2,235 matches
-
bacteriană a cartofului, Clavibacter michiganensis (Smith) Davis et al. ssp. sepedonicus (Spieckermann și Kotthoff) Davis et al. DOMENIU DE APLICARE AL PROTOCOLULUI DE TESTARE Protocolul prezentat în continuare descrie diferitele etape ce trebuie urmate pentru: (i) diagnosticarea veștejirii bacteriene pe tuberculii și pe plantele de cartof; (ii) detectarea Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus pe eșantioane de tuberculi și de plante de cartof; (iii) identificarea Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus (C. m. ssp. sepedonicus). PRINCIPII GENERALE Protocoalele optimizate pentru diversele metode, reactivii validați și
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
et al. DOMENIU DE APLICARE AL PROTOCOLULUI DE TESTARE Protocolul prezentat în continuare descrie diferitele etape ce trebuie urmate pentru: (i) diagnosticarea veștejirii bacteriene pe tuberculii și pe plantele de cartof; (ii) detectarea Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus pe eșantioane de tuberculi și de plante de cartof; (iii) identificarea Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus (C. m. ssp. sepedonicus). PRINCIPII GENERALE Protocoalele optimizate pentru diversele metode, reactivii validați și modalitățile de preparare a materialului necesar pentru teste și pentru controale figurează în apendice. În
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
menționată la articolul 5 alineatul (1) din Directiva 93/85/CEE, implică izolarea și identificarea unei culturi pure de C. m. ssp. sepedonicus cu confirmarea patogenicității. 1. PREZENTAREA DIAGRAMEI FUNCȚIONALE 1.1. Protocol de detectare în vederea diagnosticării veștejirii bacteriene pe tuberculi și plante de cartof care prezintă simptome ale bolii Procedura de testare vizează tuberculii și plantele de cartofi care prezintă simptome caracteristice veștejirii bacteriene sau care prezintă suspiciunea prezenței bolii respective. Procedura prevede un test rapid de depistare, izolarea organismului
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
identificarea unei culturi pure de C. m. ssp. sepedonicus cu confirmarea patogenicității. 1. PREZENTAREA DIAGRAMEI FUNCȚIONALE 1.1. Protocol de detectare în vederea diagnosticării veștejirii bacteriene pe tuberculi și plante de cartof care prezintă simptome ale bolii Procedura de testare vizează tuberculii și plantele de cartofi care prezintă simptome caracteristice veștejirii bacteriene sau care prezintă suspiciunea prezenței bolii respective. Procedura prevede un test rapid de depistare, izolarea organismului patogen plecând de la țesutul vascular infectat pe medii de diagnostic și, în cazul unui
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
în cazul unui rezultat pozitiv, identificarea culturii ca fiind C. m. ssp. sepedonicus. ***[PLEASE INSERT DIAGRAM FROM ORIGINAL AND THE FOLLOWING TRANSLATIONS IN RO LANGUAGE]*** tubercule(s) ou plant(s) de pomme de terre avec symptômes suspects de flétrissement bactérien = tubercul(i) sau plantă/plante de cartof cu simptome suspecte de veștejire bacteriană 2 tests rapides de depistage = teste rapide de depistare 3 test d'isolement pincipal = test de izolare principal 4 colonies avec morphologie caractéristique = colonii cu morfologie caracteristică 5
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
par C.m. ssp. sepedonicus = probă neinfectată cu C.m. ssp. sepedonicus Oui = da échantillon infecté par C.m. ssp. sepedonicus = probă infectată cu C.m. ssp. sepedonicus 1.2. Protocol de detectare și de identificare a Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus pe eșantioane de tuberculi de cartofi asimptomatice Principiu Procedura de testare vizează detectarea infecțiilor latente ale tuberculilor de cartofi. Orice rezultat pozitiv la cel puțin două teste de depistare, bazate pe principii biologice diferite, trebuie completat cu izolarea organismului patogen, urmată, în caz de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
și 104 celule/ml de extract concentrat repus în suspensie, inclus ca martori pozitivi în fiecare serie de teste. ***[PLEASE INSERT DIAGRAM FROM ORIGINAL AND THE FOLLOWING TRANSLATIONS IN RO LANGUAGE]*** échantillon de tubercules de pomme de terre = probă de tuberculi de cartof 9 extraction et concentration de l'organisme pathogène = extragerea și concentrarea organismului patogen 10 tests de dépistage principaux Test IF/test PCR/test FISH = teste principale de depistare 11 Test IF12/test PCR13/test FISH14 premier test de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
să aibă forme neregulate. Frunzele atinse de obstrucția țesuturilor vasculare situate mai jos pe tulpină prezintă adesea pete clorotice intercostale de culoare galbenă sau portocalie. Se întâmplă ca foile, frunzele și chiar și tulpinile infectate să moară. Adesea, frunzele și tuberculii scad doar în dimensiuni. Se întâmplă câteodată să se constate o atrofiere a plantelor. Ilustrații colorate ale unor simptome se pot găsi la adresa: http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main. 2.2. Tuberculi de cartofi Primele simptome
