940 matches
-
și alegerea între diverse clasamente. Cea mai importantă spectrotecă de masă este aceea a NIST (National Institut of Standards and Technology), care includea peste 250000 de spectre la nivelul anului 1996, iar în prezent numărul spectrelor este desigur mai mare. CUPLAJE De regulă, detecția compușilor organici, inclusiv medicamentoși, nu se face prin spectroscopie de masă, decât dacă ei se află în stare pură. Dar substanțele medicamentoase, care trebuie să fie detectate și dozate prin spectroscopie de masă, se găsesc în amestec
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
trebuie să fie detectate și dozate prin spectroscopie de masă, se găsesc în amestec cu alte substanțe, deci în matrici complexe, ceea ce implică pretratarea prealabilă a probelor prin extracție și purificare. Din aceste considerente, spectroscopia de masă se utilizează în cuplaj cu HPLC sau/și GC, legând capătul de ieșire al coloanei la camera de ionizare a unui spectrometru de masă. În acest fel, se poate analiza fiecare fracțiune (pic) care iese din coloana cromatografică, pe măsură ce avansează eluția, inclusiv în cazul
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
de ieșire al coloanei la camera de ionizare a unui spectrometru de masă. În acest fel, se poate analiza fiecare fracțiune (pic) care iese din coloana cromatografică, pe măsură ce avansează eluția, inclusiv în cazul urmelor de substanțe existente în probă. Aceste cuplaje sunt utilizate la detecția și dozarea moleculelor organice, inclusiv medicamentoase, din matrici complexe, cum sunt cele biologice (biochimice) sau din extracte de plante, ceea ce face posibilă detecția lor din urină, sânge, plasmă, țesuturi, precum și studiul biodisponibilității și al metabolismului medicamentelor
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
biodisponibilității și al metabolismului medicamentelor. De asemenea, spectoscopia de masă este utilizată în analiza elementară și în aceea a amestecurilor izotopice și în studiile de structură a substanțelor organice. Trebuie însă subliniate câteva dintre dificultățile care apar la realizarea acestor cuplaje, determinate de cantități mici și foarte mici de substanțe care se găsesc în efluenții cromatografici (lichizi și gazoși), de prezența eluenților în efluenți, de presiunile diferite din cromatograf și din spectrul de masă, precum și de nevoia armonizării timpilor de ieșire
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
de nevoia armonizării timpilor de ieșire ai picurilor cromatografice cu înregistrarea spectrelor de masă. Acest ultim aspect este important pentru obținerea unor rezultate reproductibile, pentru asiurarea unor înregistrări repetate ale maximelor spectrelor, de o parte și de alta a picului. Cuplajul GC-MS În practica analitică cuplajul gaz-cromatografie-spectoscopie de masă sau prescurtat GC-MS, este mai utilizat, deoarece cuplajul HPLC-SM este mai greu de realizat, datorită necesității de eliminare a fazei mobile, în special când aceasta este apa, care stânjenește funcționarea corectă a
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
ieșire ai picurilor cromatografice cu înregistrarea spectrelor de masă. Acest ultim aspect este important pentru obținerea unor rezultate reproductibile, pentru asiurarea unor înregistrări repetate ale maximelor spectrelor, de o parte și de alta a picului. Cuplajul GC-MS În practica analitică cuplajul gaz-cromatografie-spectoscopie de masă sau prescurtat GC-MS, este mai utilizat, deoarece cuplajul HPLC-SM este mai greu de realizat, datorită necesității de eliminare a fazei mobile, în special când aceasta este apa, care stânjenește funcționarea corectă a spectrometrelor de masă. În realizarea
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
aspect este important pentru obținerea unor rezultate reproductibile, pentru asiurarea unor înregistrări repetate ale maximelor spectrelor, de o parte și de alta a picului. Cuplajul GC-MS În practica analitică cuplajul gaz-cromatografie-spectoscopie de masă sau prescurtat GC-MS, este mai utilizat, deoarece cuplajul HPLC-SM este mai greu de realizat, datorită necesității de eliminare a fazei mobile, în special când aceasta este apa, care stânjenește funcționarea corectă a spectrometrelor de masă. În realizarea acestui cuplaj, faza staționară trebuie să aibă o volatilitate foarte scăzută
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
de masă sau prescurtat GC-MS, este mai utilizat, deoarece cuplajul HPLC-SM este mai greu de realizat, datorită necesității de eliminare a fazei mobile, în special când aceasta este apa, care stânjenește funcționarea corectă a spectrometrelor de masă. În realizarea acestui cuplaj, faza staționară trebuie să aibă o volatilitate foarte scăzută și o mare stabilitate termică, pentru a se evita complet orice distilare, deoarece o distilare chiar minimă perturbă traseele spectrometrului. De asemenea, trebuie utilizat un gaz inert chimic pentru a nu
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
