190,296 matches
-
o mare parte din acestea nu sunt respirabile. În perioada întregului studiu este necesară menținerea concentrațiilor administrate zilnic la valori constante, pe cât este posibil.. Pe durata generării aerosolilor trebuie efectuată analiza granulometrică pentru a determina stabilitatea concentrației acestora. În timpul expunerii, analiza trebuie efectuată suficient de des pentru a determina măsura în care este constantă distribuția particulelor la care au fost expuse animalele. Durata testului Durata testului de potențial cancerigen acoperă o perioadă mare de timp în raport cu viața animalelor de experiment. În
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
trebuie menținută la 22 ± 20C iar umiditatea din incintă la 30 - 70%, exceptând cazurile în care se folosește apă ca mediu de suspensie pentru substanță testată în atmosfera incintei (aerosoli). De preferință, ambii parametri trebuie să fie monitorizați continuu; (iv) analiza granulometrică a particulelor: în atmosfera incintei unde există aerosoli lichizi sau solizi, trebuie să fie determinată distribuția granulometrică a particulelor. Particulele din componența aerosolilor trebuie să aibă o dimensiune compatibilă cu respirarea lor de către animalele testate. Probele din atmosfera incintei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
reflecte, în termeni gravimetrici, toate suspensiile de tip aerosol, chiar dacă o mare parte din acestea nu sunt respirabile. Pe durata întregului studiu este necesară menținerea concentrațiilor administrate zilnic la valori constante, pe cât este posibil.. Pe durata generării aerosolilor trebuie efectuată analiza granulometrică pentru a determina stabilitatea concentrației acestora. În timpul expunerii, analiza trebuie efectuată suficient de des pentru a determina măsura în care este constantă distribuția particulelor la care au fost expuse animalele. Durata testului Durata segmentului de test privitor la potențialul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
o mare parte din acestea nu sunt respirabile. Pe durata întregului studiu este necesară menținerea concentrațiilor administrate zilnic la valori constante, pe cât este posibil.. Pe durata generării aerosolilor trebuie efectuată analiza granulometrică pentru a determina stabilitatea concentrației acestora. În timpul expunerii, analiza trebuie efectuată suficient de des pentru a determina măsura în care este constantă distribuția particulelor la care au fost expuse animalele. Durata testului Durata segmentului de test privitor la potențialul cancerigen acoperă o perioadă mare de timp în raport cu viața animalelor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
caz. Condiții de incubație Cutiile se incubează timp de 4 - 7 zile, la o temperatură de 28 - 30șC, la întuneric. Frecvențele mutațiilor spontane Se folosesc subculturi celulare cu o frecvență a mutațiilor spontane în limitele normale admise. Numărul replicatelor Pentru analiza prototrofilor produși prin mutageneză și a viabilității celulare se utilizează cel puțin trei cutii pentru fiecare concentrație. În cazul experimentelor în care se utilizează marcatori cum ar fi hom 3-10 cu o rată scăzută a mutațiilor, numărul cutiilor trebuie să
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
zile înaintea numărării, pentru a permite dezvoltarea de colonii pigmentate corespunzătoare. Frecvențele recombinării mitotice spontane Se utilizează subculturi celulare cu o frecvență a mutațiilor spontane în limitele normale admise. Numărul replicatelor Se utilizează cel puțin trei cutii pe concentrație pentru analiza prototrofilor produși prin conversia mitotică genică și pentru analiza viabilității. În cazul analizei homozigotismului recesiv produs prin încrucișarea mitotică, numărul cutiilor trebuie să crească, astfel încât să furnizeze un număr corespunzător de colonii. Mod de operare Tratamentul sușelor de Saccharomices cerevisiae
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
pigmentate corespunzătoare. Frecvențele recombinării mitotice spontane Se utilizează subculturi celulare cu o frecvență a mutațiilor spontane în limitele normale admise. Numărul replicatelor Se utilizează cel puțin trei cutii pe concentrație pentru analiza prototrofilor produși prin conversia mitotică genică și pentru analiza viabilității. În cazul analizei homozigotismului recesiv produs prin încrucișarea mitotică, numărul cutiilor trebuie să crească, astfel încât să furnizeze un număr corespunzător de colonii. Mod de operare Tratamentul sușelor de Saccharomices cerevisiae se realizează de obicei prin procedeul de testare în
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
mitotice spontane Se utilizează subculturi celulare cu o frecvență a mutațiilor spontane în limitele normale admise. Numărul replicatelor Se utilizează cel puțin trei cutii pe concentrație pentru analiza prototrofilor produși prin conversia mitotică genică și pentru analiza viabilității. În cazul analizei homozigotismului recesiv produs prin încrucișarea mitotică, numărul cutiilor trebuie să crească, astfel încât să furnizeze un număr corespunzător de colonii. Mod de operare Tratamentul sușelor de Saccharomices cerevisiae se realizează de obicei prin procedeul de testare în lichid, care presupune utilizarea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
