3,310 matches
-
identifica toate diferențele prezente în regiunea analizată, pe când celelalte metode bazate pe analiza ADN pot scăpa polimorfismele de secvență care nu pot fi testate cu ajutorul primerilor și / sau al probelor. În cadrul procedurii de secvențiere a ADN se utilizează PCR în vederea amplificării genei de interes, iar ADN amplificat este secvențiat direct, fără o clonare prealabilă a ADN într-un vector potrivit. Cum majoritatea persoanelor sunt heterozigote la locii HLA, se pot alege primeri cu specificitate de secvență, spre a se realiza amplificarea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
amplificării genei de interes, iar ADN amplificat este secvențiat direct, fără o clonare prealabilă a ADN într-un vector potrivit. Cum majoritatea persoanelor sunt heterozigote la locii HLA, se pot alege primeri cu specificitate de secvență, spre a se realiza amplificarea unei singure alele la un locus HLA testat. Există alternativa amplificării unui amestec de alele și de a le secvenția, utilizându-se analiza pozițiilor nucleotidice polimorfice, spre a identifica alelele prezente. Secvențiatoare automate de ADN facilitează achiziția și analiza datelor
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
o clonare prealabilă a ADN într-un vector potrivit. Cum majoritatea persoanelor sunt heterozigote la locii HLA, se pot alege primeri cu specificitate de secvență, spre a se realiza amplificarea unei singure alele la un locus HLA testat. Există alternativa amplificării unui amestec de alele și de a le secvenția, utilizându-se analiza pozițiilor nucleotidice polimorfice, spre a identifica alelele prezente. Secvențiatoare automate de ADN facilitează achiziția și analiza datelor de secvențiere. Pentru stabilirea donorului potrivit unui anumit receptor se poate
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
nucleotide care sunt perfect complementare, nu însă și la acelea care prezintă nepotriviri, oricât de mici ar fi acestea. Modificarea condițiilor de realizare a reacției de reasociere poate să conducă la o primare nespecifică în cursul reacțiilor de sinteză din cadrul amplificării prin PCR și al secvențierii ADN, precum și la hibridizarea nespecifică a probelor (Gao și colab., 1990; Molkentin și colab., 1991; Allen și colab, 1994). Specificitatea poate fi însă monitorizată prin utilizarea unui ADN de referință care poartă alele HLA bine
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
bine definite. Un aspect deosebit de important în realizarea tipajului HLA bazat pe analiza ADN este legat de luarea tuturor precauțiilor pentru evitarea contaminării probelor cu ADN anterior amplificat. De asemenea, matrița ADN ce urmează a fi copiată în procesul de amplificare prin PCR trebuie să fie de cea mai bună calitate, altfel întreaga operație de amplificare poate să eșueze. Calitatea matriței trebuie verificată cu atenție, în cadrul protocoalelor SSP. Societatea Americană pentru Histocompatibilitate și Imunogenetică publică regulat protocoale la zi pentru testarea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
legat de luarea tuturor precauțiilor pentru evitarea contaminării probelor cu ADN anterior amplificat. De asemenea, matrița ADN ce urmează a fi copiată în procesul de amplificare prin PCR trebuie să fie de cea mai bună calitate, altfel întreaga operație de amplificare poate să eșueze. Calitatea matriței trebuie verificată cu atenție, în cadrul protocoalelor SSP. Societatea Americană pentru Histocompatibilitate și Imunogenetică publică regulat protocoale la zi pentru testarea HLA bazată pe analiza ADN. Nivelul de rezoluție obținut prin metodele de tipaj bazate pe
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
