1,742 matches
-
6.2., 6.3. sau 6.4.). 6.7. Vinetele se incubează în condiții adecvate (apendice 5) timp de 40 de zile. Se examinează regulat simptomele după opt zile. Se numără vinetele care prezintă simptome. C. sepedonicum cauzează ofilirea frunzelor vinetelor, care poate începe ca o flaciditate marginală sau intervenală. Țesutul ofilit poate să aibă inițial o culoare verde închis sau pestriță dar care devine mai pală înainte de necrozare. Ofilirile intervenale au adesea un aspect unsuros apos. Țesutul necrozat are adeseori
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
o flaciditate marginală sau intervenală. Țesutul ofilit poate să aibă inițial o culoare verde închis sau pestriță dar care devine mai pală înainte de necrozare. Ofilirile intervenale au adesea un aspect unsuros apos. Țesutul necrozat are adeseori o margine galbenă strălucitoare. Vinetele nu mor neapărat; cu cât este mai îndelungată perioada care precede apariția simptomelor cu atât cresc șansele de supraviețuire. Vinetele pot învinge infecția. Vinetele tinere susceptibile sunt mult mai sensibile la populațiile reduse de C. sepedonicum decât plantele mai bătrâne
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
mai pală înainte de necrozare. Ofilirile intervenale au adesea un aspect unsuros apos. Țesutul necrozat are adeseori o margine galbenă strălucitoare. Vinetele nu mor neapărat; cu cât este mai îndelungată perioada care precede apariția simptomelor cu atât cresc șansele de supraviețuire. Vinetele pot învinge infecția. Vinetele tinere susceptibile sunt mult mai sensibile la populațiile reduse de C. sepedonicum decât plantele mai bătrâne, de unde necesitatea de a utiliza vinete aflate în al treilea stadiu de înfrunzire sau exact înaintea acestuia. Ofilirile pot fi
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
este mai îndelungată perioada care precede apariția simptomelor cu atât cresc șansele de supraviețuire. Vinetele pot învinge infecția. Vinetele tinere susceptibile sunt mult mai sensibile la populațiile reduse de C. sepedonicum decât plantele mai bătrâne, de unde necesitatea de a utiliza vinete aflate în al treilea stadiu de înfrunzire sau exact înaintea acestuia. Ofilirile pot fi provocate de asemenea de populații de alte bacterii sau ciuperci prezente în granula de țesut de tubercul. Acestea includ Erwinia carotovora, subsp. carotovora și E. Carotovora
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
de tubercul. Acestea includ Erwinia carotovora, subsp. carotovora și E. Carotovora subsp. atroseptica, Phoma exigua var. foveata precum și de populații mari de bacterii saprofite. Aceste ofiliri pot fi deosebite de cele cauzate de C. sepedonicum deoarece toate frunzele sau întreaga vânătă se ofilesc rapid. 6.8. Se prepară o colorație Gram (4) pentru toate loturile de vinete care prezintă simptome, utilizând secțiuni de țesut de frunză ofilită și de tulpină de vânătă și se izolează într-un mediu nutritiv adecvat (7
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
foveata precum și de populații mari de bacterii saprofite. Aceste ofiliri pot fi deosebite de cele cauzate de C. sepedonicum deoarece toate frunzele sau întreaga vânătă se ofilesc rapid. 6.8. Se prepară o colorație Gram (4) pentru toate loturile de vinete care prezintă simptome, utilizând secțiuni de țesut de frunză ofilită și de tulpină de vânătă și se izolează într-un mediu nutritiv adecvat (7). Se dezinfectează frunzele vinetelor și tulpinile prin ștergere cu o soluție de 70 % etanol. 6.9
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
cauzate de C. sepedonicum deoarece toate frunzele sau întreaga vânătă se ofilesc rapid. 6.8. Se prepară o colorație Gram (4) pentru toate loturile de vinete care prezintă simptome, utilizând secțiuni de țesut de frunză ofilită și de tulpină de vânătă și se izolează într-un mediu nutritiv adecvat (7). Se dezinfectează frunzele vinetelor și tulpinile prin ștergere cu o soluție de 70 % etanol. 6.9. În anumite cazuri, în special dacă condițiile de creștere nu sunt optime, este posibil ca
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
6.8. Se prepară o colorație Gram (4) pentru toate loturile de vinete care prezintă simptome, utilizând secțiuni de țesut de frunză ofilită și de tulpină de vânătă și se izolează într-un mediu nutritiv adecvat (7). Se dezinfectează frunzele vinetelor și tulpinile prin ștergere cu o soluție de 70 % etanol. 6.9. În anumite cazuri, în special dacă condițiile de creștere nu sunt optime, este posibil ca C. sepedonicum să existe ca o infecție latentă în vinete chiar după incubația
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