extras din celule și se determină conținutul total de ADN și proporția de 3H-TdR încorporată. Trebuie menționat faptul că dacă în tehnicile descrise mai sus se utilizează limfocite umane, nu este necesară suprimarea replicării semiconservative a ADN pe culturile nestimulate. Analiză Determinările autoradiografice Pentru determinarea USD în celulele din cultură, nucleele de fază S nu se numără. Trebuie numărate minimum 50 celule per concentrație. Lamele trebuie etichetate înainte de numărare. De pe fiecare lamă se numără mai multe câmpuri distribuite aleator, alese la
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
este prelevată și prelucrată separat în vederea obținerii preparatelor cromozomiale. Prepararea și colorarea cromozomilor Preparatele cromozomiale se obțin prin tehnici citogenetice standard. Colorarea lamelor pentru evidențierea SCE se poate face prin mai multe tehnici (de exemplu, prin fluorescență plus metoda Giemsa). Analiza Numărul de celule analizate depinde de frecvența spontană a SCE la martori. De obicei, cel puțin 25 de metafaze bine exprimate pe cultură sunt analizate în termeni de SCE. Lamele trebuie etichetate înainte de analiză. La limfocitele umane se analizează numai
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
exemplu, prin fluorescență plus metoda Giemsa). Analiza Numărul de celule analizate depinde de frecvența spontană a SCE la martori. De obicei, cel puțin 25 de metafaze bine exprimate pe cultură sunt analizate în termeni de SCE. Lamele trebuie etichetate înainte de analiză. La limfocitele umane se analizează numai celulele care conțin 46 de centromeri. Pe liniile celulare bine caracterizate se analizează numai metafazele care conțin 2 centromeri din numărul modal. Trebuie precizat dacă marcarea joncțiunii centromerice este sau nu inventariată ca SCE
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Acest test de citogeneză in vivo detectează aberațiile cromozomiale structurale ale spermatogoniilor. Testul constă în analiza mitozei spermatogoniei pentru a decela tipul de aberație cromatidiană și cromozomială. Metoda utilizează preparate din mamifere care au tratate cu substanța chimică de testare administrată pe căi specifice și sacrificate la diferite intervale de timp. Animalele sunt tratate în continuare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
inhibitori ai fusului mitotic cum ar fi colchicina pentru a opri celulele în stadiul de metafază a mitozei (c-metafază), apoi sunt sacrificate. Se realizează preparate cromozomiale pornind de la celule uscate în aer și apoi colorate, care se examinează microscopic. Analiza spermatocitelor în stadiul diachineză-metafaza I permite obținerea unor informații suplimentare referitoare la translocarea multivalentă a spermatogoniei, în urma tratamentului. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire Substanțele chimice testate se dizolvă în soluție izotonică salină
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
24 de ore după tratament. Alternativ, poate fi folosită o schemă de tratament repetat, animalele fiind sacrificate la 24 de ore după ultima administrare. Se pot folosi recoltări suplimentare efectuate într-un interval de 6 - 24 ore. Pregătirea testiculelor Pentru analiza mitozelor spermatogoniilor, animalele sunt injectate intraperitoneal cu o doză adecvată de inhibitor al fusului mitotic (ex. colchicina). Apoi animalele sunt sacrificate la intervale de timp adecvate: pentru șoareci, intervalul variază între trei și cinci ore, în timp ce pentru hamsterii chinezești pot
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Se folosește tehnica de uscare la aer. Procedura standard poate fi modificată în funcție de specia folosită. Suspensia de celule obținută se tratează cu soluție hipotonică apoi se fixează. Celulele se așează pe lame și se colorează. Lamele numerotate se examinează microscopic. Analiză Pentru stabilirea aberațiilor cromozomiale structurale, trebuie analizate cel puțin o sută de metafaze cu număr complet de centromeri. Pentru a se evidenția un posibil efect citotoxic, se stabilește raportul dintre primele mitoze spermatogonice și a doua metafază meiotică, care poate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
de sarcină, considerând ziua 1 ziua în care se observă pentru prima dată dopul vaginal. Aceste zile corespund zilelor 7,25, 8,25 și 9,25 de la concepție. Tratamente succesive se pot efectua și în alte zile decât cele menționate. Analiză În intervalul cuprins între trei și patru săptămâni de la fătare, descendenții se codează și se examinează pentru observarea eventualelor pete apărute. Se disting trei categorii de pete: (a) pete albe de până la 5 mm pe linia medio-ventrală, despre care se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
sunt translocații reciproce, iar dacă în experiment sunt incluse și femele din generația F1, la acestea se detectează pierderea cromozomului X. Purtătorii de translocații și femelele XO prezintă o fertilitate scăzută, care este folosită la selecția descendenților F1 pentru efectuarea analizelor citogenetice. Sterilitatea completă este determinată de numeroase tipuri de translocații (X-autozom și tipul c-t). Translocarea se observă citogenetic în timpul meiozei celulare în diachineză-metafaza I la masculi, fie la masculi F1, fie la descendenți masculi ai unei femele F1. Femelele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
