256 matches
-
sunt adăugate numai antibiotice, în vederea menținerii mediului. Pentru diagnosticul diferențial față de febră aftoasa trebuie, de asemenea, să fie inoculate celule tiroidiene primare de bovine sau celule renale de pui de hamster (BHK-21). 3. Dacă se dezvoltă un efect citopatic, fluidul supernatant trebuie să fie prelevat din culturile pozitive, atunci când efectul este complet, și utilizat în testul ELISA pentru identificarea virusului. Culturile negative trebuie să fie inoculate pe culturi de țesut proaspăt de 48 sau 72 de ore, iar acest pasaj orb
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
se lasă la temperatura ambiantă timp de cel puțin 20 de minute. (16) Se depozitează la - 20°C până când extractul este necesar pentru PCR. ... (17) Înainte de utilizare se centrifughează, pentru reacția de amplificare prin PCR fiind necesari 5 f2μl de supernatant conținând ADN. ... b) Alte metode ... Pot fi utilizate și alte metode de extracție a ADN, de exemplu Qiagen DNeasy Plant Kit, cu condiția ca acestea să aibă o eficacitate echivalentă de purificare a ADN-ului din controalele pozitive cu un
EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
mic de 10 ppm, fie proba omogenizată sau fracțiunea cea mai fină separată prin sită pot fi folosite, antibioticele putând fi găsite în principal în această fracțiune. Se suspendă proba în amestec (3.5) și se centrifughează. Se colectează lichidul supernatant și se folosește direct sau diluat, dacă este necesar, cu amestecul (3.5) pentru a obține concentrații ale antibioticelor de aproximativ 100 μg pe ml (6.1) și 5 μg pe ml (6.2). 7. Detectarea și identificarea 7.1
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
2)O), iar pentru tratarea aceluiași volum de deșeuri bazice se utilizează 3 kg de fosfat trisodic. Sedimentarea are ca scop separarea particulelor solide din suspensie prin depunerea lor pe baza diferenței de densități. Se face în vederea îndepărtării fazei lichide (supernatant) sărăcite în uraniu, care, după controlul concentrației de uraniu și al celorlalți indicatori de calitate, se evacuează la stația de epurare. Filtrarea are ca scop separarea completă a fazelor lichid-solid prin trecerea suspensiei prin straturi filtrante. Faza solidă care conține
EUR-Lex () [Corola-website/Law/271062_a_272391]
-
distilată și se incubează peste noapte la 60oC. După incubare, rondele de piele se scot din flacoane și soluția rămasă este centrifugată timp de 8 minute la 21oC (forța relativă de centrifugare ~ 175). Apoi, o probă de 1 ml de supernatant se diluează în raport de 1:5 (vol./ vol.) (adică 1 ml + 4 ml) cu soluție 30% (greut./vol.) de SDS în apă distilată. Se măsoară densitatea optică (DO) a soluției la aproximativ 565 nm. 1.5.3.3.2
jrc4584as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89750_a_90537]
-
procedurii descrise mai sus; 3. tampon de blocare: 5% (w/v) lapte praf deshidratat Marvel, 0,1% (v/v) de tween-20 furnizat sub formă de sirop de polioxietilena sorbiton monolaurat în PBS; 4. anticorp monoclonal: 3-17-A3 (furnizat sub formă de supernatant de cultură tisulara hybridoma), depozitat la temperatura de -20°C sau liofilizat, diluat 1/50 cu tampon de blocare înainte de folosire, dirijat contra polipeptidei p7 specifică grupului; 5. conjugat: globulina de iepure antisoarece (adsorbit și diluat), conjugata cu peroxidaza din
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
și se resuspenda celulele granulate rămase în 10-20 ml de tampon de distrugere a celulelor. 9. Se agită cu ajutorul unui aparat cu ultrasunete și se clarifica, se stochează supernatantul în fiecare stadiu, în total de 3 ori. 10. Se adună supernatanții și se centrifughează la 24.000 rpm timp de 120 de minute, la temperatura de +4°C peste un strat de 5 ml de 40% sucroza w/v în PBS, folosindu-se 30 ml tuburi de centrifugare Beckmann și un
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
se va efectua conform următorului protocol: 2.1. Antigen: antigenul precipitat este preparat ��n orice sistem de cultură celulară care suporta rapidă multiplicare a serotipului specific de virus BTV. Sunt recomandate celulele BHK și Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la finalul creșterii virusului, dar trebuie concentrat de 50-100 de ori pentru a fi eficace. Acest lucru se poate realiza prin orice procedura standard de concentrare proteica; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugarea a 0,3% v/v
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