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
moară. Adesea, frunzele și tuberculii scad doar în dimensiuni. Se întâmplă câteodată să se constate o atrofiere a plantelor. Ilustrații colorate ale unor simptome se pot găsi la adresa: http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main. 2.2. Tuberculi de cartofi Primele simptome sunt, mai ales în apropierea stolonului, un aspect ușor sticlos sau translucid al țesutului, fără înmuiere în jurul sistemului vascular. Inelul vascular poate prezenta, la stolon, o culoare ușor mai închisă decât de obicei. Primele simptome ușor
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
în jurul sistemului vascular. Inelul vascular poate prezenta, la stolon, o culoare ușor mai închisă decât de obicei. Primele simptome ușor de identificat sunt o culoare gălbuie a inelului vascular și faptul că, în momentul în care se apasă ușor pe tubercul, din vase ies coloane de materie asemănătoare cu brânza. Exsudatul respectiv conține milioane de bacterii. Poate apărea o înnegrire a țesutului vascular. În acest stadiu, bulbul prezintă simptome asemănătoare cu cele ale veștejirii bacteriene la Ralstonia solanacearum. Într-o primă
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
avansate ale veștejirii bacteriene de simptomele altor putregaiuri ale tuberculilor. Nu trebuie excluse nici formele asimptomatice. Ilustrații colorate ale unor simptome se pot găsi la adresa: http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main. 3. PREPARAREA EȘANTIONULUI 3.1. Tuberculi de cartof Nota bene: - Dimensiunea eșantionului standard este de 200 de tuberculi pe test. O eșantionare mai intensivă implică mai multe teste pe eșantioane de dimensiunea menționată. Un număr mai mare de tuberculi în eșantion va cauza inhibiție sau o
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
excluse nici formele asimptomatice. Ilustrații colorate ale unor simptome se pot găsi la adresa: http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main. 3. PREPARAREA EȘANTIONULUI 3.1. Tuberculi de cartof Nota bene: - Dimensiunea eșantionului standard este de 200 de tuberculi pe test. O eșantionare mai intensivă implică mai multe teste pe eșantioane de dimensiunea menționată. Un număr mai mare de tuberculi în eșantion va cauza inhibiție sau o interpretare dificilă a rezultatelor. În cazul în care nu se dispune de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
Home/main. 3. PREPARAREA EȘANTIONULUI 3.1. Tuberculi de cartof Nota bene: - Dimensiunea eșantionului standard este de 200 de tuberculi pe test. O eșantionare mai intensivă implică mai multe teste pe eșantioane de dimensiunea menționată. Un număr mai mare de tuberculi în eșantion va cauza inhibiție sau o interpretare dificilă a rezultatelor. În cazul în care nu se dispune de un număr atât de mare de tuberculi, procedura poate fi aplicată fără dificultate pe eșantioane mai mici de 200 de tuberculi
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
implică mai multe teste pe eșantioane de dimensiunea menționată. Un număr mai mare de tuberculi în eșantion va cauza inhibiție sau o interpretare dificilă a rezultatelor. În cazul în care nu se dispune de un număr atât de mare de tuberculi, procedura poate fi aplicată fără dificultate pe eșantioane mai mici de 200 de tuberculi. - Validarea tuturor metodelor de detectare descrise în continuare se bazează pe teste realizate pe eșantioane de 200 de tuberculi. - Extractul de cartof descris în continuare mai
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
tuberculi în eșantion va cauza inhibiție sau o interpretare dificilă a rezultatelor. În cazul în care nu se dispune de un număr atât de mare de tuberculi, procedura poate fi aplicată fără dificultate pe eșantioane mai mici de 200 de tuberculi. - Validarea tuturor metodelor de detectare descrise în continuare se bazează pe teste realizate pe eșantioane de 200 de tuberculi. - Extractul de cartof descris în continuare mai poate fi utilizat și pentru a detecta prezența bacteriei responsabile de veștejirea bacteriană a
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de un număr atât de mare de tuberculi, procedura poate fi aplicată fără dificultate pe eșantioane mai mici de 200 de tuberculi. - Validarea tuturor metodelor de detectare descrise în continuare se bazează pe teste realizate pe eșantioane de 200 de tuberculi. - Extractul de cartof descris în continuare mai poate fi utilizat și pentru a detecta prezența bacteriei responsabile de veștejirea bacteriană a cartofului, Ralstonia solanacearum. Pretratament facultativ prealabil la prepararea eșantionului: Se spală tuberculii, aplicând între eșantioane dezinfectanți (compuși clorurați, atunci când
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
