2,196 matches
-
NER se poate face pe două căi distincte: Calea globală - GGR (Global Genom Repair) în care se repară leziunile indiferent de localizarea lor în genom; Calea cuplată cu transcripția - TCR (Transcription-Coupled Repair), care repară mult mai rapid leziunile localizate pe catena transcrisă de genele active. Cu excepția etapei inițiale (A), cea a recunoașterii distorsiunii dublului helix, unde se constată existența și a unor proteine detectoare diferite (a se vedea aceste diferențe urmărind comparativ prima etapă din fig. 3-64, 3-65), în celelalte trei
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
ADN și redarea lui în circuitul multiplicării celulare. Detaliem, în continuare, etapele GGR. Recunoașterea leziunii moleculei de ADN (care constă din distorsiunea respectivei molecule) este opera a două proteine: XPC și hHR23B. Recunoaște și se fixează la locul lezat de pe catena de ADN. hHR 23 B este o proteină care împreună cu XPC se fixează la locul lezat, mărind distorsiunea și făcând posibilă aderarea la locul respectiv a următorului „actor“, factorul de transcripție TF II H. Fixarea factorului de transcripție TF II
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
TF II H, care conține de altfel și alte șapte asemenea proteine. Important de reținut este că acest complex TF II H desfășoară ADN-ul pe o întindere de 20-30 perechi de baze. Rezultă un „câmp operator liber“, adică firul (catena cu leziune) este separată de cealaltă și deci pregătită pentru „enzimele chirurgi“, care vor acționa în continuare, excizând și eliminând zona de nucleotide alterată. „Chirurgii moleculari“ sunt nucleazele XP-6 și complexul proteinic XPF/ERCC1, care efectuează operația de eliminare a
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
leziunii ADN. Nucleaza XP-G clivează în 3', iar XPF/ ERCC1 face același lucru în 5'. În etapa a patra, au loc operațiile de resinteză și ligaturare. Așa cum se vede în fig. 3-65, mașinăria de replicare (care astupă „gaura“ lăsată în catena de ADN), este compusă din factorul proliferativ PCNA și din polimerazele δ și ε. O altă schemă a operației de reparare globală a genomului - GGR (Global Genome Repair) ne este oferită de J. Cl. Kaplan și M. Delpech, op.cit., p.
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
mică amploare. Există și aici, la prokariote, un sistem de detecție a defectului, deservit de proteinele Mut S, Mut L și Mut H (ultima veritabilă foarfecă enzimatică, care taie site-ul cu împerecherea eronată). Opera de îndepărtare a erorii de pe catena cu defect este desăvârșită de exonucleaza Urv D (o helicază). „Gaura“ rămasă este reparată de către polimeraza III și o ligază. La eucariote, mecanismul este mai complex decât la procariote. În sistemul de recunoaștere a împerecherii greșite, proteinei Mut S îi
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
tractus urinar etc. Și în acest caz, „cobaii“ de la care au ajuns să fie extrapolate la om rezultatele unor cercetări au fost tot colibacilul 75 și drojdia de bere,76 unde, evident, mecanismele enzimatice de reparare a leziunii pe dubla catenă implică mai puține „proteine cheie“. La mamifere, inclusiv la om, asemenea leziuni se pot repara prin două procedee: a) joncțiunea neomoloagă a extremităților și b) repararea prin recombinare. Un asemenea proces se petrece în cazul recombinărilor ce au loc în
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
limfocitele B (atunci când acestea construiesc imunoglobuline), sau în limfocitele T, când ele își exprimă unii dintre receptorii caracteristici. În mare, ca și în cazul celorlalte tipuri de reparații, cronologic au loc: operații de recunoaștere a leziunii ce afectează cele două catene; manevre de fixare - stabilizare enzimatică a locului leziunii (care trebuie corectat); acțiuni de lipire (sudare) atât a uneia cât și a celeilalte catene rupte. Redăm în fig. 3-66 unele detalii ale reparării prin joncțiu ne neomoloagă a extremităților (NHEJ), care
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
cazul celorlalte tipuri de reparații, cronologic au loc: operații de recunoaștere a leziunii ce afectează cele două catene; manevre de fixare - stabilizare enzimatică a locului leziunii (care trebuie corectat); acțiuni de lipire (sudare) atât a uneia cât și a celeilalte catene rupte. Redăm în fig. 3-66 unele detalii ale reparării prin joncțiu ne neomoloagă a extremităților (NHEJ), care la rându-i are două componente: a) o jonc țiune care se face la capetele de ruptură „francă“ a celor două catene și
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
celeilalte catene rupte. Redăm în fig. 3-66 unele detalii ale reparării prin joncțiu ne neomoloagă a extremităților (NHEJ), care la rându-i are două componente: a) o jonc țiune care se face la capetele de ruptură „francă“ a celor două catene și b) o joncțiune care se face totuși, deși capetele rupturii nu au caracter de ruptură francă. Așa cum se poate observa, în primul caz (joncțiunea de la capetele cu ruptură francă) leziunea este recunoscută de proteinele Ku 70 și Ku 80