va efectua conform următorului protocol: 1.1. Antigen: antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultură celulară compatibil cu rapidă multiplicare a serotipului specific virusului bolii epizootice hemoragice. Sunt recomandate celulele BHK și Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la finalul creșterii virusului, dar trebuie concentrat de 50-100 de ori pentru a fi eficient. Acest lucru se poate realiza prin orice procedura standard de concentrare proteica; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugarea a 0,3% v/v
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de 7 tipuri de virus ai febrei aftoase (FMDV) folosite la o concentrație optimă predeterminata într-un tampon de carbonat/bicarbonat cu pH 9,6. Se prepară antigeni din tulpinile de virus selectate, cultivate pe celule monocelulare BHK-21. Se utilizează supernatanți nepurificați, pretitrati conform protocolului, dar fără ser pentru a da o diluție, care după adăugarea unui volum egal de PBST (lichid fiziologic tamponat cu fosfat, conținând 0,05% Tween-20 și indicator roșu fenol) ar da o intensitate optică între 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
Raportul dintre cantitatea de carne și lichidul de digestie trebuie să fie de circa 1/20 - 1/30. După o incubație de 18 - 20 de ore la o temperatură între 37 - 39șC, pipeta se debranșează. Se elimină cu precauție lichidul supernatant din tub și se strânge într-o capsulă sedimentul, apoi se clătește cu grijă. Se examinează prezența trichinelor cu ajutorul stereomicroscopului cu o mărire de 20 - 40 de ori. În cazul în care rezultatul analizei unei probe colective este pozitiv sau
jrc390as1977 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85527_a_86314]
-
observă de obicei înfășurarea și desfășurarea spiralei. În cazul formării unui sediment insuficient de transparent, sedimentul este limpezit. Proba finală de 45 ml se varsă într-o eprubetă cu fundul rotund pentru a se sedimenta timp de 15 minute. Lichidul supernatant este înlăturat prin aspirare, cu grijă, iar sedimentul este pus în circa 45 ml de apă de robinet. După un nou timp de sedimentare de 15 minute se înlătură din nou lichidul supernatant prin aspirare, cu multă atenție, iar sedimentul
jrc390as1977 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85527_a_86314]
-
se sedimenta timp de 15 minute. Lichidul supernatant este înlăturat prin aspirare, cu grijă, iar sedimentul este pus în circa 45 ml de apă de robinet. După un nou timp de sedimentare de 15 minute se înlătură din nou lichidul supernatant prin aspirare, cu multă atenție, iar sedimentul este clătit cu grijă cu circa 20 ml de apă de robinet într-o cutie Petri, apoi examinat. În cazul unui rezultat pozitiv sau neclar al analizei unei probe colective, se analizează individual
jrc390as1977 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85527_a_86314]
-
cu picătura amoniac 25% (3.4) până la pH 10. Se adaugă până la 10 ml etanol 96%. Se omogenizează sub azot (3.8), se pune capacul și apoi se centrifughează (la 4000 rot/min) timp de 10 minute. Se folosește lichidul supernatant. 5.2. Cromatografie 5.2.1. Punctarea plăcilor Sub atmosferă de azot (3.8), se aplică pe o placă cromatografică (4.1.3) 1 μl din fiecare dintre soluțiile de referință descrise mai sus pe 9 puncte situate la aproximativ
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
mai conține o cantitate importantă de particule solide după 30 de minute, se poate continua decantarea timp de 30 până la 60 de minute sau se adaptează noroiul la condițiile de laborator, în vederea obținerii unei decantări mai bune. Se lasă lichidul supernatant să se decanteze, astfel încât să se obțină un volum suficient pentru a asigura o însămânțare de 1 % pe fiolă de testare destinată măsurării degajărilor de CO2. Se evită antrenarea unui excedent de particule solide de noroi care ar putea conduce
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
o însămânțare de 1 % pe fiolă de testare destinată măsurării degajărilor de CO2. Se evită antrenarea unui excedent de particule solide de noroi care ar putea conduce la un rezultat eronat al producției de CO2. Se recomandă numărarea microorganismelor în supernatant. Inoculul trebuie să conțină în mod normal de la 106 la 20 x 106 celule pe milimetru. Inoculul se folosește în ziua preparării. 1.6.4. Mod de operare 1.6.4.1. Soluția mamă Se pregătește o soluție mamă de
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
7. PREPARAREA EXTRACTULUI 7.1 Extracția 7.1.1 Preamestecurile Se cântărește o cantitate de eșantion de 2 g, se adaugă 100 ml de metanol 90% (4.5), se omogenizează și se centrifughează timp de câteva minute. Se diluează soluția supernatantă cu metanol 50 % (4.6) pentru a obține un conținut estimat de sodiu monensin de 8 μg/ml (= U8). 7.1.2 Furajele cu un nivel de sodiu monensin de minim 50 ppm Se cântărește o cantitate de eșantion de
