976 matches
-
jur de 7000, din care mai puțin de 400 prezintă importanță economică (P. Galet, 2000). De aceea cea mai mare parte a resurselor genetice de viță de vie sunt cantonate în prezent doar în colecții ampelografice. Numărul mare de soiuri, polimorfismul accentuat manifestat de soiurile de viță de vie existente în cultură, numărul mare de caractere folosite, complexitatea acestora precum și neluarea în considerare a însușirilor agrobiologice, tehnologice și agrofitotehnice, constituie elemente de confuzie și erori în recunoașterea acestora. Datorită ușurinței cu
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
referință Cadarcă, Coarnă neagră), pentalobată (nota 3 - soi de referință Chasselas blanc), septalobată (nota 4 - soi de referință Müller Thurgau), multilobată (nota 5 - soi de referință Chasselas cioutat) . În cadrul soiurilor de viță de vie aparținând speciei Vitis vinifera, există un polimorfism foarte accentuat, pe același butuc, uneori chiar pe același lăstar, existând frunze întregi, tri sau cincilobate. 4.5. Culoarea feței superioare a limbului (cod OIV 069; UPOV 33; IBPRG 6.1.21.) se apreciază vizual , utilizând următoarele notări: verde foarte
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
mai puțin inductibile sub influența factorilor de mediu. Prin urmare doar sistemele enzimatice stabile (neinductibile) la variațiile factorilor de mediu pot fi utilizate ca markeri izoenzimatici. În acest fel numărul markerilor disponibili scade foarte mult și se restricționează gradul de polimorfism și diferențiere ce ar putea fi evidențiat cu ajutorul acestor markeri (Parfit, 1989; Walker ș.a., 1992). Peroxidaza, transelectronază (enzimă transportoare de electroni) face parte împreună cu catalaza din grupa hidroperoxidazelor, clasa oxidoreductazelor. Oxidoreductazele, prima clasă de enzime din sistemul de clasificare a
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
Zimogramele rezultate confirmă faptul că soiul Alb românesc este sinonim al soiului Alb de Belgorod, soiul Coarnă roșie poate fi considerat ca sinonim al soiului Țâța caprei neagră, în timp ce soiurile Ceauș alb și Ceauș roz aparțin aceluiași sortogrup, prezentând un polimorfism izoenzimatc foarte scăzut, de unde concluzia că probabil cele două soiuri au origine genetică comună sau unul a stat la baza obținerii celuilalt Metodele biochimice prin analiza izoenzimatică pot contribui la diferențierea soiurilor de viță de vie prin aprecierea intensității izoenzimatice
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
mendeliene ale moștenirii alelice pentru organismele diploide cu un grad înalt de reproducere metodică (Sefe ș.a., 2001; Aradhya, 2003). Alături de indicatorii SSR (microsateliții), izoenzimele, tehnica RFLP- (Restriction Fragment Length Polymorphism-polimorfismul lungimii fragmentelor de restricție) precum și RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA- polimorfismul ADN amplificat aleator) sunt cele mai folosite metode pentru identificarea soiurilor de viță de vie (Tessier C. ș.a., 1999). Pe plan internațional există deja o bancă de date cu soiuri inventariate genetic și informații privind cartarea, secvența de gene, proteine
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
de viță de vie (Tessier C. ș.a., 1999). Pe plan internațional există deja o bancă de date cu soiuri inventariate genetic și informații privind cartarea, secvența de gene, proteine etc. O analiză genetică cu ajutorul tehnicilor RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA - Polimorfismul ADN Amplificat Aleator) și ISSR - PCR (Inter Simple Sequence Repeat-Polymerase Chain Reaction, Repetarea Secvențelor Simple-Reacția în Lanț a Polimerazei) a fost efectuată în cadrul a patru soiuri de viță de vie, foarte răspîndite în Chile (Cabernet Sauvignon, Cabernet Franc, Merlot și
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