aplicarea metodologiei de tipare bazată pe analiza ADN să se bazeze pe o abordare în mai multe etape în procedura de identificare a alelelor HLA. În cadrul unei asemenea abordări este utilizat un set de primeri PCR pentru a se realiza amplificarea tuturor alelelor dintr-un anumit locus HLA. Utilizând un ansamblu de probe oligonucleotidice se pot obține rezultate de tipaj de rezoluție redusă sau intermediară. Pe baza acestor rezultate vor putea fi selectați primeri care asigură amplificarea doar a unui anumit
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
pentru a se realiza amplificarea tuturor alelelor dintr-un anumit locus HLA. Utilizând un ansamblu de probe oligonucleotidice se pot obține rezultate de tipaj de rezoluție redusă sau intermediară. Pe baza acestor rezultate vor putea fi selectați primeri care asigură amplificarea doar a unui anumit subset de alele sau doar a uneia dintre cele două alele existente în locusul genic HLA al unui anumit individ. Un al doilea set de oligonucleotide poate fi utilizat în identificarea alelei prezente în materialul testat
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
bogată în GC poate fi încorporată într-unul din primerii utilizați în reacția PCR pentru a modifica comportamentul la denaturare al fragmentului de interes și pentru a îmbunătăți separarea fragmentelor. Ulterior, identificarea și caracterizarea directă a mutațiilor se realizează prin amplificare specifică a alelei mutante cu ajutorul metodei ARMS-PCR sau prin metoda PCR-RFLP. Aceste metode indică exact mutația produsă în gena globinică, fiind și metode de verificare, absolut necesare într-un diagnostic molecular. Metoda ARMS-PCR, descrisa pentru prima dată de Newton și
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
exact mutația produsă în gena globinică, fiind și metode de verificare, absolut necesare într-un diagnostic molecular. Metoda ARMS-PCR, descrisa pentru prima dată de Newton și colaboratorii, este o modificare a metodei PCR care permite detecția mutațiilor punctiforme cunoscute prin amplificare cu specificitate alelică a ADN. Aceasta metodă nu implică utilizarea izotopilor radioactivi, iar genotiparea este posibilă prin simpla examinare a migrării produsului PCR specific prin electroforeză în gel de agaroză. Metoda constă în utilizarea a doi primeri care prezintă aceeași
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
examinare a migrării produsului PCR specific prin electroforeză în gel de agaroză. Metoda constă în utilizarea a doi primeri care prezintă aceeași secvență de nucleotide cu excepția nucleotidului terminal 3’, unul complementar cu alela normală, iar celălalt cu alela mutantă. Pentru amplificarea enzimatică se folosește Taq-polimeraza, enzimă care nu are activitate 3’→5’ exonucleazică, ceea ce implică necesitatea unei perfecte complementarități a primerului cu capătul 3’ al matriței ADN. Rezultatul se obține în urma electroforezei în gel de agaroză prin prezența sau absența produsului
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
se folosește Taq-polimeraza, enzimă care nu are activitate 3’→5’ exonucleazică, ceea ce implică necesitatea unei perfecte complementarități a primerului cu capătul 3’ al matriței ADN. Rezultatul se obține în urma electroforezei în gel de agaroză prin prezența sau absența produsului de amplificare respectiv. Polimorfismul situsului de restricție Hpa I lângă gena β-globinei și polimorfismul situsurilor de restricție Mae I, Dde I, Mst II, Rsa I din interiorul genei sunt utilizate în diagnosticul molecular al β-talasemiei. O metodă eficientă de ultimă oră, mult
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
bogată în GC poate fi încorporată într-unul dintre primerii utilizați în reacția PCR pentru a modifica comportamentul la denaturare al fragmentului de interes și pentru a îmbunătăți separarea fragmentelor. Ulterior, identificarea și caracterizarea directă a mutațiilor se realizează prin amplificare specifică a alelei mutante cu ajutorul metodei ARMS-PCR sau prin metoda PCR-RFLP. Aceste metode indică exact mutația produsă în gena globinică, fiind și metode de verificare, absolut necesare într-un diagnostic molecular. Metoda ARMS-PCR (fig. 16.30), descrisă pentru prima dată
