16,835 matches
-
lamele pe hârtie umedă și sub un capac-clopot timp de 30 de minute, la temperatura mediului ambiant (18-25 °C); 4.3.3. se elimină picăturile de pe fiecare lamă și se clătește cu grijă într-o soluție tampon pentru imunofluorescență. Se spală prin imersie timp de cinci minute într-o soluție tampon IF-Tween (a se vedea apendicele 3), apoi încă cinci minute într-o soluție tampon IF. Se evită orice vaporizare sau vărsare care ar putea determina o contaminare încrucișată. Se elimină
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de anticorpi utilizată; 4.3.5. se incubează lamele pe hârtie umedă și sub capac-clopot timp de 30 de minute, la temperatura mediului ambiant (18-25 °C); 4.3.6. se elimină de pe lamă picăturile de conjugat. Se clătește și se spală în conformitate cu indicațiile anterioare (punctul 4.3.3). Se elimină cu grijă excesul de umiditate; 4.3.7. în fiecare fereastră se depun cu pipeta 5-10 μl dintr-o soluție de glicerol tamponată cu fosfat la 0,1 M (a se
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
1:10 pentru a obține o soluție de lucru. Procedura de colorare 1. Se prepară frotiurile, se usucă la aer și se fixează la căldură. 2. Se scufundă lama în soluția de cristal violet timp de un minut. 3. Se spală rapid cu apă curentă. 4. Se scufundă în soluția iodo-iodurată a lui Lugol timp de un minut. 5. Se spală cu apă de robinet și se usucă cu hârtia sugativă. 6. Se decolorează adăugând picătură cu picătură etanol la 95
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
și se fixează la căldură. 2. Se scufundă lama în soluția de cristal violet timp de un minut. 3. Se spală rapid cu apă curentă. 4. Se scufundă în soluția iodo-iodurată a lui Lugol timp de un minut. 5. Se spală cu apă de robinet și se usucă cu hârtia sugativă. 6. Se decolorează adăugând picătură cu picătură etanol la 95 %, până când nu își mai modifică culoarea sau scufundând în etanol timp de 30 de secunde și agitând ușor. 7. Se
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
cu apă de robinet și se usucă cu hârtia sugativă. 6. Se decolorează adăugând picătură cu picătură etanol la 95 %, până când nu își mai modifică culoarea sau scufundând în etanol timp de 30 de secunde și agitând ușor. 7. Se spală cu apă de robinet și se usucă cu hârtia sugativă. 8. Se scufundă în soluția de safranină timp de 10 secunde. 9. Se spală cu apă de robinet și se usucă cu hârtia sugativă. Bacteriile Gram pozitive au o culoare
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
modifică culoarea sau scufundând în etanol timp de 30 de secunde și agitând ușor. 7. Se spală cu apă de robinet și se usucă cu hârtia sugativă. 8. Se scufundă în soluția de safranină timp de 10 secunde. 9. Se spală cu apă de robinet și se usucă cu hârtia sugativă. Bacteriile Gram pozitive au o culoare violet-albastră; bacteriile Gram negative au o culoare roz-roșie. REFERINȚE ***[PLEASE INSERT TEXT FROM ORIGINAL]*** Anexa II 1. În toate cazurile de apariție suspectată pentru
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de atribuire a etichetei ecologice (JO L 293, 22.11.2000, p. 31). 2b. 32000 D 0045: Decizia 2000/45/ CE a Comisiei din 17 decembrie 1999 de stabilire a criteriilor ecologice de acordare a eco-etichetei comunitare pentru mașinile de spălat rufe (JO L 16, 21.1.2000, p. 73), astfel cum a fost modificată prin: - 32003 D 0240: Decizia 2003/240/ CE a Comisiei din 24 martie 2003 (JO L 89, 5.4.2003, p. 16), - 32005 D 0384: Decizia
22006D0012-ro () [Corola-website/Law/294575_a_295904]
-
din 12 mai 2005 (JO L 127, 20.5.2005, p. 20). 2c. 32001 D 0689: Decizia 2001/689/ CE a Comisiei din 28 august 2001 de instituire a criteriilor ecologice de acordare a etichetei ecologice comunitare pentru mașinile de spălat vase (JO L 242, 12.9.2001, p. 23). 2d. 32001 D 0688: Decizia 2001/688/ CE a Comisiei din 28 august 2001 de instituire a criteriilor ecologice de acordare a etichetei ecologice comunitare pentru amelioratori de soluri și medii
22006D0012-ro () [Corola-website/Law/294575_a_295904]
-
179/ CE (JO L 77, 20.3.2002, p. 50). 2h. 32003 D 0031: Decizia 2003/31/ CE a Comisiei din 29 noiembrie 2002 de stabilire a criteriilor ecologice revizuite de acordare a etichetei ecologice comunitare detergenților pentru mașini de spălat vase și de modificare a Deciziei 1999/427/CE (JO L 9, 15.1.2003, p. 11). 2i. 32001 D 0405: Decizia 2001/405/ CE a Comisiei din 4 mai 2001 de stabilire a criteriilor ecologice pentru acordarea etichetei ecologice
