9,341 matches
-
gelurile hidrofile într-o poziție foarte favorabilă printre suporturile destinate imobilizării enzimelor. Printre cele sintetice hidrofile, poli(acrilamida) reticulată ocupă cea mai importantă poziție. Polizaharidele și unii dintre derivații lor domină domeniul de suporturi macromoleculare naturale pentru imobilizarea enzimelor. Stabilizarea enzimelor prin procesul de imobilizare a deschis drumul spre elaborarea de biotehnologii de mare eficiență economică. Una din cele mai promițătoare căi de stabilizare a enzimelor este imobilizarea pe suporturi sintetice de tipul schimbătorilor de ioni. Avantajele tehnologice ale suporturilor sintetice
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
și unii dintre derivații lor domină domeniul de suporturi macromoleculare naturale pentru imobilizarea enzimelor. Stabilizarea enzimelor prin procesul de imobilizare a deschis drumul spre elaborarea de biotehnologii de mare eficiență economică. Una din cele mai promițătoare căi de stabilizare a enzimelor este imobilizarea pe suporturi sintetice de tipul schimbătorilor de ioni. Avantajele tehnologice ale suporturilor sintetice de tipul schimbătorilor de ioni deschid noi posibilități aplicării lor eficiente în procesul de stabilizare a biocatalizatorilor [7-14]. Pentru ca un schimbător de ioni să fie
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
biocatalizatorilor [7-14]. Pentru ca un schimbător de ioni să fie bun pentru aplicații în biotehnologie, trebuie să îndeplinească următoarele cerințe: să aibă o structură tridimensională hidrofilă flexibilă; să aibă grupări funcționale capabile să realizeze legături ionice sau de altă natură cu enzima ce urmează a fi imobilizată; să aibă o structură expandată care să permită difuzia enzimei la centrul de imobilizare al schimbătorului de ioni și difuzia substratului supus reacției biochimice în conjugatul schimbător de ion-enzimă. Reușita procesului de imobilizare a enzimelor
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
să îndeplinească următoarele cerințe: să aibă o structură tridimensională hidrofilă flexibilă; să aibă grupări funcționale capabile să realizeze legături ionice sau de altă natură cu enzima ce urmează a fi imobilizată; să aibă o structură expandată care să permită difuzia enzimei la centrul de imobilizare al schimbătorului de ioni și difuzia substratului supus reacției biochimice în conjugatul schimbător de ion-enzimă. Reușita procesului de imobilizare a enzimelor pe schimbătorul de ioni depinde, in principal de următoarele caracteristici ale suportului [15]: porozitatea (permanentă
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
enzima ce urmează a fi imobilizată; să aibă o structură expandată care să permită difuzia enzimei la centrul de imobilizare al schimbătorului de ioni și difuzia substratului supus reacției biochimice în conjugatul schimbător de ion-enzimă. Reușita procesului de imobilizare a enzimelor pe schimbătorul de ioni depinde, in principal de următoarele caracteristici ale suportului [15]: porozitatea (permanentă sau de umflare); existența grupărilor ionice sau ionogene capabile de interacțiuni electrostatice cu moleculele enzimelor; numărul de atomi interpuși între catena macromoleculară a suportului și
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
în conjugatul schimbător de ion-enzimă. Reușita procesului de imobilizare a enzimelor pe schimbătorul de ioni depinde, in principal de următoarele caracteristici ale suportului [15]: porozitatea (permanentă sau de umflare); existența grupărilor ionice sau ionogene capabile de interacțiuni electrostatice cu moleculele enzimelor; numărul de atomi interpuși între catena macromoleculară a suportului și gruparea funcțională; raportul între partea hidrofilă și hidrofobă a schimbătorului. Toți acești parametri trebuie luați în considerare și corelați cu masa moleculară a proteinei și structura sa chimică. Limitarea procesului
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
între partea hidrofilă și hidrofobă a schimbătorului. Toți acești parametri trebuie luați în considerare și corelați cu masa moleculară a proteinei și structura sa chimică. Limitarea procesului difuzional datorată atât porozității mici a schimbătorului cât și masei moleculare mari a enzimelor poate fi parțial sau total evitată prin introducerea în acesta a grupărilor funcționale, ce sunt mai îndepărtate de catena principală . Studiile cinetice pe preparate de enzime imobilizate au dovedit că acestea au o activitate și o stabilitate bună în procesul
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
procesului difuzional datorată atât porozității mici a schimbătorului cât și masei moleculare mari a enzimelor poate fi parțial sau total evitată prin introducerea în acesta a grupărilor funcționale, ce sunt mai îndepărtate de catena principală . Studiile cinetice pe preparate de enzime imobilizate au dovedit că acestea au o activitate și o stabilitate bună în procesul de utilizare ca biocatalizatori și au fost intens semnalate în literatură [16,17]. După cum se vede din Figura 2, enzimele legate de suport se realizează prin
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