efluentului (eluatului) gazos, concomitent cu îmbogățirea vaporilor cu analiți prin eliminarea gazului vector. În plus, prin utilizarea unor coloane capilare cu debit mic este posibilă introducrea directă a efluentului care iese din gazcromatograf în spectrometrul de masă, fără nici o interfață. Cuplajul HPLC-MS Cuplajul HPLC-MS se aplică în cazul substanțelor volatizabile, dar stabile termic, precum și pentru analiza moleculelor polare sau termolabile, în acest din urmă caz nefiind obligatorie derivatizarea prealabilă a analiților. Este important faptul că acest cuplaj se poate adapta și
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
gazos, concomitent cu îmbogățirea vaporilor cu analiți prin eliminarea gazului vector. În plus, prin utilizarea unor coloane capilare cu debit mic este posibilă introducrea directă a efluentului care iese din gazcromatograf în spectrometrul de masă, fără nici o interfață. Cuplajul HPLC-MS Cuplajul HPLC-MS se aplică în cazul substanțelor volatizabile, dar stabile termic, precum și pentru analiza moleculelor polare sau termolabile, în acest din urmă caz nefiind obligatorie derivatizarea prealabilă a analiților. Este important faptul că acest cuplaj se poate adapta și utiliza pentru
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
masă, fără nici o interfață. Cuplajul HPLC-MS Cuplajul HPLC-MS se aplică în cazul substanțelor volatizabile, dar stabile termic, precum și pentru analiza moleculelor polare sau termolabile, în acest din urmă caz nefiind obligatorie derivatizarea prealabilă a analiților. Este important faptul că acest cuplaj se poate adapta și utiliza pentru analiza peptidelor, nucleotidelor, nucleozidelor și a altor molecule biologice și pentru moleculele de substanțe medicamentoase, în special pentru antibiotice. În cazul acestui cuplaj este relativ dificil să se realizeze și să se stăpânească interfața
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
nefiind obligatorie derivatizarea prealabilă a analiților. Este important faptul că acest cuplaj se poate adapta și utiliza pentru analiza peptidelor, nucleotidelor, nucleozidelor și a altor molecule biologice și pentru moleculele de substanțe medicamentoase, în special pentru antibiotice. În cazul acestui cuplaj este relativ dificil să se realizeze și să se stăpânească interfața dintre HPLC și MS, mai ales atunci când se utilizează ca fază mobilă apa care, pătrunzând în spectometru, modifică presiunea în camera de ionizare (sursa de ioni). Pentru a se
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
anume acela că, prin utilizarea unui astfel de procedeu de îndepărtare a apei în sursa de ionizare se poate asigura o presiune mai mare decât în cazul impactului electronic, ceea ce este compatibil cu constrângerile HPLC determinate de presiune. Practic, în cuplajul HPLC-MS, trebuie găsit un compromis între debitul fazei mobile în HPLC, pulverizarea sa și îndepărtarea excesului ei, astfel încât să se poată asigura o presiune compatibilă cu procesul de ionizare în interiorul sursei de ioni. II. 9. DIFRACȚIA RAZELOR X Principii generale
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
și carbon, cei mai studiați doi atomi din chimia organică prin RMN. Deoarece are electronegativitatea mai mare decât a protonului, devierile chimice sunt distribuite pe o zonă mai mare. În special sunt importante diferențele datorate stereochimiei moleculelor precum și constanta de cuplaj JF-H care poate fi măsurată pe o gamă mai largă decat JH-H. Din păcate, un număr relativ mic de molecule naturale conțin atomi de fluor. De aceea, spectrele fluor RMN sunt obținute de obicei din compuși în care un atom
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
este lipsită de semnificație deoarece ea depinde de valoarea amplificării și de durata de înregistrare a spectrului. Se compară valorile relative ale integralelor diferitelor semnale, ele fiind în același raport ca și numărul diferitelor categorii de protoni echivalenți. CONSTANTA DE CUPLAJ Se consideră doi protoni dintr-o moleculă având valori suficient de diferite ale deplasărilor chimice. In timpul înregistrării semnalului unuia din protoni, la o parte din molecule al doilea proton este orientat în sensul câmpului exterior, iar la altă parte
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
și cuplarea spin-spin. Diferența de frecvență între cele două linii ale primului proton este egală cu diferența între liniile celui de al doilea proton (care este "cuplat" cu primul). Această diferență de frecvență exprimată în MHz se numește constantă de cuplaj (se notează cu J) și este independentă de intensitatea câmpului exterior, respectiv de frecvența la care lucrează aparatul. Pentru unele molecule câmpul exterior va fi întărit de momentul de spin al celui de al doilea proton, iar pentru altele va
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
câmp mai slab, altul la un câmp mai intens. În mod analog, semnalul protonului 2 va fi scindat de primul proton în două semnale. Dacă diferența de deplasare chimică între protonii cuplați 1 și 2 este mică (în raport cu constanta de cuplaj) cele două semnale ale fiecărui proton au intensități diferite; liniile exterioare scad, iar cele interioare cresc. În practică se întâlnesc deseori cazuri în care un proton este cuplat simultan cu mai mulți alți protoni, cu constante de cuplaj identice sau