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
gena globinică, fiind și metode de verificare, absolut necesare într-un diagnostic molecular. Metoda ARMS-PCR (fig. 16.30), descrisă pentru prima dată de Newton și colaboratorii (1989), este o modificare a metodei PCR care permite detecția mutațiilor punctiforme cunoscute prin amplificare cu specificitate alelică a ADN. Această metodă nu implică utilizarea izotopilor radioactivi, iar genotiparea este posibilă prin simpla examinare a migrării produsului PCR specific prin electroforeză în gel de agaroză. Metoda constă în utilizarea, în două reacții PCR separate, a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
utilizarea, în două reacții PCR separate, a doi primeri ARMS care prezintă aceeași secvență de nucleotide ca și matrița ADN, cu excepția nucleotidului terminal 3’. Un primer este complementar la capătul 3’ cu alela normală, iar celălalt - cu alela mutantă. Pentru amplificarea enzimatică se folosește Taq-polimeraza enzimă care nu are activitate 3’→5’ exonucleazică, ceea ce pentru realizarea polimerizării implică necesitatea unei perfecte complementarități a primerului cu capătul 3’ al matriței ADN. Rezultatul se obține în urma electroforezei în gel de agaroză, prin prezența
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
enzimă care nu are activitate 3’→5’ exonucleazică, ceea ce pentru realizarea polimerizării implică necesitatea unei perfecte complementarități a primerului cu capătul 3’ al matriței ADN. Rezultatul se obține în urma electroforezei în gel de agaroză, prin prezența sau absența produsului de amplificare respectiv. Polimorfismul situsului de restricție Hpa I lângă gena β-globinei și polimorfismul situsurilor de restricție Mae I, Dde I, Mst II, Rsa I din interiorul genei sunt utilizate în diagnosticul molecular al β-talasemiei. O metodă eficientă de ultimă oră, mult
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
a factorului IX de coagulare a sângelui de aproximativ 5% și o reducere proporțională a concentrației proteinei factorului IX de coagulare, ceea ce a determinat un fenotip de hemofilie B medie. Pe baza analizei Southern Blot și a utilizării tehnicii de amplificare PCR a ADN genomic, autorii au descoperit existența unei inserții mari de 1,5 kb la nivelul intronului 5 al genei factorului IX de coagulare la un mascul canin afectat de hemofilie B. Acest insert a fost reprezentat de transpozon
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
4. 8. Fie fracția , unde n ∈ N. Determinați valorile naturale ale numărului n în fiecare din situațiile: a) echiunitară: b) supraunitară: c) subunitară: 9. Aflați perechile de numere naturale , astfel încât fracțiile următoare să fie echiunitare: a) b) 15. Fracții echivalente. Amplificarea și simplificarea fracțiilor. 15.1 Fracții echivalente. DE REȚINUT: * Două fracții și sunt echivalente, ceea ce se scrie , dacă . * Oricare ar fi fracțiile și , dacă , atunci și . * (Proprietatea de tranzitivitate a fracțiilor): Dacă și , atunci , oricare ar fi fracțiile și . Exerciții
Matematică. Caiet de teme pentru clasa a V-a by Oana Iavorenciuc () [Corola-publishinghouse/Science/997_a_2505]
-
cu fracția care au numitorul mai mic decât 39. 4. Determinați x astfel încât următoarele perechi de fracții să fie echivalente: a) și ; b) și ; c) și ; d) și ; 5. Determinați n ∈ N pentru care fracțiile și sunt echivalente. 15.2 Amplificarea și simplificarea fracțiilor. DE REȚINUT: * A amplifica o fracție înseamnă a înmulți numărătorul și numitorul ei cu același număr natural nenul. * Fracția obținută prin amplificare este fracție echivalentă cu fracția dată. * A simplifica o fracție înseamnă a împărți numărătorul și
Matematică. Caiet de teme pentru clasa a V-a by Oana Iavorenciuc () [Corola-publishinghouse/Science/997_a_2505]
-
