273 matches
-
6.3. Se amestecă și se lasă să stea peste noapte în frigider (5°C). 6.4. Se filtrează sau se centrifughează soluția încă rece în eprubete închise, timp 10 minute, astfel încât să se obțină un strat de filtrat sau supernatant limpede. 6.5. Se pun cu pipeta 40 ml din această soluție limpede în distilatorul cu abur (5.3) și apoi se adaugă 0,5 ml de lichid antispumant (4.5), când unde este necesar. 6.6. Se distilează și
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
dacă valoarea pH-ului este aproximativ 5, apoi se adaugă 5 ml soluție de diacetat de cadmiu (5.2.2.4). Se așteaptă 10 minute și apoi se centrifughează pentru cel puțin 15 minute la 4000 g. Se îndepărtează lichidul supernatant, care poate conține o grăsime insolubilă (în cazul produselor cremă). Această grăsime nu poate fi confundată cu tiolii care se colectează într-o masă compactă la fundul eprubetei. Se verifică să nu se producă nici o precipitare la adăugarea câtorva picături
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
grăsime nu poate fi confundată cu tiolii care se colectează într-o masă compactă la fundul eprubetei. Se verifică să nu se producă nici o precipitare la adăugarea câtorva picături de soluție de diacetat de cadmiu (5.2.2.4.) la supernatant. Când identificarea anterioară nu a relevat alți agenți reductori în afară de tioli, se verifică iodometric dacă tiolul prezent în lichidul supernatant nu depășește 6 până la 8% din cantitatea inițială. Se introduc 10 ml metanol (5.2.2.3.) într-o eprubetă
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
nu se producă nici o precipitare la adăugarea câtorva picături de soluție de diacetat de cadmiu (5.2.2.4.) la supernatant. Când identificarea anterioară nu a relevat alți agenți reductori în afară de tioli, se verifică iodometric dacă tiolul prezent în lichidul supernatant nu depășește 6 până la 8% din cantitatea inițială. Se introduc 10 ml metanol (5.2.2.3.) într-o eprubetă de centrifugare conținând precipitatul și se dispersează fin precipitatul cu o tijă agitatoare. Se centrifughează din nou pentru cel puțin
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
transferă imediat suspensia fierbinte cu apă într-un balon gradat de 50 ml. Se lasă să se răcească și se completează până la semn cu apă. Se centrifughează la cel puțin 3000 rpm timp de 5 minute și se trece lichidul supernatant printr-un filtru. 6.2. Extracție 6.2.1. Se iau 30 ml din filtrat și se extrage de trei ori cu 15 ml dietileter (4.4). Dacă este necesar, se usucă fazele eterice și se colectează într-un balon
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
cu precizie o cantitate "m" de aproximativ 2 g. Se adaugă aproximativ 15 ml acid acetic (3.1) și se amestecă cu grijă. Se așteaptă 30 de minute și se centrifughează 15 minute la 2000 rot/min. Se transferă soluția supernatantă într-un balon cotat de 50 ml. Se repetă centrifugarea de două ori prin adăugarea a 15 ml acid acetic (3.1) la reziduu. Se colectează soluția conținând clorat în același balon cotat. Se aduce la semn cu acid acetic
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
4.4 ) și se omogenizează timp de aproximativ 10 minute. Se adaugă 25 ml de soluție tampon fosfată cu pH-ul 6,5 (4.5), se agită timp de 15 minute și se centrifughează. Se iau 20 ml de soluție supernatantă și se ajustează pH-ul până la 6,5 cu ajutorul soluției de hidroxid de sodiu cu 1 N (4.8) cu soluție violetă de bromocresol (4.9) ca indicator. Se evaporă până la aproximativ 4 ml într-un evaporator rotativ la o
jrc464as1978 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85602_a_86389]
-
mai conține o cantitate importantă de particule solide după 30 de minute, se poate continua decantarea timp de 30 până la 60 de minute sau se adaptează noroiul la condițiile de laborator, în vederea obținerii unei decantări mai bune. Se lasă lichidul supernatant să se decanteze, astfel încât să se obțină un volum suficient pentru a asigura o însămânțare de 1 % pe fiolă de testare destinată măsurării degajărilor de CO2. Se evită antrenarea unui excedent de particule solide de noroi care ar putea conduce
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
o însămânțare de 1 % pe fiolă de testare destinată măsurării degajărilor de CO2. Se evită antrenarea unui excedent de particule solide de noroi care ar putea conduce la un rezultat eronat al producției de CO2. Se recomandă numărarea microorganismelor în supernatant. Inoculul trebuie să conțină în mod normal de la 106 la 20 x 106 celule pe milimetru. Inoculul se folosește în ziua preparării. 1.6.4. Mod de operare 1.6.4.1. Soluția mamă Se pregătește o soluție mamă de
