155 matches
-
µl de ADNc la 45 µl de amestec PCR pentru a se obține concentrații finale tampon 1 x 1,5 mM de MgCl2, 0,2 mM din fiecare dNTP, 25 pmol din fiecare amorsă și o unitate de polimerază Taq. Amorsele sunt ISA + (amorsă sens) și ISA- (5'-GCC-AAG-TGT-AAG-TAG-CAC-TCC-3') (amorsă antisens). Se efectuează controale negative, în vederea extracției pentru RT și PCR. b) Se așează tuburile într-un termociclu programat la 94 șC timp de 5 minute, urmat de treizeci și cinci de cicluri
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
pentru a se obține concentrații finale tampon 1 x 1,5 mM de MgCl2, 0,2 mM din fiecare dNTP, 25 pmol din fiecare amorsă și o unitate de polimerază Taq. Amorsele sunt ISA + (amorsă sens) și ISA- (5'-GCC-AAG-TGT-AAG-TAG-CAC-TCC-3') (amorsă antisens). Se efectuează controale negative, în vederea extracției pentru RT și PCR. b) Se așează tuburile într-un termociclu programat la 94 șC timp de 5 minute, urmat de treizeci și cinci de cicluri la 94 șC timp de 1 minut, la 55
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
și efectuării testului RT-PCR. IV.1.5. Confirmarea produselor PCR prin sondă ADN a) Specificitatea unui produs PCR de 155 pb poate fi evaluată prin sondaj cu un oligonucleotid, care se hibridează într-o regiune a produsului PCR, cu excepția regiunilor amorselor. Produsele PCR sunt supuse unei electroforeze, într-un gel de 1 % agaroză, în paralel cu marcatori de mărime și un control pozitiv și un control negativ pentru etapele RT și PCR. b) Se supune ADN-ul unei reacții Southern-blot pe
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
nucleotidică a produselor PCR Specificitatea produsului PCR poate fi evaluată printr-un examen al secvenței nucleotidice a produsului PCR de 155 pb. a) Se purifică produsul PCR cu gelul de agaroză sau cu soluție; b) Fragmentul este secvențializat cu aceleași amorse ca cele utilizate pentru reacția PCR sau cu amorse specifice ale vectorului, dacă fragmentul a fost clonat într-un vector înainte de secvențiere; c) Se compară secvența nucleotidică cu cea a segmentului 8 al virusului AIS disponibil în baza de date
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
evaluată printr-un examen al secvenței nucleotidice a produsului PCR de 155 pb. a) Se purifică produsul PCR cu gelul de agaroză sau cu soluție; b) Fragmentul este secvențializat cu aceleași amorse ca cele utilizate pentru reacția PCR sau cu amorse specifice ale vectorului, dacă fragmentul a fost clonat într-un vector înainte de secvențiere; c) Se compară secvența nucleotidică cu cea a segmentului 8 al virusului AIS disponibil în baza de date a secvenței nucleotidice EMBR (numere de acces Y10404, AJO12285
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
restrictive (REA) ca și cel a controlului pozitiv. Hibridizare fluorescentă in-situ (FISH) Se prepară o suspensie de 106 celule pe ml din cultură și din sușa sau sușele de control. Se aplică procedura FISH (van Beuningen et al, 1995) cu amorsă OLI-1 PCR (Seal et al, 1993). Cultura trebuie să prezinte aceeași reacție ca și controlul pozitiv. Profil proteic Proteinele celulelor întregi denaturate se separă prin electroforeza gelului de poliacrilamidă - PAGE (Stead, 1992a). Profilarea acizilor grași (FAP) Se crește cultura și
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
1,0 μl 0,2 mM d-CTP 1,0 μl 0,2 mM d-GTP 1,0 μl 0,2 mM d-TTP 1,0 μl 0,2 mM Amorsă OLI- 1 (20 μM) 2,5 μl 1 μM Amorsă Y - 2 (20 μM) 1,0 μl 1 μM Polimerizare taq (5U/μl) 0,2 μl 1,0 U Volum total 45 μl - 48 μl Pentru mai multe reacții: Se calculează cantitatea din fiecare component pentru numărul cerut de reacții
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
termic de ADN. 4.5.2. Se rulează următorul program: 1 ciclu de: (i) 2 minute la 96 °C: denaturarea modelului 50 cicluri de: (ii) 20 de secunde la 94 °C: denaturare (iii) 20 de secunde la 68 °C: hibridarea amorselor (iv) 20 de secunde la 72 °C: extinderea copiei 1 ciclu de: (v) 10 minute la 72 °C: extindere finală 1 ciclu de: (vi) menținere la 4 °C Notă: Acești parametri sunt pentru Perkin Elmer 9600. Alte cicluri termice pot
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
care este un mutagen puternic! 4.6.8 Se decolorează în apă distilată timp de 10 - 15 minute. 4.6.9 Fragmentul sau fragmentele de ADN amplificate se vizualizează prin iluminare ultravioletă. Produsul PCR de Ralstonia solanacearum cu setul de amorse OLI-1 și Y-2 are lungimea de 288 bp. Se compară cu marcatorul de ADN și cu controlul pozitiv. Notă: Controlul de apă trebuie să fie negativ în toate cazurile. Dacă este pozitiv, testul se repetă. 4.6.10. Dacă este
