185 matches
-
o prelevare de probe la un interval de timp egal cu de 1,5 ori durata ciclului celular normal după tratamentul final. Înainte de sacrificare, se procedează la injectarea intraperitoneală a animalelor cu o doză corespunzătoare de agent de inhibare a metafazei (de ex. Colcemid(r) sau colchicină). Probele de la animale se prelevează apoi la un interval corespunzător. Pentru șoareci intervalul respectiv este de aproximativ 3-5 ore; pentru hamsterii chinezești intervalul este de 4-5 ore. Celule se recoltează din măduva osoasă și
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
specificat se poate reduce. Toate lamelele, inclusiv cele cu celule de la martorii pozitivi și negativi, ar trebui să fie codificate independent, înainte de examinarea la microscop. Deoarece metodele de preparare a lamelelor conduc adesea la scindarea unei fracții de celule în metafază cu pierdere de cromozomi, toate celulele examinate ar trebui, prin urmare, să conțină un număr de centromeri egal cu 2n ± 2. 2. DATELE 2.1. PRELUCRAREA REZULTATELOR Se recomandă prezentarea sub formă de tabel a datelor pentru fiecare animal. Unitatea
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
băut în doza reală (mg/kg greutate corp/zi), dacă este cazul, - detalii privind calitatea hranei și a apei, - descrierea amănunțită a modalităților de tratare și de prelevare a probelor, - metodele de măsurare a toxicității, - identitatea substanței de inhibare a metafazei, concentrația acesteia și durata tratamentului, - metodele de preparare a lamelelor, - criteriile pentru numărătoarea aberațiilor, - numărul de celule analizate per animal, - criteriile utilizate la caracterizarea studiilor ca fiind pozitive, negative sau nesigure. Rezultatele: - semnele de toxicitate, - indexul mitotic, - tipul și numărul
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
numărului de cromozomi față de numărul normal caracteristic pentru animalele utilizate. Poliploidie: multiplicare a numărului (n) de cromozomi haploizi, alta decât diploidia (adică 3n, 4n etc.). Aberație structurală: modificare a structurii cromozomilor, detectabilă la examinarea microscopică a celulelor în stadiul de metafază al diviziunii acestora, care se prezintă sub formă de deleții, modificări intracromozomiale și intercromozomiale. 1.3. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Animalele se expun la substanța de testat printr-o cale de expunere corespunzătoare și sunt sacrificate în momente corespunzătoare după
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
și intercromozomiale. 1.3. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Animalele se expun la substanța de testat printr-o cale de expunere corespunzătoare și sunt sacrificate în momente corespunzătoare după tratament. Înainte de sacrificare, animalele se tratează cu o substanță de inhibare a metafazei (de ex. colchicină sau Colcemid(r)). Apoi, din celulele germinale, se realizează preparate cromozomiale care se colorează, iar celulele în metafază sunt analizate la microscop pentru detectarea aberațiilor cromozomiale. 1.4. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.4.1. Preparatele 1
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
și sunt sacrificate în momente corespunzătoare după tratament. Înainte de sacrificare, animalele se tratează cu o substanță de inhibare a metafazei (de ex. colchicină sau Colcemid(r)). Apoi, din celulele germinale, se realizează preparate cromozomiale care se colorează, iar celulele în metafază sunt analizate la microscop pentru detectarea aberațiilor cromozomiale. 1.4. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.4.1. Preparatele 1.4.1.1. Selectarea speciilor de animale Se utilizează, de obicei, hamsteri chinezești și șoareci de sex masculin. Cu toate acestea