Roubelakis - Angelakis, 2000) sau de bazele de date axate pe literatura de specialitate. Și în România au existat și există preocupări în analiza genetică a soiurilor de viță de vie în scopul stabilirii originii genetice a genotipurilor autohtone și a polimorfismului existent la nivel molecular. Astfel, Pop Rodica și colab, 2004 studiind polimorfismul la nivel molecular la 10 soiuri de Vitis vinifera, cu ajutorul markerilor RADP, determinând distanțele genetice dintre probele analizate și întocmind dendrograma soiurilor (programul RAPDistance 1.04) au putut
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
specialitate. Și în România au existat și există preocupări în analiza genetică a soiurilor de viță de vie în scopul stabilirii originii genetice a genotipurilor autohtone și a polimorfismului existent la nivel molecular. Astfel, Pop Rodica și colab, 2004 studiind polimorfismul la nivel molecular la 10 soiuri de Vitis vinifera, cu ajutorul markerilor RADP, determinând distanțele genetice dintre probele analizate și întocmind dendrograma soiurilor (programul RAPDistance 1.04) au putut confirma în mare măsură originea soiurilor studiate precum și faptul că în interiorul soiurilor
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
10 soiuri de Vitis vinifera, cu ajutorul markerilor RADP, determinând distanțele genetice dintre probele analizate și întocmind dendrograma soiurilor (programul RAPDistance 1.04) au putut confirma în mare măsură originea soiurilor studiate precum și faptul că în interiorul soiurilor V. vinifera, există un polimorfism ușor de pus în evidență la nivel molecular. De remarcat în acest experiment a fost faptul că soiul Fetească albă a fost încadrat în același grup cu soiul Merlot, aflându-se față de acesta la o distanță genetică mai mică, comparativ
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
influența factorilor de mediu, precum și a faptului că în identificarea plantelor tinere informațiile nu pot fi utilizate. Deoarece genotipul nu este influențat de condițiile de mediu, identificarea cultivarelor la nivel ADN este extrem de utilă, deoarece rezultatele obținute reflectă direct individul. Polimorfismul ADN, este determinat de numărul de secvențe de nucleotizi și poate fi ușor de relevat din aproape orice țesut de plantă (Rodica Pop, 2004). Dintre tehnicile moleculare utilizate din ce în ce mai mult pentru identificarea speciilor, soiurilor de Vitis și a varietăților somaclonale
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
aproape orice țesut de plantă (Rodica Pop, 2004). Dintre tehnicile moleculare utilizate din ce în ce mai mult pentru identificarea speciilor, soiurilor de Vitis și a varietăților somaclonale sunt: metoda PCR (Polymerase Chain Reaction - reacția în lanț a polimerazei), RFLP (Random Framenth Leht Polymorfism - polimorfismul lungimii fragmentelor de restricție), RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA - polimorfismul ADN amplificat aleator) și microsateliții ISSR (Inter Simple Sequence Repeats - repetarea secvențelor simple). 1. Reacția în lanț a polimerazei (PCR). Tehnica Polymerase Chain Reaction-Reacția în lanț a polimerazei (PCR) a
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
moleculare utilizate din ce în ce mai mult pentru identificarea speciilor, soiurilor de Vitis și a varietăților somaclonale sunt: metoda PCR (Polymerase Chain Reaction - reacția în lanț a polimerazei), RFLP (Random Framenth Leht Polymorfism - polimorfismul lungimii fragmentelor de restricție), RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA - polimorfismul ADN amplificat aleator) și microsateliții ISSR (Inter Simple Sequence Repeats - repetarea secvențelor simple). 1. Reacția în lanț a polimerazei (PCR). Tehnica Polymerase Chain Reaction-Reacția în lanț a polimerazei (PCR) a fost descoperită de Kary Mullis și colaboratorii în anul 1988
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
