19,573 matches
-
imediat sub CMEO, care, în comparație cu martorul, nu are un efect important din punct de vedere statistic (p < 0,05), într-un timp de expunere stabilit. ECx: este concentrația substanței testate dizolvate în apă care generează o reducere de x % a reproducerii la Daphnia magna într-un timp de expunere stabilit. Rata intrinseca de înmulțire: este o măsură a creșterii populației care cuprinde capacitatea de reproducere și mortalitatea specifică vârstei (20) (21) (22). La populațiile în stare stabilă, aceasta va fi egală
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
stabilit. ECx: este concentrația substanței testate dizolvate în apă care generează o reducere de x % a reproducerii la Daphnia magna într-un timp de expunere stabilit. Rata intrinseca de înmulțire: este o măsură a creșterii populației care cuprinde capacitatea de reproducere și mortalitatea specifică vârstei (20) (21) (22). La populațiile în stare stabilă, aceasta va fi egală cu zero. La populațiile în creștere, aceasta va fi pozitivă și la populațiile în scădere, va fi negativă. Este clar că aceasta din urmă
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
de 21 de zile. La sfarsitul testului, se evaluează numărul total de progenituri în viață produse per animal părinte viu la sfarsitul testului. Aceasta înseamnă că tineretul produs de adulții care mor în timpul testului este exclus din calcule. Capacitatea de reproducere a animalelor părinți se poate exprima în alte moduri (de ex. numărul de progenituri în viață produse per animal per zi, din prima zi în care s-au observat progeniturile), dar acestea se semnalează în afară de numărul total de tineret produs
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
moduri (de ex. numărul de progenituri în viață produse per animal per zi, din prima zi în care s-au observat progeniturile), dar acestea se semnalează în afară de numărul total de tineret produs per părinte viu la sfarsitul testului. Capacitatea de reproducere a animalelor expuse la substanță testată se compară cu aceea a martorului (rilor) pentru a determina concentrația la care se observă cele mai mici efecte (CMEO) și, din această, concentrația la care nu se observă nici un efect (CFEO). În afară de această
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
din această, concentrația la care nu se observă nici un efect (CFEO). În afară de această și în măsura în care este posibil, rezultatele sunt analizate cu ajutorul unui model de regresie pentru estimarea concentrației care ar putea să provoace o reducere cu x % a capacității de reproducere (adică EC50, EC20 sau EC10). De asemenea, se semnalează supraviețuirea animalelor părinți și timpul producerii primilor pui. Se mai pot studia alte efecte aferente substanței asupra unor parametri cum ar fi creșterea (de ex. lungimea) și posibil rata intrinseca de
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
4. DATE PRIVIND SUBSTANȚĂ TESTATĂ Datele unui test de toxicitate acută (metodă C.2, partea I) efectuat cu Daphnia magna trebuie să fie disponibile. Rezultatul poate să fie util la selectarea unui domeniu potrivit de concentrații experimentale în testele de reproducere. Este necesar să se cunoască solubilitatea în apă și presiunea de vapori a substanței testate și să existe o metodă analitică fiabila pentru determinarea cantitativa a substanței în soluțiile experimentale, cu eficientă recuperării și limită de detecție specificate. Datele privind
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
luminii. 1.6.2. Organismul experimental Specia utilizată în test este Daphnia magna Straus. Se pot utiliza și alte specii de dafnia, cu condiția ca acestea să îndeplinească criteriile de validitate după caz (criteriul de validitate referitor la cpacitatea de reproducere la martori trebuie să fie relevant pentru speciile dafnia). Dacă se utilizează alte specii de dafnia, acestea trebuie să se identifice în mod clar și să se justifice utilizarea lor. De preferință, clonul trebuie să fi fost identificat după genotip
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
speciile dafnia). Dacă se utilizează alte specii de dafnia, acestea trebuie să se identifice în mod clar și să se justifice utilizarea lor. De preferință, clonul trebuie să fi fost identificat după genotip. Studiul (1) a arătat că performanța de reproducere a clonului A (care provine din IRCHA din Franța) (3) satisface complet criteriile de validitate pentru o medie de ≥ 60 progenituri per animal părinte supraviețuitor atunci când se cultivă în condițiile descrise în prezența metodă. Cu toate acestea, se acceptă și
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
