparate în conformitate cu punctul 5.3.3.1. și destinate a fi utilizate cu extracte (5.2). Soluția de etalonare este preparată în conformitate cu punctul 3.27.4, dar fără clorura de sodiu. Se păstrează la o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
mai mare de ±2°C. 4.4. pH - metru (gradație de trei zecimale) 4.5. Filtru cu membrana (0,2 æm) 4.6. Centrifuga 4.7. Evaporator rotativ cu vid 4.8. Agitator mecanic sau magnetic 4.9. Analizor de aminoacizi sau echipament HPLC cu coloana schimbătoare de ioni, dispozitiv pentru ninhidrina, derivație post-coloana și detector fotometric. Coloana este prevăzută cu rășini polistiren sulfonate, pentru separarea diferiților aminoacizi unul de celălalt și din alte materiale ninhidrin pozitive. Debitul de tampon și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
rotativ cu vid 4.8. Agitator mecanic sau magnetic 4.9. Analizor de aminoacizi sau echipament HPLC cu coloana schimbătoare de ioni, dispozitiv pentru ninhidrina, derivație post-coloana și detector fotometric. Coloana este prevăzută cu rășini polistiren sulfonate, pentru separarea diferiților aminoacizi unul de celălalt și din alte materiale ninhidrin pozitive. Debitul de tampon și ninhidrina este asigurat de pompe având un grad de stabilitate a fluxului de ±0,5% în perioada ce acoperă ambele soluții standard de etalonare și de analiză
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
materiale ninhidrin pozitive. Debitul de tampon și ninhidrina este asigurat de pompe având un grad de stabilitate a fluxului de ±0,5% în perioada ce acoperă ambele soluții standard de etalonare și de analiză a probei. Cu aceleasi analizoare de aminoacizi se pot utiliza metode de hidroliza în care hidrolizatul are o concentrație de sodiu de c = 0,8 mol/l și conține tot acidul formic rezidual provenit din oxidare. Altele nu pot asigura o separare satisfăcătoare a unor aminoacizi, daca
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
de aminoacizi se pot utiliza metode de hidroliza în care hidrolizatul are o concentrație de sodiu de c = 0,8 mol/l și conține tot acidul formic rezidual provenit din oxidare. Altele nu pot asigura o separare satisfăcătoare a unor aminoacizi, daca hidrolizatul conține exces de acid formic și/sau concentrație crescută a ionilor de sodiu. În acest caz volumul de acid este redus prin evaporare la aproximativ 5 ml, după hidroliza și anterior de ajustarea pH-ului. Evaporarea trebuie să
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
cu umiditate ridicată trebuie, înainte de măcinare, uscate fiecare la aer, la o temperatură ce maxim 50°C sau prin liofilizare. Probele cu un conținut mare în grăsimi trebuie extrase cu eter de petrol (3.12), înainte de măcinare. 5.2. Determinarea aminoacizilor liberi din furaje și premixuri Se cântărește, cu o precizie de 0,2 mg, o cantitate corespunzătoare (1-5 g) de probă preparată (5.1), într-un pahar conic și se adaugă 100,0 ml amestec de extracție (3.21). Se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
cu soluție tampon (3.24). Se trece la etapa de cromatografie în conformitate cu punctul 5.4. Dacă extractele existente nu sunt examinate în aceeași zi, acestea trebuie să fie păstrate la o temperatură mai scăzută de 5°C. 5.3. Determinarea aminoacizilor totali 5.3.1. Oxidare Se cântărește cu o precizie de 0,2 mg, de la 0,1 la 1 g de probă preparată (5.1) într-un: (i) balon cu fund rotund de 100 ml (4.1), pentru hidroliza deschisă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
într-un pahar gradat de 250 ml sau într-un balon cu fund rotund de 250 ml, utilizandu-se tampon citrat (3.24). Se continuă în conformitate cu punctul 5.3.3. 5.3.3. Ajustarea pH-ului În funcție de toleranță analizorului de aminoacid la sodiu, (4.9) se continuă în conformitate cu punctele 5.3.3.1 sau 5.3.3.2., pentru ajustarea pH-ului 5.3.3.1. Pentru sistemele cromatografice (4.9) ce necesită o concentrație mică de sodiu: Se recomandă să
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
3.2., pentru ajustarea pH-ului 5.3.3.1. Pentru sistemele cromatografice (4.9) ce necesită o concentrație mică de sodiu: Se recomandă să se utilizeze o soluție standard stoc internă (3.27.3) atunci când sunt folosite analizoare de aminoacizi ce necesită o concentrație mică de sodiu (când volumul acidului trebuie să fie redus). În acest caz se adaugă hidrolizatului înaintea evaporării 2,00 ml soluție standard stoc internă (3.27.3). Se adaugă 2 picături de 1-octanol (3.15
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
5 ml, hidrolizatul trebuie eliminat și analiza reluată. Se aduce pH-ul la 2,20 cu soluție de hidroxid de sodiu (3.18) și se continuă cu punctul 5.3.4. 5.3.3.2. Pentru toti ceilalti analizori de aminoacizi (4.9) Se iau hidrolizatele obținute în conformitate cu punctul 5.3.2.3 sau 5.3.2.4 și se neutralizează parțial cu atenție, adaugandu-se și agitandu-se, 17 ml soluție hidroxid de sodiu (3.17) asigurându-se că temperatura
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
3.4) la temperatura camerei. Se agită amestecul și se filtrează o cantitate potrivită printr-un filtru cu membrana de 0,2 æm (4.5). Soluția clară obținută este supusă cromatografiei cu schimbători de ioni, utilizandu-se un analizor de aminoacizi (4.9). Injecția poate fi executată manual sau mecanic. Este important că aceeași cantitate de soluție ±0,5% să fie adăugată la coloană, pentru că analiza de standarde și probe, cu excepția cazului în care se utilizează un standard intern și rapoartele
