9,381 matches
-
prin amplificare genică, fie prin translocație cromozomală (Press și colab., 1990; Sawyers, 1999). Faptul că fiecare dintre aceste kinaze este țintită la nivel de ADN și că expresia forțată a fiecărei kinaze se realizează în modele murine conducând la fenotip tumoral reprezintă un argument puternic în sprijinul afirmației că fiecare dintre aceste kinaze este esențială pentru inițierea tumorală în cancerul de sân și respectiv, în LCM. Teste clinice recente cu cele două kinaze menționate anterior au adus prima dovadă că ele
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
aceste kinaze este țintită la nivel de ADN și că expresia forțată a fiecărei kinaze se realizează în modele murine conducând la fenotip tumoral reprezintă un argument puternic în sprijinul afirmației că fiecare dintre aceste kinaze este esențială pentru inițierea tumorală în cancerul de sân și respectiv, în LCM. Teste clinice recente cu cele două kinaze menționate anterior au adus prima dovadă că ele sunt necesare în menținerea fenotipului tumoral. Dar, dincolo de toate aceste considerente teoretice, cel mai important fapt este
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
sprijinul afirmației că fiecare dintre aceste kinaze este esențială pentru inițierea tumorală în cancerul de sân și respectiv, în LCM. Teste clinice recente cu cele două kinaze menționate anterior au adus prima dovadă că ele sunt necesare în menținerea fenotipului tumoral. Dar, dincolo de toate aceste considerente teoretice, cel mai important fapt este că medicamentele țintite spre kinaze reprezintă agenți terapeutici utili și eficienți. Cercetări privitoare la rezistența la medicamente la pacienții care au o revenire la starea anterioară remisiei cu STI-571
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
țintite spre kinaze reprezintă agenți terapeutici utili și eficienți. Cercetări privitoare la rezistența la medicamente la pacienții care au o revenire la starea anterioară remisiei cu STI-571 au adus noi dovezi că Bcr-Abl joacă un rol crucial în menținerea fenotipului tumoral, chiar și în fazele ultime ale bolii. La 11 pacienți cu criză-blastică sau leucemie limfoidă acută cu cromozom Philadelphia pozitiv s-a constatat că în toate cazurile apare o reactivare a semnalării Bcr-Abl, în ciuda tratamentului continuu cu STI-571 (Gorre și
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
poate fi administrată pacientului în condiții de securitate, precum și de a stabili rata răspunsului într-un grup de bolnavi care au trăsături histologice similare ale tumorii și stadiu similar al bolii. Asemenea încercări nu pot evalua țintele moleculare din țesuturile tumorale, în primul rând deoarece modul de acțiune a celor mai multe medicamente este slab înțeles. În cazul Herceptin și STI-571, testele clinice necesită ca expresia țintei moleculare a agentului testat - colorare imunohistochimică puternică pentru Herceptin, expresia genei de fuziune, în cazul STI-571
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
acțiune a celor mai multe medicamente este slab înțeles. În cazul Herceptin și STI-571, testele clinice necesită ca expresia țintei moleculare a agentului testat - colorare imunohistochimică puternică pentru Herceptin, expresia genei de fuziune, în cazul STI-571 - să fie bine cercetată în țesutul tumoral al pacientului. Fără asemenea criterii moleculare bine conturate, eficacitatea acestor agenți ar putea fi în mare măsură subestimată. De aici, Sawyers (2002) consideră că, în viitor testele clinice asupra inhibitorilor kinazici ar trebui să implice măsurarea țintei kinazice în țesutul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
al pacientului. Fără asemenea criterii moleculare bine conturate, eficacitatea acestor agenți ar putea fi în mare măsură subestimată. De aici, Sawyers (2002) consideră că, în viitor testele clinice asupra inhibitorilor kinazici ar trebui să implice măsurarea țintei kinazice în țesutul tumoral. Se poate administra un inhibitor kinazic înainte de realizarea unei intervenții planificate și apoi în țesutul tumoral prelevat se poate determina gradul de inhibiție a țintei. O asemenea strategie de tratament este cunoscută în lumea oncologilor sub denumirea de „neoadjuvantă” și
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
măsură subestimată. De aici, Sawyers (2002) consideră că, în viitor testele clinice asupra inhibitorilor kinazici ar trebui să implice măsurarea țintei kinazice în țesutul tumoral. Se poate administra un inhibitor kinazic înainte de realizarea unei intervenții planificate și apoi în țesutul tumoral prelevat se poate determina gradul de inhibiție a țintei. O asemenea strategie de tratament este cunoscută în lumea oncologilor sub denumirea de „neoadjuvantă” și se aplică acelor pacienți la care s-a decis intervenția chirurgicală dar la care s-a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
