1,963 matches
-
diluții duble de antiser. Se aplică procedura IF (secțiunea III.2). Valoarea IF a culturii trebuie să fie echivalentă celei a controlului pozitiv. Testul ELISA Se prepară o suspensie de >106 celule pe ml din cultură și din sușa sau sușele de control. Se aplică procedura ELISA (secțiunea III.3). Valoarea ELISA a culturii trebuie să fie echivalentă celei a controlului pozitiv. Testul PCR Se prepară o suspensie de 106 celule pe ml din cultură și din sușa sau sușele de
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
din sușa sau sușele de control. Se aplică procedura ELISA (secțiunea III.3). Valoarea ELISA a culturii trebuie să fie echivalentă celei a controlului pozitiv. Testul PCR Se prepară o suspensie de 106 celule pe ml din cultură și din sușa sau sușele de control. Se aplică procedura PCR (secțiunea III.4). Produsul PCR al culturii trebuie să aibă aceeași dimensiune și același profil al analizei enzimatice restrictive (REA) ca și cel a controlului pozitiv. Hibridizare fluorescentă in-situ (FISH) Se prepară
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
sau sușele de control. Se aplică procedura ELISA (secțiunea III.3). Valoarea ELISA a culturii trebuie să fie echivalentă celei a controlului pozitiv. Testul PCR Se prepară o suspensie de 106 celule pe ml din cultură și din sușa sau sușele de control. Se aplică procedura PCR (secțiunea III.4). Produsul PCR al culturii trebuie să aibă aceeași dimensiune și același profil al analizei enzimatice restrictive (REA) ca și cel a controlului pozitiv. Hibridizare fluorescentă in-situ (FISH) Se prepară o suspensie
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Produsul PCR al culturii trebuie să aibă aceeași dimensiune și același profil al analizei enzimatice restrictive (REA) ca și cel a controlului pozitiv. Hibridizare fluorescentă in-situ (FISH) Se prepară o suspensie de 106 celule pe ml din cultură și din sușa sau sușele de control. Se aplică procedura FISH (van Beuningen et al, 1995) cu amorsă OLI-1 PCR (Seal et al, 1993). Cultura trebuie să prezinte aceeași reacție ca și controlul pozitiv. Profil proteic Proteinele celulelor întregi denaturate se separă prin
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
al culturii trebuie să aibă aceeași dimensiune și același profil al analizei enzimatice restrictive (REA) ca și cel a controlului pozitiv. Hibridizare fluorescentă in-situ (FISH) Se prepară o suspensie de 106 celule pe ml din cultură și din sușa sau sușele de control. Se aplică procedura FISH (van Beuningen et al, 1995) cu amorsă OLI-1 PCR (Seal et al, 1993). Cultura trebuie să prezinte aceeași reacție ca și controlul pozitiv. Profil proteic Proteinele celulelor întregi denaturate se separă prin electroforeza gelului
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
PCR (Seal et al, 1993). Cultura trebuie să prezinte aceeași reacție ca și controlul pozitiv. Profil proteic Proteinele celulelor întregi denaturate se separă prin electroforeza gelului de poliacrilamidă - PAGE (Stead, 1992a). Profilarea acizilor grași (FAP) Se crește cultura și o sușă de control pozitiv timp de 48 de ore la 28° C în mediu tripticaz-soia-agar și se aplică procedura FAP (Janse, 1991; Stead, 1992a; Stead, 1992b). Profilul culturii trebuie să fie identic cu cel al controlului pozitiv. În condițiile specificatee, acizii
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Janse, 1991; Stead, 1992a; Stead, 1992b). Profilul culturii trebuie să fie identic cu cel al controlului pozitiv. În condițiile specificatee, acizii grași caracteristici sunt 14:0 3OH, 16:0 2OH, 16:1 2OH și 18:1 2OH. 4.2. Caracterizarea sușei Caracterizarea sușei este opțională, dar este recomandată pentru fiecare caz nou folosind cel puțin una dintre următoarele: Determinarea biovarului Ralstonia solanacearum se separă pe biovari în baza capacității de a produce acid din trei hexoze alcoolice și trei zaharuri (Hayward
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Stead, 1992a; Stead, 1992b). Profilul culturii trebuie să fie identic cu cel al controlului pozitiv. În condițiile specificatee, acizii grași caracteristici sunt 14:0 3OH, 16:0 2OH, 16:1 2OH și 18:1 2OH. 4.2. Caracterizarea sușei Caracterizarea sușei este opțională, dar este recomandată pentru fiecare caz nou folosind cel puțin una dintre următoarele: Determinarea biovarului Ralstonia solanacearum se separă pe biovari în baza capacității de a produce acid din trei hexoze alcoolice și trei zaharuri (Hayward, 1964 & 1994
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de patogenicitate sau prin testul de hipersensibilitate al tutunului poate să nu fie foarte sigure și, în schimb, pot fi deduse din biovar și gazda naturală de origine. Cultura poate fi caracterizată în continuare prin: Amprentă genomică Diferențierea moleculară a sușelor din complexul Ralstonia solanacearum se poate face prin: Analiza RFLP (Cook et al., 1989) PCR pe secvențe repetitive [REP-, ERIC- & BOX-PCR (Louws et al, 1995; Smith et al, 1995)] 4.3 Testul de patogenicitate Acesta este un test pentru confirmarea