principală . Studiile cinetice pe preparate de enzime imobilizate au dovedit că acestea au o activitate și o stabilitate bună în procesul de utilizare ca biocatalizatori și au fost intens semnalate în literatură [16,17]. După cum se vede din Figura 2, enzimele legate de suport se realizează prin cele trei metode (adsorbție fizică, legare ionică și legare covalentă) unde intervin legături și interacțiuni diferite: legături covalente; legături ionice ( interacțiuni ionice); legături de hidrogen; interacțiuni hidrofobe; interacțiuni Van der Waals. Obișnuit în procesul
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
hidrofobe; interacțiuni Van der Waals. Obișnuit în procesul de imobilizare concură mai multe tipuri de legături și interacțiuni ceea ce face ca acest proces să fie mai eficient. Imobilizarea pe aceste suporturi datează de multă vreme, fiind foarte mult studiată. Când enzima este imobilizată în acest fel, trebuie avut grijă în selectarea suportului, precum și în tehnica de legare. Cantitatea de enzimă reținută de suport precum și activitatea după imobilizare depinde foarte mult de natura suportului Căi de activare a suporturilor Pentru introducerea grupelor
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
face ca acest proces să fie mai eficient. Imobilizarea pe aceste suporturi datează de multă vreme, fiind foarte mult studiată. Când enzima este imobilizată în acest fel, trebuie avut grijă în selectarea suportului, precum și în tehnica de legare. Cantitatea de enzimă reținută de suport precum și activitatea după imobilizare depinde foarte mult de natura suportului Căi de activare a suporturilor Pentru introducerea grupelor funcționale capabile să lege enzimele sunt folosite mai multe căi: a). Aminoliza cu polialchilenpoliamine a copolimerilor reticulați. Una dintre
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
fel, trebuie avut grijă în selectarea suportului, precum și în tehnica de legare. Cantitatea de enzimă reținută de suport precum și activitatea după imobilizare depinde foarte mult de natura suportului Căi de activare a suporturilor Pentru introducerea grupelor funcționale capabile să lege enzimele sunt folosite mai multe căi: a). Aminoliza cu polialchilenpoliamine a copolimerilor reticulați. Una dintre căile cele mai simple de imobilizare covalentă a enzimelor este prin intermediul reacției de condensare cu glutaraldehidă, reacție ce se poate realiza prin două variante: activarea cu
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
foarte mult de natura suportului Căi de activare a suporturilor Pentru introducerea grupelor funcționale capabile să lege enzimele sunt folosite mai multe căi: a). Aminoliza cu polialchilenpoliamine a copolimerilor reticulați. Una dintre căile cele mai simple de imobilizare covalentă a enzimelor este prin intermediul reacției de condensare cu glutaraldehidă, reacție ce se poate realiza prin două variante: activarea cu glutaraldehidă a unor schimbători ce conțin grupări aminice primare sau secundare, urmată de reacția suportului activat cu enzima; adsorbția fizică sau chemosorbția enzimei
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
simple de imobilizare covalentă a enzimelor este prin intermediul reacției de condensare cu glutaraldehidă, reacție ce se poate realiza prin două variante: activarea cu glutaraldehidă a unor schimbători ce conțin grupări aminice primare sau secundare, urmată de reacția suportului activat cu enzima; adsorbția fizică sau chemosorbția enzimei pe schimbătorul macromolecular acrilic, urmată de reacția de condensare a grupelor aminice cu glutaraldehidă. Reacția de condensare a schimbătorului de anioni ce posedă grupări funcționale de etilenamină cu aldehida glutarică are loc, probabil, prin participarea
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
enzimelor este prin intermediul reacției de condensare cu glutaraldehidă, reacție ce se poate realiza prin două variante: activarea cu glutaraldehidă a unor schimbători ce conțin grupări aminice primare sau secundare, urmată de reacția suportului activat cu enzima; adsorbția fizică sau chemosorbția enzimei pe schimbătorul macromolecular acrilic, urmată de reacția de condensare a grupelor aminice cu glutaraldehidă. Reacția de condensare a schimbătorului de anioni ce posedă grupări funcționale de etilenamină cu aldehida glutarică are loc, probabil, prin participarea uneia sau a două grupări
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
Schemei de reacție 2. După cum se poate observa prin reacția de condensare a suportului acrilic cu aldehida glutarică se pot introduce în structura tridimensională a suportului grupări formil foarte reactive, capabile de condensare cu grupările aminice din structura proteică a enzimei. De asemenea, poate avea loc reacția de condensare intramoleculară (2 a) sau intermoleculară (2 b). Aceste reacții joacă un rol foarte important în procesul de imobilizare a enzimelor pe suporturi acrilice din următoarele motive: consumă grupele aminice primare rămase nereacționate
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
foarte reactive, capabile de condensare cu grupările aminice din structura proteică a enzimei. De asemenea, poate avea loc reacția de condensare intramoleculară (2 a) sau intermoleculară (2 b). Aceste reacții joacă un rol foarte important în procesul de imobilizare a enzimelor pe suporturi acrilice din următoarele motive: consumă grupele aminice primare rămase nereacționate în procesul de imobilizare ionică a enzimei, înlăturând tendința de adsorbție specifică a preparatului enzimatic; crearea unor punți de reticulare suplimentară față de reticularea inițială ceea ce îmbunătățește 182 caracteristicile