unei noi ere în genetica moleculară, permițând automatizarea PCR; o pereche de oligonucleotide sintetice care poate fi ADN dublu sau monocatenar, circular sau linear. Aplicațiile tehnicii PCR sunt multiple, ele deschizând noi posibilități în biologia moleculară. Dintre acestea amintim: detectarea polimorfismelor genetice, care pot fi datorate numărului diferit de repetiții în tandem, precum și variației secvențelor mini- sau microsateliților; studiul expresiei genice prin reacția de amplificare sub aspectul cantității produșilor finali (PCR cantitativ), iar analiza produșilor de reacție ne dau informații despre
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
unor gene într-un tip celular dat; mutageneza prin reacția polimerazei în lanț, metoda folosită curent pentru analiza structurii și funcțiilor proteinelor; amplificarea unor secvențe genice care pot conduce la identificarea mutațiilor cunoscute sau a unora noi apărute. 2. Analiza polimorfismelor ADN amplificate aleator (RAPD) Metoda RAPD, datorită simplității ei, a faptului că necesită cantități extrem de reduse de ADN și a capacității de a releva un polimorfism foarte accentuat, a fost folosită cu succes la mai multe specii de plante, incluzând
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
care pot conduce la identificarea mutațiilor cunoscute sau a unora noi apărute. 2. Analiza polimorfismelor ADN amplificate aleator (RAPD) Metoda RAPD, datorită simplității ei, a faptului că necesită cantități extrem de reduse de ADN și a capacității de a releva un polimorfism foarte accentuat, a fost folosită cu succes la mai multe specii de plante, incluzând și vița de vie (Wolf și colab., 2001; Ryan și colab., 2001, Tessier și colab., 1999; Fanizza și colab., 1999; Bohm și colab., 1998; Pamfil și
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
G și C pentru obținerea unor produși de amplificare a PCR din genomul ADN. Este cea mai simplă variantă a metodei PCR cu primeri arbitrari și nu necesită informații despre secvența de ADN. Aceste tehnici au fost denumite astfel: analiza polimorfismelor ADN amplificate aleator (RAPD); amprenta obținută prin amplificarea ADN (DAF); PCR cu primeri arbitrari (AP-PCR). Tehnica RAPD, reprezintă o soluție relativ simplă și rapidă de evidențiere a polimorfismului genetic, pînă în prezent fiind aplicată cu succes în cadrul mai multor specii
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
informații despre secvența de ADN. Aceste tehnici au fost denumite astfel: analiza polimorfismelor ADN amplificate aleator (RAPD); amprenta obținută prin amplificarea ADN (DAF); PCR cu primeri arbitrari (AP-PCR). Tehnica RAPD, reprezintă o soluție relativ simplă și rapidă de evidențiere a polimorfismului genetic, pînă în prezent fiind aplicată cu succes în cadrul mai multor specii de plante (mentă, zorele, măr etc.), în special a celui intraspecific și mai rar a celui intergenic. În ultimul timp, tehnica RAPD a fost aplicată cu succes și
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
în prezent fiind aplicată cu succes în cadrul mai multor specii de plante (mentă, zorele, măr etc.), în special a celui intraspecific și mai rar a celui intergenic. În ultimul timp, tehnica RAPD a fost aplicată cu succes și în relevarea polimorfismului intraspecific (în interiorul subspeciilor, varietăților și cultivarelor) și chiar a celui intravarietal (bumbac, cartof, zorele). Cauzele care pot determina polimorfismele depistate prin analiza RAPD, teoretic sunt multiple. Dintre acestea amintim: inserția unui element mare de ADN între cele două situsuri de
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
celui intraspecific și mai rar a celui intergenic. În ultimul timp, tehnica RAPD a fost aplicată cu succes și în relevarea polimorfismului intraspecific (în interiorul subspeciilor, varietăților și cultivarelor) și chiar a celui intravarietal (bumbac, cartof, zorele). Cauzele care pot determina polimorfismele depistate prin analiza RAPD, teoretic sunt multiple. Dintre acestea amintim: inserția unui element mare de ADN între cele două situsuri de fixare ale primerului poate determina ca fragmentul original să fie prea mare pentru a mai putea fi amplificat și
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