înregistrează data, numărul puilor și sexul acestora. Toți puii masculi sunt înțărcați, iar femelele pui sunt eliminate, exceptând cazurile în care sunt incluse și ele în experiment. Testarea translocațiilor heterozigote Se utilizează una din cele două metode posibile: ― testarea, prin analize citogenetice, a fertilității generației F1 și a posibilității apariției purtătorilor; ― analiza citogenetică a tuturor descendenților masculi F1 înaintea selecției prin testarea fertilității. (a) Testarea fertilității Reducerea fertilității fiecărui mascul F1 poate fi stabilită prin observații asupra numărului puilor și/sau
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
înțărcați, iar femelele pui sunt eliminate, exceptând cazurile în care sunt incluse și ele în experiment. Testarea translocațiilor heterozigote Se utilizează una din cele două metode posibile: ― testarea, prin analize citogenetice, a fertilității generației F1 și a posibilității apariției purtătorilor; ― analiza citogenetică a tuturor descendenților masculi F1 înaintea selecției prin testarea fertilității. (a) Testarea fertilității Reducerea fertilității fiecărui mascul F1 poate fi stabilită prin observații asupra numărului puilor și/sau prin analizarea conținutului uterin la femelele gestante. Criteriile de determinare a
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
se înregistrează numărul și sexul descendenților F2, care apoi sunt eliminați. Dacă se testează și generația de femele F1, descendenții F2 din fătările cu număr mic de pui păstrați pentru testări suplimentare. Toate femelele purtătoare de translocații sunt verificate prin analiza citogenetică a unei translocări la oricare din descendenții lor masculi. Femelele XO se recunosc prin schimbarea raportului între sexe masculi/femele la descendenții lor, de la 1:1 la 1:2. Într-o acțiune ulterioară, exemplarele normale din generația F1 se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
contrar urmărindu-se o a doua sau o a treia serie F2. Animalele F1 care nu pot fi clasificate ca normale după observațiile efectuate pe mai mult de trei serii de pui fătați de trei femele F1, sunt testate prin analiza conținutului uterin al femelelor gestante sau sunt supuse direct analizelor citogenetice. Examinarea conținutului uterin: Reducerea numărului de pui la o fătare în cazul purtătorilor de translocații se datorează morții embrionilor, astfel încât un număr mare de implanturi moarte este un indiciul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
serie F2. Animalele F1 care nu pot fi clasificate ca normale după observațiile efectuate pe mai mult de trei serii de pui fătați de trei femele F1, sunt testate prin analiza conținutului uterin al femelelor gestante sau sunt supuse direct analizelor citogenetice. Examinarea conținutului uterin: Reducerea numărului de pui la o fătare în cazul purtătorilor de translocații se datorează morții embrionilor, astfel încât un număr mare de implanturi moarte este un indiciul al prezenței translocațiilor la animalele testate. Masculii F1 testați sunt
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
XO. Prezența unui cromozom neobișnuit de lung și/sau scurt în fiecare a zecea celulă indică un mascul cu sterilitate prin translocație (tip c-t). Anumite translocații X-autozomale care determină sterilitatea masculină pot fi identificate numai printr-o serie de analize ale cromozomilor mitotici. Prezența a 39 de cromozomi în toate cele 10 mitoze dovedește starea XO a unei femele. 2. DATE Datele sunt prezentate sub formă de tabele. Pentru fiecare perioadă de împerechere, se înregistrează raportul numeric între sexe și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
în cazul purtătorilor F1 de translocații. Pentru examinarea conținutului uterin se specifică numărul mediu al implanturilor vii și moarte în sarcini normale și numărul individual al implanturilor vii și moarte ale fiecărei sarcini a unei purtătoare F1 de translocații. Pentru analiza citogenetică a diachineză-metafazei I, se înregistrează numărul tipurilor de configurații multivalente și numărul total de celule pentru fiecare purtător de translocații. Pentru fiecare exemplar F1 steril se raportează numărul total de împerecheri și durata perioadei de împerechere. Se fac analize
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
analiza citogenetică a diachineză-metafazei I, se înregistrează numărul tipurilor de configurații multivalente și numărul total de celule pentru fiecare purtător de translocații. Pentru fiecare exemplar F1 steril se raportează numărul total de împerecheri și durata perioadei de împerechere. Se fac analize citogenetice detaliate și se cântăresc testiculele. Pentru femelele XO se specifică media numărului de pui dintr-o serie, raportul numeric dintre sexe la puii F2 și rezultatele analizelor citogenetice. Dacă posibilii purtători de translocații din F1 sunt selectați în teste
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]