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
1995)] 4.3 Testul de patogenicitate Acesta este un test pentru confirmarea diagnosticului de Ralstonia solanacearum și pentru evaluarea virulenței culturilor identificate ca fiind Ralstonia solanacearum. Se prepară un inocul de 106 celule pe ml din cultură și dintr-o sușă de control pozitiv. Se inoculează 5- 10 plante de tomată sau vinete, preferabil la nivelul celei de a treia frunze adevărate sau mai bătrâne (secțiunea III.6.). Se incubează până la două săptămâni la 22° C - 28° C și umiditate relativă
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
cealaltă microfiolă. Se centrifughează. Se depozitează la - 18°C (săptămâni) sau la - 70°C (luni). 2. Testul IF Se folosește antiserul pentru Ralstonia solanacearum, preferabil rasa 3/biovar 2. Se determină titrul unei suspensii de 106 celule pe ml din sușa omologă de Ralstonia solanacearum cu o diluție corespunzătoare de antiser conjugat cu izotiocianat de fluoresceină (FITC), în conformitate cu recomandările producătorului. Antiserul brut ar trebui să aibă o valoare IF de minim 1:2000. Se utilizează lame microscopice cu mai multe puțuri
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
include un control FITC conjugat. Testul ar trebui repetat cu includerea unui control PBS, dacă este observată o celulă pozitivă la controlul FITC. Se prepară lame de control pozitiv separate cu o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă corespunzătoare de rasă / biovar de Ralstonia solanacearum. Se utilizează o lamă la fiecare set de teste. 2.1. Lamele de test se prepară printr-una dintre următoarele proceduri: (i) pentru extracte concentrate cu relativ puțin amidon: Se pipetează un volum
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
indică legături nespecifice ale conjugatului, autofluorescență sau contaminare. Notă: Dacă se observă acestea, testul trebuie repetat. Se observă celulele intens fluorescente cu morfologia caracteristică a Ralstonia solanacearum în ferestrele de test. Intensitatea fluorescenței trebuie să fie echivalentă cu cea a sușei de control pozitiv la aceeași diluție a antiserului. Celulele cu colorație incompletă sau cu fluorescență slabă nu trebuie luate în considerare, dacă nu sunt în număr mare (vezi interpretarea rezultatului testului IF). Interpretarea rezultatului testului IF: (i) Dacă nu sunt
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
cu o diluție de zece ori a extractului concentrat. 3. Testul ELISA În baza Robinson - Smith et al., 1995 Se folosește antiser pentru Ralstonia solanacearum, preferabil rasa 3/biovar 2. Se determină titrul suspensiei de 106 celule pe ml din sușa omologă de Ralstonia solanacearum. Se recomandă folosirea plăcilor de microtritrare NUNC - Polysorb. Se include un extract de cartof de control negativ și un control salin tamponat fosfatic (PBS). Se folosește o suspensie de > 106 celule pe ml dintr-o sușă
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
sușa omologă de Ralstonia solanacearum. Se recomandă folosirea plăcilor de microtritrare NUNC - Polysorb. Se include un extract de cartof de control negativ și un control salin tamponat fosfatic (PBS). Se folosește o suspensie de > 106 celule pe ml dintr-o sușă corespunzătoare de rasă/biovar de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv. Se testează în mod identic cu eșantionul sau eșantioanele, dar separat de eșantioanele de pe placa de microtitru. 3.1. Se pipetează 100 - 200 μl din extractul concentrat resuspendat într-o
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
PCR În baza Seal et al., 1993 Notă: În timpul tuturor etapelor de pregătire a eșantioanelor și a altor manipulări care implică PCR trebuie folosite conuri de pipetă cu filtru. Se prepară o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă din rasa 3 / biovar 2 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv. Se testează într-un mod identic cu eșantionul sau eșantioanele. 4.1. Se pipetează 100 μl din extractul concentrat resuspendat într-o microfiolă. În mod alternativ, se tranferă 90
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
7.3 Fragmentul PCR digerat se analizează prin electroforeza în gel de agar ca mai înainte (4.6). Interpretarea rezultatelor testului PCR: Testul PCR este negativ dacă nu este detectat fragmentul caracteristic de 288 bp, iar fragmentul este detectat pentru sușa de control pozitiv de Ralstonia solanacearum. Testul PCR este pozitiv dacă este detectat fragmentul caracteristic de 288 bp, iar fragmentul amplificat este identic cu sușa de control pozitiv de Ralstonia solanacearum. 5. Testul de placare selectivă În baza Elphinstone et