cazul tumorilor stromale gastrointestinale (GIST-uri) care au frecvent mutații activatoare în c-kit tirozină kinază. Testele clinice timpurii cu STI-571 în GIST au arătat că acest medicament inhibă c-kit și PDGFR în adiție la Abl a arătat răspunsuri tumorale dramatice (Joensuu și colab., 2001, Van Osterom și colab., 2001) și au sugerat că răspunsurile cele mai bune sunt relevate la pacienții cu tumori în care apar mutații de activare a c-kit, ceea ce susține ipoteza că o anomalie la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și au sugerat că răspunsurile cele mai bune sunt relevate la pacienții cu tumori în care apar mutații de activare a c-kit, ceea ce susține ipoteza că o anomalie la nivel ADN prezice dependența de acea kinază pentru menținerea dezvoltării tumorale. O asemenea paradigmă se poate aplica și în cazul leucemiilor cu translocația t (5;12) care creează o alelă constitutivă pentru PDGFR dar cu fuziune la gena Tel (Golub și colab., 1994). Studiile inițiale ale tratamentului cu STI-571, la pacienții
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
abordare terapeutică poate fi aplicată doar anumitor pacienți, dar răspunsul exact la aceste întrebări va putea fi dat numai după efectuarea unui număr mare de testări clinice. Există posibilitatea ca o kinază reglată în mod normal de o proteină supresor tumorală să devină activată constitutiv în urma pierderii genei supresoare de tumori. Acesta este cazul fosfatazei tumorsupresoare PTEN care reglează semnalul de la fosfatidil-inositol 3 -kinază (PI 3-kinază) la serină/treonină kinază. Tumorile din care lipsește PTEN prezintă o hiperactivitate Akt kinazică. Alelele
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
să fie rezultatul pierderii PTEN, dependentă, cel puțin parțial de superactivarea căii Akt. Studii preclinice recente aduc dovezi că inhibiția farmacologică a acestei căi în tumorile cu PTEN null poate avea relevanță terapeutică. Pe baza utilizării mai multor linii celulare tumorale umane cu statut PTEN bine definit, precum și cu șoareci knockout țintit în gena PTEN, Sawyers și colaboratorii au raportat că tratamentul cu CCI-779 a inhibat în mod specific creșterea celulelor tumorale PTEN null (Neshat și colab., 2001; Podsypanina și colab
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
relevanță terapeutică. Pe baza utilizării mai multor linii celulare tumorale umane cu statut PTEN bine definit, precum și cu șoareci knockout țintit în gena PTEN, Sawyers și colaboratorii au raportat că tratamentul cu CCI-779 a inhibat în mod specific creșterea celulelor tumorale PTEN null (Neshat și colab., 2001; Podsypanina și colab., 2001). Un alt grup de tumori care sunt considerate ca obiect al terapeuticii cu inhibitori kinazici sunt acelea la care nu apar evidente leziunile genetice, incluzând cele ale genelor supresoare de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
punct important de lărgire a posibilităților de aplicare terapeutică și în alte tipuri de cancer, printr-o abordare similară. Beneficiile clinice ale unei asemenea strategii terapeutice vor fi condiționate de extinderea analizei moleculare din domeniul genomicii, proteomicii și metabolomicii țesuturilor tumorale. 32.3. UTILIZAREA INHIBITORILOR TELOMERAZEI ÎN TERAPIA CANCERULUI În condiții normale, celulele embrionare au cromozomi care prezintă la capete (telomere) secvențe repetate de nucleotide numite repetiții telomerice. Acestea sunt adăugate prin activitatea unei enzime speciale, numită telomerază - o reverstranscriptază celulară
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
capetele cromozomilor eucariotici (Harley și colab., 1995, a și b). Majoritatea celulelor normale nu conțin această enzimă și pierd sectoare din ADN telomeric, în fiecare ciclu celular, ceea ce , în final, conduce la senescență și la moartea celulei. În cazul celulelor tumorale, în aproximativ 90% dintre toate tipurile de tumori se înregistrează expresia telomerazei și numai astfel ele continuă să prolifereze (Kim și colab., 1994; Shay și Wright, 1996; Bacchetti și colab., 1995). Cercetările efectuate de Liu și colaboratorii (1998) au demonstrat
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Koga și colaboratorii (2001) au lucrat cu liniile celulare UM-UC-2, UM-UC-3, UM-UC-6, UMUC-9, UM-UC-14, T24 și RT4 care au activitate telomerazică pusă în evidență cu ajutorul protocolului amplificării repetiției telomerice (TRAP). Această activitate telomerazică a fost evidențiată în toate liniile celulare tumorale, pe când în linia celulară fibroblast W38 nu apare o asemenea activitate enzimatică. În culturi de celule a fost evidențiat efectul citotoxic al tratamentului cu spA4-anti-hTR sau cu specii de A4 anti(M6)hTR. Pentru aceasta au fost inoculate 5 × 103
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
ARN telomerazic a fost de 0,5 µM. Tratamentul cu 2-5A ARN antisens telomerazic a fost aplicat la fiecare 24 h timp de patru zile. S-a determinat viabilitatea celulară prin MTT. Activitatea telomerazică a fost detectată în toate liniile tumorale testate (fig. 32.5), utilizânduse protocolul TRAP pentru amplificarea repetițiilor telomerice. Procentul a fost calculat față de celulele viabile martor la care s-a adăugat doar lipofectamina (fig. 32.6). Activitatea telomerazică internă standard (ITAS) a fost detectată în extractele din