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
de condensare intramoleculară (2 a) sau intermoleculară (2 b). Aceste reacții joacă un rol foarte important în procesul de imobilizare a enzimelor pe suporturi acrilice din următoarele motive: consumă grupele aminice primare rămase nereacționate în procesul de imobilizare ionică a enzimei, înlăturând tendința de adsorbție specifică a preparatului enzimatic; crearea unor punți de reticulare suplimentară față de reticularea inițială ceea ce îmbunătățește 182 caracteristicile fizico-mecanice ale preparatului enzimatic [18]. b). activarea suporturilor prin reacția de condensare a grupărilor carboxilice cu carbodiimide. c). activare
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
aminice urmată de reacția de diazotare. d). reacția acidului monocloracetic (sarea de sodiu) asupra unui scimbator de anioni slab bazic. e). reacția copolimerilor acrilici reticulați cu cu hidroxilamină (clorhidrat). În continuare sunt prezentate succint cele trei metode de imobilizare a enzimelor prin legare pe suport. După cum se vede din Figura 2, metodele de legare a enzimei pe suport insolubil se înpart în trei categorii, după natura legăturilor formate: metoda legării enzimei prin adsorbție fizică; metoda legării ionice; metoda legării covalente. Metoda
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
scimbator de anioni slab bazic. e). reacția copolimerilor acrilici reticulați cu cu hidroxilamină (clorhidrat). În continuare sunt prezentate succint cele trei metode de imobilizare a enzimelor prin legare pe suport. După cum se vede din Figura 2, metodele de legare a enzimei pe suport insolubil se înpart în trei categorii, după natura legăturilor formate: metoda legării enzimei prin adsorbție fizică; metoda legării ionice; metoda legării covalente. Metoda imobilizării prin adsorbție Metoda adsorbției fizice de imobilizare a enzimelor se bazează pe adsorbția enzimei
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
continuare sunt prezentate succint cele trei metode de imobilizare a enzimelor prin legare pe suport. După cum se vede din Figura 2, metodele de legare a enzimei pe suport insolubil se înpart în trei categorii, după natura legăturilor formate: metoda legării enzimei prin adsorbție fizică; metoda legării ionice; metoda legării covalente. Metoda imobilizării prin adsorbție Metoda adsorbției fizice de imobilizare a enzimelor se bazează pe adsorbția enzimei native pe suportul insolubil în apă. Această metodă poate cauza, sau nu, mici schimbări conformaționale
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
2, metodele de legare a enzimei pe suport insolubil se înpart în trei categorii, după natura legăturilor formate: metoda legării enzimei prin adsorbție fizică; metoda legării ionice; metoda legării covalente. Metoda imobilizării prin adsorbție Metoda adsorbției fizice de imobilizare a enzimelor se bazează pe adsorbția enzimei native pe suportul insolubil în apă. Această metodă poate cauza, sau nu, mici schimbări conformaționale ale enzimei native. Dacă suportul este potrivit pentru enzima ce urmează a fi imobilizată, metoda poate fi simplă și eficientă
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
enzimei pe suport insolubil se înpart în trei categorii, după natura legăturilor formate: metoda legării enzimei prin adsorbție fizică; metoda legării ionice; metoda legării covalente. Metoda imobilizării prin adsorbție Metoda adsorbției fizice de imobilizare a enzimelor se bazează pe adsorbția enzimei native pe suportul insolubil în apă. Această metodă poate cauza, sau nu, mici schimbări conformaționale ale enzimei native. Dacă suportul este potrivit pentru enzima ce urmează a fi imobilizată, metoda poate fi simplă și eficientă. Totuși, ea are dezavantajul că
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
adsorbție fizică; metoda legării ionice; metoda legării covalente. Metoda imobilizării prin adsorbție Metoda adsorbției fizice de imobilizare a enzimelor se bazează pe adsorbția enzimei native pe suportul insolubil în apă. Această metodă poate cauza, sau nu, mici schimbări conformaționale ale enzimei native. Dacă suportul este potrivit pentru enzima ce urmează a fi imobilizată, metoda poate fi simplă și eficientă. Totuși, ea are dezavantajul că enzima adsorbită poate fi eluată de pe suprafața suportului în timpul folosirii deoarece este legată slab de acesta. După
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]
-
covalente. Metoda imobilizării prin adsorbție Metoda adsorbției fizice de imobilizare a enzimelor se bazează pe adsorbția enzimei native pe suportul insolubil în apă. Această metodă poate cauza, sau nu, mici schimbări conformaționale ale enzimei native. Dacă suportul este potrivit pentru enzima ce urmează a fi imobilizată, metoda poate fi simplă și eficientă. Totuși, ea are dezavantajul că enzima adsorbită poate fi eluată de pe suprafața suportului în timpul folosirii deoarece este legată slab de acesta. După natura lor chimică, suporturile se pot clasifica
Imobilizarea enzimelor pe schimbatori de ioni acrilici. In: (Co)polimeri reticulaţi obţinuti prin polimerizare în suspensie by Ion Bunia () [Corola-publishinghouse/Science/743_a_1455]