17,900 matches
-
fie dăunătoare. Fără muchii ascuțite sau proeminențe. Circulația aerului, nivelul de praf, temperatura, umiditatea relativă a aerului și concentrația de gaze trebuie păstrate în limite care să nu fie dăunătoare animalelor. Animalele ținute în clădiri nu trebuie ținute permanent în întuneric sau fără condiții adecvate pentru a se odihni. Echipamente În cazul în care viața sau bunăstarea animalelor depind de sisteme artificiale de ventilație, trebuie luate măsuri de asigurare a unor sisteme de rezervă care să garanteze o suficientă reîmprospătare a
jrc4410as1999 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89575_a_90362]
-
cu opt concentrații diferite ale produsului chimic timp de 1 oră. Apoi, una dintre cele două plăci este expusă la o doză de lumină UVA/vizibilă necitotoxică, de 5 J/cm2 UVA (experimentul + UV), iar cealaltă placă se păstrează la întuneric (experimentul -UV). În ambele plăci, mediul de tratare este apoi înlocuit cu mediul de cultură și după alte 24 de ore de incubare se determină viabilitatea celulară prin fixarea colorantului roșu neutru (NRU) timp de 3 ore. Viabilitatea celulară relativă
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
de 1-9 J/cm2 și se determină viabilitatea celulară o zi mai târziu printr-un test NRU. Dacă, după o iradiere cu 5 J/cm2 UVA, viabilitatea celulară nu este mai mică de 80% din viabilitatea probelor martor ținute la întuneric, celulele satisfac criteriile de calitate. La doza maximă de UVA, de 9 J/cm2, viabilitatea ar trebui să nu fie mai mică de 50% din cea a probelor martor ținute la întuneric. Această verificare ar trebui să se repete aproximativ
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
de 80% din viabilitatea probelor martor ținute la întuneric, celulele satisfac criteriile de calitate. La doza maximă de UVA, de 9 J/cm2, viabilitatea ar trebui să nu fie mai mică de 50% din cea a probelor martor ținute la întuneric. Această verificare ar trebui să se repete aproximativ la fiecare a 10-a reînsămânțare a celulelor. Sensibilitatea la UVA a celulelor de probe martor negative, testul curent: dacă probele martor negative [celule în soluție salină echilibrată Earl (EBSS)] cu sau
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
salină echilibrată Earl (EBSS)] cu sau fără 1% dimetilsulfoxid (DMSO) sau 1% etanol (EtOH) în experimentul +UVA prezintă o viabilitate care nu este mai mică de 80% din cea a celulelor neiradiate aflate în același solvent, într-un experiment la întuneric (-UVA) realizat în paralel, testul îndeplinește criteriile de calitate. Viabilitatea probelor martor negative: densitatea optică absolută (DO540 NRU) măsurată în extractul NR al probelor martor negative indică dacă cele 1104 celule însămânțate în fiecare cavitate se dezvoltă la dublarea
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
cele două plăci separate, cu câte 96 de cavități, care se utilizează apoi concomitent pe toată durata testului în condiții de cultură identice, cu excepția intervalului de timp în care o placă este iradiată (+UVA/viz.) și cealaltă este păstrată la întuneric (-UVA/viz.). 1.7.1.4. Activarea metabolică În timp ce utilizarea sistemelor de activare metabolică este o cerință generală pentru toate testele in vitro utilizate pentru estimarea potențialului genotoxic și cancerigen, în cazul fototoxicologiei, nu se cunoaște până în prezent nici un produs
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
Se adaugă 100 μl de EBSS/PBS ce conțin concentrația corespunzătoare a produsului chimic de testat sau doar solvent (martorul negativ). Se aplică 8 concentrații diferite de produs chimic de testat. Se incubează celulele cu produsul chimic de testat la întuneric timp de 60 de minute (7,5% CO2, 37oC). Pentru a realiza partea (+UVA) a testului, se iradiază celulele la temperatura camerei timp de 50 de minute, prin capacul plăcii cu 96 de cavități, cu 1,7 mW/cm2 UVA
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
cu lumină UVA/vizibilă. Dacă se constată o citotoxicitate, atât limitele concentrației, cât și intervalele concentrațiilor individuale ar trebui să fie stabilite, astfel încât să fie posibilă o concordanță a curbei cu datele experimentale. Datorită faptului că, în experimentul realizat la întuneric (-UVA), un produs chimic de testare ar putea să nu fie citotoxic până la concentrația limită determinată de 100 μg/ml, dar foarte citotoxic atunci când este iradiat (+UVA), s-ar putea să fie necesară o variație cu câteva ordine de mărime
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