Se dezinfectează frunzele vinetelor și tulpinile prin ștergere cu o soluție de 70 % etanol. 6.9. În anumite cazuri, în special dacă condițiile de creștere nu sunt optime, este posibil ca C. sepedonicum să existe ca o infecție latentă în vinete chiar după incubația de 40 de zile. Aceste infecții pot avea ca rezultat ofilirea și pierderea vigorii vinetelor inoculate. Dacă testul IF este considerat pozitiv, se poate considera că este necesară o testare suplimentară. Este așadar esențial să se compare
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
cazuri, în special dacă condițiile de creștere nu sunt optime, este posibil ca C. sepedonicum să existe ca o infecție latentă în vinete chiar după incubația de 40 de zile. Aceste infecții pot avea ca rezultat ofilirea și pierderea vigorii vinetelor inoculate. Dacă testul IF este considerat pozitiv, se poate considera că este necesară o testare suplimentară. Este așadar esențial să se compare ratele de creștere ale tuturor plantelor supuse testului vinetei cu controalele inoculate cu SFT steril de 0,05
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
infecții pot avea ca rezultat ofilirea și pierderea vigorii vinetelor inoculate. Dacă testul IF este considerat pozitiv, se poate considera că este necesară o testare suplimentară. Este așadar esențial să se compare ratele de creștere ale tuturor plantelor supuse testului vinetei cu controalele inoculate cu SFT steril de 0,05 M și să se monitorizez condițiile de mediu ale serei. Recomandările pentru teste ulterioare sunt următoarele: 6.9.1. Se taie tulpinile deasupra locului inoculării și se îndepărtează frunzele. 6.9
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
ca la 3.1 până la 3.2. 6.9.3. Se utilizează o jumătate de granulă pentru a efectua o colorație Gram (4) și un test IF (5). 6.9.4. Se utilizează cealaltă jumătate pentru un nou test al vinetei (6), dacă colorația Gram și/sau testele IF sunt pozitive. Se folosește o cultură cunoscută C. sepedonicum și controale sterile de SFT 0,05 M. Dacă nu se observă simptome în testul ulterior, mostra este considerată negativă. 7. Izolarea lui
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
C. sepedonicum este un organism dificil, el poate fi izolat din țesutul simptomatic. Totuși el poate fi depășit prin cultivarea rapidă de bacterii saprofite și de aceea izolarea directă din granula de țesut de tubercul (3.3.) nu este recomandată. Vinetele asigură un mediu de îmbogățire excelent pentru dezvoltarea lui C. sepedonicum și, de asemenea, un excelent test gazdă de confirmare. Se fac izolări din toți tuberculii de cartof simptomatici și vinete (4, 6). Dacă este necesar, macerarea tulpinilor vinetelor se
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
recomandată. Vinetele asigură un mediu de îmbogățire excelent pentru dezvoltarea lui C. sepedonicum și, de asemenea, un excelent test gazdă de confirmare. Se fac izolări din toți tuberculii de cartof simptomatici și vinete (4, 6). Dacă este necesar, macerarea tulpinilor vinetelor se face ca la 3. și 6.9. 7.1. Înșiruiți suspensii într-unul din următoarele medii: (formulele sunt indicate în apendicele 6): dextroză agar nutritivă (numai pentru subculturi), drojdie de glucoză peptidică agar, drojdie de dextroză agar nutritivă, drojdie
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
de dom convex, mucoid fluidale, cu margini întregi și cu un diametru uzual de 1 până la 3 mm. Identificarea Multe bacterii corineforme pozitive Gram pozitive, cu caractere coloniale similare celor ale lui C. sepedonicum pot fi izolate din cartofi și vinete sănătoase sau bolnave. În acest context, C. sepedonicum poate fi identificat prin următoarele teste: testul IF (5.1), testul vinetei, testele de nutriție și fiziologice (apendice 7), ― testul oxidării/fermentării (O/F), ― testul oxidazei, ― creșterea la 37ș C, ― producția de
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
bacterii corineforme pozitive Gram pozitive, cu caractere coloniale similare celor ale lui C. sepedonicum pot fi izolate din cartofi și vinete sănătoase sau bolnave. În acest context, C. sepedonicum poate fi identificat prin următoarele teste: testul IF (5.1), testul vinetei, testele de nutriție și fiziologice (apendice 7), ― testul oxidării/fermentării (O/F), ― testul oxidazei, ― creșterea la 37ș C, ― producția de urează, ― hidroliza esculinei, ― hidroliza amidonului, ― toleranța la o soluție de 7 % clorură de sodiu, ― testul indolului, ― testul catalazei, ― producția de
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
agar nutritive. Comparațiile morfologice se fac din culturi de dextroză agar nutritive. Pentru testul IF populațiile de celule trebuie să fie ajustate la 104 celule/ml. Titlul IF trebuie să fie similar celui al culturii C. sepedonicum cunoscute. Pentru testul vinetei populațiile de celule trebuie să fie ajustate la 107 celule/ml. Testele vinetei se fac utilizând zece plante pentru fiecare din organismele de testare, utilizând din nou cultura cunoscută C. sepedonicum și controale de apă sterilă; în cazul culturilor pure