22006D0012-ro () [Corola-website/Law/294575_a_295904]
-
subsp. sepedonicus. Operațiuni de pretratare care pot fi efectuate înainte de pregătirea eșantionului: (a) Se incubează eșantioanele la 25-30 °C pe parcursul unei perioade de până la două săptămâni înainte de efectuarea testelor pentru a încuraja multiplicarea eventualelor populații de R. solanacearum. (b) Se spală tuberculii, între fiecare eșantion, cu dezinfectanți (compuși clorurați în cazul în care testul PCR trebuie folosit pentru a elimina ADN patogen) și detergenți corespunzători. Tuberculii se usucă la aer. Această procedură de spălare este deosebit de utilă (dar nu obligatorie) pentru
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
decantează supranatantul. În cazul în care acesta este prea tulbure, se filtrează printr-o centrifugare la viteză mică (la 180 g maximum timp de zece minute, la o temperatură de 4-10 °C) sau printr-o filtrare în vid (40-100 μm), spălând filtrul cu un tampon de macerare suplimentar (10 ml). 1.1.4. Se centrifughează maceratul decantat la 7 000 g timp de 15 minute (sau la 10 000 g timp de zece minute) la o temperatură de 4-10 °C și
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
și se examinează la microscop după cum urmează. Testul cu albastru de Nil (a) Fiecare lamelă se scufundă într-o soluție apoasă 1 % de albastru de Nil A. Se incubează zece minute la 55 °C. (b) Se scurge soluția colorantă. Se spală rapid sub un firișor de apă curgătoare. Excesul de apă se îndepărtează cu hârtie absorbantă. (c) Frotiul se scufundă într-o soluție apoasă de acid acetic de 8 % și se incubează un minut la temperatura ambiantă. (d) Se spală rapid
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Se spală rapid sub un firișor de apă curgătoare. Excesul de apă se îndepărtează cu hârtie absorbantă. (c) Frotiul se scufundă într-o soluție apoasă de acid acetic de 8 % și se incubează un minut la temperatura ambiantă. (d) Se spală rapid sub un firișor de apă curgătoare. Excesul de apă se îndepărtează cu hârtie absorbantă. (e) Se umezește cu o picătură de apă și se aplică o lamelă de acoperire. (f) Se examinează frotiul colorat la un microscop cu epifluorescență
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
R. solanacearum. Testul cu negru de Sudan (a) Fiecare lamelă se scufundă într-o soluție de 0,3 % negru de Sudan B în 70 % etanol și se incubează zece minute la temperatura ambiantă. (b) Se scurge soluția colorantă și se spală rapid cu apă curgătoare. Se îndepărtează excesul de apă cu hârtie absorbantă. (c) Lamelele se trec rapid prin xilen brut și se usucă cu hârtie absorbantă. Atenție! xilenul este un produs periculos. Luați măsurile de precauție necesare și lucrați într-
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
chimică. (d) Se scufundă lamelele în soluție apoasă de safranin de 0,5 % și se lasă zece secunde la temperatura ambiantă. Atenție! Safraninul este un produs periculos. Luați măsurile de precauție necesare și lucrați într-o hotă chimică. (e) Se spală sub un firișor de apă curgătoare. Se usucă cu hârtie absorbantă și se reacoperă cu o lamelă. (f) Se examinează frotiul colorat la un microscop optic utilizând lumina transmisă sub imersie în ulei la un grosisment de 1 000. (g
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Se incubează lamele pe hârtie umedă acoperite timp de 30 de minute la temperatura ambiantă (18-25 °C). 5.3.3. Se scutură picăturile de antiser de pe fiecare lamă și se clătesc lamele cu atenție cu un tampon pentru imunofluorescență. Se spală timp de cinci minute în soluție tampon IF-Tween (apendicele 4) și apoi în tampon IF. Se evită orice vaporizare sau scurgere care ar putea conduce la o contaminare încrucișată. Excesul de umezeală se îndepărtează cu grijă cu o sugativă. 5
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
echivalentă cu cantitatea de anticorpi utilizată. 5.3.5. Se incubează lamele pe hârtie umedă, acoperite timp de treizeci de minute la temperatura ambiantă (18-25 °C). 5.3.6. Se scutură picăturile de conjugat de pe lamă. Se clătesc și se spală în conformitate cu cele indicate anterior (5.3.3). Se îndepărtează cu grijă excesul de umezeală. 5.3.7. Se pipetează 5-10 μl glicerol tamponat fosfatic 0,1 M (apendicele 4) sau un suport antidecolorare comercial în fiecare fereastră și se acoperă