UVA la distanța menționată, exprimată în mW/cm2, - timpul de expunere la lumină UV/vizibilă, - doza UVA (iradianța timp), exprimată în J/cm2, - temperatura utilizată la culturile de celule în timpul iradierii, precum și la culturile de celule păstrate în paralel la întuneric. Condițiile de testare (d) - testul NRU: - compoziția mediului NR, - durata de incubare în NR, - condițiile de incubare (concentrația CO2, temperatura, umiditatea), - condițiile de extracție a NR (agentul de extracție, timpul), - lungimea de undă utilizată pentru citirea spectrofotometrică a densității optice
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
Suma suplimentară stabilită la art. 3 alin. (2) din Regulamentul (CEE) nr. 2075/92 se adăugă la partea fixă a primei. B. Relația între partea variabilă și primă 1999 I Uscat la fum II Uscat la lumină III Uscat la întuneric IV Uscat la foc V Uscat la soare Altele VI Basmas VII Katerini VIII K. Koulak Italia 20% 20% 20% 20% 25% Grecia 20% 20% 25% 15% 15% 15% Spania 20% 20% 20% 20% Portugalia 20% 20% Franța 20% 20
jrc3928as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89091_a_89878]
-
2 minute, în PBS cu un conținut de 0,1 % de Tween 20. Lamele se scurg și apoi sunt montate în CitifluorTM sau într-un alt mediu de montare adecvat. Înainte de a fi examinate la microscop, lamele sunt stocate la întuneric, la o temperatură de 4 șC. V.3. Examinarea cu un microscop fluorescent Se examinează fiecare lamă cu un microscop adecvat epifluorescenței, prin utilizarea unui filtru corespunzător, de excitare a FITC, care determină emiterea fluorescenței verzi caracteristice. Se examinează toate
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
și o plasă fină, cu ochiuri de 10-30 μm, la partea inferioară. La plasele cu ochiuri mari ale cadrului, se atașează un numar de "pomi pentru depunerea icrelor" dintr-o frânghie de nylon nerăsucita. După ce peștii au fost lăsați în întuneric timp de 12 ore, se aprinde o lumină slabă care va iniția depunerea icrelor. La 2-4 ore după depunerea icrelor, se scoate tavă pentru depunerea icrelor și se colectează icrele. Cu tavă pentru depunerea icrelor se evita mâncarea icrelor de către
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
80 80 Medaka 24 ± 1 2 Pimephales promelas 25 ± 2 - 16 4-5 5 De îndată ce este posibil după fecundare (prima fază de gastrula) până la 4 zile după ieșirea din ou (8-9 zile) 60 70 1 Pentru embrioni. 2 Pentru larve. 3 Întuneric pentru embrioni și larve până la o săptămână după ieșirea din ou, cu excepția cazului în care se inspectează. Apoi se dă o lumină atenuata pe durata testului. APENDICE 3 CONDIȚIILE, DURATA TESTULUI ȘI CRITERIILE DE SUPRAVIEȚUIRE PENTRU ALTE SPECII BINE STUDIATE
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
inoxidabil, plasă de sârmă, cuști din material plastic sau din lemn disponibile etc. Se preferă grupuri de 10 albine în fiecare cușcă. Dimensiunile cuștilor experimentale trebuie să corespundă numărului de albine, adică să asigure spațiul corespunzător. Albinele se țin la întuneric într-o cameră experimentală la o temperatură de 25 ± 2oC. Pe toată durata testului, se înregistrează umiditatea relativă, care este în mod normal de aproximativ 50-70%. Manipularea, care include tratamentul și observațiile se efectuează la lumină (lumina zilei). Că hrană
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
inoxidabil, plasă de sârmă, cuști din material plastic sau din lemn disponibile etc. Dimensiunile cuștilor experimentale trebuie să corespundă numărului de albine, adică să asigure spațiul corespunzător. Se preferă grupuri de 10 albine în fiecare cușcă. Albinele se țin la întuneric într-o cameră experimentală la o temperatură de 2 5± 2oC. Pe toată durata testului, se înregistrează umiditatea relativă, care este în mod normal de aproximativ 50-70%. Manipularea, care include tratamentul și observațiile se efectuează la lumină (lumina zilei). Că
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
în afară de aceasta, concentrația soluției mama trebuie să fie mai mică decât solubilitatea în apă a substanței de încercat. Este de preferat ca soluția mama să se prepare chiar înaintea aplicării pe probele de sol și să se păstreze închisă, la întuneric, la 4oC. Durată depozitarii depinde de stabilitatea substanței încercate și de concentrația acesteia în soluție. Numai pentru substanțele cu solubilitate mică (Să < 10-4 g l-1), ar putea să fie necesar un agent de solubilizare corespunzător, daca dizolvarea substanței încercate
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
de ore, la o temperatură de maximum 70°C, pentru oricare metodă de lucru. Eșantioanele trebuie uscate până se atinge o masă constantă și un grad de umiditate cuprins între 8-13%. Eșantioanele uscate se păstrează fără a fi presate, la întuneric și la o temperatură de maximum 25°C. 3. Analiza conținutului de THC 3.1. Pregătirea eșantionului de analiză Se îndepărtează tulpinile și semințele mai mari se 2 mm de pe eșantioanele uscate. Eșantioanele uscate se macină până la obținerea unei pudre