teste realizate pe eșantioane de 200 de tuberculi. - Extractul de cartof descris în continuare mai poate fi utilizat și pentru a detecta prezența bacteriei responsabile de veștejirea bacteriană a cartofului, Ralstonia solanacearum. Pretratament facultativ prealabil la prepararea eșantionului: Se spală tuberculii, aplicând între eșantioane dezinfectanți (compuși clorurați, atunci când trebuie utilizat testul PCR pentru eliminarea ADN-ului patogen) și detergenți adecvați. Se usucă tuberculii cu aer. Procedura de spălare menționată este utilă (dar nu este neapărat obligatorie) în special pentru eșantioanele care
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
prezența bacteriei responsabile de veștejirea bacteriană a cartofului, Ralstonia solanacearum. Pretratament facultativ prealabil la prepararea eșantionului: Se spală tuberculii, aplicând între eșantioane dezinfectanți (compuși clorurați, atunci când trebuie utilizat testul PCR pentru eliminarea ADN-ului patogen) și detergenți adecvați. Se usucă tuberculii cu aer. Procedura de spălare menționată este utilă (dar nu este neapărat obligatorie) în special pentru eșantioanele care conțin elemente de sol în excedent și în cazul în care trebuie efectuat un test PCR sau o procedură de izolare directă
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
conțin elemente de sol în excedent și în cazul în care trebuie efectuat un test PCR sau o procedură de izolare directă. 3.1.1. Cu ajutorul unui scalpel sau al unui cuțit pentru legume curat și dezinfectat se cojește fiecare tubercul la nivelul stolonului până la apariția țesutului vascular. Se decupează cu atenție un mic con de țesut vascular la nivelul stolonului, avându-se grijă să se preleveze cât mai puțin țesut nevascular posibil (a se vedea site-ul web accesibil la adresa
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
-se grijă să se preleveze cât mai puțin țesut nevascular posibil (a se vedea site-ul web accesibil la adresa: http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main). Nota bene: După caz, se pun deoparte și se testează separat tuberculii care prezintă simptome suspecte de veștejire bacteriană. În cazul în care se observă simptome suspecte de veștejire bacteriană în momentul prelevării conului de stolon, trebuie să se efectueze o inspecție vizuală a tuberculului, după ce a fost tăiat în apropierea stolonului
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
prezintă simptome suspecte de veștejire bacteriană. În cazul în care se observă simptome suspecte de veștejire bacteriană în momentul prelevării conului de stolon, trebuie să se efectueze o inspecție vizuală a tuberculului, după ce a fost tăiat în apropierea stolonului. Orice tubercul tăiat care prezintă simptome suspecte trebuie suberificat timp de două zile la temperatura mediului ambiant, apoi conservat în carantină (la o temperatură cuprinsă între 4 și 10 °C) până la efectuarea tuturor testelor. Toți tuberculii din eșantion (inclusiv cei care prezintă
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
fost tăiat în apropierea stolonului. Orice tubercul tăiat care prezintă simptome suspecte trebuie suberificat timp de două zile la temperatura mediului ambiant, apoi conservat în carantină (la o temperatură cuprinsă între 4 și 10 °C) până la efectuarea tuturor testelor. Toți tuberculii din eșantion (inclusiv cei care prezintă simptome suspecte) trebuie conservați în conformitate cu anexa II. 3.1.2. Se colectează conurile de stolon în recipiente noi de unică folosință care să se poată închide și/sau sigila (în cazul recipientelor refolosite, acestea
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
a se vedea punctul 7.3 sau 7.4) cu o suspensie apoasă care conține între 105 și 106 celule/ml dintr-o cultură cunoscută de C. m. ssp. sepedonicus și, în cazul în care este posibil, cu extract din tubercul infectat în mod natural (a se vedea secțiunea 4). 7.6. Ca martori negativi, se inoculează cinci plante prin aceeași metodă (a se vedea punctul 7.3 sau 7.4) cu o soluție tampon sterilă de extract concentrat. 7.7
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
izolarea este posibilă pe baza țesutului care prezintă simptome de infecție. Cu toate acestea, organismul poate fi sufocat de bacterii saprofite cu creștere rapidă, ceea ce îl face dificil de izolat în mod direct pe baza extractului concentrat de țesut de tubercul sau de tulpină (obținut la secțiunea 3.1.6 sau 3.2.5). Izolarea directă a C. m. ssp. sepedonicus rămâne posibilă pe mediu selectiv și pe baza unei diluții adecvate de extract concentrat, repus în suspensie, de conuri de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
Izolarea directă a C. m. ssp. sepedonicus rămâne posibilă pe mediu selectiv și pe baza unei diluții adecvate de extract concentrat, repus în suspensie, de conuri de cartofi prelevate de la stolonul sau tulpina de cartof. Izolările trebuie practicate pe toți tuberculii sau pe toate segmentele de tulpini de cartofi și pe toate pătlăgelele vinete care nu prezintă nici un simptom, dar pentru care testul IF sau PCR efectuat pe proba compozită (a se vedea secțiunea 7.10) a dat un rezultat pozitiv
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]