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
6.2.8. Se îndepărtează și se clătește dopul și interiorul gâtului aparatului cu câțiva milimetri de solvent amestecat (pct. 4.5.) și se permite soluției de clătire să pătrundă în aparat. Se transferă cu grijă, pe cât posibil, din stratul supernatant prin decantare sau cu ajutorul unui sifon (pct. 5.6.) în flaconul preparat (pct. 6.2.1.). Notă: Dacă transferul nu se face cu ajutorul unui sifon, poate fi necesară adăugarea a puțină apă pentru a clăti interfața dintre cele două straturi
jrc542as1979 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85680_a_86467]
-
6.2.8. Se îndepărtează și se clătește dopul și interiorul gâtului aparatului cu câțiva milimetri de solvent amestecat (pct. 4.5) și se permite soluției de clătire să pătrundă în aparat. Se transferă cu grijă, pe cât posibil, din stratul supernatant prin decantare sau cu ajutorul unui sifon (pct. 5.6) în flaconul preparat (pct. 6.2.1). Notă: Dacă transferul nu se face cu ajutorul unui sifon, poate fi necesară adăugarea a puțină apă pentru a clăti interfața dintre cele două straturi
jrc542as1979 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85680_a_86467]
-
7. PREPARAREA EXTRACTULUI 7.1 Extracția 7.1.1 Preamestecurile Se cântărește o cantitate de eșantion de 2 g, se adaugă 100 ml de metanol 90% (4.5), se omogenizează și se centrifughează timp de câteva minute. Se diluează soluția supernatantă cu metanol 50 % (4.6) pentru a obține un conținut estimat de sodiu monensin de 8 μg/ml (= U8). 7.1.2 Furajele cu un nivel de sodiu monensin de minim 50 ppm Se cântărește o cantitate de eșantion de
jrc686as1981 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85824_a_86611]
-
eșantion de 10-20 g, se adaugă 100 ml de metanol 90 % (4.5), se omogenizează timp de 15 minute. Se centrifughează până se limpezește. Pentru un eșantion care conține 20 ppm de sodiu monensin se iau 40 ml de lichid supernatant. Pentru un eșantion care conține 10 ppm, se iau 80 ml și se evaporă până la uscare în vid, într-un evaporator rotativ (5.1) la maxim 40°C. Se dizolvă reziduul în 10 ml de metanol 90 % (4.5). Se
jrc686as1981 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85824_a_86611]
-
a proteinelor și concentrarea și repunerea ulterioară în suspensie a proteinelor precipitate într-un volum redus de plasmă. 8. "Spălare" înseamnă un proces de îndepărtare a plasmei sau a mediului de stocare din produsele celulare prin centrifugare, decantare a lichidului supernatant din celule și adăugare a unui fluid izotonic de suspensie, care, la rândul său, este în general îndepărtat și înlocuit după centrifugarea suspensiei. Procesul de centrifugare, decantare și înlocuire poate fi repetat de mai multe ori. 9. "Eritrocite" înseamnă eritrocitele
32004L0033-ro () [Corola-website/Law/292657_a_293986]
-
singure unități de sânge total. 24. "Concentrat trombocitar de la un singur donator, cu leucocitele îndepărtate" înseamnă o suspensie concentrată de trombocite obținute prin prelucrarea unei singure unități de sânge total din care sunt îndepărtate leucocitele. 25. "Plasmă proaspătă-congelată" înseamnă plasma supernatantă separată dintr-o donare de sânge integral sau plasma donată prin afereză, congelată și depozitată. 26. "Plasmă, cu crioprecipitatul îndepărtat, pentru transfuzie" înseamnă o componentă plasmatică preparată dintr-o unitate de plasmă proaspătă-congelată. Ea cuprinde fracțiunea rămasă după îndepărtarea crioprecipitatului
32004L0033-ro () [Corola-website/Law/292657_a_293986]
-
orice transport de ADN în recipientele sau în dispozitivele de zdrobire. În cazul în care se recurge la testul PCR, se recomandă zdrobirea în pungi de unică folosință și utilizarea tuburilor de unică folosință. 3.1.4. Se decantează lichidul supernatant. În cazul în care lichidul este prea tulbure, se limpezește prin centrifugare la viteză redusă (la maximum 180 g timp de 10 minute, la o temperatură de 4-10 °C) sau prin filtrare în vid (40-100 μm), spălând filtrul cu un
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
