2,287 matches
-
ADN-ului, aceste afecțiuni pot fi diagnosticate atât pre- cât și postnatal. În oncogeneza virală, mai exact în carcinomul hepatic indus de virusul hepatitic B (HBV), diagnosticul serologic are defectele sale: antigenul HBs nu e constant prezent. În schimb, analiza genică indică totdeauna integrarea HBV în genomul (ADN-ul) hepatocitelor. Alte avantaje oferite de analiza ADN constau din: a) cantitatea mică de material ce trebuie recoltat: nucleul fiecărei celule diploide conține 6 picograme de ADN (6x1012g). Un ml. de sânge total
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
foretic fragmentele rezultate, după care, cu ajutorul unor sonde genetice pure, se proceda la hibridarea cu regiunea genomică aleasă, aflată de obicei în nucleul unor bacterii „cobai“. Ulterior, celulele bacte riene se clonau, încercându-se astfel o primă și greoaie analiză genică.84 Dezavantajele metodei erau vizibile: nu putea fi automatizată, nu se găseau totdeauna sondele adecvate, ca să nu mai vorbim că la nivelul anilor ’70 genomul uman nu fusese descifrat, astfel că nu exista un etalon de referință pentru depistarea ușoară
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
depistarea ușoară a secvențelor anormale de ADN. Etapa reacției Polymerase Chain Reaction (PCR). Este meritul biochimistului K. Mullis de a fi inventat în 1985 și publicat doi ani mai târziu, împreună cu F. Faloona, această metodă socotită a fi revoluționat analiza genică.85 Deoarece în capitolele ce urmează ne vom ocupa mai pe larg de metodă și de importanța ei în depistarea ADN-ului unor virusuri oncogene integrate în genomul celular, ne rezumăm să precizăm aici că reacția PCR și-a câștigat
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
care stabilesc paternitatea ori dau verdictul „vinovat“ în expertizele judiciare, au intrat cel puțin două tipuri de sonde: Sondele genetice directe sunt compuse din totalitatea sau numai dintr-o porțiune a secvențelor ADN ori ARN corespunzătoare unei gene sau fragment genic prezent pe țintă. Aceste sonde sunt capabile să recunoască un eveniment mutațional care s-a produs în structura țintei, implicit prezența unui fragment nucleinic străin în structura ADN ori ARN a țintei. Hibridul format este stabil dacă cel puțin 20
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
în bacterii ori cu ajutorul reacției PCR și care provin din băncile genomice; ribosonde alcătuite din secvențe de ARN ș.a. Sondele genetice indirecte, care pun în evidență secvențele polimorfice distincte ale țintei de studiat, explorând între altele prezența și poziția determinanților genici ai markerilor genetici. c) Etapa explorării genomului normal și a celui patologic Cunoașterea à fond a arsenalului de gene și, de ce nu, a funcției acestora, a fost visul de peste un veac al geneticienilor. Realizarea acestui vis a depins în primul
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
virus uman asociat cu carcinomul cu celule Merkel. Astfel s-a deschis o nouă cale pentru După 1980, odată cu intrarea în uz a sondelor de ADN genomic clonat, s-a reușit nu numai „atacul“ asupra unui număr sporit de ținte genice din structura genomului, dar și distincția netă între a) genele propriu zise și b) așa-numitele „secvențe anonime“. Rafinarea de după 1990 a metodologiei sondelor de ADN genomic clonat a adus în orizontul cunoașterii primele genoame animale și vegetale explorate complet
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
itinerarii. b) Semnalizarea indusă de factorii extracelulari. În general, orice informație adusă din exteriorul celulei „prinsă“ de receptorul specific, trebuie să fie dusă printr-o serie de mecanisme ierarhizate în interior, la formațiuni specializate din citosol, sau chiar la aparatul genic din nucleu. Pe parcursul acestui drum mesajul este amplificat. Există mecanisme enzimatice și ionice care efectuează această operație de amplificare, strâns legată de eficiența ulterioară a răspunsului celular, indiferent dacă este vorba de cel determinat de diverși hormoni, medicamente, factori de
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
găsește și fosforilează proteina p62TCF. Această proteină, de îndată ce este fosforilată, se asociază cu o altă proteină, p67SRF, formând un complex transcripțional activ. Pentru a-și merita numele de „activ“, complexul celor două proteine, respectiv p62TCF - p67SRF se leagă de promotorul genic (mai exact de componenta acestuia numită Serum Response Element. Ciclul celular și sistemul său de reglare, premiză a înțelegerii procesului de carcinogeneză Rezultatul final este activarea transcripției genelor. Așa cum se va vedea mai departe (Autoreglarea procesului de transducție al semnalelor
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
S-au obținut rezultate promițătoare în cancerul pulmonar. 2.2.8. Alte căi de semnalizare În afară de semnalizarea indusă de factorii de creștere, în ultimii 10-15 ani au fost descoperite și alte căi de transport și transducție a mesajelor adresate aparatului genic al celulei. Unele dintre aceste căi, care pornesc tot de la unirea unui ligand cu un receptor, transduc fiecare anumite ordine, urmăresc o anumită finalitate. În fig. 2-27 se află schițate etapele și mesagerii chimici proprii fiecărei asemenea căi. În lucrarea
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
