189,597 matches
-
reacțiile (2) și (3). 1.1. Metoda uzuală Acidul lactic, separat prin trecerea printr-o coloană cu rășină de schimb ionic, este oxidat la etanal și determinat prin colorimetrie după reacția cu nitroprusiat de sodiu și piperidină. 2. METODA DE REFERINȚĂ 2.1. Reactivi 2.1.1. Soluție tampon, pH=10 (glicilglicină 0,6 mol/l; L-glutamat 0,1 mol/l): Se dizolvă 4,75 g de glicilglicină și 0,88 g de acid L-glutamic în aproximativ 50 ml de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
o temperatură între 20 și 25°C înainte de a trece la determinare. Cu spectrofotometrul reglat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuve cu drum optic de 1 cm, cu aerul ca standard de absorbție zero (referință) (fără cuvă în drumul optic) sau cu apă ca standard. Se pun următoarele în cuve cu drum optic de 1 cm: Cuvă de referință (ml) Cuvă probă (ml) Soluția 2.1.1 1,00 1,00 Soluția 2.1.2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
absorbția folosind cuve cu drum optic de 1 cm, cu aerul ca standard de absorbție zero (referință) (fără cuvă în drumul optic) sau cu apă ca standard. Se pun următoarele în cuve cu drum optic de 1 cm: Cuvă de referință (ml) Cuvă probă (ml) Soluția 2.1.1 1,00 1,00 Soluția 2.1.2 0,20 0,20 Apă bidistilată 1,00 0,80 Suspensia 2.1.3 0,02 0,02 Proba de măsurat - 0,20 Se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
Suspensia 2.1.3 0,02 0,02 Proba de măsurat - 0,20 Se amestecă folosind un agitator de sticlă sau o baghetă din material sintetic cu un capăt turtit; după cinci minute se măsoară absorbția soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A1). Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4 și 0,05 ml de soluție de la punctul 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se determină puterea de absorbție
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4 și 0,05 ml de soluție de la punctul 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se determină puterea de absorbție a soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) dintre absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a acidului D-
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
punctul 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se determină puterea de absorbție a soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) dintre absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a acidului D-lactic Determinările acidului L-lactic și acidului D-lactic pot fi efectuate independent aplicând procedura pentru
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
pentru determinarea acidului lactic total până la determinarea A1 și continuând apoi după cum urmează: Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 20 minute) și se determină absorbțiile din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se adaugă 0,05 ml de soluție 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3). Se calculează diferențele (A2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
minute) și se determină absorbțiile din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se adaugă 0,05 ml de soluție 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3). Se calculează diferențele (A2 - A1) pentru acid L-lactic și (A3 - A2) pentru acid D-lactic între absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența între acestea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3). Se calculează diferențele (A2 - A1) pentru acid L-lactic și (A3 - A2) pentru acid D-lactic între absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența între acestea: Notă: Timpul necesar pentru finalizarea acțiunii enzimei poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus este dată numai orientativ și se recomandă determinarea ei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
în cele două cuve să fie egale. 5. METODA DE LUCRU Cu spectrofotometrul ajustat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuvele cu o lungime optică de 1 cm, cu aer pentru absorbția standard zero (de referință) sau cu apă, ca standard. În cuvele cu un drum optic de 1 cm se pun următoarele: Celula de referință (ml) Celula probei (ml) Soluția 2.1 1,00 1,00 Soluția 2.2 0,20 0,20 Apă bidistilată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
nm, se determină absorbția folosind cuvele cu o lungime optică de 1 cm, cu aer pentru absorbția standard zero (de referință) sau cu apă, ca standard. În cuvele cu un drum optic de 1 cm se pun următoarele: Celula de referință (ml) Celula probei (ml) Soluția 2.1 1,00 1,00 Soluția 2.2 0,20 0,20 Apă bidistilată 1,00 0,90 Suspensia 2.3 0,01 0,01 Proba de măsurat - 0,10 Se amestecă: după trei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
00 1,00 Soluția 2.2 0,20 0,20 Apă bidistilată 1,00 0,90 Suspensia 2.3 0,01 0,01 Proba de măsurat - 0,10 Se amestecă: după trei minute se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei de măsurat (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,01 ml 0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
referință și a probei de măsurat (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,01 ml 0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) în absorbțiile soluțiilor cuvei de referință și a probei ΔAR și ΔAS. La sfârșit, se calculează diferența acestora ΔA = ΔAs - ΔAR Notă: timpul necesar pentru realizarea activității enzimatice poate varia de la
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) în absorbțiile soluțiilor cuvei de referință și a probei ΔAR și ΔAS. La sfârșit, se calculează diferența acestora ΔA = ΔAs - ΔAR Notă: timpul necesar pentru realizarea activității enzimatice poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus are caracter orientativ și se recomandă să
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
