1,026 matches
-
se adaugă în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară ce conține 0,5-1,0 x 106 celule la ml într-un mediu de cultură celulară conținând ser fără anticorpi la FMD, după care plăcile sunt sigilate. Plăcile sunt incubate la temperatura de 37°C. Monoculturile devin normal confluente în 24 de ore. CPE este în mod normal suficient de dezvoltat la 48 de ore pentru a permite o citire microscopica a testului. În acest moment se poate efectua o
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
antigenului reduce diluția serica inițială la 1/8. 3. Se spală plăcile ELISA cu PBST de 5 ori. 4. Se transferă apoi 50 æl din amestecurile ser-antigen din plăcile purtătoare în plăcile ELISA acoperite cu ser de iepure și se incubează la temperatura de 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare se adaugă în fiecare godeu 50 u.i. de antiser de cobai la antigenul folosit la lit. d). Se incubează plăcile la temperatura de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de iepure și se incubează la temperatura de 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare se adaugă în fiecare godeu 50 u.i. de antiser de cobai la antigenul folosit la lit. d). Se incubează plăcile la temperatura de 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Se spală plăcile și se adaugă în fiecare godeu 50 æl de imunoglobulina de iepure anticobai, conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
Se incubează plăcile la temperatura de 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Se spală plăcile și se adaugă în fiecare godeu 50 æl de imunoglobulina de iepure anticobai, conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la temperatura de 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Se spală plăcile și se adaugă în fiecare godeu 50 u.i. de ortofenilen diamina, ce conține 0,05% H(2)O(2) 30% p/v.
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
Vero sau alte sisteme celulare senzitive. Virusul bolii lui Aujeszky este utilizat la 100 TCID50 per 0,025 ml; probele de seruri inactivate, nediluate, sunt amestecate cu un volum egal (0,025 ml) de suspensie de virus. Amestecul virus-ser este incubat timp de două ore la temperatura de 37°C în plăci de microtitru înainte de adăugarea celulelor potrivite. Celulele sunt utilizate într-o concentrație, care formează după 24 de ore un monostrat complet. ... c) Controale: ... 1. verificarea infecțiozității virusului; 2. controlul
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
A72 (tumori de câine) sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul TGE se folosește la 100 TCID50 per 0,025 ml; probele de ser inactivate, nediluate, sunt amestecate cu un volum egal (0,025 ml) de suspensie virală. Amestecul virus-ser este incubat 30-60 minute la temperatura de 37°C în plăcile de microtitru înainte de a se adaugă celulele potrivite. Celulele sunt utilizate într-o concentrație, care după 24 de ore formează un monostrat complet. Fiecare celulă primește 0,1 ml de suspensie
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
standardizat; ... d) pe o coloană de lapte de cel putin 25 ml înălțime și pe un volum de lapte de 2 ml la care s-au adăugat 0,05 ml antigen colorat standardizat. ... 6. Amestecul de lapte și antigen trebuie incubat la 37°C timp de minimum 45 de minute ��i maximum 60 de minute. Testul trebuie evaluat la 15 minute după scoaterea din termostat. 7. Reacția trebuie evaluată conform următoarelor criterii: a) reacție negativă: laptele colorat, smântână necolorata; ... b) reacție
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 5 iunie 2002 privind problemele de sănătate a animalelor, ce afectează comerţul României cu statele membre ale Uniunii Europene cu animale din speciile bovine şi porcine. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/145985_a_147314]
-
godeu dintr-o placă cu 24 de godeuri. Folosirea plăcutelor cu godeuri este recomandată, dar sunt acceptate, de asemenea, și alte suporturi cu suprafața de creștere similară sau mai mare. ... Articolul 12 Incubarea culturilor celulare a) Culturile celulare inoculate sunt incubate la temperatura de 15°C pentru 7-10 zile. Dacă culoarea mediului culturilor celulare virează de la roșu la galben, indicând o acidifiere a mediului, se va ajusta pH-ul mediului cu soluție sterilă de bicarbonat de sodiu sau substanțe echivalente, pentru
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
de 7-10 zile la 15°C, se face ��n conformitate cu art. 12. ... d) Dacă se produce un efect citopatic toxic în primele 3 zile de incubație, se poate realiza o subcultivare în acest stadiu, dar celulele trebuie să fie incubate 7 zile, urmată de o subcultivare cu durata de incubație tot de 7 zile. Atunci când se produce un efect citopatic toxic după 3 zile, celulele pot fi pasate o dată și incubate pentru a obține un total de 14 zile de la
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