1.5. Se concentrează fracțiunea bacteriană prin centrifugare la viteza de 7 000 g timp de 15 minute (sau de 10 000 g timp de 10 minute) la o temperatură cuprinsă între 4 și 10 °C, apoi se elimină lichidul supernatant fără a agita depozitul. 3.1.6. Se readuce depozitul în suspensie într-un tampon de 1,5 ml (a se vedea apendicele 3). Se utilizează 500 μl pentru testele de C. m. ssp. sepedonicus, 500 μl pentru testele de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
trebuie să fie refrigerate (pentru o perioadă mai scurtă de 72 de ore), fie conservate la temperatura mediului ambiant (pentru o perioadă mai scurtă de 24 de ore). 3.2.3. După o sedimentare de 15 minute, se decantează lichidul supernatant. 3.2.4. De obicei, nu este necesar să se efectueze o nouă limpezire a extractului sau a concentrației fracțiunii bacteriene; cu toate acestea, limpezirea se poate efectua prin filtrare și/sau centrifugare, în conformitate cu metoda descrisă de secțiunile 3.1
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de fixare (a se vedea apendicele 7). 5.1.2. Se introduc cu pipeta 100 μl din fiecare extract într-un tub Eppendorf și sunt centrifugați timp de 8 minute la 7 000 g. 5.1.3. Se elimină lichidul supernatant și se dizolvă extractul concentrat în 500 μl de fixativ preparat cu mai puțin de 24 de ore înainte. Se agită și se lasă la incubat toată noaptea la 4 °C. Se mai poate utiliza ca fixativ etanol la 96
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
din 50 μl etanol la 96 %. Se amestecă la vortex și se lasă la incubat la 4 °C timp de 30-60 minute. 5.1.4. Se pune la centrifugat timp de 8 minute la 7 000 g, se elimină lichidul supernatant și se repune în suspensie extractul concentrat în 75 μl de tampon fosfatat la 0,01 M. 5.1.5. Se depun 16 μl de suspensii fixate pe o lamă multitest, astfel cum se indică în figura 3. Pe fiecare
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se lasă la temperatura mediului înconjurător timp de cel puțin 20 de minute. 16. Se conservă la -20 °C până atunci când se utilizează pentru PCR. 17. Se izolează orice precipitat alb prin centrifugare și se utilizează 5 μl din lichidul supernatant ce conține ADN pentru PCR. 6.1. (b) Alte metode Se pot aplica și alte metode de extragere a ADN-ului (Qiagen DNeasy Plant Kit, de exemplu), cu condiția ca metodele respective să aibă o eficacitate recunoscută ca fiind echivalentă
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de rotație de 500 - 600 rot/min-1 (pct. 5.2). Dacă nu se folosește centrifuga (vezi nota de la pct. 5.2) se lasă să se odihnească pe stativ (pct. 5.7), timp de cel puțin 30 de minute, până ce stratul supernatant se limpezește și se separă vizibil de stratul apos. Dacă e nevoie, se poate răci balonul cu apă curentă. 6.5.6. Se îndepărtează cu grijă dopul de plută sau dispozitivul de închidere și se clătește, ca și interiorul gâtului
jrc1895as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87045_a_87832]
-
la bază turnând apă, cu grijă, de-a lungul pereților balonului, astfel încât să se faciliteze decantarea solventului. 6.5.7. Ținând balonul de extracție de bulbul îngust, se decantează, cu foarte mare grijă, cât se poate de mult din stratul supernatant, în recipientul pregătit, destinat recuperării substanțelor grase (pct. 6.4), care conține câțiva regulatori de fierbere (pct. 5.10), în cazul baloanelor (facultativ în cazul capsulelor mecanice), evitându-se decantarea unei părți cât de mici a stratului apos. 6.5
jrc1895as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87045_a_87832]
-
cu o viteză de rotație de 500 -600 rot /min-1 (pct. 5.2). În lipsa unei centrifugi (vezi nota de la pct. 5.2), tubul astupat se lasă să se odihnească pe stativ, timp de cel puțin 30 de minute, până ce stratul supernatant se limpezește și se separă în mod vizibil de stratul apos. Dacă este necesar, tubul se răcește cu apă curentă. A.1.5.6. Se îndepărtează cu grijă dopul din plută (sau alt material) și se clătește, ca și gâtul
jrc1895as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87045_a_87832]
-
în tub și se scufundă tubulura lungă în interior, până ce orificiul se află la aproximativ 3 mm deasupra suprafeței de contact dintre straturi. Tubulura din interior trebuie să fie paralelă cu axa tubului de extracție. Se transvazează cu grijă stratul supernatant din tub în recipientul pregătit pentru recuperarea substanțelor grase (pct. 6.4), evitându-se transvazarea unei părți cât de mici a stratului apos; dacă recipientul e un balon, trebuie să conțină câțiva regulatori de fierbere (pct. 5.10) - facultativi în
jrc1895as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87045_a_87832]