din secolul trecut. S-a putut demonstra atunci că toate aceste proteine tirozin kinazice citosolice (PTK) joacă un rol deosebit în numeroase procese legate nu numai de adeziunea celulară ci și de transmiterea unor mesaje de la periferia celulei spre aparatul genic din nucleu. Mesajul este însă diferit, în funcție de starea celulei ca integrare în sistem. Dacă respectiva celulă a ratat adeziunea cu congenerele ori a fost desprinsă accidental din legătura morfofuncțională cu acestea, mesajul indus de stimuli matricei extracelulare este o condamnare
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
stimulii porniți de la matricea extracelulară și receptați de integrine: a) atât cel care trece prin FAK src cât și cel care ajunge la proteina Ras, împrumută calea factorilor de creștere (TGFα și EGF) descrisă anterior și care ajunge la aparatul genic nuclear prin cascada informativă Raf → MEK→ MAPK→ ERK→ Fos. b) mesajul transmis prin proteina cdc 42 ajunge în final la proteina P13K, componentă a căii proprii factorilor de supraviețuire (iGF1). Ciclul celular și sistemul său de reglare, premiză a înțelegerii
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
cei mai mulți dintre autori scriu numele (simbolul) genelor care codifică diversele proteine evident cu litere latine, în majuscule, în timp ce cel al proteinei codificate cu prima literă majusculă, următoarele fiind litere mici. citim astfel: gena RB (a retinoblastomului) codifică proteina Rb. Mutantele genice care, în istoria problemei, sunt primele care au atras atenția cercetătorilor și a căror investigare a dus la descoperirea genei normale, se scriu în întregime cu litere mici: gena rb. Printre funcțiile sale de esență ale proteinei p53 (după K.
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
G0. Mecanismele prin care virusurile oncogene deturnează mersul normal al ciclului celular, ar putea fi clasificate astfel: A. Alterarea prin mutageneză inserțională a genelor care codifică ciclinele. cu alte cuvinte, aceste virusuri introduc un fragment de nucleotid viral în „detrimentul“ genic al ciclinei. Este cazul herpes virusurilor care folosind polimeraza ADN virală (deci o polimerază străină celulei), pot introduce și așeza greșit diferitele nucleotide în timpul procesului de replicare semiconservativă a ADN-ului celular (faza S). Aceasta conduce la apariția de mutanți
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
exprimare de glicoproteine induse de virus la suprafața celulei parazitate. Este și acesta un mod de ascundere a prezenței parazitului viral în celulă. În infecția cu virusuri litice (ceea ce nu e cazul celor care își includ gene persistente în aparatul genic | 1552. Ciclul celular și sistemul său de reglare, premiză a înțelegerii procesului de carcinogeneză 127÷162-qxp9 PC•RI•IC•AM 05.02.2015 12:45 Page 155 al celulei cum este herpesvirusul), asemenea glicoproteine codate de virus demască prezența sa și
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
Cum bine se știe, genomul oricărui viețuitor, plantă sau animal, a pierdut porțiuni din ADN-ul său, ori și-a modificat structura, după cum a și câștigat asemenea fragmente care s-au constituit în gene noi. Alături de alte fenomene de restructurare genică, mutageneza a jucat un rol de seamă în evoluție, fiind principalul „motor“ al adecvării la mediu al biosistemelor de la celulă la organismele complexe. 3.1.1. Cromozomii, forma hipercompactată a cromatinei Cromozomii nu există fizic decât pe perioada mitozei și
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
1990 replicarea ADN ca problematică de cercetare și interpretare era catalogată drept o preocupare de biologie normală, în ultimii 20 de ani s-au cumulat o serie de descoperiri care au relevat că ea are o legătură esențială cu patologia genică și mai ales cu etiopatogenia bolii neoplazice. Această legătură este în prezent atât de evidentă, încât numeroși oameni de știință din domeniu afirmă că boala neoplazică are la origine o dereglare a mecanismelor de semnalizare și o pierdere a exigenței
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
au suferit o ruptură dublu catenară. ADN ligaza este utilă nu numai în procesul replicării ADN, dar și în cel al reparării ADN. În plus, ADN ligaza are o utilizare extensivă în laboratoarele de biologie moleculară, în experimentele de recombinare genică. În fig. 3-22 mai apar și acele Binding proteins, așezate în monostrat pe ambele catene desfăcute ale moleculei de ADN matrice. Rolul lor este acela de a stabiliza ADN monocatenar, prevenind formarea unor bucle și, în același timp, de a
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
Kaplan et M. Delpech, op.cit., pp. 188-189). Cele mai importante oncogene adenovirale sunt E1A și E1B. S-a putut preciza că proteina oncogenă E1A este în principal imortalizantă, iar E1B are predominant o acțiune transformantă asupra celulelor deja imortalizate. Cartografierea genică a precizat poziția genelor timpurii E1A și E1B, anume marginal la cca 11% de capătul genomului văzut linear. Proteina codificată de oncogena E1A a adenovirusurilor este un produs format din 289 aminoacizi (aa). Între N terminus și C terminus ea
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
20-30 de perechi de baze. Factorul de transcripție TF II H joacă, în condițiile normale ale transcrierii mesajului conținut într-o genă, un rol important în inițierea transcripției. De reținut că numai în această operație de debut a transcrierii mesajului genic, intră în acțiune cel puțin 20 de proteine diverse, din care reținem și alți factori generali de transcripție, numiți generic GTF (General Transcription Factors), respectiv „rudele“ lui TF II H (TF II A, TF II B, TF II S ș.a.