subcultivare în acest stadiu, dar celulele trebuie să fie incubate 7 zile, urmată de o subcultivare cu durata de incubație tot de 7 zile. Atunci când se produce un efect citopatic toxic după 3 zile, celulele pot fi pasate o dată și incubate pentru a obține un total de 14 zile de la prima inoculare. Nu trebuie să existe semne de toxicitate în cursul ultimelor 7 zile de incubație. ... e) Dacă se produce o contaminare bacteriană în ciuda tratamentului cu antibiotice, subcultivarea trebuie precedată de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
prin membrana de 0,45 æm cu procent scăzut de absorbție a proteinelor, si se diluează supernatantul 1:100 și 1:10.000 în mediu de culturi celulare. ... b) Părți din cele două diluții ale supernatantului sunt amestecate separat și incubate pentru 60 de minute la 15°C cu părți egale din următorii reagenti: ... 1. ser ce conține anticorpi anti virusul SHV la diluție 1:50, vol:vol; 2. ser ce conține anticorpi anti virusul IHN la diluție 1:50, vol
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
indigene la virusul IPN la diluție 1:50, vol:vol; 4. doar mediu - martor pozitiv. c) 50 æl din fiecare amestec format din supernatantul cu virusul de identificat și ser se inoculează pe cel puțin două culturi celulare și se incubează la 15°C. Se urmărește apariția efectului citopatic așa cum este descris în art. 13. ... d) Unele tulpini de virus SHV nu reacționează la testele de neutralizare. Astfel de izolate trebuie să fie identificate prin imunofluorescența - IF - sau ELISA. ... e) Pot
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
asemenea, și alte linii celulare cum sunt BF2, RTG2 sau FHM. ... b) Virusul care trebuie să fie identificat se inoculează când celulele s-au prins pe suprafața de sticlă, la aproximativ o oră după tripsinizare, sau când culturile au fost incubate până la 24 ore. Patru culturi sunt inoculate la un raport volum la volum de 1:10 și patru culturi la un raport de 1:1.000. Acestea sunt apoi incubate la 15°C pentru 20-30 de ore. ... c) După incubație
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
aproximativ o oră după tripsinizare, sau când culturile au fost incubate până la 24 ore. Patru culturi sunt inoculate la un raport volum la volum de 1:10 și patru culturi la un raport de 1:1.000. Acestea sunt apoi incubate la 15°C pentru 20-30 de ore. ... c) După incubație, culturile sunt clătite de două ori în mediu Eagle's MEM fără ser fetal, se fixează în 80% acetona rece și se colorează apoi prin tehnică de imunofluorescența indirectă - IFAT
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
cu procent scăzut de legare a proteinei. ... c) Tratarea supernatantului cu antiser: suspensia de organe tratată cu antibiotice sau filtrată este diluata 1:10 și 1:1000 în mediu de culturi celulare, iar părți din acestă se amestecă și se incubează 60 de minute la 15°C cu părți egale din reagentii menționați în partea I cap. IV art. 16. ... 3. a) Culturile celulare și mediile de cultură: astfel cum sunt prevăzute în partea I cap. III art. 10; b) Inocularea
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
fi realizate două diluții ale serului începând cu 1/2 sau 1/5. Fiecare diluție este amestecata cu un volum egal de suspensie de virus conținând 100 de doze infecțioase. După incubare amestecul este inoculat în culturi celulare care sunt incubate 3-5 zile. După această perioadă de incubație culturile sunt fixate și orice replicare virală în celulele infectate este detectată de un sistem imun de etichetare. Pot fi folosite atât testul de neutralizare a anticorpilor legați de peroxidaza (NPLA), cât și
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 4 decembrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare a probelor şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea pestei porcine clasice. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/147050_a_148379]
-
monoclonali selectați, conjugați cu peroxidaza, cu antigenul virusului bolii veziculoase a porcului va fi inhibata. În acest test ELISA antigenul viral al bolii veziculoase a porcului este blocat în faza solidă, folosindu-se anticorpi monoclonali, apoi probele de ser sunt incubate în diluție corespunzătoare, urmată de adăugarea anticorpului monoclonal conjugat cu peroxidaza. Ulterior inhibiția legăturii anticorpului monoclonal cu antigenul bolii veziculoase a porcului este măsurată prin intermediul unui substrat și al unui cromogen. 2. Un test ELISA indirect de blocare, care folosește
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 18 octombrie 2002 privind procedurile de diagnostic, metodele de prelevare de probe şi criteriile pentru evaluarea rezultatelor testelor de laborator, pentru confirmarea şi diagnosticul diferential al bolii veziculoase a porcului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