cunosc ca fiind optime pentru cultura pe termen lung a Daphnia magna sunt Elendt M4 și M7. Ambele medii conțin agentul de chelatizare EDTA. Cercetările (2) arată că "toxicitatea aparentă" a cadmiului este în general mai mică atunci cand testul de reproducere se realizează în mediile M4 și M7 decât în mediile cu conținut de EDTA. Prin urmare, M4 și M7 nu se recomandă pentru substanțele de probă ce conțin metale și, de asemenea, trebuie să se evite alte medii ce conțin
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
varieze cu mai mult de 1,5 unități în oricare din încercări. Se recomandă o duritate mai mare de 140 mg/l (exprimată în CaCO3). Testele efectuate la această valoare și la valori mai mari au demonstrat o performanță a reproducerii conformă cu criteriile de validitate (9) (10). 1.6.4. Soluțiile experimentale Soluțiile experimentale de concentrațiile alese se prepară de obicei prin diluarea unei soluții mama. Soluțiile mama se prepară de preferință prin dizolvarea substanței în mediul experimental. În unele
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
două sau mai multe probe identice cu un număr egal de animale (de ex. patru probe identice, fiecare cu cinci daphnide). De reținut că pentru testele în care animalele sunt ținute în grupe, nu va fi posibilă exprimarea capacității de reproducere sub forma numărului total de progenituri vii produse per animal părinte în viață la sfarsitul testului, daca animalele părinți mor. În aceste cazuri, capacitatea de reproducere se exprimă prin "numărul total de progenituri vii produse per părinte prezent la începutul
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
în care animalele sunt ținute în grupe, nu va fi posibilă exprimarea capacității de reproducere sub forma numărului total de progenituri vii produse per animal părinte în viață la sfarsitul testului, daca animalele părinți mor. În aceste cazuri, capacitatea de reproducere se exprimă prin "numărul total de progenituri vii produse per părinte prezent la începutul testului". 1.8.1.4. Administrarea hranei Pentru testele semistatice, hrana se administrează de preferință zilnic, dar cel puțin de trei ori pe săptămână (adică să
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
mare, astfel încât fecunditatea la această concentrație să fie cu mult mai mică decât aceea din martor. Dacă nu este așa, testul va trebui să fie repetat cu concentrația cea mai mare sporită; (iii) dacă se determina ECx pentru efectele asupra reproducerii, se recomandă utilizarea unor concentrații suficiente pentru stabilirea ECx cu un nivel corespunzător de siguranță. Dacă se determina EC50 pentru efectele asupra reproducerii, se recomandă că cea mai mare concentrație experimentata să fie mai mare decât EC50 menționat. În caz
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
să fie repetat cu concentrația cea mai mare sporită; (iii) dacă se determina ECx pentru efectele asupra reproducerii, se recomandă utilizarea unor concentrații suficiente pentru stabilirea ECx cu un nivel corespunzător de siguranță. Dacă se determina EC50 pentru efectele asupra reproducerii, se recomandă că cea mai mare concentrație experimentata să fie mai mare decât EC50 menționat. În caz contrar, desi va fi posibilă încă determinarea EC50, intervalul de siguranță pentru EC50 va fi foarte larg și s-ar putea să nu
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
cel indicat; (iv) este de preferat că valorile concentrației experimentate să nu includă concentrații care au efect important din punct de vedere statistic asupra supraviețuirii adulților, deoarece acest lucru ar modifică natură testului de la un test pur și simplu de reproducere la un test combinat de reproducere și mortalitate care necesită o analiză statistică mult mai complexă. Cunoașterea în prealabil a toxicității substanței testate (de ex. dintr-un test de toxicitate acută și/sau din studii de găsire a domeniului) ar
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
că valorile concentrației experimentate să nu includă concentrații care au efect important din punct de vedere statistic asupra supraviețuirii adulților, deoarece acest lucru ar modifică natură testului de la un test pur și simplu de reproducere la un test combinat de reproducere și mortalitate care necesită o analiză statistică mult mai complexă. Cunoașterea în prealabil a toxicității substanței testate (de ex. dintr-un test de toxicitate acută și/sau din studii de găsire a domeniului) ar fi utilă în selectarea concentrațiilor optime
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
avortate sau a progeniturilor decedate. 1.8.7. Mortalitatea Mortalitatea în rândul animalelor părinți se înregistrează de preferință zilnic, cel puțin de câte ori se numără progeniturile. 1.8.8. Alți parametri Deși prezenta metodă este destinată în principal evaluării efectelor asupra reproducerii, este posibil să se poată măsură și alte efecte suficient pentru a permite o analiză statistică. Măsurătorile de creștere sunt de dorit în mare măsură, deoarece oferă date privind posibilele efecte subletale, care s-ar putea să fie mai utile