și ; d) și ; 5. Determinați n ∈ N pentru care fracțiile și sunt echivalente. 15.2 Amplificarea și simplificarea fracțiilor. DE REȚINUT: * A amplifica o fracție înseamnă a înmulți numărătorul și numitorul ei cu același număr natural nenul. * Fracția obținută prin amplificare este fracție echivalentă cu fracția dată. * A simplifica o fracție înseamnă a împărți numărătorul și numitorul ei printr-un număr care este un divizor comun al lor. * Fracția obținută prin simplificare este fracție echivalentă cu fracția dată. * O fracție care
Matematică. Caiet de teme pentru clasa a V-a by Oana Iavorenciuc () [Corola-publishinghouse/Science/997_a_2505]
-
evidență activitățile de înalt nivel artistic ale corului comunei și ale grupului vocal-folcloric conduse de prof. Neculai Guragata și de înv. Costache Jacotă. Baza materială a fost asigurată prin existența unui televizor, a unui aparat de radio, o stație de amplificare, aparat de proiecție pentru ecran lat, scaune individuale, mese etc. La fel și celelalte cămine culturale din comună dispuneau de o bază materială corespunzătoare pentru desfășurarea unor activități culturale diverse. Până în 1989, în sala Căminului cultural Hudești au fost prezentate
Monografia comunei Hudeşti. Judeţul Botoşani by Gheorghe Apătăchioae () [Corola-publishinghouse/Science/91870_a_93216]
-
transmită informații și cunoștințe unui destinatar generic") Dospinescu, 1998, p. 206. Aici, am optat pentru sintagma generică discurs didactic/educațional. 44 Pentru comunicarea didactică, vezi și Hobjilă, 2008b. 45 Cf., de exemplu, Dospinescu, 1998, p. 92. 46 Cf., pentru tehnica amplificării și a simplificării în discursul didactic, Dospinescu, 1998, p. 135. 47 Cf. Meyerhold, apud Hubert, 2011, p. 277. 48 Cf. Hubert, 2011, p. 277: "Regizorul acestui "teatru al liniei drepte" își comunică reflecțiile pe care i le inspiră opera autorului
Comunicare: discurs, teatru. Delimitări teoretice şi deschideri aplicative by Angelica Hobjilă () [Corola-publishinghouse/Science/921_a_2429]
-
macrofagelor, se eliberează și interleukina I, care va atrage participarea limfocitelor T din circulația sanguina. Ele vor "recunoaște" asocierea formată din antigenele micobacteriene și proteinele complexului major de histocompatibilitate și vor elibera interleukina II, ceea ce va antrena activarea macrofagelor, cu amplificarea capacităților distructive ale acestora pentru bacilii Koch. Această activare macrofagică este realizată mai ales cu contribuția fracțiunii limfocitare CD4. La locul unde s-a produs "lupta" dintre macrofage și bacili se vor acumula macrofagele distruse și bacilii vii sau morți
Curs de pneumoftiziologie by Antigona Trofor () [Corola-publishinghouse/Science/940_a_2448]
-
București” Editura Academiei Române, 2011, am delimitat investigarea noastră de atunci, doar la instituțiile sanitare care au avut de la început profilul preponderent și organizarea particulară în chirurgia de urgență. După anul 1990, sistemul asistenței chirurgicale de urgență a cunoscut o anumită amplificare și perfecționare. Le vom detalia în partea a doua a acestei lucrări. Este vorba de realizarea și asigurarea mai complexă și mai eficientă a primului ajutor la locul accidentului și a transportului de acolo la spitalele de adulți sau copii
Asistența urgențelor chirurgicale din București by Mircea Beuran () [Corola-publishinghouse/Science/91916_a_92411]
-
arbitrare (mai ales legate de liberarea înainte de termen); 4. generalizarea ambiguităților (în ce privește programul zilnic, permanent modificat); 5. lansarea zvonurilor (despre gravele deteriorări ale vieții care vor urma curînd); 6. pregătirea din timp a cadrelor de rezervă; 7. utilizarea presei pentru amplificarea grevei la întreg sistemul carceral; 8. stimularea libertăților de comunicare și de asociere (dezvoltarea schimburilor pe "caleașcă" și mărirea orelor de plimbare); 9. identificarea potențialelor victime și stimularea lor să declanșeze acțiunile greviste; 10. intervenția în forță pentru menținerea controlului
Mediul penitenciar românesc by BRUNO ŞTEFAN () [Corola-publishinghouse/Science/998_a_2506]