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
prin activarea cvasi permanentă a celor două frâne ale multiplicării celulare, se instalează treptat și ireversibil fenomenul de senescență celulară (apare vizibilă acea limită de supraviețuire descrisă în 1961 de Leonard Hayfick). Ca și apoptoza, senescența replicativă este strict controlată genic. Leziunile ADN-ului, scurtarea telomerelor sau activarea protooncogenei RAS, au practic același efect final: activarea frânelor celulare p.53 și p.RB (fig. 4-5). c) NecRoza însoțită obligatoriu de moartea rapidă a celulelor implicate, prezintă o serie de deosebiri morfologice
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
aflate sub controlul unor programe genetice (cele mai vizibile sunt cele efectuate cronologic în cursul creșterii și diferențierii țesuturilor și organelor embrionare). Aceste enzime se află când în stare inactivă, când sub formă activată, joc dirijat cibernetic de același aparat genic celular. Unele dintre cele mai active enzime de demolare fac parte din marea familie a endonucleazelor. Evenimentele concrete care se petrec în faza de execuție, sunt comentate în subcapitolul 4.3.5.2. Digestia proteinelor perimată fiziologic în proteasomi. C.
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
glutamine). Evident că activată de diferiți inductori (inclusiv proteine virale prooncogene), produșii codificați de CREB vor avea o acțiune antiapoptotică, deci proneoplazică. Fenomenul de apoptoză indusă de experimentatori și curând de clinicieni începe să fie folosit din ce în ce mai des în cadrul terapiilor genice. Astfel, s-a experimentat: a) inserarea în celulele tumorale a unor gene suicidare, sensibile la tratamentul chimioterapic; b) transferul în genomul individului afectat a unor gene supresoare tumorale, care să inhibe acțiunea oncogenelor oprind multiplicarea anarhică a celulelor neoplazice; c
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
anularea expresiei unor oncogene la nivelul ribozomilor. Vom comenta în continuare aspectele și ponderea pe care le are fiecare dintre acești trei factori etiopatogenici în geneza cancerului. Precizăm ab initio că virusurile oncogene nu reprezintă decât o parte dintre agenții genici destabilizatori, o pondere însemnată în modificările care apar în structura genomului aparținând unor agresori fizici (în special radiații), mutageni chimici și unui complex de așa numiți „factori ereditari“ încă prea puțin cunoscuți. Este însă de reținut că deși virusurile nu
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
gena v-Src, unde v vine de la virus iar Src de la sarcom. Descoperirea genei v-Src a completat imaginea generală a genomului retrovirusurilor în general și a virusului Rous în special. După 1980 au putut fi trase concluzii clare în ce privește: a) baza genică a sușelor de RSV defective; b) aparatul genic al sușelor neoplazice (a celor care posedă și gena v-Src). A. Bazele moleculare ale defectivității retrovirusurilor. S-a afirmat mai înainte că imposibilitatea unor sușe de RSV de a fi productive și
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
Src de la sarcom. Descoperirea genei v-Src a completat imaginea generală a genomului retrovirusurilor în general și a virusului Rous în special. După 1980 au putut fi trase concluzii clare în ce privește: a) baza genică a sușelor de RSV defective; b) aparatul genic al sușelor neoplazice (a celor care posedă și gena v-Src). A. Bazele moleculare ale defectivității retrovirusurilor. S-a afirmat mai înainte că imposibilitatea unor sușe de RSV de a fi productive și necesitatea corectării acestui neajuns de către un virus helper
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]