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
afectează dramatic viabilitatea celulelor normale (fibroblaste) în care nu se evidențiază o activitate telomerazică, în condiții normale, ceea ce constituie un argument privind declararea acțiunii specifice a ARN antisens față de componenta ARN telomerazică și a specificității tratamentului cu 2-5A-anti-hTR asupra celulelor tumorale din cancerul de vezică urinară. Tratamentul timp de patru zile cu spA4-anti hTR aplicat liniilor celulare canceroase a inhibat semnificativ activitatea telomerazică la 75%, în comparație cu tratamentul doar cu lipofectamină sau cu spA4-anti (M6)hTR (fig. 32.7). Kano și colaboratorii
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
CPP32 (caspaza 3) a refăcut viabilitatea comparativ cu situația tratamentului doar cu spA4-anti hTR. Aceste rezultate au relevat implicarea celor două tipuri de caspază în inducția apoptozei în urma tratamentului cu 2-5A-anti-hTR. S-a realizat și tratamentul in vivo asupra celulelor tumorale UM-UC-2 cu spA4-anti hTR prin inocularea subcutanată a acestor celule la șoarecii nuzi. Când tumorile au ajuns la un volum mediu de 60-80mm3 s-au realizat injecții zilnice cu spA4-anti hTR și spA4-(M6)anti hTR în amestec cu lipofectamină
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
zilnice cu spA4-anti hTR și spA4-(M6)anti hTR în amestec cu lipofectamină. După șapte zile de tratament cu spA4-anti hTR, dimensiunea tumorilor s-a redus la aproximativ 82% față de dimensiunea inițială. În același timp, procentul de creștere a volumului tumoral la variantele tratate doar cu lipofectamină sau doar cu spA4-(M6)anti hTR a fost de 207%, respectiv de 88%. La specimenele tumorale tratate cu spA4-anti hTR au fost detectate multe celule apoptotice, pe când la variantele martor, numărul acestora a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
s-a redus la aproximativ 82% față de dimensiunea inițială. În același timp, procentul de creștere a volumului tumoral la variantele tratate doar cu lipofectamină sau doar cu spA4-(M6)anti hTR a fost de 207%, respectiv de 88%. La specimenele tumorale tratate cu spA4-anti hTR au fost detectate multe celule apoptotice, pe când la variantele martor, numărul acestora a fost redus. Aceste date experimentale conduc la concluzia că tratamentul cu 2-5A-anti-hTR a supresat în mod semnificativ creșterea in vivo a cancerului de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
sunt rapid eliminate prin activitate a celulelor fagocitice. Rămâne de realizat un aspect important legat de modul în care 2-5Aanti-hTR pătrunde în țintă și blochează expresia hTR. Deoarece activitatea telomerazică este abolită în majoritatea celulelor normale, dar intensificată în celulele tumorale, este de așteptat ca această enzimă să altereze proprietățile de creștere ale tumorilor și astfel să supreseze creșterea acestora. Deoarece componenta ARN a telomerazei umane a fost cunoscută inițial, s-au realizat numeroase încercări de țintire a componentei ARN a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Cercetări efectuate de Hahn și colaboratorii (1999), Zhang și colaboratorii (1999) și Counter și colaboratorii (1999) au demonstrat că utilizarea unei mutații dominant negative a genei pentru telomeraza (reverstranscriptaza) umană hTERT determină reducerea lungimii telomerelor și moartea apoptotică a celulelor tumorale. Când sunt tratate celulele tumorale în care telomerele cromozomilor sunt scurtate, inhibiția funcției hTERT este eficientă. Pe de altă parte, 2-5A-anti-hTR a indus apoptoza dependentă de caspaze în celulele tumorale. După o lună de tratament cu 2-5A-anti-hTR, celulele liniei U251-MG
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
colaboratorii (1999), Zhang și colaboratorii (1999) și Counter și colaboratorii (1999) au demonstrat că utilizarea unei mutații dominant negative a genei pentru telomeraza (reverstranscriptaza) umană hTERT determină reducerea lungimii telomerelor și moartea apoptotică a celulelor tumorale. Când sunt tratate celulele tumorale în care telomerele cromozomilor sunt scurtate, inhibiția funcției hTERT este eficientă. Pe de altă parte, 2-5A-anti-hTR a indus apoptoza dependentă de caspaze în celulele tumorale. După o lună de tratament cu 2-5A-anti-hTR, celulele liniei U251-MG au suferit apoptoză doar după
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
hTERT determină reducerea lungimii telomerelor și moartea apoptotică a celulelor tumorale. Când sunt tratate celulele tumorale în care telomerele cromozomilor sunt scurtate, inhibiția funcției hTERT este eficientă. Pe de altă parte, 2-5A-anti-hTR a indus apoptoza dependentă de caspaze în celulele tumorale. După o lună de tratament cu 2-5A-anti-hTR, celulele liniei U251-MG au suferit apoptoză doar după inhibiția completă a activității telomerazice. Koga și colaboratorii săi (2001) apreciază că 2-5A-anti-hTR este un agent terapeutic potențial al cancerului de vezică urinară. 32.4
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]