1,629 matches
-
A1). Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4 și 0,05 ml de soluție de la punctul 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se determină puterea de absorbție a soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) dintre absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
soluție de la punctul 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se determină puterea de absorbție a soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) dintre absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a acidului D-lactic Determinările acidului L-lactic și acidului D-lactic pot fi efectuate independent aplicând
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
aplicând procedura pentru determinarea acidului lactic total până la determinarea A1 și continuând apoi după cum urmează: Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 20 minute) și se determină absorbțiile din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se adaugă 0,05 ml de soluție 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3). Se calculează
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
aproximativ 20 minute) și se determină absorbțiile din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se adaugă 0,05 ml de soluție 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3). Se calculează diferențele (A2 - A1) pentru acid L-lactic și (A3 - A2) pentru acid D-lactic între absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3). Se calculează diferențele (A2 - A1) pentru acid L-lactic și (A3 - A2) pentru acid D-lactic între absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența între acestea: Notă: Timpul necesar pentru finalizarea acțiunii enzimei poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus este dată numai orientativ și se recomandă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
lactic, V = 2,29 ml pentru acid D-lactic și acid lactic total) v = volumul probei în ml (aici, 0,2 ml) M = masa moleculară a substanței de determinat (aici, pentru acid DL-lactic, M = 90,08) d = drumul optic în cuvă în cm (aici, 1 cm) = coeficientul de absorbție a NADH (la 340 nm = 6,3 m mol-1 1 cm-1), 2.5.1.1. Acidul lactic total și acidul D-lactic C = 0,164 A Dacă proba a fost diluată în timpul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
lungă de aproximativ 300 mm, echipată cu robinet de golire pentru reglarea curgerii. 3.2.2. Baie de apă termostatată la 65° C. 3.2.3. Spectrofotometru pentru determinarea absorbției la o lungime de undă de 570 nm, echipat cu cuve cu drum optic de 1 cm. 3.3. Metoda de lucru 3.3.1. Pregătirea coloanei de schimb ionic Vezi capitolul "Acidul tartric", metoda uzuală, secțiunea 3.3.1. 3.3.2. Separarea acizilor organici Vezi capitolul "Acidul tartric", metoda
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
1.2.4). Se adaugă 5 ml de soluție de nitroprusiat de sodiu, se agită, apoi se adaugă 5 ml de soluție de piperidină (punctul 3.1.2.6), se agită energic și se introduce imediat această soluție într-o cuvă de spectrofotometru. Colorația produsă variază de la verde la violet și este măsurată la 570 nm comparativ cu aerul (fără cuvă în drumul optic); ea se intensifică și apoi se decolorează rapid. Se urmărește variația corespunzătoare a absorbției și se alege
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
de soluție de piperidină (punctul 3.1.2.6), se agită energic și se introduce imediat această soluție într-o cuvă de spectrofotometru. Colorația produsă variază de la verde la violet și este măsurată la 570 nm comparativ cu aerul (fără cuvă în drumul optic); ea se intensifică și apoi se decolorează rapid. Se urmărește variația corespunzătoare a absorbției și se alege valoarea maximă ca valoare definitivă. Dacă eluatul este prea bogat în acid lactic și absorbția prea ridicată, se diluează eluatul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
nm. Întrucât se efectuează măsurători absolute ale absorbției (de exemplu, nu se utilizează curbele de calibrare, dar standardizarea se obține prin considerarea coeficientului de extincție a NADH), trebuie verificate scalele lungimii de undă și absorbanța spectrală a aparatului. 3.2. Cuve de sticlă cu drum optic de 1 cm sau cuve de unică folosință. 3.3. Micropipete pentru pipetarea volumelor de eșantioane între 0,01 și 2 ml. 4. PREGĂTIREA PROBEI Determinarea acidului L-malic se realizează în mod normal direct
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
nu se utilizează curbele de calibrare, dar standardizarea se obține prin considerarea coeficientului de extincție a NADH), trebuie verificate scalele lungimii de undă și absorbanța spectrală a aparatului. 3.2. Cuve de sticlă cu drum optic de 1 cm sau cuve de unică folosință. 3.3. Micropipete pentru pipetarea volumelor de eșantioane între 0,01 și 2 ml. 4. PREGĂTIREA PROBEI Determinarea acidului L-malic se realizează în mod normal direct pe vin, fără o îndepărtare prealabilă a pigmentării (coloritului) și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
de malat în vin este mai mică de 30 mg/l, volumul probei test poate fi mărit până la 1 ml. În acest caz, volumul de apă care se adăugă este redus în așa fel încât volumele totale în cele două cuve să fie egale. 5. METODA DE LUCRU Cu spectrofotometrul ajustat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuvele cu o lungime optică de 1 cm, cu aer pentru absorbția standard zero (de referință) sau cu apă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