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
9). Injecția poate fi executată manual sau mecanic. Este important că aceeași cantitate de soluție ±0,5% să fie adăugată la coloană, pentru că analiza de standarde și probe, cu excepția cazului în care se utilizează un standard intern și rapoartele sodiu/aminoacid din soluțiile standard și proba să fie, pe cât posibil, similare. În general frecvență injecțiilor depinde de stabilitatea reactivului ninhidrina și a sistemului de analiză. Standardul sau proba este diluata cu tampon citrat (3.24) pentru a realiza o arie a
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
similare. În general frecvență injecțiilor depinde de stabilitatea reactivului ninhidrina și a sistemului de analiză. Standardul sau proba este diluata cu tampon citrat (3.24) pentru a realiza o arie a picului standardului de 30-200% din aria picului probei de aminoacid. Cromatografia aminoacizilor se modifică ușor în conformitate cu tipul de analizor întrebuințat și rășina utilizată. Sistemul ales trebuie să permită separarea aminoacizilor unii de alții și din materiile pozitive la ninhidrina. În cursul operațiunii, sistemul cromatografie trebuie să dea un răspuns linear
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
general frecvență injecțiilor depinde de stabilitatea reactivului ninhidrina și a sistemului de analiză. Standardul sau proba este diluata cu tampon citrat (3.24) pentru a realiza o arie a picului standardului de 30-200% din aria picului probei de aminoacid. Cromatografia aminoacizilor se modifică ușor în conformitate cu tipul de analizor întrebuințat și rășina utilizată. Sistemul ales trebuie să permită separarea aminoacizilor unii de alții și din materiile pozitive la ninhidrina. În cursul operațiunii, sistemul cromatografie trebuie să dea un răspuns linear la schimbările
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
cu tampon citrat (3.24) pentru a realiza o arie a picului standardului de 30-200% din aria picului probei de aminoacid. Cromatografia aminoacizilor se modifică ușor în conformitate cu tipul de analizor întrebuințat și rășina utilizată. Sistemul ales trebuie să permită separarea aminoacizilor unii de alții și din materiile pozitive la ninhidrina. În cursul operațiunii, sistemul cromatografie trebuie să dea un răspuns linear la schimbările privind cantitățile de aminoacizi adăugați la coloană. În timpul etapei de cromatografie raportul dintre partea superioară și partea inferioară
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
în conformitate cu tipul de analizor întrebuințat și rășina utilizată. Sistemul ales trebuie să permită separarea aminoacizilor unii de alții și din materiile pozitive la ninhidrina. În cursul operațiunii, sistemul cromatografie trebuie să dea un răspuns linear la schimbările privind cantitățile de aminoacizi adăugați la coloană. În timpul etapei de cromatografie raportul dintre partea superioară și partea inferioară a curbei menționate mai jos, se aplică atunci când este analizată o soluție echimolară (a aminoacizilor existenți determinați). Această soluție echimolară trebuie să conțină cel putin 30
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
trebuie să dea un răspuns linear la schimbările privind cantitățile de aminoacizi adăugați la coloană. În timpul etapei de cromatografie raportul dintre partea superioară și partea inferioară a curbei menționate mai jos, se aplică atunci când este analizată o soluție echimolară (a aminoacizilor existenți determinați). Această soluție echimolară trebuie să conțină cel putin 30% din sarcina maximă a fiecărui aminoacid ce poate fi măsurat cu precizie cu ajutorul sistemului analizorului de aminoacizi (4.9). Pentru separarea treoninei de serina, raportul dintre partea inferioară și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
de cromatografie raportul dintre partea superioară și partea inferioară a curbei menționate mai jos, se aplică atunci când este analizată o soluție echimolară (a aminoacizilor existenți determinați). Această soluție echimolară trebuie să conțină cel putin 30% din sarcina maximă a fiecărui aminoacid ce poate fi măsurat cu precizie cu ajutorul sistemului analizorului de aminoacizi (4.9). Pentru separarea treoninei de serina, raportul dintre partea inferioară și picul curbei a celor mai de jos 2 aminoacizi de pe cromatograma, suprapuși parțial, nu trebuie să depășească
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
menționate mai jos, se aplică atunci când este analizată o soluție echimolară (a aminoacizilor existenți determinați). Această soluție echimolară trebuie să conțină cel putin 30% din sarcina maximă a fiecărui aminoacid ce poate fi măsurat cu precizie cu ajutorul sistemului analizorului de aminoacizi (4.9). Pentru separarea treoninei de serina, raportul dintre partea inferioară și picul curbei a celor mai de jos 2 aminoacizi de pe cromatograma, suprapuși parțial, nu trebuie să depășească raportul 2:10 (dacă sunt determinate numai cist(e)ina, metionina
EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]