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
aplică 100 μl alicote în fiecare dintre minimum două godeuri ale plăcii de microtitrare (de exemplu, Nunc-Polysorp sau echivalent) și se incubează o oră la 37 °C sau peste noapte la 4 °C. (4) Se scot extractele din godeuri. Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4), lăsând ultima soluție de spălare cel puțin cinci minute în godeuri. (5) Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului anti-R. solanacearum în tampon de saturație (apendicele 4). Pentru anticorpii comerciali validați, se folosesc
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
validați, se folosesc diluțiile recomandate (de obicei, de două ori mai concentrate decât titrul). (6) Se aplică 100 μl în fiecare godeu și se incubează o oră la 37 °C. (7) Se scoate soluția de anticorpi din godeuri și se spală în conformitate cu cele indicate anterior (punctul 4). (8) Se prepară diluția corespunzătoare de conjugați secundari de anticorpi și de fosfatază alcalină în tampon de saturație. Se adaugă 100 μl în fiecare godeu și se incubează o oră la 37 °C. (9
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
diluția corespunzătoare de conjugați secundari de anticorpi și de fosfatază alcalină în tampon de saturație. Se adaugă 100 μl în fiecare godeu și se incubează o oră la 37 °C. (9) Se scoate conjugatul de anticorpi din godeuri și se spală în conformitate cu cele indicate anterior (punctul 4). (10) Se adaugă 100 μl de soluție de substrat de fosfatază alcalină (apendicele 4) în fiecare godeu. Se incubează în întuneric la temperatura ambiantă și se măsoară absorbanța la 405 nm la intervale regulate
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de imunoglobuline policlonale anti-R. solanacearum în tampon concentrat cu pH 9,6 (apendicele 4). Se adaugă 200 μl în fiecare godeu. Se incubează timp de patru-cinci ore la 37 °C sau timp de 16 ore la 4 °C. (2) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). Se adaugă 190 μl de extract de eșantion în cel puțin două godeuri. De asemenea, se adaugă eșantioane de control pozitiv și negativ în două godeuri pe fiecare placă. Se incubează timp
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Se adaugă 190 μl de extract de eșantion în cel puțin două godeuri. De asemenea, se adaugă eșantioane de control pozitiv și negativ în două godeuri pe fiecare placă. Se incubează timp de șaisprezece ore la 4 °C. (3) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (4) Se prepară o diluție corespunzătoare de anticorpi monoclonali specifici R. solanacearum în PBS (apendicele 4) conținând, de asemenea, 0,5 % seralbumină bovină (BSA) și se adaugă 190 μl în fiecare godeu
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Se prepară o diluție corespunzătoare de anticorpi monoclonali specifici R. solanacearum în PBS (apendicele 4) conținând, de asemenea, 0,5 % seralbumină bovină (BSA) și se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (5) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (6) Se prepară o diluție corespunzătoare de imunoglobuline antișoarece conjugate cu fosfatază alcalină în PBS. Se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (7) Se spală
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (6) Se prepară o diluție corespunzătoare de imunoglobuline antișoarece conjugate cu fosfatază alcalină în PBS. Se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (7) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (8) Se prepară o soluție de substrat al fosfatazei alcaline conținând 1 mg de p-nitrofenil fosfat pe ml de substanță tamponată (apendicele 4). Se adaugă 200 μl în fiecare godeu. Se incubează
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
eșantionare, identificare și caracterizare a produselor de fum primare 1. Eșantionarea Cerința de bază constă în obținerea unei probe de laborator reprezentative și omogene. Laborantul se asigură că probele nu se contaminează în cursul preparării lor. Recipientele trebuie să fie spălate cu acetonă sau hexan de puritate mare (p.A., de calitate HLPC sau echivalentă) înainte de utilizare pentru a reduce riscul contaminării. În măsura în care este posibil, aparatura care vine în contact cu proba este fabricată din materiale inerte, de ex. din sticlă sau
32006R0627-ro () [Corola-website/Law/295239_a_296568]