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
testul IF populațiile de celule trebuie să fie ajustate la 104 celule/ml. Titlul IF trebuie să fie similar celui al culturii C. sepedonicum cunoscute. Pentru testul vinetei populațiile de celule trebuie să fie ajustate la 107 celule/ml. Testele vinetei se fac utilizând zece plante pentru fiecare din organismele de testare, utilizând din nou cultura cunoscută C. sepedonicum și controale de apă sterilă; în cazul culturilor pure ofilirea se obține în 20 de zile, dar plantele care nu prezintă simptome
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
apă sterilă; în cazul culturilor pure ofilirea se obține în 20 de zile, dar plantele care nu prezintă simptome după această perioadă trebuie să fie incubate pe o durată totală de 30 de zile, la temperaturi care să determine dezvoltarea vinetelor dar fără să depășească 30 0 (apendicele 5). Dacă după 30 de zile simptomele nu sunt prezente, cultura nu poate fi confirmată ca fiind o formă patogenică a lui Corynebacterium sepedonicum. Testul C. sepedonicum O/F Inert sau slab oxidativ
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
tipice pe câmp (c). Se calculează numărul celulelor fluorescente tipice pe fereastră (C). Se calculează numărul celulelor fluorescente tipice pe ml de granulă (N ). unde y = volumul granulei pe fereastră, unde F = factorul de diluție a granulelor. Apendicele 5 CULTURA VINETELOR Se însămânțează semințe de vânătă (Solenum melongena cv. Black Beauty) într-un compost de semințe pasteurizat. Puieții cu cotiledoane deplin expandate (10 până la 14 zile) se răsădesc într-un compost de răsădire pasteurizat. Se utilizează vinete în al treilea stadiu
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
calculează numărul celulelor fluorescente tipice pe fereastră (C). Se calculează numărul celulelor fluorescente tipice pe ml de granulă (N ). unde y = volumul granulei pe fereastră, unde F = factorul de diluție a granulelor. Apendicele 5 CULTURA VINETELOR Se însămânțează semințe de vânătă (Solenum melongena cv. Black Beauty) într-un compost de semințe pasteurizat. Puieții cu cotiledoane deplin expandate (10 până la 14 zile) se răsădesc într-un compost de răsădire pasteurizat. Se utilizează vinete în al treilea stadiu de înfrunzire, atunci când două dar
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
granulelor. Apendicele 5 CULTURA VINETELOR Se însămânțează semințe de vânătă (Solenum melongena cv. Black Beauty) într-un compost de semințe pasteurizat. Puieții cu cotiledoane deplin expandate (10 până la 14 zile) se răsădesc într-un compost de răsădire pasteurizat. Se utilizează vinete în al treilea stadiu de înfrunzire, atunci când două dar nu mai mult de trei frunze sunt desfăcute complet. Vinetele trebuie să fie cultivate într-o seră în următoarele condiții de mediu: durata zilei: 14 ore de lumină naturală sau mai
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
semințe pasteurizat. Puieții cu cotiledoane deplin expandate (10 până la 14 zile) se răsădesc într-un compost de răsădire pasteurizat. Se utilizează vinete în al treilea stadiu de înfrunzire, atunci când două dar nu mai mult de trei frunze sunt desfăcute complet. Vinetele trebuie să fie cultivate într-o seră în următoarele condiții de mediu: durata zilei: 14 ore de lumină naturală sau mai mult; temperatura: ziua: 21 până la 24ș C, noaptea: 15ș C. N.B.: C. sepedonicum nu crește la temperaturi de peste 30ș
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
N.B.: C. sepedonicum nu crește la temperaturi de peste 30ș C. Dacă temperaturile nocturne nu scad la 15 ș C se poate produce deteriorarea cromoforului (necroza argintie). Deteriorarea rădăcinii cauzate de larvele sciaride poate fi depășită prin aplicarea unui insecticid adecvat. Vânăta Black Beauty poate fi obținută de la firmele următoare: 1. AB Hammenhögs Frö, 50 Hammenhög, Sweden; 2. HURST Seeds Ltd, Avenue Road, Witham, Essex CM8 2DX, England; 3. ASGRO Italia Sp A, Corso Lodi, 23, Milan; 4. KÜPPER Mitteldeutsche Samen GmbH
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
și lamelele de imunofluorescență pregătite suplimentar, până la aplicarea cu succes a metodei menționate. 2. În cazul confirmării pozitive a organismului trebuie să se păstreze și să se conserve adecvat: ― materialul specificat la alin. (1), și ― o mostră din materialul de vânătă infectată, inoculată cu un tubercul sau extract de plantă, și ― cultura izolată a organismului, timp de minimum o lună de la procedura de notificare conformă cu art. 5 alin. (2). ANEXA III 1. Elementele avute în vedere pentru determinarea gradului contaminării
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]