sau mai multe situsuri de fixare ale primerilor, poate conduce la absența produsului de amplificare; substituția unei nucleotide, poate influența fixarea unuia sau ambilor primeri la un anumit nivel datorită schimbărilor în omologie, ceea ce poate conduce la prezența sau absența polimorfismelor sau la o schimbare a mărimii fragmentului; inserția sau deleția unui mic fragment de ADN poate duce la schimbarea mărimii fragmentului amplificat. În practică se observă rar schimbări ale mărimii fragmentelor, dar se pot întâlni și cazuri de markeri dominanți
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
și cazuri de markeri dominanți, determinați de modul de distribuție a alelelor, pe fragmentul RAPD. Tehnica RAPD, prezintă atât avantaje cât și dezavantaje în aplicarea rezultatelor obținute. Avantajele se referă la: posibilitatea automatizării analizei; relevarea unui număr relativ mare de polimorfisme; costuri scăzute; analizarea unui număr mare de probe în unitatea de timp; posibilitatea utilizării metodelor de vizualizare prin fluorescență în locul celor bazate pe radioactivitate; personalul din laborator nu necesită un grad de pregătire foarte ridicat. Dintre dezavantaje amintim: comportamentul dominant
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
amintim: comportamentul dominant al markerilor RAPD, care pot conduce la pierderea unor informații; sensibilitatea mărită a tehnicii, atunci cînd datele trebuie transferate de la un laborator la altul, motiv pentru care trebuie acordată o deosebită atenție standardizării analizei între colaboratori. Nivelul polimorfismelor evidențiate prin analiza RAPD este în general similar cu acela obținut prin analiza RFLP (polimorfisme de lungime ale fragmentelor de restricție). Tehnica RAPD poate fi aplicată cu succes în rezolvarea următoarelor aspecte: depistarea diversității genetice și a gradului de înrudire
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
a tehnicii, atunci cînd datele trebuie transferate de la un laborator la altul, motiv pentru care trebuie acordată o deosebită atenție standardizării analizei între colaboratori. Nivelul polimorfismelor evidențiate prin analiza RAPD este în general similar cu acela obținut prin analiza RFLP (polimorfisme de lungime ale fragmentelor de restricție). Tehnica RAPD poate fi aplicată cu succes în rezolvarea următoarelor aspecte: depistarea diversității genetice și a gradului de înrudire între populațiile de plante din flora spontană. Amprenta ADN obținută prin tehnica RAPD, datorită capacității
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
scopul preîntâmpinării fenomenului de reducere a diversității în procesul de ameliorare. Alte aplicații ale analizei RADP sunt: obținerea materialului vegetal înmulțit "in vitro" și variabilitatea somoclonală, identificarea hibrizilor somatici și identificarea sexului la plante; cartarea genomului cu ajutorul markerilor RAPD. 3. Polimorfismul lungimii fragmentelor de restricție (Restriction Fragment Length Polymorphism - RELF), descrisă pentru prima dată de Farria și colab. în anul 1994, reprezintă un ansamblu de fragmente specifice de ADN, generate din ADN genomic prin digestie endonucleazică. RFLP este marker genetic, caracterizat
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
diferite). Tehnicile RFLP, ca și strategiile de cercetare, pot fi utilizate în următoarele direcții de analiză genetică: stabilirea hărții genetice; diagnosticarea maladiilor genetice monofactoriale; cercetarea maladiilor poligenice; identificarea indivizilor la nivel de organism și celulă; analiza nondisjuncțiilor cromozomiale (aneuploidie). 4. Polimorfisme de lungime ale fragmentelor amplificate (Amplified Fragment Length Polimorphism - markerii AFLP) Reprezintă o combinație între metoda RFLP și tehnica PCR (Vos și colab., 1995). Separarea produșilor de amplificare se realizează prin electroforeză în geluri de poliacrilamidă și evidențiere prin autoradiografiere
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]