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
negativ dacă nu este detectat fragmentul caracteristic de 288 bp, iar fragmentul este detectat pentru sușa de control pozitiv de Ralstonia solanacearum. Testul PCR este pozitiv dacă este detectat fragmentul caracteristic de 288 bp, iar fragmentul amplificat este identic cu sușa de control pozitiv de Ralstonia solanacearum. 5. Testul de placare selectivă În baza Elphinstone et al., 1996 5.1 Testul se efectuează printr-o tehnică corespunzătoare de diluare galvano-plastică, cum ar fi: (i) Se prepară cel puțin două diluții zecimale
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
toată suprafața mediului. Bagheta se întinde pe cel puțin alte două plăci cu mediu SMSA modificat fără a se trece prin flacără. 5.2 Prin aceeași tehnică de diluție, se aplică o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă virulentă din rasa 3 / biovar 2 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv pe un set de plăci separate cu mediu SMSA modificat. 5.3 Plăcile se incubează la 28 °C. Citirea plăcilor se face după trei zile. Dacă este negativă
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
extract concentrat resuspendat între plantele de test. Se inoculează în tulpină între cotiledoane și în unul sau mai multe alte locuri. 6.3 Prin aceeași tehnică se inoculează 10 răsaduri cu o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă virulentă din biovar 2 / rasa 3 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv și cu tampon de concentrare drept control negativ. Se separă plantele de control pozitiv de celelalte plante pentru a evita contaminarea încrucișată. 6.4 Plantele se cresc în
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
E 400 ACID ALGINIC Definiție Glicuronoglican linear constituit în principal din unități de acid D-manuronic legat β-(1-4) și de acid L-guluronic legat α-(1-4) sub formă de inel piranozic. Hidrații de carbon coloidali hidrofili extrași cu ajutorul alcalilor diluate din sușele naturale ale diferitelor specii de alge brune marine (Phaeophyceae) IESCE 232-680-1 Formula chimică (C6H8O6)n Greutatea moleculară 10 000 - 600 000 (media tipică) Analiza Acidul alginic generează, raportat la greutatea în stare anhidră, cel puțin 20% și cel mult 23
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
coloidală hidrofilă care conține în principal unități de D-galactoză. La aproximativ fiecare a zecea unitate de D-galactopiranoză, una dintre grupările hidroxil este esterificată cu acid sulfuric care este neutralizat cu calciu, magneziu, potasiu sau sodiu. Se extrage din anumite sușe naturale de alge marine din familia Gelidiaceae și Sphaerococcaceae și din alge roșii înrudite din clasa Rhodophyceae IESCE 232-658-1 Analiza Concentrația limită a gelului ar trebui să fie de cel mult 0,25% Descrierea Agarul este inodor sau are un
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
diferite denumiri, ca: - Geloză de mușchi irlandez - Eucheuman (din speciile Eucheuma) - Iridophycan (din speciile Irdidaea) - Hypnean (din speciile Hypnea) - Furcellaran sau agar danez (din Furcellaria fastigiata) - Carrageenan (din speciile Chondrus și Gigartina) Definiție Carrageenan se obține prin extracția apoasă a sușelor naturale de alge marine Gigartinaceae, Solieriaceae, Hypneaceae și Furcellariaceae, a familiilor din clasa Rhodophyceae (alge roșii). Nu se utilizează nici un alt agent organic de precipitare în afară de metanol, etanol și propan-2-ol. Carrageenan conține în principal săruri de potasiu, sodiu, magneziu și
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
gram E. coli Negativ în 5 g Specii de Salmonella Negativ în 10 g E 407a ALGĂ EUCHEUMA PRELUCRATĂ Sinonime PES (acronim pentru algă eucheuma prelucrată) Definiție Alga eucheuma prelucrată se obține prin tratamentul alcalin în soluție apoasă (KOH) al sușelor naturale de alge Eucheuma cottonii și Eucheuma spinosum, din clasa Rhodophyceae (alge roșii) pentru îndepărtarea impurităților, spălare cu apă proaspătă și uscare. O purificare suplimentară se poate obține prin spălare cu metanol, etanol sau propan-2-ol și uscare. Produsul conține în
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
coli Negativ în 5 g Specii de Salmonella Negativ în 10 g E 410 GUMĂ DIN SEMINȚE DE SALCÂM Sinonime Gumă din semințe de roșcov Gumă de algaroba Definiție Guma din semințe de salcâm este endospermul măcinat al semințelor de sușe naturale de roșcov, Cerationia siliqua (L.) Taub. (familia Leguminosae). Conține în principal o polizaharidă hidrocoloidală cu greutatea moleculară mare, compusă din unități de galactopiranoză și manopiranoză combinate prin legături glicozidice, care se poate descrie chimic ca fiind galactomanan. Greutatea moleculară
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]