jrc686as1981 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85824_a_86611]
-
eșantion de 10-20 g, se adaugă 100 ml de metanol 90 % (4.5), se omogenizează timp de 15 minute. Se centrifughează până se limpezește. Pentru un eșantion care conține 20 ppm de sodiu monensin se iau 40 ml de lichid supernatant. Pentru un eșantion care conține 10 ppm, se iau 80 ml și se evaporă până la uscare în vid, într-un evaporator rotativ (5.1) la maxim 40°C. Se dizolvă reziduul în 10 ml de metanol 90 % (4.5). Se
jrc686as1981 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85824_a_86611]
-
apă Microcon(R) YM - 30 (Millipore), MWCO, 30,000 Da 50mM acetat de sodiu tampon pH-5 Tween -8O BRP și NESP Metodă: Centrifugați 0,6 mL de urină 10 minute, 2700 RCF, 20grade C și puneți 0,5 mL de supernatant într-o eprubetă test. Adăugați 20 (mu)L de Pepstatin A și 5 (mu)L de Complete(TM) Concentrați la aproximativ 30 (mu)L utilizând Microcon(R) Adăugați 200 (mu)L de acetat tampon în rezerva probei și amestecați prin
EUR-Lex () [Corola-website/Law/182014_a_183343]
-
cu precizie o cantitate "m" de aproximativ 2 g. Se adaugă aproximativ 15 ml acid acetic (3.1) și se amestecă cu grijă. Se așteaptă 30 de minute și se centrifughează 15 minute la 2000 rot/min. Se transferă soluția supernatantă într-un balon cotat de 50 ml. Se repetă centrifugarea de două ori prin adăugarea a 15 ml acid acetic (3.1) la reziduu. Se colectează soluția conținând clorat în același balon cotat. Se aduce la semn cu acid acetic
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
sol, în apă (inclusiv în apa potabilă, apa freatică și apa de suprafață) și în aer, dacă este relevant. Se mai recomandă includerea metodelor analitice pentru determinarea cantității și activității produselor proteice, de exemplu, analizarea culturilor exponențiale și a lichidelor supernatante ale culturilor într-o bioanaliză de celulă animală. 5. EFECTELE ASUPRA SĂNĂTĂȚII OAMENILOR Introducere (i) Informațiile existente referitoare la proprietățile microorganismului și organismelor corespunzătoare (secțiunile 1-3), inclusiv fișele medicale și de sănătate pot fi suficiente pentru a hotărî dacă microorganismul
jrc5110as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90278_a_91065]
-
Acest procedeu evită pierderile de amoniac, în timpul distilării cu abur, din anumite săruri de amoniu cum ar fi carbonatul și carbonații bazici precum și din sărurile acizilor grași, cu excepția acetatului de amoniu. Amoniacul se distilează cu abur din filtrat sau din supernatant și se determină prin titrare potențiometrică sau alt tip de titrare. 4. REACTIVI Toți reactivii trebuie să fie de puritate analitică. 4.1. Metanol. 4.2. Clorură de bariu dihidrată, soluție 25% (m/v). 4.3. Acid ortoboric, soluție 4
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
6.3. Se amestecă și se lasă să stea peste noapte în frigider (5°C). 6.4. Se filtrează sau se centrifughează soluția încă rece în eprubete închise, timp 10 minute, astfel încât să se obțină un strat de filtrat sau supernatant limpede. 6.5. Se pun cu pipeta 40 ml din această soluție limpede în distilatorul cu abur (5.3) și apoi se adaugă 0,5 ml de lichid antispumant (4.5), când unde este necesar. 6.6. Se distilează și
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
dacă valoarea pH-ului este aproximativ 5, apoi se adaugă 5 ml soluție de diacetat de cadmiu (5.2.2.4). Se așteaptă 10 minute și apoi se centrifughează pentru cel puțin 15 minute la 4000 g. Se îndepărtează lichidul supernatant, care poate conține o grăsime insolubilă (în cazul produselor cremă). Această grăsime nu poate fi confundată cu tiolii care se colectează într-o masă compactă la fundul eprubetei. Se verifică să nu se producă nici o precipitare la adăugarea câtorva picături
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
grăsime nu poate fi confundată cu tiolii care se colectează într-o masă compactă la fundul eprubetei. Se verifică să nu se producă nici o precipitare la adăugarea câtorva picături de soluție de diacetat de cadmiu (5.2.2.4.) la supernatant. Când identificarea anterioară nu a relevat alți agenți reductori în afară de tioli, se verifică iodometric dacă tiolul prezent în lichidul supernatant nu depășește 6 până la 8% din cantitatea inițială. Se introduc 10 ml metanol (5.2.2.3.) într-o eprubetă
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]