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
HCl concentrat. Se adaugă apă distilată până la 1 litru. Se adaugă 0,2 g MgCl2. Se dizolvă două tablete de cinci mg de substrat de fosfatază (Sigma) la 15 ml de soluție. Apendicele 6 Materiale pentru testul PCR Secvența de amorsă de oligonucleotide Amorsă OLI-1 5΄-GGGGGTAGCTTGCTACCTGCC-3΄ Amorsă Y-2 5΄-CCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGT-3΄ Pentru materiale a se vedea Seal et al (1993). Apendicele 7 Materiale pentru testele de placare selectivă și de îmbogățire Mediu selectiv SMSA (Engelbrecht, 1994 modificat de Elphinstone et al
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
explozivi 24.61.11.30 Pulberi propulsive 3601 kg S 24.61.11.50 Explozivi preparați (excl. pulberile propulsive) 3602 kg S 24.61.12.50 Fitiluri de siguranță, fitiluri detonante 3603.00.10 km @ S 24.61.12.70 Amorse și detonatoare, aprinzătoare și detonatoare electrice 3603.00.90 buc/st @ S 24.61.13.00 Articole pentru focuri de artificii 3604.10 kg S 24.61.14.00 Semnale luminoase, rachete pentru ploaie, semnale de ceață și alte articole
32006R0317-ro () [Corola-website/Law/295168_a_296497]
-
britanic, abreviere de la High Explosive Squash Head: "proiectil exploziv cu vârf maleabil") sau HEP (termen american, abreviere de la High Explozive, Plastic: "proiectil exploziv, plastic") este un proiectil de ruptură al cărui vârf este plin de explozibil plastic maleabil și o amorsă de fund cu acțiune întârziată. Vârful proiectilului se mulează pe blindaj înainte de a exploda, trasmițând o enormă energie metalului. Unda de șoc provoacă rupturi pe partea opusă, aruncând schije cu o viteză foarte mare în interiorul țintei lovite. Schijele respective pot
Proiectil HESH () [Corola-website/Science/311156_a_312485]
-
pentru protecția construcțiilor contra încălzirii sau pierderilor de căldură. Se deosebesc materiale termoizolante dure (betonuri celulare, perlită, sticlă spongioasă, diatomite ș.a.) și flexibile (vată minerală, pâslă, carton gofrat etc.). În realizarea unui termosistem se folosește: adeziv, polistiren, plasă de armare, amorsă, tencuială decorativă, etc. Acestea trebuie alese cu mare atenție dat fiind faptul că termoizolarea unei clădiri nu este o operație care să se facă anual ci una care trebuie sa fie de cât mai lungă durată. "Materialele fonoizolante" servesc pentru
Materiale de construcție () [Corola-website/Science/311341_a_312670]
-
jucat de Pitt, si Marla , jucată de Carter, într-un triunghi amoros. Regizorul a adăugat tonuri homoerotice relației dintre narator și Tyler, deviând de la român, pentru a împiedica spectatorul să ghicească finalul, de asemenea Tyler nu apare în nici un cadru amorsa. Adaptarea românului a fost făcută de Uhls, care a fost și lăudat pentru fidelitatea sa față de român. Filmul a fost filmat în jurul Los Angesului și în platourile Century City, regizorul a folosit de 3 ori mai mult film decât un
Fight Club (film) () [Corola-website/Science/314146_a_315475]
-
aprinzi un foc. Cu el poți încălzi mâncarea și băutura. Usuci hainele. Te încălzești. Semnalizezi. Îți dă curaj. Mintea funcționează mai bine. Pentru aprinderea focului ai nevoie de combustibil + oxigen (aer) + temperatura de aprindere; adică: o scânteie sau o flacără + amorse + vreascuri. Plus gândire - și răbdare. Dar e bine să știi din capul locului că s-ar putea să nu reușești să aprinzi focul! La primele încercări - sau vreodată. Mai ales în condiții foarte grele. Sau, chiar dacă îl aprinzi și vremea
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
țigări, când ai la dispoziție alte metode; - Chiar dacă ai un foc sau chibrituri, învață și antrenează-te să aprinzi focul fără chibrituri (vezi mai jos). S-ar putea să ai nevoie de această îndemânare mult mai repede decât te aștepți. - Amorsele pentru aprinderea focului/ac jumătate din treaba chibritului. Cealaltă jumătate o face scânteia, căldura sau flacăra. Completează-ți și sporește-ți mereu rezerva de amorse pentru aprinderea focului: iască, praf de la carii de lemn, scame, fire din bumbac, rumeguș uscat
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
S-ar putea să ai nevoie de această îndemânare mult mai repede decât te aștepți. - Amorsele pentru aprinderea focului/ac jumătate din treaba chibritului. Cealaltă jumătate o face scânteia, căldura sau flacăra. Completează-ți și sporește-ți mereu rezerva de amorse pentru aprinderea focului: iască, praf de la carii de lemn, scame, fire din bumbac, rumeguș uscat, așchii de lemn, sfoară despletită, scame de la fese sau bandaje, pânză, fire de lână, pene, scame din buzunar, bucăți din cuiburi de pasăre, orice fel