caz, volumul de apă care se adăugă este redus în așa fel încât volumele totale în cele două cuve să fie egale. 5. METODA DE LUCRU Cu spectrofotometrul ajustat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuvele cu o lungime optică de 1 cm, cu aer pentru absorbția standard zero (de referință) sau cu apă, ca standard. În cuvele cu un drum optic de 1 cm se pun următoarele: Celula de referință (ml) Celula probei (ml) Soluția
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
5. METODA DE LUCRU Cu spectrofotometrul ajustat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuvele cu o lungime optică de 1 cm, cu aer pentru absorbția standard zero (de referință) sau cu apă, ca standard. În cuvele cu un drum optic de 1 cm se pun următoarele: Celula de referință (ml) Celula probei (ml) Soluția 2.1 1,00 1,00 Soluția 2.2 0,20 0,20 Apă bidistilată 1,00 0,90 Suspensia 2.3
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
1 1,00 1,00 Soluția 2.2 0,20 0,20 Apă bidistilată 1,00 0,90 Suspensia 2.3 0,01 0,01 Proba de măsurat - 0,10 Se amestecă: după trei minute se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei de măsurat (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,01 ml 0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
cuvele de referință și a probei de măsurat (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,01 ml 0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) în absorbțiile soluțiilor cuvei de referință și a probei ΔAR și ΔAS. La sfârșit, se calculează diferența acestora ΔA = ΔAs - ΔAR Notă: timpul necesar pentru realizarea activității enzimatice poate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
01 ml 0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) în absorbțiile soluțiilor cuvei de referință și a probei ΔAR și ΔAS. La sfârșit, se calculează diferența acestora ΔA = ΔAs - ΔAR Notă: timpul necesar pentru realizarea activității enzimatice poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus are caracter orientativ și se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
unde: V = volumul soluției test, în ml (aici, 2,22 ml) v = volumul probei, în ml (aici, 0,1 ml) M = masă moleculară a substanței care este determinată (aici, pentru acid L-malic, M = 134,09) d = drumul optic al cuvei, în cm (aici, 1 cm( = coeficientul de absorbție a NADH (la 340 nm, є=6,3 m mol -1 1 cm-1) astfel încât, pentru L-malat: C = 0,473 ΔA g/l Dacă proba a fost diluată în timpul pregătirii, se înmulțește rezultatul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
care permite determinări la 340 nm, lungimea de undă la care absorbția NADH și NAPDH este maximă. În lipsa acestuia, poate fi folosit un spectrofotometru cu o sursă discontinuă a spectrului care permite determinări la 334 sau 365 nm. 3.2. Cuve de sticlă de 1 cm (dacă se dorește, pot fi utilizate cuvele de folosință unică). 3.3. Micropipete pentru pipetarea volumelor de 0,01 și 2 ml. 4. PREGĂTIREA PROBEI Cantitatea de acid D-malic din cuvă trebuie să fie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
NADH și NAPDH este maximă. În lipsa acestuia, poate fi folosit un spectrofotometru cu o sursă discontinuă a spectrului care permite determinări la 334 sau 365 nm. 3.2. Cuve de sticlă de 1 cm (dacă se dorește, pot fi utilizate cuvele de folosință unică). 3.3. Micropipete pentru pipetarea volumelor de 0,01 și 2 ml. 4. PREGĂTIREA PROBEI Cantitatea de acid D-malic din cuvă trebuie să fie între 2 mg și 50 g. Soluția probă trebuie diluată pentru a
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
nm. 3.2. Cuve de sticlă de 1 cm (dacă se dorește, pot fi utilizate cuvele de folosință unică). 3.3. Micropipete pentru pipetarea volumelor de 0,01 și 2 ml. 4. PREGĂTIREA PROBEI Cantitatea de acid D-malic din cuvă trebuie să fie între 2 mg și 50 g. Soluția probă trebuie diluată pentru a produce o concentrație de acid D-malic între 0,02 și 0,5 g/l sau, respectiv, 0,02 și 0,3 g/l. Dacă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
respectiv, 0,02 și 0,3 g/l. Dacă diferența de absorbție A este <0,100, volumul probei poate fi ridicat până la 1,80 ml. Volumul apei adăugate trebuie redus, astfel încât să se obțină un volum final identic în ambele cuve (probă și martor). 5. METODA DE LUCRU Temperatura: 20 - 25șC. Volumul final: 2,95 ml. Citire față de aerul (fără cuvă în drumul optic), cu apa sau cu martorul. Pipetare în cuve Blanc Probă Soluția 2.1.1 Soluția 2.1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
ridicat până la 1,80 ml. Volumul apei adăugate trebuie redus, astfel încât să se obțină un volum final identic în ambele cuve (probă și martor). 5. METODA DE LUCRU Temperatura: 20 - 25șC. Volumul final: 2,95 ml. Citire față de aerul (fără cuvă în drumul optic), cu apa sau cu martorul. Pipetare în cuve Blanc Probă Soluția 2.1.1 Soluția 2.1.2 Apă bidistilată Soluție probă 1,00 ml 0,10 ml 1,80 ml - 1,00 ml 0,10 ml
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
să se obțină un volum final identic în ambele cuve (probă și martor). 5. METODA DE LUCRU Temperatura: 20 - 25șC. Volumul final: 2,95 ml. Citire față de aerul (fără cuvă în drumul optic), cu apa sau cu martorul. Pipetare în cuve Blanc Probă Soluția 2.1.1 Soluția 2.1.2 Apă bidistilată Soluție probă 1,00 ml 0,10 ml 1,80 ml - 1,00 ml 0,10 ml 1,70 ml 0,10 ml Se amestecă; după aproximativ șase
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
2.2. Coloană de sticlă cu aproximativ 300 mm în lungime și 10-11 mm diametrul intern, prevăzută cu robinet de scurgere. 2.3. Baie de apă controlată termostatic la 100șC. 2.4. Spectrofotometru pentru măsurarea absorbției la 420 nm, folosind cuve de 10 mm. 3. REACTIVI 3.1. Rășină de schimb ionic puternic bazică (cum ar fi Merck III). 3.2. Hidroxid de sodiu 5% (m/v). 3.3. Acid acetic 30% (m/v). 3.4. Acid acetic 0,5% (m
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]