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
constanta de cuplaj) cele două semnale ale fiecărui proton au intensități diferite; liniile exterioare scad, iar cele interioare cresc. În practică se întâlnesc deseori cazuri în care un proton este cuplat simultan cu mai mulți alți protoni, cu constante de cuplaj identice sau diferite. In asemenea cazuri spectrul se amplifică. APLICAȚIILE SPECTROSCOPIEI RMN Metoda RMN este la ora actuală cel mai important intrument analitic din arsenalul investigației fizice. Astfel, prin intermediul acestei metode se pot stabili datele structurale ale compușilor organici, proprietățile
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
metilenici dau un cvartet central la δ = 3,41 ppm, în timp ce în izomerul cis (simetric) se manifestă la aceeași intensitate a câmpului sub forma unui singlet. Analiza conformațională a cocainei și pseudococainei prin RMN și constă în măsurarea constantelor de cuplaj vicinale ținând cont de unghiul diedru format de două legături CH. Valorile unghiurilor diedre determinate cu ajutorul constantelor de cuplaj permit optarea pentru configurația de scaun a ciclului piperidinic și de a considera grupa esterică în poziție axială. Prin această metodă
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
intensitate a câmpului sub forma unui singlet. Analiza conformațională a cocainei și pseudococainei prin RMN și constă în măsurarea constantelor de cuplaj vicinale ținând cont de unghiul diedru format de două legături CH. Valorile unghiurilor diedre determinate cu ajutorul constantelor de cuplaj permit optarea pentru configurația de scaun a ciclului piperidinic și de a considera grupa esterică în poziție axială. Prin această metodă s-a mai stabilit conformația nicotinei, morfinei, analogilor metadionei, tetraciclinelor, hormonilor steroizi, cardiotonicelor steroidice etc. - Evidențierea interacțiunilor moleculare Diclofenacul
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
într-o curbă RES care poate fi de tip "lorentzian", "gaussian" sau intermediară (fig. II. 11.2). Spectrele RES oferă informații prin analiza parametrilor caracteristici: factorul g (factor giromagnetic), mărimea absorbției, lărgimea benzii, tipul de despicare (scindare) și constanta de cuplaj. Deoarece se cunoaște valoarea magnetonului Bohr, iar câmpurile magnetice și frecvențele pot fi măsurate cu precizie, metoda RES permite o determinare foarte exactă a valorii g (pentru electronul liber g=2,00231). În cazul radicalilor liberi organici, ponderea momentului orbital
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
moleculele din vecinătate, prezintă un semnal RES scindat în mai multe linii. De asemenea, dacă într-un radical organic se găsesc în interacțiune 2 electroni cu spin neîmperecheat având factori g diferiți, semnalul fiecărui electron va fi scindat (dedublat) prin cuplaj spin - spin. În afară de electroni unele nuclee posedă momente de spin, mult mai mici decât ale electronilor. Prin interacțiunea unor asemenea nuclee (cu I diferit de 0) cu electronul impar, liniile spectrale RES sunt scindate (scindare hiperfină) în mai multe componente
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
tetracianetilenei) apare un număr de 2x4x1+1=9 linii echidistante, a căror intensitate este practic egală cu cea determinată teoretic (prin dezvoltarea seriei). În cazul când nucleele ce interacționează cu electronul impar sunt diferite, dar au între ele constante de cuplaj identice, se obține un număr de (2I1+1), (2I2+1), (2I3+1)... linii egal distanțate, dar având intensități diferite (după natura nucleelor respective). Se observă că în cazul unor radicali liberi cu structură complicată este posibil să se obțină spectre
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
în cazul unor radicali liberi cu structură complicată este posibil să se obțină spectre RES constând din foarte multe linii. Suprapunerea unor linii precum și lărgimea mare a altor linii sunt factori care îngreunează foarte mult interpretarea acestor spectre. Constanta de cuplaj este distanța dintre liniile componente ale multipleților corespunzând unei anumite scindări. Este proporțională cu densitatea electronului impar de la atomul respectiv. Această distanță poate fi exprimată prin diferența lor de frecvență (în Hz) considerând un câmp magnetic constant sau prin diferența
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
viață scurtă sunt extrem de reactivi și ei apar în concentrații foarte mici care scad rapid în timp. Din această cauză, ei trebuie produși în momentul determinării, prin reacții fotochimice. Radicalul format dă un spectru ce se caracterizează prin constanta de cuplaj (a) exprimată în gaussi. Radicalii aromatici se caracterizează prin constante de cuplaj, în funcție de interacțiunea electronului impar cu protonii echivalenți din pozițiile orto, meta, para (fenil) și cei din poziția 1 a moleculelor polinucleare (naftalen, fenantren etc). Radicalii liberi ai oxigenului
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]