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
proteinele Ku 70 și Ku 80, care recrutează o proteinkinază depen dentă de ADN (ADN-PKcs; cs = catalytic subunit). Fixarea ADN-PKcs fos fo rilează câteva proteine care fixează complexul. Apoi XRCC4 (X Ray Cross Complementing 4) și ADN-Ligaza IV restabilesc continuitatea catenelor. În cazul când joncțiunea se face la capetele care nu prezintă o ruptură francă, unirea capetelor are loc în zone cu omologie. Proteinele care intervin sunt Rad1, Mre11 și NBS1. Ele formează un complex cu proprietăți exonucleazice. În final, cele
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
cazul când joncțiunea se face la capetele care nu prezintă o ruptură francă, unirea capetelor are loc în zone cu omologie. Proteinele care intervin sunt Rad1, Mre11 și NBS1. Ele formează un complex cu proprietăți exonucleazice. În final, cele două catene ale ADN sunt lipite. Procesul se face cu pierderea secvențelor dintre cele două zone de omologie. 3. ADN și ARN, țintele predilecte ale factorilor carcinogeni (intrinseci sau extrinseci) B. Joncțiunea prin recombinare omoloagă - HR (Homologous Recombination), este o operație naturală
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
Procesul se face cu pierderea secvențelor dintre cele două zone de omologie. 3. ADN și ARN, țintele predilecte ale factorilor carcinogeni (intrinseci sau extrinseci) B. Joncțiunea prin recombinare omoloagă - HR (Homologous Recombination), este o operație naturală în care ruptura dublei catene de pe unul dintre cromozomi este reparată după modelul structural oferit de cromozomul pereche, rămas intact. De fapt, așa cum se observă în fig. 3-67, proce deul reparator constă în „invazia“ (citește „aju torul frățesc“) dat unor nucleotide de pe cromo zomul intact
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
pereche, rămas intact. De fapt, așa cum se observă în fig. 3-67, proce deul reparator constă în „invazia“ (citește „aju torul frățesc“) dat unor nucleotide de pe cromo zomul intact la locul lezionat de pe cromozomul pereche (care are o dublă ruptură de catene). În acest caz, se poate vedea că proteina ATM este cea care declanșează alarma ce anunță producerea dublei rupturi (a). ATM activează complexul format din proteinele Rad50, Nbs1 și Mre, provocând în același timp apariția unei extremități 3', care va
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
proteină constituită din trei subunități de 70, 34 și 11 kDa. Numai unitatea de 70 kDa se fixează pe ADN și numai când ADN-ul e sub formă monocatenară. A mai fost numită și HSSB (Human Single Strand Binding). Protejează catena de ADN în timpul replicării (formează manșonul de apărare împotriva atacului nucleazelor, dar numai dacă respectiva unitate de 40 kDa este forsforilată. Factorul de replicare RPA fosforilat este implicat și chiar absolut necesar acțiunii polimerazelor a și d, mai ales în
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
întârziată. Această deficiență predispune la apariția de neoplazii maligne. Integritatea genei BRCA1 (implicit a proteinei Brca1) este necesară pentru desfășurarea în bune condițiuni a procesului. Proteina Rad51 are misiunea de a căuta omologiile și de a facilita „invazia“ fragmentului de catenă omolog (cel aflat inițial în compoziția cromozomului pereche) la locul leziunii (c). Buna desfășurare a „misiunii de invazie“ este garantată și de proteina Brca2 (produsul genei BRCA2). La reparare participă și proteinele Rad52 și Rad54. Repararea ADN are o importanță
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
urmarea unor mutații apărute în gena NBS1, care codifică enzima Nbs1 - în acest caz anihilată prin mutația genei. Reamintim că enzima Nbs1 joacă un rol important, alături de proteinele Rad50 și 51 și MRE11 în recunoașterea și ulterior repararea rupturilor ambelor catene de ADN prin NHEJ (fig. 3-66) și HR (a se vedea fig. 3-67). Sindromul Werner (sin. sindrom Elliot sau Cockayne-Touraine), a fost descris clinic încă de la sfârșitul sec XIX, de către dermatologul american G. T. Elliot, sub numele de epidermolisis bulosa
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
trei gene esențiale codifică anvelopa, capsida și reverstranscriptaza. MultIPlICAReA RetRovIRuSuRIloR Acest proces urmează, în mare, schema de multiplicare a virusurilor cu ARN, dar are totuși și unele particularități. Astfel, pentru a se multiplica cele două copii de ARN codificator (reprezentând catena +), se replică prin transcrierea mesajului pe care-l poartă pe un ADN dublu catenar - care a primit denumirea de provirus, fabricat (sintetizat) de o enzimă: ADN polimeraza ARN dependentă (transcriptaza inversă sau reverstranscriptaza codificată de gena virală Pol. Cronologic, evenimentele
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