jrc5705as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90876_a_91663]
-
și semințele mai mari se 2 mm de pe eșantioanele uscate. Eșantioanele uscate se macină până la obținerea unei pudre semifine (sită cu diametrul ochiurilor de 1 mm). Termenul maxim de conservare a pudrei este de zece săptămâni în mediu uscat, la întuneric și la o temperatură de maximum 25°C. 3.2. Reactivi, soluție de extracție Reactivi - Δ9-tetrahidrocanabinol pur din punct de vedere cromatografic - Squalan pur din punct de vedere cromatografic ca etalon intern Soluția de extracție - 35 mg de squalan la
jrc5705as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90876_a_91663]
-
înregistrarea destinației crabilor (păstrați, aruncați, distruși), înregistrarea numărului vintirului din care provine crabul. ANEXA II MODIFICĂRI LA ANEXA IV 1. În alin.(2), prima propoziție se înlocuiește cu : Plasele de pescuit se vor arunca numai noaptea ( i.e. în orele de întuneric, între momentele de amurg pe mare; orele de înserare se pot găsi în tabelele din almanahurile nautice pentru toate latitudinile și orele locale ale tuturor zilelor. Toate orele menționate, fie pentru exploatarea navei fie pentru declarațiile observatorilor, trebuie să fie
jrc3879as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89041_a_89828]
-
să poată răni animalele. 10. Circulația aerului, nivelul de praf, temperatura, umiditatea relativă a aerului și concentrația de gaze trebuie menținute în limite care să nu fie dăunătoare animalelor. 11. Animalele ținute în clădiri nu trebuie ținute în permanență în întuneric și nici nu trebuie expuse la lumină artificială fără întreruperile necesare. Dacă lumina naturală este insuficientă pentru a răspunde nevoilor fiziologice și etiologice ale animalelor, trebuie prevăzut un sistem de iluminare artificială adecvat. Animale care nu sunt ținute în clădiri
jrc3682as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88842_a_89629]
-
la -20° sau liofilizat, diluat în proporție de 1/50 cu tampon de blocare înainte de utilizare, îndreptat împotriva polipeptidei p7 specifice de grup. 5. Conjugatul: globulină anti-șoarece de iepure (absorbită și eluată) conjugată cu peroxid de hrean și păstrată la întuneric la o temperatură de 4°C. 6. Substratul și cromogenul: 0,2 g diamină de ortofenilenă (OPD) dizolvată într-o soluție tampon constând din 2,553 g acid citric și 4,574 g hidrogen ortofosfat bisodic ridicat la 500 ml
jrc2435as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87589_a_88376]
-
2 g diamină de ortofenilenă (OPD) dizolvată într-o soluție tampon constând din 2,553 g acid citric și 4,574 g hidrogen ortofosfat bisodic ridicat la 500 ml cu apă distilată, divizată în 25 ml alicoți și păstrată la întuneric la -20° C, cu 12 µl/25 ml peroxid de hidrogen (30% w/v) adăugat imediat înainte de utilizare. MANIPULAȚI OPD CU GRIJĂ- PURTAȚI MĂNUȘI CHIRURGICALE- MUTAGEN SUSPECTAT. 7. 1 molar acid sulfuric: 26,6 ml acid adăugat la 473,4
jrc2435as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87589_a_88376]
-
Puțurile se spală ca mai înainte (3.4 și 3.6). 3.9. Se prepară soluția de substrat de fosfatază alcalină (apendicele 5). Se aplică 100 μl în puțuri. Se incubează timp de 30 de minute până la o oră în întuneric la temperatura camerei. 3.10. Se citește absorbanța la 409 nm. Interpretarea testului ELISA: Testul ELISA este negativ dacă densitatea optică (DO) a eșantionului este < 2 × DO a controlului negativ. Testul ELISA este pozitiv dacă densitatea optică (DO) a eșantionului
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
poate fi confirmat prin injectarea de standarde de congener individuale la diluția test folosind condițiile de GC de la pct. 6.4) și numai apă de cel puțin 3 grade conform definiției din ISO 3696. Acetalul și acetaldehida se păstrează la întuneric, la < 5°C, toți ceilalți reactivi pot fi păstrați la temperatura camerei. 5.1. Etanol absolut (CAS 64-17-5), 5.2. Metanol (CAS 67-56-1), 5.3. Propan-1-ol (CAS 71-23-8), 5.4. 2-metilpropan-1-ol (CAS 78-33-1), 5.5. Standarde interne acceptabile: pentan-3-ol (CAS
jrc4880as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90048_a_90835]
-
în exces, pentru diminuarea radioactivității neîncorporate ("cold chase"). Celulele sunt apoi spălate, fixate și uscate. Pentru perioade de incubare mai lungi, s-ar putea ca procedeul "cold chase" să nu fie necesar. Lamelele sunt imersate în soluție autoradiografică, păstrate la întuneric (de ex. refrigerate timp de 7-14 zile), developate, colorate și apoi se procedează la numărarea grăunților de argint expuși. Pentru fiecare animal se pregătesc două până la trei lamele. 1.5.8. Analiza Preparatele depuse pe lamele ar trebui să conțină
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]