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
poată măsură și alte efecte suficient pentru a permite o analiză statistică. Măsurătorile de creștere sunt de dorit în mare măsură, deoarece oferă date privind posibilele efecte subletale, care s-ar putea să fie mai utile decât determinarea doar a reproducerii; se recomandă măsurarea lungimii animalelor părinți (adică lungimea corpului, fără înotătoarea caudala, la sfârșitul testului. Alți parametri care se pot măsură sau calcula includ timpul de producere a primului pui (și a puilor ulteriori), numărul și dimensiunea puilor per animal
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
sau se dovedește a fi mascul, atunci proba repetată se exclude din analiza. Analiza se va face atunci pentru un număr redus de probe identice. Pentru estimarea CMEO și, prin urmare, a CFEO, pentru efectele substanței chimice asupra capacității de reproducere, este necesar să se calculeze capacitatea medie de reproducere pentru toate probele identice pentru fiecare concentrație și deviație standard remanenta comună și acest lucru se poate realiza prin analiza de varianta (ANOVA). Apoi, media pentru fiecare concentrație se compară cu
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
se exclude din analiza. Analiza se va face atunci pentru un număr redus de probe identice. Pentru estimarea CMEO și, prin urmare, a CFEO, pentru efectele substanței chimice asupra capacității de reproducere, este necesar să se calculeze capacitatea medie de reproducere pentru toate probele identice pentru fiecare concentrație și deviație standard remanenta comună și acest lucru se poate realiza prin analiza de varianta (ANOVA). Apoi, media pentru fiecare concentrație se compară cu media probelor martor, utilizând o metodă potrivită de comparare
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
înaintea efectuării ANOVA sau+ efectuarea unei ANOVA ponderate. Se calculează și se prezintă dimensiunea efectului detectabil prin utilizarea ANOVA (adică diferența cea mai puțin importantă). Pentru estimarea concentrației care ar putea să genereze o reducere de 50% a capacității de reproducere (adică EC50), trebuie să se realizeze o reprezentare grafică corespunzătoare a datelor, de ex. printr-o curbă logaritmica, utilizând o metodă statistică cum ar fi metodă celor mai mici pătrate. Curbă ar putea să fie bine caracterizată în funcție de parametri, astfel încât
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
în viață la sfarsitul testului), - reprezentarea grafică a numărului total de progenituri vii per animal părinte (pentru fiecare proba identică) în viață la sfarsitul testului în funcție de concentrația substanței testate, - concentrația la care se observă cele mai mici efecte (CMEO) pentru reproducere, care include o descriere a metodelor statistice utilizate și indicarea dimensiunii efectului care ar putea să fie detectat și concentrația la care nu se observă nici un efect (CFEO) pentru reproducere; dacă este cazul, se consemnează și raportul LOEC/CFEO pentru
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
la care se observă cele mai mici efecte (CMEO) pentru reproducere, care include o descriere a metodelor statistice utilizate și indicarea dimensiunii efectului care ar putea să fie detectat și concentrația la care nu se observă nici un efect (CFEO) pentru reproducere; dacă este cazul, se consemnează și raportul LOEC/CFEO pentru mortalitatea animalelor părinți, - dacă este cazul, ECx pentru reproducere cu intervalele de încredere și reprezentarea grafică a modelului utilizat pentru calculul acesteia, pantă curbei doză-răspuns și erorile standard ale acesteia
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
și indicarea dimensiunii efectului care ar putea să fie detectat și concentrația la care nu se observă nici un efect (CFEO) pentru reproducere; dacă este cazul, se consemnează și raportul LOEC/CFEO pentru mortalitatea animalelor părinți, - dacă este cazul, ECx pentru reproducere cu intervalele de încredere și reprezentarea grafică a modelului utilizat pentru calculul acesteia, pantă curbei doză-răspuns și erorile standard ale acesteia, - alte efecte biologice observate sau măsurători: se consemnează orice alte efecte biologice care au fost observate sau măsurate (de
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
elaboreze propriile nomograme. mg C/l hrană concentrată din alge mg C/l hrană concentrată din alge mg C/l hrană concentrată din alge APENDICE 3 EXEMPLU DE FIȘA TEHNICĂ PENTRU ÎNREGISTRAREA REÎNNOIRII MEDIULUI, DATELE CONTROLULUI FIZIC/CHIMIC, ADMINISTRAREA HRANEI, REPRODUCEREA DAFNIEI ȘI MORTALITATEA ADULȚILOR Nr. experimentări: Început la data: Conul: Mediul: Tipul hranei: Substanță testată: Conc. nominală: 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Reînnoirea
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]