antibiotice. 4. Izolarea virusului pe ouă embrionate de pasăre Fluidul supernatant clarificat se va inocula în cantități de căte 0,2 ml în cavitatea alantoidiana, fiecare fluid într-un număr minim de 4 ouă embrionate de pasăre ce au fost incubate timp de 8-11 zile. Ideal ar fi că aceste ouă să fie obținute dintr-un lot de păsări liber de agenți patogeni, iar atunci când aceasta nu se poate practică, se acceptă folosirea ouălor obținute dintr-un lot ce se prezintă
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 decembrie 2002 privind criteriile de testare a pasarilor pentru tăiere ce provin dintr-o zona de supraveghere a bolii de Newcastle, în aplicarea art. 5 alin. (3) din Norma sanitară veterinara privind condiţiile de sănătate animala care reglementează comerţul României cu statele membre ale Uniunii Europene şi importul din tari terţe de carne proaspăta de pasare, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentaţiei şi pădurilor nr. 391/2002. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146993_a_148322]
-
determină, în prezența iodului, apariția unor colorații caracteristice: albastră-violetă (pentru amilodextrine), roșie (pentru eritrodextrine) și galbenă (pentru flavodextrine). Acrodextrinele având o masă moleculară mai mică nu se colorează în prezența iodului. Principiul metodei O soluție de amidon ca substrat se incubează cu amilază salivară la temperatura de 370C. Hidroliza enzimatică a amidonului se evidențiază prin reacția cu iodul, iar apariția maltozei, ca produs final al acțiunii amilazei, prin reacția Fehling. Prezența maltozei în mediul de reacție indică hidroliza completă a amidonului
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
0,3 % * Amilază salivară: se colectează salivă într o eprubetă; după filtrare se diluează în raportul 1/10 cu apă distilată * Reactiv Fehling (I, II) Mod de lucru: Intr-o eprubetă se măsoară 10 cm3 soluție de amidon și se incubează minute într-o baie de apă la temperatura de 370C. Se adaugă 0,5 cm3 soluție de amilază, se omogenizează și se introduce din nou în baia de apă. Din amestecul de reacție se colectează la intervale de 2-3 minute
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
cm 3) pH= 5,2 pH=6,8 pH=8,2 Amidon Tampon fosfați pH=5,2 Tampon fosfați pH=6,8 Tampon fosfați pH=8,2 5,0 2,0 5,0 2,0 5,0 2,0 Se incubează 5 minute la 370C Ulterior se adaugă: Amilază salivară 0,5 0,5 0,5 Eprubetele conținând probele respective se mențin pe baie de apă la 370C. La intervale de timp diferite (3, 5, 7, 15, 20 de minute) se
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
8. * Soluție de NaCl 1 %. * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilaza salivară (diluată 1 /10). Mod de lucru Se realizează următoarea schemă experimentală: Soluții Probă (cm3) Martor (cm3) Amidon Tampon fosfați pH=6,8 NaCl Apă distilată Se incubează 5 minute la 370C. Ulterior se adaugă: Amilază salivară 0,5 0,5 Eprubetele se mențin pe baie de apă la 370C. Se efectuează reacția cu iodul după procedeul descris anterior. Interpretarea rezultatelor In proba care conține ioni de clor
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
tehnicii de incubarea probelor, la 4 0 C, cu un anticorp primar de iepure, anti-neu uman. Etapa a doua a constat în incubarea cu anticorpul secundar, antiiepure, biotinilat, 10 minute, la temperatura camerei. În a treia etapă secțiunile au fost incubate cu complexul enzimatic streptavidină-peroxidază (LSAB - DAKO), 10 minute, la temperatura camerei. Evidențierea activității enzimatice s-a realizat cu DAB/H 2 O 2 , 10-15 minute, la temperatura camerei, urmată de etapa de contracolorare cu hematoxilină. Pattern-ul de colorare în
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
tehnicii de incubarea probelor, la 4 0 C, cu un anticorp primar de iepure, anti-neu uman. Etapa a doua a constat în incubarea cu anticorpul secundar, antiiepure, biotinilat, 10 minute, la temperatura camerei. În a treia etapă secțiunile au fost incubate cu complexul enzimatic streptavidină-peroxidază (LSAB - DAKO), 10 minute, la temperatura camerei. Evidențierea activității enzimatice s-a realizat cu DAB/H 2 O 2 , 10-15 minute, la temperatura camerei, urmată de etapa de contracolorare cu hematoxilină. Pattern-ul de colorare în
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
SGC Sucrose density-gradient ultracentrifugation - ultracentrifugare în gradient de sucroză) Ultracentrifugarea în gradient de sucroză furnizează informații despre formele moleculare ale receptorilor, din date de viteza de sedimentare ale proteinelor, în funcție de densitatea și masa moleculară. În mod uzual, întâi, citosolul este incubat cu ligand radiomarcat (steroid, de concentrație standard) cu și fără competitor, apoi este supus centrifugării în eprubete de centrifugă în care se realizează gradienți de soluție de sucroză (soluțiile de sucroză sunt medii de suspendare care nu influențează structura organitelor
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]