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
ore (1,5 ori durata ciclului celular) de la ultimul tratament. Se pot utiliza momente suplimentare de prelevare a probelor, dacă este necesar. Înainte de sacrificare, se procedează la injectarea intraperitoneală a animalelor cu o doză corespunzătoare de substanță de inhibare a metafazei (de ex. Colcemid(r) sau colchicină). Probele de la animale se prelevează apoi la un interval corespunzător. Pentru șoareci intervalul respectiv este de aproximativ 3-5 ore; pentru hamsterii chinezești intervalul este de 4-5 ore. 1.5.3. Dozele Dacă, în lipsa datelor
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
și să fie stabilite pentru fiecare caz în parte. Doza maximă se mai poate defini ca doza care produce anumite semne de toxicitate în celulele spermatogoniale (de ex. o diminuare a proporției de mitoze spermatogoniale în raport cu prima și a doua metafază meiotică; reducerea respectivă nu ar trebui să fie mai mare de 50%). 1.5.4. Test limită Dacă un test realizat cu o doză de minimum 2 000 mg/kg greutate corp, administrată într-o singură repriză sau în două
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
de la unul sau două testicule, se expun la o soluție hipotonică și se fixează. Celulele se întind apoi pe lamele și se colorează. 1.5.7. Analiza Pentru fiecare animal ar trebui să se analizeze minimum 100 de celule în metafază, bine etalate (de ex. minimum 500 de celule în metafază pentru fiecare grupă). Dacă se observă un număr mai mare de aberații, numărul specificat se poate reduce. Toate lamelele, inclusiv cele cu celule de la martorii pozitivi și negativi, ar trebui
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
hipotonică și se fixează. Celulele se întind apoi pe lamele și se colorează. 1.5.7. Analiza Pentru fiecare animal ar trebui să se analizeze minimum 100 de celule în metafază, bine etalate (de ex. minimum 500 de celule în metafază pentru fiecare grupă). Dacă se observă un număr mai mare de aberații, numărul specificat se poate reduce. Toate lamelele, inclusiv cele cu celule de la martorii pozitivi și negativi, ar trebui să fie codificate independent înainte de examinarea la microscop. Deoarece metodele
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
specificat se poate reduce. Toate lamelele, inclusiv cele cu celule de la martorii pozitivi și negativi, ar trebui să fie codificate independent înainte de examinarea la microscop. Deoarece metodele de preparare a lamelelor conduc adesea la scindarea unei fracții de celule în metafază cu pierdere de cromozomi, toate celulele examinate ar trebui, prin urmare, să conțină un număr de centromeri egal cu 2n ± 2. 2. DATELE 2.1. PRELUCRAREA REZULTATELOR Se recomandă prezentarea sub formă de tabel a datelor pentru fiecare animal. Unitatea
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
se consemnează și se raportează separat, dar în general acestea nu se includ în frecvența totală a aberațiilor. Dacă se observă concomitent mitoză și meioză, ar trebui să se determine raportul dintre mitozele spermatogoniale , în prima, respectiv în a doua metafază meiotică; această determinare ar trebui să se realizeze pentru toate animalele tratate și cele martori negativi, pe un eșantion total de 100 celule în diviziune pentru fiecare animal pentru a stabili un posibil efect citotoxic. Dacă se constată doar mitoză
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