aparatului de distilare cu aburi 10 ml de vin și se adaugă 1-2 g de acid tartric (punctul 2.1.1). Se colectează 250 ml de distilat. 2.3.2. Pregătirea curbei de calibrare Se prepară, prin diluarea soluției de referință (punctul 2.1.3) patru soluții diluate de referință, cu 0,5, 1,0, 2,5 și 5 mg acid sorbic la litru. Se determină absorbțiile cu spectrofotometrul la 256 nm, folosindu-se apa distilată ca blanc. Se obține o
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
și se adaugă 1-2 g de acid tartric (punctul 2.1.1). Se colectează 250 ml de distilat. 2.3.2. Pregătirea curbei de calibrare Se prepară, prin diluarea soluției de referință (punctul 2.1.3) patru soluții diluate de referință, cu 0,5, 1,0, 2,5 și 5 mg acid sorbic la litru. Se determină absorbțiile cu spectrofotometrul la 256 nm, folosindu-se apa distilată ca blanc. Se obține o curbă reprezentându-se variația absorbției în funcție de concentrație. Variația este
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
ale tubului, se adaugă în conținut 10 ml de eter etilic (punctul 3.1.1). Se extrage acidul sorbic în faza organică prin scuturarea tubului timp de 5 minute. Se lasă să se așeze. 3.3.2. Pregătirea soluției de referință Se selectează un vin pentru care cromatograma extractului cu eter nu arată nici un vârf corespunzător eluției acidului sorbic. Vinul este supraîncărcat cu acid sorbic cu o concentrație de 100 mg/l. Se tratează 20 de ml din proba astfel preparată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
etalonului. Se măsoară înălțimea (sau suprafața) picurilor înregistrate. 3.4. Exprimarea rezultatelor 3.4.1. Calculare Concentrația acidului sorbic în vinul analizat, exprimată în mg pe litru, este dată de relația: unde: H = înălțimea picului acidului sorbic în soluția de referință u = înălțimea picului acidului sorbic în proba pentru analiză l = înălțimea picului standardului intern în soluția de referință i = înălțimea picului standardului intern în proba pentru analiză Notă: Concentrația acidului sorbic poate fi determinată, în același mod, prin măsurarea suprafețelor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
sorbic în vinul analizat, exprimată în mg pe litru, este dată de relația: unde: H = înălțimea picului acidului sorbic în soluția de referință u = înălțimea picului acidului sorbic în proba pentru analiză l = înălțimea picului standardului intern în soluția de referință i = înălțimea picului standardului intern în proba pentru analiză Notă: Concentrația acidului sorbic poate fi determinată, în același mod, prin măsurarea suprafețelor aflate sub picurile respective. 4. IDENTIFICAREA URMELOR DE ACID SORBIC PRIN CROMATOGRAFIA ÎN STRAT SUBȚIRE 4.1. Reactivi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
ACID SORBIC PRIN CROMATOGRAFIA ÎN STRAT SUBȚIRE 4.1. Reactivi 4.1.1. Eter etilic (C2H5)2O. 4.1.2. Soluție apoasă de acid sulfuric H2SO4 (20 = 1,84g/ml) diluat 1:3 (v/v). 4.1.3. Soluție de referință de acid sorbic în amestec de etanol - apă de aproximativ 10% vol. conținând 20 mg/l. 4.1.4. Faza mobilă: acizi hexani, pentani și acid acetic (20:20:3) (C6H14/C5H12/CH3COOH, 20 = 1,05 g/ml). 4.2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
de vin, se adaugă 1 ml acid sulfuric diluat (punctul 4.1.2.) și 5 ml de eter etilic (punctul 4.1.2) Se amestecă prin rotirea tubului. Se lasă să se așeze. 4.3.2. Pregătirea soluțiilor diluate de referință Se prepară cinci soluții diluate de referință din soluția în 4.1.3. conținând 2, 4, 6, 8 și 10 mg acid sorbic pe litru. 4.3.3. Cromatografia Folosind o microsiringă sau micropipetă, se depun 5 l din faza
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
sulfuric diluat (punctul 4.1.2.) și 5 ml de eter etilic (punctul 4.1.2) Se amestecă prin rotirea tubului. Se lasă să se așeze. 4.3.2. Pregătirea soluțiilor diluate de referință Se prepară cinci soluții diluate de referință din soluția în 4.1.3. conținând 2, 4, 6, 8 și 10 mg acid sorbic pe litru. 4.3.3. Cromatografia Folosind o microsiringă sau micropipetă, se depun 5 l din faza extrasă cu eter obținută la punctul 4
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
8 și 10 mg acid sorbic pe litru. 4.3.3. Cromatografia Folosind o microsiringă sau micropipetă, se depun 5 l din faza extrasă cu eter obținută la punctul 4.3.1 și 5 l din fiecare din soluțiile de referință diluate (punctul 4.3.2) la 2 cm de marginea inferioară a plăcii și 2 cm distanță una față de alta. Se pune faza mobilă (punctul 4.1.4) în cuva pentru cromatografie la o înălțime de 0,5 cm și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
examinează cromatograma sub o lampă cu ultraviolete de 254 nm. Spoturile indicând prezența acidului sorbic apar violet închis pe fondul galben fluorescent al plăcii. 4.4. Exprimarea rezultatelor O comparație a intensităților punctelor produse de proba analizată și soluțiile de referință permit evaluarea semicantitativă a concentrației acidului sorbic între 2 și 10 mg pe litru. O concentrație de 1 mg/l poate fi determinată cu depunerea a 10 µl din soluția probă analizată. Concentrații de peste 10 mg pe litru pot fi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
depunerea a mai puțin de 5 l din soluție analizată (măsurată cu ajutorul unei microsiringi.) 23. ACIDUL L-ASCORBIC 1. PRINCIPIUL METODELOR Metodele propuse permit determinarea acidului L-ascorbic și a acidului dehidroascorbic din vinuri și musturi. 1.1. Metoda de referință (fluorimetrie) Acidul L-ascorbic este oxidat pe carbon activ la acid dehidroascorbic. Acesta din urmă formează un compus fluorescent prin reacția cu ortofenildiamina (OPDA). Un test de control în prezența acidului boric permite determinarea fluorescenței parazite (prin formarea unui complex
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]