maturare a transcriptului. 1. Particula virală completă conținând anvelopa, capsida cu ARn-ul codificator (roșu) și reverstranscriptaza (galben) se adsoarbe pe receptorul de pe suprafața membranei plasmatice. 2. Complexul ARn + reverstranscriptază pătrunde în celula victimă; 3. Reverstranscriptaza catalizează înscrierea mesajului adus de catena + de ARn într-o porțiune a ADnului celular. Ia naștere astfel provirusul (ADn modificat), care se lasă copiat (transcris) de un ARnm care posedă și transportă în citoplasmă informația pentru a) sinteza altor molecule de ARn viral ce vor intra
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
de activare a oncogenelor prin mecanismul translocației cu fuziune cromozomială. În leucemia limfocitară acută (ALL), a fost descrisă translocația t (11, 14) (q13, q11). Așa cum se observă în fig. 5-14, fractura cromozomului 14 se produce la nivelul locusului genic pentru catena alpha a genei TCRA. După fracturare, segmentele genice pentru regiunea variabilă (Vα) rămân în cromozomul 14q-. Segmentele genice Cα sunt strămutate (translocate) însă în cromozomul 11. Acest cromozom devine 11p+, în timp ce gena care codifică nucleozidfosforilaza umană (gena NP) rămâne în
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
devine 11p+, în timp ce gena care codifică nucleozidfosforilaza umană (gena NP) rămâne în 14q. Genele pentru LDH-A, c-H-ras și β-globină sunt translocate în 14q-. În acele regiuni se află gene esențiale care codifică porțiuni din molecula de imunoglobulină: gena pentru catena grea (H), pentru catenele ușoare Lk și Lλ. Evident că translocația genei C-Myc are drept consecință alterarea reglajului genic normal al acesteia (apud Lucian Gavrilă și Aurel Ardelean, 200925). Ne oprim aici cu exemplele de translocații activatoare ale unor protooncogene
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
care codifică nucleozidfosforilaza umană (gena NP) rămâne în 14q. Genele pentru LDH-A, c-H-ras și β-globină sunt translocate în 14q-. În acele regiuni se află gene esențiale care codifică porțiuni din molecula de imunoglobulină: gena pentru catena grea (H), pentru catenele ușoare Lk și Lλ. Evident că translocația genei C-Myc are drept consecință alterarea reglajului genic normal al acesteia (apud Lucian Gavrilă și Aurel Ardelean, 200925). Ne oprim aici cu exemplele de translocații activatoare ale unor protooncogene. Alte exemple, care în
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
modul intervenției lor în diferitele faze ale carcinogenezei (tabelul 6-2). Dacă la începutul constituirii sale ca entitate științifică imunologia era definită drept „preocuparea pentru descifrarea mecanismelor prin care organismul se apără împotriva germenilor infecțioși“, de îndată ce Paul Ehrlich a elaborat teoria catenelor laterale (între 1897 și 1904), el însuși și alți contemporani și-au pus problema dacă nu cumva receptorii aflați pe suprafața celulelor imuno com petente ar putea cupla și eventual neutraliza și antigene tumorale, exprimate de celule neoplazice. Ehrlich afirma
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
are loc numai în regiunea genomului VHB dintre primeri. Nu este amplificat întregul genom VHB. Amplificarea selectivă a acidului nucleic țintă din probă se realizează prin utilizarea enzimei AmpErase (uracil-N-glicozilază) și trifosfat dezoxiuridină (dUTP). Enzima AmpErase recunoaște și catalizează distrugerea catenelor ADN care conțin deoxiuridine 26 și nu conțin dezoxitimidină. Dezoxiuridina nu este prezentă în ADN-ul natural, dar este întotdeauna prezentă în amplicon, datorită utilizării trifosfat-dezoxiuridinei ca unul dintre DNTP-uri din Master Mix-ul reactiv, de aceea, numai ampliconul
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
prin acțiunea enzimei recombinante termostabile Thermus thermophilus ADN polimeraza (Tth). Tth are dublă activitate: reverstranscriptazică și ADN polimerazică. Aceasta permite realizarea concomitentă a revers transcripției și amplificării PCR în cadrul aceleiași mixturi de reacție. Inițial este sintetizat după matrița ARN-VHC o catenă de ADN complementar. În cadrul reacției de PCR, acest ADN monocatenar inițial este transformat în ADN dublu catenar (reacție de amplificare liniară) după care se desfășoară ciclurile de PCR. Regiunea amplificată de la nivelul ARN-VHC este înalt conservată și este localizată la
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
A devenit afacere ca orice afacere. Ca să ai un trai cât de cât decent trebuie să slujești o viață la stat, mai recent la patron. Sau să te transformi din artist de frunte în personaj de publicitate la farmacia inimii Catena. A.B.Când mor, unde se duc poeții? Cei cu dare de mână, cei cu pile la împărăția breslei, la Bellu. Cei mai mulți, pe unde apucă sau la groapa comună; ca Bălcescu, Mozart, alții. Dar, dragă Angela, ce-ți veni cu
[Corola-publishinghouse/Journalistic/1456_a_2754]