băut în doza reală (mg/kg greutate corp/zi), dacă este cazul, - detalii privind calitatea hranei și a apei, - descrierea amănunțită a modalităților de tratare și de prelevare a probelor, - metodele de măsurare a toxicității, - identitatea substanței de inhibare a metafazei, concentrația acesteia și durata tratamentului, - metodele de preparare a lamelelor, - criteriile pentru numărătoarea aberațiilor, - numărul de celule analizate per animal, - criteriile utilizate la caracterizarea studiilor ca fiind pozitive, negative sau nesigure. Rezultatele: - semnele de toxicitate, - indexul mitotic, - procentul de celule
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
criteriile pentru numărătoarea aberațiilor, - numărul de celule analizate per animal, - criteriile utilizate la caracterizarea studiilor ca fiind pozitive, negative sau nesigure. Rezultatele: - semnele de toxicitate, - indexul mitotic, - procentul de celule spermatogoniale în mitoză în raport cu cele din prima și a doua metafază meiotică, - tipul și numărul aberațiilor, consemnate separat pentru fiecare animal, - numărul total de aberații pentru fiecare grupă, - numărul de celule cu aberații pentru fiecare grupă, - relația doză-răspuns, dacă este posibil, - analizele statistice, dacă există, - datele privind martorii negativi studiați în
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
sau un studiu in vitro care utilizează un sistem de metabolizare diferit de cel/cele utilizat(e) anterior. Dacă testul citogenetic in vitro este pozitiv, trebuie să se efectueze un test in vivo care să utilizeze celule somatice (analiza de metafază a măduvei osoase la rozătoare sau testul micronuclear la rozătoare). Dacă oricare din testele in vitro de mutație a genelor sunt pozitive, trebuie să se efectueze un test in vivo pentru a se cerceta sinteza neprogramată a ADN sau un
jrc5110as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90278_a_91065]
-
în sângele periferic < 20 % și fără implicare extramedulară . NEL : aceleași criterii ca și la RHC dar NAN ≥ 500/ mm și < 1000/ mm , și/ sau plachete ≥ 20000/ mm și ≤ 100000/ mm . c Criterii de răspuns citogenetic : complet ( 0 % Ph+ metafaze ) sau parțial ( > 0 % - 35 % ) . RCyM ( 0 % - 35 % ) combină atât răspunsurile complete cât și pe cele parțiale . n/ a = nu se aplică Iî= interval de încredere LSN= limita superioară a intervalului normal . Răspunsul la pacienții cu transplant de măduvă osoasă
Ro_980 () [Corola-website/Science/291739_a_293068]
-
cronică ) : WBC ≤ LSN instituțional , plachete < 450000/ mm , fără blaști sau promielocite în sângele periferic , < 5 % mielocite plus metamielocite în sângele periferic , ≤ 20 % bazofile în sângele periferic și fără implicare extramedulară , b Criterii de răspuns citogenetic : complet ( 0 % Ph+ metafaze ) sau parțial ( > 0 % - 35 % ) . RCyM ( 0 % - 35 % ) combină atât răspunsurile complete cât și pe cele parțiale . 2 - În studiul pe LCM în fază avansată și LAL Ph+ , obiectivul final primar a fost RHMa . Un număr total de 611 pacienți
Ro_980 () [Corola-website/Science/291739_a_293068]
-
în sângele periferic < 20 % și fără implicare extramedulară . NEL : aceleași criterii ca și la RHC dar NAN ≥ 500/ mm și < 1000/ mm , și/ sau plachete ≥ 20000/ mm și ≤ 100000/ mm . c Criterii de răspuns citogenetic : complet ( 0 % Ph+ metafaze ) sau parțial ( > 0 % - 35 % ) . RCyM ( 0 % - 35 % ) combină atât răspunsurile complete cât și pe cele parțiale . n/ a = nu se aplică Iî= interval de încredere LSN= limita superioară a intervalului normal . Răspunsul la pacienții cu transplant de măduvă osoasă
Ro_980 () [Corola-website/Science/291739_a_293068]
-
cronică ) : WBC ≤ LSN instituțional , plachete < 450000/ mm , fără blaști sau promielocite în sângele periferic , < 5 % mielocite plus metamielocite în sângele periferic , ≤ 20 % bazofile în sângele periferic și fără implicare extramedulară , b Criterii de răspuns citogenetic : complet ( 0 % Ph+ metafaze ) sau parțial ( > 0 % - 35 % ) . RCyM ( 0 % - 35 % ) combină atât răspunsurile complete cât și pe cele parțiale . 2 - În studiul pe LCM în fază avansată și LAL Ph+ , obiectivul final primar a fost RHMa . Un număr total de 611 pacienți