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
material găsești. Dar mai întâi încearcă o cantitate mică, să vezi dacă arde. În cazul în care e e bun, folosește-1 mereu. Înainte de aprinderea focului: stropește combustibilul cu gaz (petrol lampant), benzină sau spirt. Stropește vreascurile. Pune 2 picături pe amorse. După ce torni o cană peste o grămadă de lemne, poți aprinde imediat un foc zdravăn. De asemenea, uleiul, parafină și spirtul solid pot să pornească bine focul. Dar niciodată NU turna sau arunca gaz, benzină etc. într-un foc sau
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
se frece, să se sfărâme, ciocnească sau să se autoaprindă. - Cu bricheta (de buzunar, de la automobil): folosește-o numai pentru aprinderea focului. Țigările se vor aprinde altfel: de exemplu de la soare, cu o lentilă. - Cu o lentilă convexă - poți aprinde amorsa și vreascurile de la razele soarelui. Anumite lentile (convergente) dau rezultate mai bune, altele mai slabe, iar unele (cele divergente) nu aprind deloc. Sunt bune lentilele de la ochelarii persoanelor presbite (cu dioptrii „plus"). Geamul de la ceas este prea puțin convex, nu
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
șurubelniță etc. Dificultatea constă în găsirea pietrei potrivite apoi în prinderea și utilizarea scânteii. E nevoie de antrenament! Încearcă să faci la fel cum aprinzi chibritul: între palme, contra vântului. Ține piatra între degetul mare și arătătorul mâinii stângi, iar amorsa de foc în palma stângă. Lovește cu bucata de oțel ținută în mâna dreaptă. Dacă scânteia prinde, suflă până apare flacăra. Pentru aceasta, cea mai bună amorsa este o bucată de pânză (ruptă din cămașă) și împăturită astfel încât scânteile să
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
palme, contra vântului. Ține piatra între degetul mare și arătătorul mâinii stângi, iar amorsa de foc în palma stângă. Lovește cu bucata de oțel ținută în mâna dreaptă. Dacă scânteia prinde, suflă până apare flacăra. Pentru aceasta, cea mai bună amorsa este o bucată de pânză (ruptă din cămașă) și împăturită astfel încât scânteile să ajungă în centrul ei. - Prin frecarea a două lemne: o metodă foarte dificilă. Majoritatea oamenilor n-o pot folosi deoarece: nu au experiență; nu au lemne cu
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
ca pe o cutie de chibrituri Prin manevrarea arcului încoace și încolo, țărușul (din lemn tare) se rotește cât mai repede în lemnul de bază (moale, uscat, nerășinos). Din frecarea lemnelor apare un rumeguș fin, care începe să ardă deasupra amorsei. Prin suflare, grămăjoara devine jăratic. Vârful țărușului trebuie rotit la marginea crestăturii din scândurica de bază, astfel încât praful de lemn aprins să cadă pe grămăjoara de amorse, pusă mai jos. - Cu acumulatorul - chiar dacă autovehiculul, motocicleta sau șalupa nu are un
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
nerășinos). Din frecarea lemnelor apare un rumeguș fin, care începe să ardă deasupra amorsei. Prin suflare, grămăjoara devine jăratic. Vârful țărușului trebuie rotit la marginea crestăturii din scândurica de bază, astfel încât praful de lemn aprins să cadă pe grămăjoara de amorse, pusă mai jos. - Cu acumulatorul - chiar dacă autovehiculul, motocicleta sau șalupa nu are un aprinzător electric pentru țigări. Dar atenție - nimeni nu dorește: mâini arse, baterie descărcată și scântei pe motor. Acoperă preventiv motorul cu orice fel de învelitoare - de la un
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
a picurat puțină benzină. Cârpa este ținută legată cu o sârmă răsucită în spirală, suficient de rigidă pentru a nu se îndoi cu cârpa aprinsă și a-ți aprinde mâna sau mâneca. Pregătește din timp, în preajmă, o grămăjoară cu amorse și vreascuri. - Cu o armă de foc: puțin praf de pușcă amestecat cu amorse de foc pornesc bine focul. Pentru a obține o flacără, taie tubul cartușului și scoate glonțul sau alicele, precum și majoritatea pulberii (nu arunca nimic, resturile păstrează
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]
-
suficient de rigidă pentru a nu se îndoi cu cârpa aprinsă și a-ți aprinde mâna sau mâneca. Pregătește din timp, în preajmă, o grămăjoară cu amorse și vreascuri. - Cu o armă de foc: puțin praf de pușcă amestecat cu amorse de foc pornesc bine focul. Pentru a obține o flacără, taie tubul cartușului și scoate glonțul sau alicele, precum și majoritatea pulberii (nu arunca nimic, resturile păstrează-le pentru alte utilizări!). Peste pulberea rămasă în tubul cartuș bagă un dop de
Tehnici de supraviețuire () [Corola-website/Science/318351_a_319680]