Ro_980 () [Corola-website/Science/291739_a_293068]
-
în sângele periferic < 20 % și fără implicare extramedulară . NEL : aceleași criterii ca și la RHC dar NAN ≥ 500/ mm și < 1000/ mm , și/ sau plachete ≥ 20000/ mm și ≤ 100000/ mm . c Criterii de răspuns citogenetic : complet ( 0 % Ph+ metafaze ) sau parțial ( > 0 % - 35 % ) . RCyM ( 0 % - 35 % ) combină atât răspunsurile complete cât și pe cele parțiale . n/ a = nu se aplică Iî= interval de încredere LSN= limita superioară a intervalului normal . Răspunsul la pacienții cu transplant de măduvă osoasă
Ro_980 () [Corola-website/Science/291739_a_293068]
-
cronică ) : WBC ≤ LSN instituțional , plachete < 450000/ mm , fără blaști sau promielocite în sângele periferic , < 5 % mielocite plus metamielocite în sângele periferic , ≤ 20 % bazofile în sângele periferic și fără implicare extramedulară , b Criterii de răspuns citogenetic : complet ( 0 % Ph+ metafaze ) sau parțial ( > 0 % - 35 % ) . RCyM ( 0 % - 35 % ) combină atât răspunsurile complete cât și pe cele parțiale . 2 - În studiul pe LCM în fază avansată și LAL Ph+ , obiectivul final primar a fost RHMa . Un număr total de 611 pacienți
Ro_980 () [Corola-website/Science/291739_a_293068]
-
în sângele periferic < 20 % și fără implicare extramedulară . NEL : aceleași criterii ca și la RHC dar NAN ≥ 500/ mm și < 1000/ mm , și/ sau plachete ≥ 20000/ mm și ≤ 100000/ mm . c Criterii de răspuns citogenetic : complet ( 0 % Ph+ metafaze ) sau parțial ( > 0 % - 35 % ) . RCyM ( 0 % - 35 % ) combină atât răspunsurile complete cât și pe cele parțiale . n/ a = nu se aplică Iî= interval de încredere LSN= limita superioară a intervalului normal . Răspunsul la pacienții cu transplant de măduvă osoasă
Ro_980 () [Corola-website/Science/291739_a_293068]
-
cronică ) : WBC ≤ LSN instituțional , plachete < 450000/ mm , fără blaști sau promielocite în sângele periferic , < 5 % mielocite plus metamielocite în sângele periferic , ≤ 20 % bazofile în sângele periferic și fără implicare extramedulară , b Criterii de răspuns citogenetic : complet ( 0 % Ph+ metafaze ) sau parțial ( > 0 % - 35 % ) . RCyM ( 0 % - 35 % ) combină atât răspunsurile complete cât și pe cele parțiale . 2 - În studiul pe LCM în fază avansată și LAL Ph+ , obiectivul final primar a fost RHMa . Un număr total de 611 pacienți
Ro_980 () [Corola-website/Science/291739_a_293068]
-
toxică , de cidofovir ( ≥ 2000 mg/ kg ) . Cidofovirul a indus aberații cromozomiale în limfocitele umane circulante periferice in vitro fără activare metabolică ( fracția S- 9 ) . Pentru cele 4 niveluri de cidofovir testate ( între 12, 5 și 100 μg/ ml ) , procentul de metafaze eronate și numărul de aberații pe celulă a crescut în funcție de concentrație . Nu au fost observate reacții adverse asupra fertilității și a reproducerii generale la masculii de șobolani , consecutiv injecțiilor intravenoase unice săptămânale de cidofovir timp de 13 săptămâni consecutive , în
Ro_1158 () [Corola-website/Science/291917_a_293246]
-
nu a avut un efect semnificativ din punct de vedere statistic asupra respirației , sistemului nervos central și sistemului cardiovascular . Carbaglu nu a prezentat o activitate mutagenă semnificativă în cadrul unei baterii de teste de genotoxicitate efectuate in vitro ( testul Ames , analiza metafazei limfocitelor umane ) și in vivo ( testul micronucleilor la șobolani ) . Dozele unice de acid carglumic de până la 2800 mg/ kg pe cale orală și de 239 mg/ kg pe cale intravenoasă nu au indus nici un efect asupra mortalității sau semne clinice anormale la
Ro_165 () [Corola-website/Science/290925_a_292254]